Anti-nociceptiven in protivnetna aktivnost, ki jo povzroča Cistanche Deserticola pri glodavcih

Stik:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin, et al

Abstrakten

V sedanji študiji soCistanchedeserticola(Orobanchaceae, skrajšano kot CD) so bili ekstrahirani s 50% etanolom in izolirani po naročilu z etil acetat, n-butanol in vodo. Analgetik inAnti-Vnetneučinkov ekstrakta CD in treh plasti so bile ocenjene v več živalskih modelih. CD(Cistanchedezertikola)ekstrakti so učinkovito zavirali odziv writhinga, ki ga je povzročilo 1 % ocetne kisline in bifaznih odgovorov lizanja, ki jih je povzročil 1% formalin, in tudi zmanjšali edem, ki ga je povzročil 1 % karrageena, vendar ne zimosana. Poleg tega so butanoične in kešne plasti CD-jev(Cistanchedezertikola)izvleček ni le zmanjšal bolečine, ki jih povzročita ocetna kislina in formalin, temveč je tudi zmanjšal edem, ki ga je privedlo do karrageenana. Učinki butanojske plasti CD-ja(Cistanchedezertikola)ekstrakt so boljši od izvleček iz kešnega sloja. Poleg tega učinek butanojske plasti CD(Cistanchedezertikola)izvleček ni ukinil nalokson. Ti rezultati so pokazali, da ima analgetiko inAnti-Vnetneučinki, butanoične in kemoične plasti pa so predvsem aktivne sestavine. Poleg tega so analgetiki inAnti-Vnetneučinki butanojske plasti CD(Cistanchedezertikola)izvleček niso bili povezani z opioidnimi receptorji in imunskim sistemom.

Ključne besede:Cistanche deserticola; Analgetik dejavnost; Protivnetna aktivnost

1. Uvod

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, skrajšano kot CD), se v tradicionalni medicini pogosto uporablja v tradicionalni medicini za različna terapevtska zdravljenja, vključno s sedativnimi, analgetiki in indikacijami za izboljšanje imunskega sistema (Lee, 1986). Sodobne farmakološke študije so pokazale cd(Cistanchedezertikola)izvleček je obsedel krepitev imunskega sistema (Chin in Su, 1993), učinek prostega radikalnega praskanja (Hsu et al., 1995) in povečanje aktivnosti SOD (Chang et al., 1995). V nedavni študiji je prosta radikalna reakcija igrala pomembno vlogo pri vnetnih procesih (Arrigoni-Martelli, 1985). Zato so v sedanji študiji poskušali raziskati putativne analgeične učinke(Cistanchedezertikola)izvleček pri miših s testom izvitka, ki ga je pognala oceta kislina (Taber et al., 1969) in testom lizanja, ki ga povzroči formalin (Shibata et al., 1989). Drugič, preučili smo tudi možneAnti-Vnetnedejavnosti CD-ja(Cistanchedezertikola)ekstrakt na klasični vnetni proces s karrageensko poučenim testom edema (Winter et al., 1962) in alternativnim vnetnim procesom s testom edema z zimosanom (Tarayre et al., 1989). Na koncu smo raziskovali aktivne plasti izvlečka CD, ločenih z različnimi topili. '

2. Materiali in metode

2.1 Rastlinski material in izvleček

Rhizomes of CD(Cistanchedezertikola)kupili na tajvanskem trgu in potrdil profesor M.T. Hsieh. Vzorec bona (št. CMC-ICPS-000626) je bil ohranjen v herbariju Inštituta kitajskih farmacevtskih znanosti, China Medical College za prihodnje reference. Ekstrakcija in izoliranje CD-ja(Cistanchedezertikola)prejšnja poročila (Lu, 1998). CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt (donos v 34,2 %) in tri plasti*/etil acetat plast, butanolna plast in vodena plast (njihovi donosi v 3,4, 10,2, 30,6%) (skrajšano kot CDE, CDB in CDW,*/so bili uporabljeni za pripravo ekstraktov.

2.2 Priprava izvlekov in zdravil

CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt (0,1, 0,3, 1 g/kg) in tri plasti CD-ja(Cistanchedezertikola)izvlečke (0,03, 0,1, 0,3 g/kg) raztopila v 0,5 % karboksimetilceluloze in dajali peroralno 60 minut pred injiciranjem induktorja. Acetilsalicilna kislina (ASA) (100, 300 mg/kg) in indometacin (INDOL) (10 mg/kg) sta bila pripravljena kot suspenzija z 0,5% karboksimetilceluloze in dano intraperitonealno pred injiciranjem induktorja. Nalokson (1 mg/kg) je bil raztopen z normalno raztopijo.

2.3 Živali

Podgane s podganami Sprague-Dawley (200-250 g) so uporabili zaAnti-VnetneDejavnosti. Moške miši ICR (20-25 g) so se uporabljale za testiranje analgeičnih učinkov. Vse živali so bile uporabljene v poskusih po smernicah z oskrbo in uporabo laboratorijskih živali. Bili so vsaj 1 teden pred začetkom poskusa v temperaturi 239/1 8C in 60% okolju, reguliranem z vlažnostjo, s prostim dostopom do standardne hrane v peletih (dobavljeno in zasnovano s strani Fwusow Industry Co. LTD., Tajvan) i voda iz pipe, u skladu s 12-12 h svetlosnim/tamnim ciklusom (svetlosna faza: 08:00-20:00 h). Nato so dajali zdravila in analgetik inAnti-Vnetnez dvojno slepo metodo. Po merjenju vedenja so vse živali ubile z ogljikovim dioksidom.

2.4 Antinociceptivna študija

2.4.1 Odziv na oceto kislino pri miših

Miši so bili naključno razdeljeni v več skupin. Vsaka miška je bila dana intraperitonealno 1% raztopina ocete kisline (10 ml/kg telesne mase). Miši so bile dane v posamezne opazovalne škatle. Simptomi trebušne writhing s kislo oceto kislino so bili podobni tistim, ki jih je opisal Taber et al. (1969). Kontrolne živali so v istih poskusih prejele rešitve vozil. Pet minut po injiciranju ocete kisline je bilo število writhing odzivov na miško šteto 10 min med ocetno kislino induciranega trebušnega writhinga. Nazadnje, število odzivov na writhing nam je dovolilo, da izrazimo odstotek zaščite z uporabo naslednjega razmerja: (kontrolna mean-treated mean)/100/ control mean.

2.4.2 Odziv lizanja, ki ga povzroči formalin, pri miših

Ta metoda je predstavljala spremembo, ki jo je opisala Shibata et al. (1989). Vsaka miška je bila v opazovalni komori 5 min pred injiciranjem formalina v akrilno prozorno ploščo. Pod tlemi je bilo veliko ogledalo nagibano pod kotom 458, da bi omogočili jasno opazovanje tac živali. Živali so dajali 25 ml 1% formalina v desni podplantar. Nato so vsako žival vrnili v komoro in opazili sta se dve ločeni obdobji intenzivnega lizanja odziva. Prvo obdobje (zgodnja faza) je bilo zabeleženo 0/5 min po injiciranju formalina, drugo obdobje (pozno obdobje) pa 10/35 min po injiciranju. Čas(-i), porabljen za lizanje odzivov injiciranega taca, je bil izmerjena kot kazalec odziva na bolečino.

2.5 Protivnetna študija pri podganah

VAnti-Vnetneaktivnost je bila določena pri podganah z merjenjem povzetek prostornine zadnje tape po sub plantarnem injiciranju vnetnih sredstev, kot so karragean (Winter et al., 1962) ali zymosan (Tarayre et al., 1989). Živalim so v desno zadnji del pod plantarno aponeurozo vbrizgali 0,1 ml 1% karrageena ali 2% zimosana. Vnetje je bilo kvantitano v smislu mililiterjev z uporabo pletismometra (7150 Ugo Basile), v katerem so zabeležene majhne razlike v ravni vode, ki so posledica količinskega premeščanja. Pred vsako obdelavo je bil določen povprečni volumen nahrbtnikov vsake živali (Vo) s tremi meritvami, ki se niso razlikujele od več kot 4% (natančnost aparata). Nato 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min po injiciranju vnetnih sredstev je bila določena povprečna prostornina zadnjih tac vsake živali (Vt) s tremi meritvami, ki se niso razlikujele od več kot 4 %.

Odstotki edema pri vsakem zapisu so bili izračunani tako, da so primerjali povprečni volumen zadnjih tac vsake živali (Vt) po injiciranju vnetnih sredstev s povprečno prostornino zadnjih tac vsake živali (Vo) pred vsakim zdravljenjem (Palanichamy in Nagarajan, 1990). Odstotki zaviranja so bili za vsako skupino pridobljeni z naslednjim razmerjem: [(Vt-Vo)control/(Vt-Vo)treated]-100/ (Vt-Vo)control.

2.6 Statistična analiza

Vsi podatki, pridobljeni med analgetiko inAnti-Vnetneje bila izražena v smislu mean and standardnih napak in nadalje analizirana z uporabo enosmostne analize variance ANOVA, ki ji sledi Scheffov test. Kadar je bila verjetnost (P) manjša od 0,05, se je štelo, da je razlika pomembna.

3. Rezultati in razprava

Živali s peroralno dozo CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt (0,1-1 g/kg) je povzročil od odmerka odvisno in pomembno inhibicijo odziva na writhing, ki ga je povzročila ocetna kislina (preglednica 1) in bifazne faze polizanja, ki jih povzroči formalin, pri miših (slika 1(A)). Zaviranje, ki ga povzroča CD(Cistanchedezertikola)izvleček pri 1 g/kg na odziv na writhing, ki ga povzroči ocetna kislina, in odzivi na lizanje, ki jih je pognala formalin, so bili približno 54 oziroma 45%. Pozitivni kontrolni acetilsalicilna kislina pri 0,1-0,3 g/kg se je zmanjšal tudi odziv na writhing, ki ga povzroči ocetna kislina, z zaviranjem 45-64% (preglednica 1). Vendar je drugi pozitivni kontrolni indometacin pri 10 mg/kg zaviral le pozno, vendar ne zgodnjo fazo poliznega odziva na formalin pri miših z največjo inhibicijo 32 % (slika 1(A)). Poleg tega so samo butanolične in kešne plasti med tremi plastmi CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt pri 0,1-0,3 g/kg je prav tako proizvajal pomembno antinocicepcijo, in ti analgeični učinki butanolične plasti so bili boljši od tistih iz kešne plasti (tabela 1 in sl. 1(B)). Drugič, ocenili smoAnti-Vnetnedejavnost CD-ja(Cistanchedezertikola)ekstrakt in tri plasti proti klasični (karragean-induced) in alternativni (zymosan-induced) edem tvorbi. Našli smo tisti CD.(Cistanchedezertikola)ekstrakt s 0,1-1g/kg je tudi znatno zaviral nastanek edema, ki ga je induciral karrageen, na odmeren način, in indometacin pri 10 mg/kg je tudi učinkovito zaviral nastanek edema, ki ga je induciral Karrageenan pri podganah (slika 2). Vendar cd ni zaviral nastanek edema z zimosano(Cistanchedezertikola)0,1-1 g/kg pri podganah (podatki niso prikazani). Poleg tega samo butanolna plast med tremi plastmi CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt pri 0,1-0,3 g/kg je pri podganah pomembno zaviral tudi nastanek edema, ki ga povzroči karragean (slika 2). V skladu s fitokemičnih poročili, akteozid in sukcinska kislina, ki spadajo v sestavine butanolične plasti CD(Cistanchedezertikola)izvleček (Hsu et al., 1994, 1995), jeAnti-Vnetnedejavnosti na tvorbi edema, ki jo povzročijo kemikalije (Murai et al., 1995; Kabachnyi et al., 1987). Iz naših trenutnih podatkov in drugih prejšnjih poročil, smo predlagali rhizomes CD(Cistanchedezertikola)obsedenih analgetikov inAnti-Vnetneaktivnost pri glodavcih, aktivne sestavine pa večinoma izstopajo v butanolični plasti CD(Cistanchedezertikola)Ekstrakt. Ali sta akteozid in sukcinska kislina aktivni sestavini CD(Cistanchedezertikola), bomo izolatorji in ocenili njihove analgeične inAnti-Vnetnedejavnosti v prihodnosti.

Slika 1. Učinek CD-ja(Cistanchedezertikola)ekstrakt (0,1, 0,3 in 1 g/kg), etil acetat, butanolični in kevo plasti CD(Cistanchedezertikola)ekstrakt (CDE, CDB in CDW) (0,03, 0,1 in 0,3 g/kg) in indometacin (INDOL, 10 mg/kg) na začetku (0 /5 min) in pozno fazo (10 /35 min) odziva na lizanje, ki ga povzroči formalin, pri miših. Vsaka vrednost je predstavljena kot mean9/S.E. (N/7). *P B/0,05, *** P B/0.001, v primerjavi s skupino VEH.

Slika 2. Učinek CD-ja(Cistanchedezertikola)ekstrakt (0,1, 0,3 in 1 g/kg), etil acetat, butanolični in kevo plasti CD(Cistanchedezertikola)izvleček (CDE, CDB in CDW) (0,03, 0,1 in 0,3 g/kg) in indometacin (INDOL, 10 mg/kg) na karragenski induciativni edem tape pri podganah. Vsaka vrednost je predstavljena kot mean9/S.E. (N/6). *P B/0,05, ** P B/0,01 v primerjavi s skupino VEH

Poleg tega zdravilo Shibata et al. (1989) kaže, da je bila zgodnja faza odziva na lizanje, ki ga je ponujil formalin, povezana z bradikininom in snovjo P, pozno fazo pa je bila povezana z bradikininom, avtokrinom in prostaglandinom. Naši trenutni podatki so poudarili, da nalokson ni odpravilAnti-Vnetneaktivnost butanol plast CD(Cistanchedezertikola)izvleček na obeh fazah odziva na lizanje, ki ga povzroči formalin (slika 3) in analgetični učinek na odziv na writhing, ki ga povzroči oceta kislina (preglednica 1). Zato so analgetiki inAnti-Vnetneučinki butanola iz ekstrakta CD morda niso povezani z opioidnimi receptorji. Poleg tega, CD(Cistanchedezertikola)butanolna plast zavirala nastanek edema, ki ga povzroči karragean, pri podganah. Karrageenski inducirani edem preko polimorfonuklearnega infiltracije levkocita in aktiviranega kinin sistema, zlasti bradikinina, se razlikuje od zimosano induciranega edema preko priliva monocitov in aktiviranega imunskega sistema (Damas et al., 1990; Dawson et al., 1991). Sukcinska kislina, sestavina butanolične plasti IZVLEČKA CD, zavirala je polimorfonuklearo levkocitno funkcijo (Rotstein et al., 1985). Ti rezultati so pokazali, da so analgetiki inAnti-Vnetneučinki butanol plast CD(Cistanchedezertikola)izvleček lahko povezan s kinin sistemom, vendar ne opioidnih receptorjev in imunskega sistema, čeprav CD(Cistanchedezertikola)imunoeenhancing učinek (Chin in Su, 1993). Za podrobni mehanizem analgetikov inAnti-Vnetnedejavnost, bomo nadalje raziskali z aktivnimi plastmi ali sestavinami izvleček CD.

Cistanchetubulosaima veliko učinkov, kliknite tukaj, da veste več

Sklicevanja

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Farmakologija prostega radikala pri vnetju. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/ 519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, S.N., Cheng, H.C., 1995. Študija o močnih učinkihCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (C.A. Mey) G. Beck in Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. China Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, H.L., Su, Y.C., 1993. Študija o farmakoloških učinkihCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Kinini in peritonealni izpuščaji, ki jih pri podganah povzročita karrageenin in zimosana. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, A.D., Edwards, J.C., Lees, P., 1991. Primerjalna študija celičnih, eksudativnih in histoloških odzivov na karragean, dextran in zymosan v miški. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, W.H., Chu, S.H., Chao, C.H., Hsu, Y., Yuan, K.W., Yen, C.H., Chi, C.Y., Chan, C., 1994. Študija o kemičnih sestavinahCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, W.H., Chu, S.H., Sheng, L.C., Yuan, K.W., Mao, C.N., 1995. Študija o kemičnih sestavinah in farmakoloških učinkihCistanchedeserticolaMa. in Cistanche salsa (C.A. Mey) G. Beck. Kitajska tradicionalna zeliščna zdravila 26, 143/146.
Kabachnyi, V.I., Chernykh, V.P., Drogovoz, S.M., Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, E.E., 1987. IskatiAnti-Vnetnepripravki med derivati sukcinske kisline heteril amidov. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, S.L., 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. National Research Institute of Chinese Medicine Publications, Taipei, str. 20.
Lu, M.C., 1998. Študije o sedativnih učinkihCistanchedeserticola. Journal of Ethnopharmacology 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Fenilethanoidi v rastlini Plantago lanceolata in inhibitorni učinek na arahidonsko kislino povzročen mišji ušesni edem. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Analgetik dejavnost Cassia alata izvleček iz listja in kemp Eerol 3-0-Sophoroside. Journal of Ethnopharmacology 29, 73/78.
Rotstein, O.D., Pruett, T.L., Fiegel, V.D., Nelson, R.D., Simmons, R.L., 1985. Sukcinska kislina, presnovni skodek bakterijskih vrst, zavira polimorfonuklearo levkocitno funkcijo. Okužba in imuniteta 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. Spremenjen formalin test: značilen odziv na bifazno bolečino. Bolečina 38, 347/ 352.
Taber, R.I., Greenhouse, D.D., Rendell, J.K., Irwin, S., 1969. Agonistična in antagonistična interakcija opioidov na trebušno raztegovanje z oceto kislino pri miših. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 169, 29/38.
Tarayre, J.P., Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Konzul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Farmakološke študije o vnetju zimosana pri podganah in miših. 1: Edem, ki ga povzroči Zymosan, pri podganah in miših. Farmakološke raziskave 21, 375/384.
Winter, C.A., Risley, E.A., Nuss, G.W., 1962. Karrageenski edem v zadnjih tacah podgane je bil kotAnti-Vnetnedroge. Proceedings Society of Experimental Biology and Medicine 111, 544/547.