Povzetek:Izpostavljenost ultravijoličnemu sevanju (UV) povzroči fotostaranje kože, kar povzroči gubanje in povešenost kože zaradi proizvodnje reaktivnih kisikovih vrst (ROS). Zato je zaščita pred fotostaranjem pomembna lastnost kozmetičnih in dermatoloških izdelkov. Biomateriali, pridobljeni iz naravnih proizvodov, so zelo zaželeni kot prihodnje možne sestavine, ker so ti biomateriali pogosto varni in učinkoviti. V tej študiji smo želeli opisati zaščitno delovanje kože Pradosia multisite, ki se tradicionalno uporablja za zdravljenje sončnih opeklin in eritema. Določili smo lovilne proste radikale, antimelanogene in vlažilne učinke metanolnega ekstrakta Pradosia multisite (Pm-ME) v keratinocitih (celice HaCaT), melanocitih (celice B16F10) in fibroblastih (človeški dermalni fibroblasti (HDF)) pri necitotoksične koncentracije. Ekstrakt metanola Pradosia multisite vsebuje kumarinsko kislino kot glavno sestavino in ekstrakt je pokazal zaščitno delovanje proti citotoksičnosti, ki jo povzroča UVB in H2O2-. Ta izvleček je tudi zaviral izražanje metaloproteinaz (MMP) in ciklooksigenaze (COX) -2 v celicah HaCaT. Pm-ME je v celicah HaCaT ugotovil zmanjšanje izražanja Sirt-1 v pogojih, obdelanih z UVB- in H2O2-. Ta ekstrakt je pokazal pomembno aktivnost lovljenja prostih radikalov v skladu s testom 2,20 -casino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kisline) diamonijeve soli (ABTS). Pm-ME je prav tako povečal ekspresijske ravni sintaze hialuronske kisline (HAS) in transglutaminaze-1 (TGM-1) v celicah HaCaT, kar kaže na domnevno vlažilno aktivnost. Zanimivo je, da je bilo ugotovljeno, da sta se ekspresija gena kolagena tipa 1 (Col1A1) in njegova promotorska aktivnost, ocenjena s testom reporterskega gena, povečali v celicah HDF in HEK293. Podobno je Pm-ME pomagal obnoviti ravni kolagena po zdravljenju z UVB in H2O2 v HDF-jih ter zmanjšal sintezo in izločanje melanina iz celic melanoma B16F10, kar lahko kaže na koristno beljenje kozmetične vrednosti. Zaviralec p38 SB203580 in zaviralec JNK SP600125 sta zavirala izražanje MMP-9 in COX-2 v celicah HaCaT, obdelanih s H2O2-. Podobno je zaviralec ERK U0126 zaviral HAS-2 v celicah HaCaT, obdelanih s Pm-ME/H2O2-. Te ugotovitve kažejo, da bi Pm-ME lahko ciljala na inhibicijo JNK in p38 ter aktivacijo ERK. Zato lahko Pm-ME deluje proti staranju na fotografiji in proti melanogenim lastnostim z regulacijo protein kinaze, aktivirane z mitogenom, kar bi lahko bilo koristno v kozmetični industriji.

Glede na ustrezne študije,cistancheje pogostazeliščeznan kot "čudežna rastlina, ki podaljšuje življenje". Njegova glavna sestavina jecistanozid, ki ima različne učinke kot nprantioksidant, protivnetno, inspodbujanje imunske funkcije. Mehanizem med cistančo inbeljenje koželeži v antioksidativnem učinku cistančnih glikozidov. Melanin v človeški koži proizvajaoksidacijatirozina, ki ga kataliziratirozinaza. Theoksidacijska reakcija zahteva sodelovanje kisika, zato postanejo radikali brez kisika v telesu pomemben dejavnik, ki vpliva namelaninproizvodnja. Cistanche vsebuje cistanozid, ki je antioksidant in lahko zmanjša nastajanjeprosti radikaliv telesu in tako zavira nastajanje melanina.

Kliknite na dodatek Cistanche Tubulosa za beljenje

Vprašaj za več:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Uvod

Koža je največji organ v telesu, ki služi kot pregrada med organizmom in okoljem ter je odgovorna za vzdrževanje homeostaze kože in navsezadnje določa preživetje organizma [1]. Koža je sestavljena iz povrhnjice, dermisa z adneksalnimi strukturami in podkožne maščobe [2]. Poleg tega je koža pomembna za stalno komunikacijo z imunskim, nevralnim in endokrinim sistemom [3], večinoma zagotavlja zaščito pred patogeni, kemikalijami, fizičnimi poškodbami in ultravijoličnim (UV) sevanjem [4]. Ultravijolični spektri so razdeljeni na tri cone, UVC (200 do 280 nm), UVB (280 do 320 nm) in UVA (320 do 400 nm) [5]. Od tega UVB pretežno absorbirajo zgornje plasti kožne povrhnjice in papilarni dermis, medtem ko UVA prodrejo v retikularni dermis s 1000-krat nižjo učinkovitostjo pri povzročanju različnih bioloških učinkov v primerjavi z UVB [5]. Čeprav je UVC zelo reaktiven in ga absorbira stratum corneum, ga večinoma odstranita ozonski plašč in atmosfera. Kot glavni vir UV-obsevanja lahko UVB povzroči nastanek reaktivnih kisikovih spojin (ROS), kot je vodikov peroksid (H2O2), z aktivacijo encimov, ki ustvarjajo ROS, vključno z NADPH oksidazo, ksantin oksidazo in D-aminokislinsko oksidazo [6– 8] in indukcijo fotostaranja kože, ki vodi do gubanja in povešenosti kože [9,10]. Poleg tega so poročali, da odziv na oksidativni stres povzroči različne poškodbe celičnih komponent, kot so lipidi celične membrane, beljakovine in nukleinske kisline [11]. Te poškodovane kožne celice lahko sprožijo vnetne odzive, ki vodijo do morebitnih poškodb, ki se kažejo na kronično izpostavljeni koži [12].

Oksidativni stres inducira aktivacijo vnetnih in redoks občutljivih transkripcijskih faktorjev, jedrnega faktorja (NF)-κB in aktivatorskega proteina (AP) -1 ter njihovih signalnih encimov navzgor, vključno z mitogenom aktiviranimi protein kinazami (MAPK), kot je zunajcelična signalno regulirana kinaza (ERK), p38 in c-Jun-N-terminalna kinaza (JNK) v poti AP-1 ali kot zaviralec κB (IκB ), IκB kinaze (IKK / ) in AKT na poti NF-κB, povezana z indukcijo vnetja in nastajanjem gub [13]. Zunajcelična signalno regulirana kinaza običajno posreduje celične odzive, povezane z rastnimi faktorji, JNK, in p38-posredovane celične odzive, povezane s citokini in fizičnim stresom [14]. Protein kinaze, aktivirane z mitogenom, lahko povzročijo tudi proizvodnjo proteolitičnih matričnih metaloproteinaz (MMP) [15], ki povzročijo razgradnjo kolagena in tako zmanjšajo elastičnost kože [16]. V zvezi s temi komponentami so antioksidativne komponente ali izvlečki, kot so ginsenosid, kurkumin, epikatehin, asiatikozid, ziyuglikozid I, magnolol, galna kislina, hidroksihavikol, hidroksicimetne kisline, glicirizinska kislina, mangiferin, Mirko, rožmarinska kislina, tektorigenin, tirozol, BIOGF1K in hidroalkoholni izvleček Spartium junceum L. followers je bil uporabljen za razvoj izdelkov proti staranju kože [17–21]. Ker je oksidativni stres znan kot glavni vzrok bolezni pri ljudeh in procesa staranja, ki vpliva na dolgoživost, so sekundarni bioaktivni metaboliti v prehrani ljudi zaantioksidativne lastnostiveljajo za dragocene sestavine [22,23].

Drugi geni, povezani s fotostaranjem, vključujejo ciklooksigenazo-2 (COX-2) in Sirt-1. Ciklooksigenaza-2 je običajno čezmerno izražena pri premalignih kožnih lezijah, ki jih povzroči UV [24], in njeno zaviranje lahko zmanjša maligno transformacijo v povrhnjici [25]. Ekspresija Sirt-1 lahko prepreči celično apoptozo in poveča celično preživetje [26]. Drugi mehanizem zaščite pred sevanjem UVB je proizvodnja melanina, pigmenta, ki se sintetizira v melanocitih in se nadalje izloča v keratinocite v plasti povrhnjice [1]. Melanin nastane z oksidacijo L-tirozina in njegovo naslednjo pretvorbo v L-dihidroksifenilalanin (L-DOPA) [6] s kataliziranjem z od bakra odvisnim encimom tirozinazo [27]. Kljub zaščitni funkciji lahko prekomerna proizvodnja melanina povzroči starostne pege [28], melizem in hiperpigmentacijo [29]. Zaradi trenutnega trenda, ki meni, da je svetla polt lepotni standard, so pripravki za beljenje kože, ki dosežejo bodisi beljenje hiperpigmentiranih lezij ali beljenje kože, postali zelo zaželeni v farmacevtski in kozmetični industriji [29]. Tako je bilo veliko truda vloženega v razvoj pripravkov, ki zmanjšujejo sintezo melanina [30]. Ker je staranje kože povezano z izgubo kožne vlage, je pomemben dejavnik pri ohranjanju zdrave kože zadostna hidracija [31]. Hialuronska kislina (HA), glikozaminoglikan z visoko molekulsko maso in hidrofilnimi lastnostmi, prispeva k hidraciji in plastičnim lastnostim kože z uravnavanjem izražanja sintaz hialuronske kisline (HAS) [32]. Drug pomemben gen v koži je kolagen, ki zagotavlja podporo epidermalnim strukturam [33], zato je odgovoren za moč in odpornost kože [34] in katerega razgradnja vodi do povešenosti in gubanja kože. Poleg tega je transglutaminaza-1 (TGM-1) epidermalni konstitutivno izražen encim, ki katalizira tvorbo poroženele epidermalne celične ovojnice, kar pomaga preprečevati izgubo vode [35,36].

Družina Sapotaceae je razširjena predvsem v tropskih in subtropskih regijah Azije in Mezoamerike. Številne vrste iz družine Sapotaceae dajejo užitne sadeže visoke gospodarske vrednosti. Ti sadeži so bili uporabljeni v medicinske namene. Zlasti semena so bogata s hranili, rastlinskimi maščobami, beljakovinami in drugimi koristnimi spojinami. Na primer, olje mamey se tradicionalno uporablja za nego kože, za zdravljenje sončnih opeklin in eritema [37]. Pradosia music je član družine Sapotaceae, katerega olje se tradicionalno uporablja za zdravljenje kožnih brazgotin [38]. Vendar je treba njegove lastnosti še znanstveno dokazati. Cilj te raziskave je bil torej ugotoviti potencialno vrednost P. mutisii v negi kože, kozmetologiji in farmakologiji.

2. Rezultati

2.1. Karakterizacija Pm-ME in njen učinek na sposobnost preživetja celic

Pm-ME ni blokiral viabilnosti do 100 µg/mL, vendar je nekoliko zmanjšal viabilnost pri 200 µg/mL v celicah HaCaT, B16F10 in človeških dermalnih fibroblastov (HDF), glede na 3-(4,{{ 7}}dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijev bromid (MTT) test (slika 1a–c). Z ultravisokotlačno tekočinsko kromatografijo (UHPLC) in tekočinsko kromatografijo (LC)/masno spektrometrijo je bilo po 4,27 min ugotovljeno, da je glavna spojina v Pm-ME kumarinska kislina (slika 1d).

2.2. Zaščitni učinek Pm-ME pred poškodbami UVB in H2O2

Da bi ugotovili, ali Pm-ME ščiti celice HaCaT pred poškodbami, ki jih povzroči fotostaranje zaradi UVB in H2O2-, so bile celice pred izpostavljenostjo predhodno obdelane z različnimi koncentracijami Pm-ME (0–100 µg/mL). UVB ali H2O2. Slika 2a prikazuje, da je UVB obsevanje zmanjšalo število adherentnih celic HaCaT, medtem ko je Pm-ME povečalo adherenco celic. Poleg tega je celično poškodbo, ki jo je sprožil H2O2, obnovil Pm-ME pri 100 µg/mL (slika 2b). Da bi pojasnili, ali Pm-ME oslabi nastajanje gub, posredovano z UVB in H2O2-, so izmerili ravni izražanja MMP-1 in MMP-9 po zdravljenju z UVB ali H2O2 v prisotnosti ali odsotnosti Pm-ME. Pm-ME je zaviral izražanje MMP-1 in MMP-9 pod obema pogojema (slika 2c,d). Nato smo preverili, ali je Pm-ME zaviral vnetne odzive, ki jih povzročajo prosti radikali, z merjenjem ravni mRNA COX-2. V pogojih, obdelanih z UVB- ali H2O2-, so bile ravni mRNA COX-2 močno zavrte s Pm-ME pri 100 µg/mL (slika 2e,f). Nato smo izmerili ravni mRNA gena za preprečevanje staranja, Sirt-1, da bi ugotovili njegov vpliv na fotostaranje. Tako UVB kot H2O2 sta zmanjšala izražanje Sirt-1, medtem ko je Pm-ME izjemno obnovil izražanje pri 50 in 100 µg/mL (slika 2g,h). Ker je Pm-ME zavrl določene molekularne in celične odzive v celicah HaCaT, obdelanih z UVB ali H2O2, smo nato z uporabo 2,2′-casino-bis (3-etilbenzotiazolina{{57) preverili, ali ima ta izvleček neposredno antioksidativno delovanje. }}sulfonska kislina) ABTS test, pri katerem je Pm-ME pokazal od odmerka odvisno aktivnost lovljenja prostih radikalov (slika 2i).

2.3. Vlažilni učinki in učinki Pm-ME na povečanje kolagena

Pm-ME je okrepil izražanje genov, povezanih z vlaženjem, kot sta HAS-2 in TGM-1 v celicah HaCaT (slika 3a). Da bi ugotovili, ali lahko Pm-ME poveča ekspresijo kolagenskega gena (Col1A1), smo celice HDF najprej obdelali s Pm-ME (0–100 µg/mL) in nato določili raven ekspresije Col1A1. Kot prikazuje slika 3b, so opazili povečano izražanje gena Col1A1 v pogojih zdravljenja s Pm-ME, odvisno od odmerka. Ti rezultati so bili nadalje potrjeni s testom reporterskega gena s konstruktom Col1A1-Luc, transfektiranim v celice HEK293 in celice HDF. Pričakovano je, da je Pm-ME povečal aktivnost promotorja gena Col1A1 na način, ki je odvisen od odmerka v obeh celicah (slika 3c, d). Poleg tega je bilo ugotovljeno, da Pm-ME obnavlja ravni genov kolagena, ki so se zmanjšale tako pri UV obsevanju kot pri pogojih zdravljenja s H2O2 (slika 3e,f).

2.4. Antimelanogeni učinek Pm-ME

Ker je naša ciljna koncentracija ustrezala 100 µg/mL, smo ugotovili, ali je Pm-ME sposoben zavreti izločanje melanina in njegove celične vsebine. Da bi to ugotovili, so celice melanoma B16F10 stimulirali -melanocite stimulirajoči hormon (-MSH) v prisotnosti ali odsotnosti Pm-ME ali arbutina (pozitivna kontrola). Nato so izmerili raven melanina. Pm-ME je zmanjšal izločanje melanina do 75 odstotkov pri 100 µg/mL (slika 4a,b). Pm-ME je prav tako zmanjšal vsebnost melanina v celicah B16F10, obdelanih z MSH, do 30 odstotkov pri 100 µg/mL, medtem ko vsebnost melanina pri 50 µg/mL ni bila bistveno zmanjšana v primerjavi s pozitivno kontrolo (-MSH) (slika 4c). . Končno smo za določitev učinka Pm-ME na aktivnost encimov, ki proizvajajo melanin, izvedli encimski test tirozinaze. Zanimivo je, da je Pm-ME (0–400 µg/mL) znatno zmanjšal aktivnost tirozinaze pri koncentracijah, višjih od 200 µg/mL, medtem ko je Kojična kislina (KA), nadzorovano zdravilo, močno zmanjšala aktivnost tirozinaze (slika 4d).

2.5. Molekularni mehanizmi protifotostaranja in vlažilnih učinkov, posredovanih s Pm-ME

3. Razprava

Zaradi njihovega bogastva s hranili in vitamini se različne vrste iz družine Sapotaceae uporabljajo v tradicionalni medicini [39]. Vendar je treba potencialno uporabo P. mutisii v kozmetični in farmacevtski industriji še raziskati. Iz tega razloga smo preučevali zaščitno delovanje kože P. mutisii v keratinocitih in fibroblastih v pogojih, ki poškodujejo kožo. Ocenili smo tudi njegovo primernost za kozmetične pripravke. Ker je testiranje toksičnosti za odkrivanje morebitnih tveganj pri ljudeh nujen in kritičen korak tako v industriji zdravil kot v kozmetični industriji [40], je bila citotoksičnost P. mutisii testirana v celicah HaCaT, B16F10 in HDF. Pradosia mutisii je pokazala nizko toksičnost do 200 µg/mL in brez toksičnosti pri 100 µg/mL v celicah HaCaT, B16F10 (slika 1a,b) in HDF (slika 3c). Z analizo UHPLC/MS (slika 1c) je bilo dokazano, da ima Pm-ME visoko koncentracijo kumarne kisline, fenolne kisline [41, 42]. Polifenoli so sekundarni presnovki rastlin in na splošno sodelujejo pri obrambi pred UV sevanjem ali okužbo s patogeni. V človeškem telesu polifenoli dokazano ščitijo pred nastankom raka, boleznimi srca in ožilja, diabetesom, osteoporozo in nevrodegenerativnimi boleznimi [1]. Dokazano je, da ima kumarinska kislina antioksidativne in protivnetne lastnosti [43].

Ultravijolično obsevanje je eden glavnih vzrokov za nastanek prostih radikalov (npr. ROS) v koži. Prosti radikali lahko povzročijo staranje kože in raka, če se kopičijo v daljših obdobjih [44]. Znano je, da lahko oksidativni stres in poškodbe, ki jih povzročajo prosti radikali, ogrozijo celično preživetje, proliferacijo, diferenciacijo in metabolizem [45,46]. V skladu s prejšnjimi poročili [47, 48] smo tudi ugotovili, da UVB obsevanje povzroča celične poškodbe v celicah HaCaT. Poškodba je vključevala zmanjšano proliferacijo, povečano apoptozo in molekularne odzive, vključno z izražanjem genov, povezanih z vnetjem, nastajanjem gub in staranjem (sliki 2 in 3). Ker so radikali, ki jih povzročajo UVB, glavni dejavniki, ki poškodujejo celice, tkiva in organe, je bilo ugotovljeno, da so nekatere endogene spojine, kot sta melatonin in njegov presnovek [49–52] ter bilirubin [53], vključene v odstranjevanje strupenih radikalov z izkazovanjem antioksidantov. , foto-zaščitne lastnosti in lastnosti proti staranju našega telesa. Zaenkrat so te spojine razvite tudi kot zelo dragocene biomateriale, ki jih lahko farmacevtska industrija uporablja za naša telesa [54]. Kljub temu postajajo vitamin C, koencim Q10 in -tokoferol najbolj prodajani izdelki za zdravje ljudi zaradi svojih pomembnih antioksidativnih lastnosti. Raziskovalni laboratoriji v farmacevtskih in kozmetičnih podjetjih še naprej dajejo velik poudarek prepoznavanju in razvoju učinkovitih antioksidativnih zdravil in naravnih spojin. V naši študiji smo opazili, da je imel Pm-ME močno antioksidativno delovanje pri testiranju s testom ABTS (slika 2i). Podobno je Pm-ME obrnil s prostimi radikali povzročeno supresijo celične adherence, indukcijo poškodb jedra in spremenjeno izražanje genov, kot so MMP-1, MMP-9 in COX{{27} } v pogojih UVB in H2O2 na način, ki je odvisen od odmerka (slika 2a–f). Predvsem je Pm-ME obnovil ravni gena Sirt-1 (slika 2g,h), ki sodeluje pri preprečevanju apoptoze in povečanju preživetja celic v pogojih oksidativnega stresa [26]. Ti rezultati močno nakazujejo, da je staranje celic povezano z oksidativnim stresom prek znižane regulacije izražanja Sirt1. Antioksidativne lastnosti Pm-ME so omogočile obnovitev izražanja Sirt1. To lahko povzroči zaščito pred poškodbami kože in staranjem v pogojih naravnega UVB obsevanja in vivo. Poleg tega obstaja možnost, da je Pm-ME sposoben zaščititi tudi celične odzive, ki jih povzroči UVC, saj so lahko naši pogoji UV-sevanja onesnaženi z UVC, čeprav smo uporabili filtrirni sistem za čiščenje vseh valovnih dolžin pod 290 nm. Koncept, da lahko antioksidativni biomateriali izboljšajo celične in molekularne poškodbe v pogojih oksidativnega stresa, je spodbudil komercialno proizvodnjo različnih izdelkov, kot so BIOGF1K, ginsenoside Ro, EGCG, ekstrakt Fraxinus chinensis in nekateri sintetični antioksidanti. V kozmetični industriji so veliko poročali o učinkih biomaterialov v teh in drugih izdelkih proti gubam in fotostaranju [48,55,56].

Ohranjanje ustrezne hidracije kože [31] in ustvarjanje novega kolagena [57] sta pomembna procesa za zdravo kožo. Izražanje vlažilnih (HAS2, TGM-1) (slika 3a) in kolagenskih (Col1A1) genov je bilo izjemno povečano s Pm-ME (slika 3b–d) in je pomagalo obnoviti ravni kolagena po izpostavljenosti UVB in zdravljenju s H2O2 ( Slika 3e,f). Zato to nakazuje, da je lahko Pm-ME učinkovita sestavina pri vzdrževanju zdrave kože. Zatiranje melanina s Pm-ME je koristno tudi za njegovo uporabo v kozmetičnih pripravkih. Čeprav je melanin dragocen pri zaščiti kože pred UV-sevanjem, ker si mnoge ženske raje posvetlijo kožo, je beljenje z antimelanogenim delovanjem uporabna lastnost v kozmetičnih materialih [29]. Pm-ME (100 µg/mL) je pokazal močno zaviralno aktivnost med melanogenezo, kot je bilo ocenjeno z določanjem ravni melanina iz izločenega medija in prikazanim zmanjšanjem ravni izločanja melanina (slika 4a–c). Poleg tega je Pm-ME (200 µg/mL) znatno zaviral aktivnost encima tirozinaze (slika 4d), kar pomeni, da je višja koncentracija neposredno učinkovita za zatiranje aktivnosti encima, medtem ko nižja koncentracija sodeluje pri regulaciji izločanja melanina. Zato lahko Pm-ME zaradi svojih antioksidativnih, proti fotostaranju, proti gubam, vlažilno stimulativnih in antimelanogenih dejavnostih štejemo za dobrega kozmetičnega kandidata. Za nadaljnje raziskovanje te možnosti nameravamo v prihodnjih študijah oceniti njegovo klinično učinkovitost.

Izvedli smo študije za določitev molekularnih mehanizmov, s katerimi je Pm-ME deloval antioksidativno in vlažilno v keratinocitih. Osredotočili smo se na encime, povezane z MAPK (ERK, JNK in p38), ker imajo ti encimi ključno vlogo pri staranju in melanogenezi kožnih keratinocitov in melanocitov [58,59]. Na primer, pot ERK posreduje celične odzive na transformacijski rastni faktor - 1 s povečanjem poti sinteze kolagena [60] in HA v keratinocitih [61]. JNK ima ključno vlogo pri apoptozi keratinocitov, ki jo povzroča oksidativni stres [62]. Encim p38 je pomemben pri vzdrževanju homeostaze človeške kože [63]. Poti JNK in p38 posredujeta celični odziv na citokine in fizični stres [14]. Te poti aktivirajo stresi, ki jih povzročijo UVB in ROS. Te poti lahko povečajo proizvodnjo proteolitičnih genov MMP in COX-2 [15], ki sta povezana z razgradnjo kolagena oziroma vnetjem kože [64]. Predvsem je oksidativni stres blokiral fosforilacijo ERK, medtem ko sta bila p38 in JNK fosforilirana, ko sta bila obdelana s H2O2 (slika 5a). V nasprotju s tem je Pm-ME povečal fosforilacijo ERK in zmanjšal fosforilacijo p38 in JNK (slika 5a), kar pomeni, da lahko ti encimi različno sodelujejo pri farmakoloških aktivnostih, ki jih posreduje Pm-ME. Za nadaljnje razumevanje funkcionalne vloge MAPK pri učinkih Pm-ME proti staranju na fotografiji, melanogenih in protivnetnih učinkih Pm-ME v keratinocitih, obsevanih z UVB in H2O2-stimuliranimi keratinociti, so bili uporabljeni specifični zaviralci MAPK. Rezultati slike 5b močno nakazujejo, da je inhibicija p38 in JNK s Pm-ME povzročila učinke proti gubam in protivnetne učinke, ker sta zaviralec p38 (SB203580) in zaviralec JNK (SP600125) blokirala izražanje MMP{{45 }} oziroma COX-2. Poleg tega je fosforilacija ERK, ki jo sproži Pm-ME, povzročila izražanje genov, povezanih z vlaženjem, ker je zdravljenje s Pm-ME sprožilo izražanje HAS-2, medtem ko ga je U0126 zatrl (slika 5c). Ti rezultati kažejo, da so encimi, povezani z MAPK, prispevali k dejavnostim proti staranju, proti gubam in protivnetnim dejavnostim, posredovanim s PM-ME. Znano je, da UVB obsevanje poveča druge signalne kaskade, kot so tiste, povezane z NF-κB in STAT3 [65,66]. Še vedno je treba raziskati, ali lahko Pm-ME regulira te signalne poti.

Za zaključek smo ugotovili, da Pm-ME, bogat s kumarično kislino, deluje antioksidativno, deluje proti gubam, spodbuja vlaženje in deluje antimelanogeno v kožnih celicah, obsevanih z UVB ali obdelanih s H2O2. Pm-ME je povečal fosforilacijo ERK na način, ki je odvisen od odmerka, vendar je zmanjšal fosforilacijo p38 in JNK (slika 6). Naši rezultati so močno pokazali, da je Pm-ME lahko učinkovit biomaterial za zaščito kože. Ker je Pm-ME pokazal zelo obetavne aktivnosti tako v rakavih kožnih celicah (celicah HaCaT in B16F10) kot v normalnih človeških keratinocitih med pogoji oksidativnega stresa, zato predlagamo koristne vloge uporabe Pm-ME v kozmetičnih pripravkih. Vendar pa imajo celice melanoma nenormalne lastnosti, kot so moten nadzor celičnega cikla, nenormalni vzorci izražanja genov in omejene sposobnosti diferenciacije [67], zato je treba slediti dodatnemu delu s primarnimi melanociti, da bi natančno razumeli antimelanogenezno aktivnost Pm-ME in njegove molekularni mehanizem. Poleg tega bodo rastline iz iste družine (Sapotaceae) ali rodu (Pradosia spp.) testirane glede podobnih zaščitnih aktivnosti kože.

Vprašajte za več: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501