Botryllus Schlosseri kot edinstven model kolonialnih hordatov za preučevanje in modulacijo prirojene imunske aktivnosti

Povzetek:

Razumevanje mehanizmov, ki vzdržujejo imunološko nereaktivnost, je bistvenega pomena za ohranjanje tkiva v singenskih in alogenskih okoljih, kot sta presaditev in toleranca nosečnosti. Medtem ko se večina zavrnitev presadkov pojavi zaradi adaptivnega imunskega odziva, je vnetni odziv prirojene imunosti potreben za aktivacijo adaptivne imunosti. Botryllus schlosseri, kolonialni plaščar, ki je vretenčarjem najbližja skupina nevretenčarjev, je brez adaptivne imunosti na osnovi T- in B-celic. Ima edinstvene značilnosti, zaradi katerih je dragocen modelni sistem za preučevanje mehanizmov prirojene imunosti: (i) pojav naravne alogenske presaditve, ki povzroči zlitje ali zavrnitev; (ii) regeneracija cele živali in nevnetna resorpcija vsak teden; (iii) alogenska resorpcija, ki je primerljiva s človeško kronično zavrnitvijo.

Nedavne študije o B. schlosseri so vodile do prepoznavanja molekularnega in celičnega ogrodja, na katerem temelji izguba prirojene imunosti ali tolerance do alogenskih tkiv. Poleg tega je bil B. schlosseri razvit kot model za preučevanje transplantacije hematopoetskih matičnih celic (HSC) in zagotavlja nadaljnji vpogled v podobnosti med nišami HSC pri ljudeh in B. schlosseri. V tem pregledu razpravljamo o tem, zakaj lahko preučevanje molekularnih in celičnih poti, ki usmerjajo uspešno prirojeno imunsko toleranco pri B. schlosseri, zagotovi nov vpogled v in potencialne modulacije teh imunskih procesov pri ljudeh.

Imuniteta je tesno povezana z mehanizmi neodzivnosti. Mehanizem neodzivnosti je pomembno sredstvo za ohranjanje stabilnosti notranjega in zunanjega okolja človeškega telesa, prav tako pa je pomemben dejavnik za zagotavljanje normalnega življenjskega zakona telesa. Brez obstoja mehanizmov neodzivnosti bo delovanje imunosti močno zmanjšano.

Na primer, rožena plast in sluznica na površini telesa sta izjemno pomembni za obrambo pred zunanjimi patogenimi mikroorganizmi, ki so del prirojene imunosti človeškega telesa. Brez takega mehanizma, ne glede na to, kako močan je človeški imunski sistem, bo težko doseči učinkovito odpornost proti boleznim. Tudi v vsakdanjem življenju moramo biti pozorni na izboljšanje imunosti. V naši raziskavi smo ugotovili, da lahko Cistanche izboljša imunost. Cistanche vsebuje različne biološko aktivne sestavine, kot so polisaharidi, dve gobi, Huang Li itd. Te sestavine lahko stimulirajo različne celice imunskega sistema in povečajo njihovo imunsko aktivnost.

Kliknite, kdaj želite vzeti cistanche

Ključne besede:

imunska toleranca; aloprepoznavanje; presaditev matičnih celic; Botryllus schlosseri; tunikati; prirojena imunost; imunska zavrnitev; imunska modulacija.

1. Uvod

Preučevanje imunoloških mehanizmov, ki živalim omogočajo regeneracijo in prepoznavanje alogenskih tkiv, je pomembna lastnost na področju transplantacije. Pri vretenčarjih so celice T glavne efektorske celice adaptivnega imunskega sistema za ne-samoprepoznavanje. Zanimivo je, da se prirojene celice aktivirajo z vnetnimi signali, ki jih sproščajo poškodovane ali stresne celice, ki so posledica alogenske presaditve; ta prirojena imunost je potrebna za aktivacijo T-celic in sočasni zavrnitveni odziv [1,2].

Na primer, po presaditvi HSC hiperaktivacija celic naravnih ubijalk (NK) povzroči nastajanje proinflamatornih signalov, posredovanih s celicami NK, ki inducirajo in vzdržujejo odziv T-celice posredovane reakcije presadka proti gostitelju (GVHD) [3,4]. ]. Pri toleranci tkiv zarodka med nosečnostjo ima pomembno vlogo tudi prirojena imunost. V tem primeru so prirojeni odzivi močno povezani z motnjami nosečnosti, kot so ponavljajoča se izguba nosečnosti, prezgodnji porod in preeklampsija [5–11].

Za preučevanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki vodijo prirojene imunske sisteme za toleranco ali zavračanje, pregledamo zamisel o preučevanju nastajajočega modela kolonialnega hordata, Botryllus schlosseri. B. schlosseri preučujejo že desetletja in ima zelo zanimive naravne pojave, ki temeljijo na prirojenih imunskih odzivih, od naravne presaditve ali zavrnitve do sinhronizirane programske odstranitve celic in regeneracije celega telesa. Ta organizem je plaščar; je del najbližje sestrske skupine vretenčarjem in nima adaptivne imunosti na osnovi limfocitov [12–14]. To omogoča preučevanje celičnih in molekularnih mehanizmov, ki usmerjajo zavračanje tolerance in regeneracijo v sistemu, ki nima imunosti, posredovane s T- in B-celicami.

V zadnjem desetletju so bila modelu B. schlosseri dodana nova orodja in napredek, od projekta genoma [15] in nizov genov različnih imunoloških pojavov do izolacije imunskih celic in transplantacije HSC [16,17]. Genom B. schlosseri (~600 Mbp) je bil v celoti sekvenciran in označen leta 2013 [15], pri čemer je bilo ugotovljeno, da ima veliko genov, ki kodirajo beljakovine, pomembno homologijo z vsaj 75 odstotki človeških genov [15]. V tem pregledu pojasnjujemo različne naravne prirojene imunske pojave pri B. schlosseri in kako so povezani s procesi pri sesalcih. Poleg tega pregledamo orodja in nabore genov, ki so na voljo za preučevanje celične in molekularne ravni teh imunoloških pojavov in vivo in in vitro z uporabo tega edinstvenega modelnega organizma.

Botryllus schlosseri

B. schlosseri je invazivni morski kolonialni plaščar iz vrste Chordata, ki ga je zdaj mogoče najti po vsem svetu [18,19]. Plaščarji so bili poimenovani po želatinasti "tuniki" strukturi, ki pokriva njihovo telo in jo je predlagal Charles Darwin kot temeljni namig v evoluciji vretenčarjev [20]; študije molekularne filogenetike so dejansko pokazale, da so vretenčarjem najbližji živeči nevretenčarski sorodniki [21,22].

B. schlosseri se lahko razmnožuje spolno ali nespolno [23, 24]. Po oploditvi serija klasičnih embrionalnih razvojnih stopenj v 6 dneh povzroči ličinko paglavca, spočeto po spolni poti [23]. Ta stopnja ličinke je glavni pokazatelj, ki odraža tesno povezavo z vretenčarji, saj ima značilnosti, kot so rep, notohord, nevralna cev in progasta muskulatura (slika 1A) [15,22,23,25]. Plavajoča ličinka se v nekaj urah po izvalitvi usede na substrat in se metamorfozira v sesilca s telesnim načrtom, podobnim nevretenčarjem (slika 1B), kar sproži ciklični blastogeni proces, ki povzroči nastanek kolonije genetsko enakih zooidov in brsti [23,26].

Cikel brstenja traja 7 dni in se začne s sekundarnimi brsti, ki se spremenijo v primarne brstiče, ki na koncu cikla nadomestijo prejšnjo generacijo zooidov, katerih celice odmrejo zaradi programirane celične smrti in se očistijo s programirano odstranitvijo celic (slika 1C) [ 17,23,27–29]. Ta ciklični proces brstenja posredujejo matične celice, ki vzdržujejo organizem vse življenje in so odgovorne za organogenezo v ciklu nespolnega razmnoževanja in gametogenezo v poti spolnega razmnoževanja [17, 30–35].

B. schlosseri ima različne stopnje naravnega imunskega odziva. Ko se dotakneta dve genetsko združljivi koloniji, ki imata vsaj en alel v genu za faktor histokompatibilnosti Botryllus (BHF), se združita, delita kroženje in tvorita himero (slika 1D, zgoraj) [36–38].

Vendar so nekompatibilne kolonije, ki nimajo nobenega alela v genu BHF, podvržene zavrnitvenemu odzivu, kar ustvari točke zavrnitve med kolonijami z nekrotičnim tkivom (slika 1D, spodaj) [31,33,34,36–38]. Zanimivo je, da se pri spojenih živalih na polkompatibilni ravni v nekaterih primerih en himerni partner odstrani z vnetnim procesom alogenske resorpcije, ki je primerljiv s kronično zavrnitvijo pri človeku (slika 1E) [16,39].

Drug fascinanten pojav, ki se zgodi, ko se dve združljivi koloniji združita v kroženje, je konkurenca matičnih celic, pri čemer se matične celice iz ene kolonije infiltrirajo v reproduktivne organe druge kolonije, prehitijo gametogenezo in povzročijo potomstvo svojega genotipa; torej matične celice predstavljajo biološke enote naravne selekcije. Tekmovanje matičnih celic je primer novega področja, ki se je razvilo iz preučevanja himer B. schlosseri. Celično tekmovanje pri B. schlosseri je bilo prikazano v poskusu, ki je uporabil genetske označevalce za sledenje genotipu somatskih tkiv in tkiv zarodne linije znotraj himere z dvema kolonijama, pri čemer je razkril izražanje samo enega genotipa v tkivih zarodne linije obeh kolonij, pa tudi enega nekaj genotipov v somatskih celicah [31,33,34]. Nadaljnje študije so nadalje pokazale, da ta prevzem klonov posredujejo matične celice [31].

Da bi prevedli študijo tekmovanja matičnih celic na miši, so razvili tetrahimera miši z injiciranjem treh različnih barvnih izvornih celic zarodkov v blastocite, od katerih je bila vsaka označena z drugačnim fluorescenčnim reporterjem [40]. Ko so se zarodki razvili, je veliko sosednjih semenskih tubulov oddajalo več fluorescenčnih signalov; vendar sta po zorenju v vsakem testisu ostali le dve do tri različne barve [41]. Interpretacija nakazuje, da so vsi kloni dvostransko vstopili v genitalne grebene, le eden od njih je ostal pri odraslih miših [42]. V krvotvornem sistemu so procese staranja in bolezni pripisali tekmovanju matičnih celic.

Med staranjem se poveča delež matičnih celic, ki proizvajajo mieloično v primerjavi z limfno populacijo krvi, kar je mogoče pripisati konkurenci matičnih celic, kot so opazili pri starih v primerjavi z mladimi mišmi in ljudmi [43–47]. Klonsko širjenje in tekmovanje matičnih celic sta se jasno pokazala v postopnem napredovanju nenormalnih prelevkemičnih klonov proti levkemiji [48–53], kot tudi v klonskem širjenju gladkih mišičnih celic pri aterosklerozi pri miših in ljudeh [54,55]. To so primeri, kako so študije o B. schlosseri vodile do odkritij v razvoju sesalcev, staranju, raku in aterosklerozi [42].

2. Naravni fenomen presaditve (fuzijski/zavrnitveni mehanizmi)

Ko se dve koloniji B. schlosseri dotakneta ampule (končna točka njunih krvnih žil), doživita proces prepoznavanja samega/nesabe [36,38,56]. Kolonije se prepoznajo kot same sebe in združijo svoje žile, da tvorijo naravni parabiont (slika 1D zgoraj), če imajo vsaj en sam alel polimorfnega histokompatibilnega gena, faktor histokompatibilnosti Botryllus (BHF) [38]. Po vzpostavitvi skupnega vaskulaturnega sistema lahko imunske celice in izvorne celice prosto tečejo od enega partnerja himere do drugega, kar je podobno parabiontom v poskusnih sistemih sesalcev (slika 2A–C).

Na somatski ravni je himerizem lahko dolgotrajno stabilen, ko sta prisotna in vidna oba genotipa. Ker se matične celice lahko prosto gibljejo tudi znotraj himere, pride do hierarhične konkurence matičnih celic v himerni koloniji, kjer bodo "zmagovalne" celice dedno prevladujoče, kar bo povzročilo spolne žleze z enim izvorom zarodne linije, medtem ko bodo ohranile somatske himere [33,34]. ]. Dedni zmagovalni in poraženi sevi zarodne linije odražajo gensko določene fenotipe matičnih celic [31,32,35]. Zanimivo je, da se v nekaterih primerih zlitih kolonij eden od partnerjev resorbira. To se običajno zgodi med blastogenim ciklom, medtem ko poteka programirana celična odstranitev starih zooidov; vendar pa vnetni proces preprečuje tudi razvojni proces novih zooidov iz popkov [16,39]. Ta proces imenujemo alogenska resorpcija (slika 1E).

Genetsko nekompatibilne kolonije so podvržene imunskemu zavrnitvenemu odzivu, kjer so vključene vnetne in citotoksične celice, kar ustvarja nekrotična območja med dotikajočimi se ampulami (slika 1D spodaj) [17,36,38]. Osnovo za zavrnitveni odziv citotoksičnosti predstavljajo citotoksične celice morule (MC), za katere se zdi, da delujejo v skladu s "manjkajočo samohipotezo", ki spominjajo na človeške naravne celice ubijalke (NK). Brez inhibitornega prepoznavanja združljivega BHF MC ubijejo ciljne celice, kar povzroči nekrotično lezijo na točkah zavrnitve (slika 1D spodaj) [17]. To aloprepoznavanje se pripisuje kot nevretenčarski dvojnik imunosti pri presaditvi [16].

3. Zooidna resorpcija in regeneracija kot model za programirano odstranitev celic

Kolonija B. schlosseri se razvije iz ene same paglavcu podobne ličinke, ki se je razvila s klasično hordatno embriogenezo iz oplojenega jajčeca. Blastogeneza se začne, ko se ličinka metamorfozira v filtrirni izcedek, ki nosi popek, ki se razvije v posameznega odraslega zooida. Zooidi rastejo brsti, ki se razvijejo in jih zamenjajo vsak teden in tvorijo kolonije (slika 1A-C). Vsaka kolonija je sestavljena iz primarnih popkov odraslih (zooidov) filtriranja in sekundarnih brstov. Blastogenetski cikel je opredeljen s spremembami v teh treh generacijah, ki se zgodijo vsak teden pri 20 stopinjah [24].

Zooidi živijo 1 teden in se resorbirajo, ko jih nadomesti nova generacija. Ta "dogodek prevzema je posredovan z usklajevanjem različnih molekularnih in celičnih procesov, v katere so vključene krvne celice v obtoku. Preden pride do prevzema, se sproži difuzna programirana celična smrt , od sprednjega proti zadnjemu delu zooida (57], po od mitohondrijev odvisni apoptotični poti. To je bilo dokazano s povečanjem kondenzacije kromatina (27l, aktivacija kaspaz (kaspaza-3 in9) (58l). , čezmerno izražanje apoptotičnih molekul pri sesalcih (tj. Bax, Fas in FasL) in znižanje antiapoptotičnega Bcl-2 (59). Fosfatidilserin in oksidirani lipidi se izražajo na površini plazemske membrane prizadetih celic kot fagociti. prepoznavni signali (27).V naslednjih korakih prevzema krožeče fagocitne celice (pozitivna protitelesa proti CD36) infiltrirajo starajoča se tkiva, zajamejo apoptotične celice in nato tudi umrejo z apoptozo (slika 1C)[27,60].

Zooidna resorpcija ustvari znatno količino biološkega materiala, ki se reciklira z razvijajočimi se brsti, da se ohrani blastogeni razvoj (611. Resorpcija zooidov in alogenska resorpcija (podrobno opisana v delu E), ki poteka pri himerah B. schlosseri, imata podobnosti v imunskem odziv, saj oba vključujeta stalno preslušavanje med apoptozo, prepoznavanjem samega/ne-samo in fagocitozo [62].Ker se to preslušavanje pojavi v naravnih pogojih, B. schlosseri predstavlja dragocen model za preučevanje na različnih ravneh (geni, metaboliti, signalne molekule , in celične funkcije), mehanizmi, ki vodijo programirano odstranitev celic, kar omogoča regeneracijo novih zooidov.

4. Botryllus schlosseri kot model za preučevanje prirojene imunosti

B. schlosseri ima učinkovit imunski sistem, ki se ne le bori proti okužbam in jih preprečuje, ampak tudi orkestrira procese histokompatibilnosti, nekompatibilnosti, zavrnitve in zooidne resorpcije. Zanimivo je, da ko je bil njegov genom označen in primerjan z genomi nevretenčarjev in vretenčarjev, je bilo ugotovljeno, da številni geni, povezani z imunskim sistemom in hematopoezo, vključno z ZBTB1, MEFV, DSG3, NQ01, NQO2 in BHLHE40, ki sodelujejo pri razvoju levkocitov, kot tudi dodaten nabor genov, ki bi jih lahko pripisali predhodnikom človeških hematopoetskih linij, je bilo mogoče zaznati pri B. schlosseri, ne pa tudi pri drugih vrstah nevretenčarjev ali samotnih vrstah plaščarjev [15].

Imunski odzivi pri B. schlosseri so posredovani s homeostatskim celičnim prometom in licenciranjem prirojenih citotoksičnih celic, ki sodelujejo z aktiviranimi fagociti. Te imunske efektorske celice so krvne celice v obtoku, ki trenutno kažejo fagocitno in citotoksično celično aktivnost. Med fagocitnimi celicami ima B. schlosseri mieloično linijo, ki si deli velik nabor genov z mieloično linijo sesalcev [17]; ima tudi amebocite in velike fagocite, ki so morfološko bolj podobni hemocitom členonožcev in iglokožcev [63]. Ti fagociti zajamejo mikroorganizme in poškodovane lastne celice, vsebujejo fagosome s hidrolitičnimi encimi, lipide in lipofuscine [64] in jih lahko razdelimo na statične (v epiteliju obtočil) in mobilne (krožijo skozi kolonijo) populacije [65].

MC B. schlosseri so bile označene kot citotoksične celice; so najpogostejši tip celic v obtoku in imajo velike citoplazemske granule, ki vsebujejo neaktivno obliko fenoloksidaze (PO) [64]. Analiza izražanja genov je pokazala, da izražajo genski repertoar, specifičen za tunikate, in nabor genov (15 odstotkov), ki so homološki z vretenčarskimi limfociti [17,63].

Na molekularni ravni se BsTLR1 izraža tako v fagocitih kot v MC B. schlosseri kot člana družine receptorjev TLR, ki je aktivno vključena v samo-/ne-samo-prepoznavanje [66]. Celice v krvnem obtoku izražajo tudi gen transmembranskega proteina tipa II, ki je povezan z receptorji CD94 in NKR-p1 človeških NK celic in T limfocitov. Ta beljakovina se regulira navzgor med procesom aloprepoznavanja [67]. Lektin, ki veže ramnozo (BsRBL), je bil identificiran kot efektorska molekula, ki aktivira fagocite in tako inducira sproščanje citokinom podobnih molekul, ki jih prepoznajo protitelesa proti IL1 in proti TNF [68]. Poleg tega aktivirani fagociti signalizirajo prek majhnih GTPaz, podobnih Rasu, MAPK in omrežij NF-κB, da sprožijo odziv prepoznavanja tujih celic [69].

Delo v B. schlosseri nas je vodilo do hipoteze, da so prirojeni imunski mehanizmi med vzdrževanjem tkiva, aloprepoznavanjem in regeneracijo ohranjeni in zelo pomembni za sprožitev adaptivnega imunskega odziva pri sesalcih. Zato ta model omogoča preučevanje orkestriranja celičnih in molekularnih procesov okoli teh imunskih odzivov, s poudarkom na prirojenih imunskih odzivih. Te informacije se nato lahko prevedejo v človeško imunost, s posebnim vplivom na izboljšanje terapevtskih strategij za presaditev matičnih celic, tkiv in organov.

Poleg tega so zaradi imunske obrambe plaščarjev postali potencialni vir različnih naravnih zdravil z velikim potencialom za farmakološke aplikacije. Na primer, hemaglutinacijska aktivnost lektinov v hemolimfi ascidije ima pomembno imunsko vlogo [70]; morske lektine so raziskali kot potencialna protimikrobna in protivirusna sredstva, pa tudi kot spojine z imunomodulatornimi in citotoksičnimi učinki na tumorske celice [71]. Ugotovljeno je bilo, da pet homolognih transkriptov lektinov, ki vežejo ramnozo (RBL), povečujejo fagocitozo pri B. schlosseri [70]. Poleg tega komponente alternativne poti komplementa (ortologi C3 in Bf) [72,73] in komponente lektinske poti (lektin, ki veže manozo, fikolin in z manozo povezana serinska proteaza 1) prepisujejo MC in povezujejo z nesamoprepoznavanjem , opsonizacija in očistek mikrobov in apoptotičnih celic [74].

Prej omenjeni encim PO, ki ga degranulirajo in sprostijo MC B. schlosseri, je bioaktivna molekula s citotoksičnim delovanjem proti mikrobnim okužbam (tj. celicam kvasovk in bakterijskim sporam), pa tudi proti celicam, ki niso lastne sebi (tj. nekompatibilni krvi) [70]. ,75]. MC so tudi glavni vir topnih citokinom podobnih proinflamatornih molekul IL-1- in TNF-, za katere se domneva, da se sproščajo v prisotnosti nekompatibilnih celic in mikrobov [70]. Potrebne so nadaljnje študije za raziskovanje zdravilnega potenciala teh molekul B. schlosseri in njihove možne farmakološke uporabe.

V plaščarjih je bilo ugotovljenih več drugih spojin s protiglivičnimi, antidiabetičnimi, antioksidativnimi in protitumorskimi potenciali. Več poglobljenih informacij o tej temi je bilo pregledanih v [76,77].

5. Botryllus kot model za presaditev HSC

Lastnosti B. schlosseri so pokazale veliko podobnosti z vretenčarji in sesalci, bodisi v njihovem krvnem obtoku, biologiji izvornih celic ali imunskih značilnostih [31,33,56]. Podobno pri vretenčarjih matične celice B. schlosseri prebivajo v edinstvenih nišah, kjer se domneva, da je njihov status reguliran na spektru, kjer en konec predstavlja mirovanje, drugi pa diferenciacijo/širjenje. Leta 2005 sta Laird et al. pokazala presaditev na osnovi matičnih celic [31]; leta 2008, Voskoboynik et al. uspešno identificiral endostilno nišo in iz nje izoliral somatske matične celice B. schlosseri (slika 2D) [35]. Ta napredek je pripeljal do nadaljnjih študij, osredotočenih na karakterizacijo niše in izvornih celic.

HSC, ki so na vrhu hierarhije, ko gre za krvne/imunske celice, vzdržujejo krvni in imunski sistem organizma skozi celotno življenjsko dobo. Temeljito so jih raziskali v več organizmih, med katerimi so najpomembnejši ljudje in miši [78–81]. Leta 2018 sta Rosental et al. [17] je uspešno preslikal celotne transkriptome celic in tkiv v hematopoetskem sistemu B. schlosseri, kot so HSC in njihove niše (endostil), matične celice in imunske efektorske celice. Razvrstili so 23 ločenih populacij, preslikali njihove transkriptome in identificirali skupino celic, v katerih je bilo 235 genov različno reguliranih, kar je pokazalo pomembno homologijo genske aktivnosti s HSC ljudi in sesalcev. S transplantacijskimi testi so pokazali tiste, ki so obogatili diferenciacijo HSC z drugimi krvnimi celicami Botryllus, kot tudi tiste, ki so dom endostilne niše (slika 2D).

Za karakterizacijo endostila kot niše HSC so primerjali podatke o transkriptomih iz 10 endostilov v 34 celih kolonij, pri čemer so našli 327 genov, ki so bili znatno povišani in si jih delijo z upreguliranimi geni v mišjem in človeškem hematopoetskem kostnem mozgu. To nakazuje skupni izvor endostilne niše pri B. schlosseri, pa tudi hematopoetskega kostnega mozga vretenčarjev, poleg homoloških HSC in imunskih celic, ki izhajajo iz mieloidne linije [17,63].

To nedavno delo, skupaj s prejšnjimi raziskavami, naredi B. schlosseri popoln model za presaditev HSC, ob upoštevanju njihove sposobnosti izolacije HSC, njihove interakcije z imunskimi efektorskimi celicami in njihove lokalizacije v niši HSC (slika 2D). To vključuje zmožnost analize ravni himerizma, ki ga povzroča presaditev, s pretočno citometrijo (slika 2E).

6. Alogenska resorpcija kot model za kronično zavračanje

V mnogih primerih se bo po zlitju dveh kolonij B. schlosseri eden od polzdružljivih partnerjev v nekaj tednih ponovno absorbiral skozi vnetni proces, ki preprečuje regeneracijo novih zooidov (slika 1E) [39]. Pogonske mehanizme tega procesa so razjasnili Corey et al., ki so identificirali citotoksične MC kot ključno imunsko efektorsko celično vrsto v procesu alogenske resorpcije [16]. Prisotnost MC je povzročila spremembe genske ekspresije pri "izgubljajočem" partnerju, ki sprožijo programe celične smrti in napake v razvojnem procesu. Ko so bile alogenske MC posvojitveno presajene v kolonije, so povzročile vnetni odziv, ki je preprečil razvoj zooidov naslednje generacije (v primerjavi z lažnimi injekcijami ali darovalci, ki niso MC), kar dokazuje, da so MC gonilna sila tega procesa. Izolacija in sekvenciranje RNA brstov in zooidov iz resorbirajočih in neresorbirajočih delov himer sta zagotovila seznam različno izraženih genov, ki razkrivajo povečano izražanje regulatornih genov obrambe gostitelja in pro-vnetnih markerjev.

Ugotovljeno je bilo, da imajo geni, povezani s sistemom komplementa, kot so MASP1, MASP2 in C3, spremenjeno izražanje med alogensko resorpcijo, skupaj s proteini, povezanimi s TNF (TRAF3 in TRAF4), koagulacijskimi komponentami (KLKB1, KLK3, F2, F8), celično smrt (CASP2/7/9) in lizosomske proteinaze (CTSV, CTSF). Ti podatki potrjujejo, da proces alogenske resorpcije vključuje različne preslušne dogodke, ki jih je mogoče nadalje preučevati pri B. schlosseri.

Član družine interlevkinov IL-17 je bil ključni navzgor reguliran gen (60-kratno povečanje). IL-17 izločajo prirojene imunske celice in je vključen v očistek gliv in zunajceličnih bakterij [82]. IL-17 deluje kot ključni regulativni citokin, njegova regulacija pa povzroči poškodbe tkiva zaradi prekomernega vnetja, kroničnega vnetja [83], avtoimunosti [84] in kronične GVHD pri višjih vretenčarjih [85]. Za primerjavo, pri B. schlosseri je uporaba rekombinantnega proteina IL-17 B. schlosseri povzročila znatno povečano celično citotoksičnost na način, ki je odvisen od odmerka [16]. Ta rezultat, skupaj z nizi genov, ki kažejo povečano regulacijo klasičnih vnetnih odzivov, kaže vzporednice s kronično zavračanjem pri ljudeh.

7. Možnost splošnega alogenskega modela

Trenutno se alogenska transplantacija HSC uporablja za zdravljenje več bolezni pri ljudeh; vendar je ta klinični proces zelo zapleten in zahteva profilaktično zdravljenje za preprečitev imunske zavrnitve [86]. Nekatere pomembnejše možnosti za profilakso vključujejo zaviralce kalcinevrina, rapamicin, mikofenolat mofetil z (ali brez) antitimocitnega globulina ali, v primeru akutne GVHD, uporabo sistemskih kortikosteroidov, kot je metilprednizolon [87].

Kljub nedavnemu napredku in uporabi profilakse se akutna GVHD diagnosticira pri skoraj polovici postopkov alogenske presaditve HSC in je povezana s slabo prognozo [88]. Kronično zavračanje le še poslabša odpornost na zdravljenje s kortikosteroidi; zaradi nezmožnosti obvladovanja kronične zavrnitve nekateri bolniki potrebujejo ponovno presaditev, kar poveča klinična tveganja [88]. Pri višjih vretenčarjih imajo celice T pomembno vlogo pri kronični zavrnitvi, GVHD in motnjah nosečnosti [89,90]. Razjasnitev mehanizmov, povezanih z imunskim sistemom, ki stojijo za aktivacijo teh efektorskih celic v alogenskem okolju, nam bo omogočila boljše razumevanje, kako se izogniti njihovi citolitični aktivaciji in pozitivno modulirati proces kronične zavrnitve. Celice NK in celice T pri ljudeh imajo skupno značilnost prepoznavanja alogenskega sebe/nejaza in se aktivirajo z identifikacijo ne-jaza ali pomanjkanjem sebe.

Pri B. schlosseri se alogenska zavrnitev pojavi podobno kot pri vretenčarjih, kljub njenemu bolj prirojenemu imunskemu sistemu. Kot smo že omenili, si BHF v B. schlosseri deli nekatere lastnosti s človeškim MHC [91], saj njegovo prepoznavanje kot "samo" vodi do glavnega zaviralnega mehanizma citotoksičnosti pri aloprepoznavanju. Zaviralni učinki BHF na citotoksičnost [17] v kombinaciji z opazovalnimi dokazi fuzije kolonij, ki imajo vsaj en alel BHF, kažejo, da mehanizem celične toksičnosti med aloprepoznavanjem v tem tunikatu izvira iz "manjkajočega jaza" in ga je mogoče primerjati s prepoznavanjem s celicami NK pri napredovalih vretenčarjih [63]. Te ugotovitve skupaj kažejo podobnosti v prirojenih imunskih odzivih med B. schlosseri in ljudmi na celični in molekularni ravni. Medtem ko je gonilna sila v vsakem organizmu drugačna, bi lahko točke interakcije, kot so imunske poti in ključne molekule za prepoznavanje, preučevali v modelu z lahko dostopom in jih nato prevedli v kompleksne modele sesalcev.

8. Sklepi

Napredek v raziskavah in znanstvenih orodjih v modelu B. schlosseri je promoviral B. schlosseri kot zanimiv model za preučevanje odzivov prirojenega imunskega sistema, natančneje pri presaditvah. Eno vidnejših raziskovalnih orodij, projekt genoma Botryllus [15], je omogočil analizo na genetski in molekularni ravni ter tako identificiral BHF [38] na fuzijskem histokompatibilnem lokusu [92]. Poleg tega je projekt genoma potrdil lokacijo plaščarjev kot skupine nevretenčarjev, ki je najbližja vretenčarjem, pri čemer si veliko imunskih genov deli s sesalci in njihovim hematopoetskim sistemom [15].

Poleg tega, kot je omenjeno zgoraj, ima B. schlosseri naravno prisotne pojave, ki spominjajo na številne osnovne imunološke procese, kot je (I) zavrnitev kot akutna zavrnitev pri presaditvi, (II) zlitje kot naravni parabiont, ki si deli izvorne celice, (III) izvorne celice tekmovanje in himerizem, (IV) naravni tedenski cikel zooidne resorpcije in razvoja novih popkov, ki deluje prek klasičnih programiranih mehanizmov odstranjevanja in regeneracije celic, primerljivih z vretenčarji, in (V) alogenske resorpcije kot kroničnega procesa zavrnitve.

Poleg tega je bilo med raziskovanjem zgoraj opisanih procesov pridobljenih več genskih ekspresijskih sklopov, ki so omogočili iskanje kandidatnih genov in poti, ki vplivajo na te imunsko povezane procese, na primer genski nizi alogenske resorpcije [16], fuzije in geni, povezani s histokompatibilnostjo [38], 23 različnih celičnih populacij in endostil [17] ter zooidna regeneracija in razvojni procesi [23].

Skupaj orodja in napredek pri B. schlosseri, skupaj z zmožnostjo in vivo in ex vivo celičnih imunskih profilov, s celičnimi in molekularnimi manipulacijami (od morfolinov do rekombinantnih proteinov), predstavljajo temelj za prihodnja odkritja o mehanizmih imunske aktivacije v preprost model, ki je pomemben za raziskave človeškega imunskega sistema.

Avtorski prispevki:

Konceptualizacija, BR; pisanje—priprava izvirnega osnutka, OG, EAM-T., TL, ST in BR; pisanje—pregledovanje in urejanje, OG, EAM-T., TL, ST, TR, AV, BR in OG-Y.; nadzor, BR; projektna administracija, OG-Y.; pridobitev sredstev, AV in BR Vsi avtorji so prebrali in se strinjali z objavljeno različico rokopisa.

Financiranje:

Delo BR podpirata Izraelska znanstvena fundacija (ISF), štipendija št. 1416/19, in HFSP Research Grant, RGY0085/2019. BR je prejel sredstva od Evropskega raziskovalnega sveta (ERC) v okviru programa Evropske unije za raziskave in inovacije Obzorje 2020 v skladu s sporazumom o dodelitvi sredstev št. 948476. AV podpirata NIH R21AG062948 in raziskovalni program Chan Zuckerberg.

Izjava institucionalnega revizijskega odbora:

Se ne uporablja.

Izjava o informirani privolitvi:

Se ne uporablja.

Nasprotja interesov:

Avtorji izjavljajo, da ni navzkrižja interesov.

Reference

1. Oberbarnscheidt, MH; Lakkis, FG Prirojeno aloprepoznavanje. Immunol. Rev. 2014, 258, 145–149. [CrossRef]

2. Zečer, D.; Li, Q.; Williams, AL; Walters, JT; Baddoura, FK; Chalasani, G.; Rothstein, DM; Shlomchik, WD; Demetris, AJ; Lakkis, FG Samo prirojena imunost ne zadošča za kronično zavrnitev, ampak povzroči nagnjenost zaceljenih alograftov k patologiji, ki jo posredujejo celice T. Transpl. Immunol. 2012, 26, 113–118. [CrossRef] [PubMed]

3. Ghadially, H.; Ohana, M.; Elboim, M.; Gazit, R.; Gur, C.; Nagler, A.; Mandelboim, O. NK celični receptor NKp46 uravnava bolezen presadka proti gostitelju. Cell Rep. 2014, 7, 1809–1814. [CrossRef]

4. Simonetta, F.; Alvarez, M.; Negrin, RS Naravne celice ubijalke pri bolezni presadka proti gostitelju po alogenski presaditvi hematopoetskih celic. Spredaj. Immunol. 2017, 8, 465. [CrossRef]

5. Geldenhuys, J.; Rossouw, TM; Lombaard, HA; Ehlers, MM; Kock, MM Motnje v regulaciji imunskih odzivov pri placentnem podtipu preeklampsije. Spredaj. Immunol. 2018, 9, 1659. [CrossRef]

6. Gomez-Lopez, N.; Stlouis, D.; Lehr, MA; Sanchez-Rodriguez, EN; Arenas-Hernandez, M. Imunske celice pri donošenem in prezgodnjem porodu. Celica. Mol. Immunol. 2014, 11, 571–581. [CrossRef]

7. Kwak-Kim, J.; Bao, S.; Lee, SK; Kim, JW; Gilman-Sachs, A. Imunološki načini izgube nosečnosti: vnetje, imunski učinki in stres. Am. J. Reprod. Immunol. 2014, 72, 129–140. [CrossRef] [PubMed]

8. Moffett, A.; Chazara, O.; Colucci, F. Materinsko aloprepoznavanje ploda. Fertil. Sterilno. 2017, 107, 1269–1272. [CrossRef]

9. Rosental, B.; Brusilovski, M.; Hadad, U.; Oz, D.; Appel, MY; Afergan, F.; Josef, R.; Rosenberg, LA; Aharoni, A.; Červenka, A.; et al. Proliferirajoči celični jedrski antigen je nov zaviralni ligand za naravni citotoksični receptor NKp44. J. Immunol. 2011, 187, 5693–5702. [CrossRef] [PubMed]

10. Šemeš, A.; Kugel, A.; Steiner, N.; Yezersky, M.; Tiroš, D.; Edri, A.; Teltsh, O.; Rosental, B.; Sheiner, E.; Rubin, E.; et al. Variantni profili spoja NKp44 in NKp30 v tkivih decidue in tumorja: primerjalno stališče. Oncotarget 2016, 7, 70912–70923. [CrossRef] [PubMed]

11. Šemeš, A.; Tiroš, D.; Sheiner, E.; Tiroš, NB; Brusilovski, M.; Segev, R.; Rosental, B.; Porgador, A. Izguba nosečnosti v prvem trimesečju in izražanje alternativno spojenih izooblik NKp30 v materini krvi in ​​placentnem tkivu. Spredaj. Immunol. 2015, 6, 189. [CrossRef]

12. Azumi, K.; De Santis, R.; De Tomaso, A.; Rigoutsos, I.; Yoshizaki, F.; Pinto, MR; Marino, R.; Šida, K.; Ikeda, M.; Ikeda, M.; et al. Genomska analiza imunosti urokordatov in nastanek imunskega sistema vretenčarjev: "čakajoč na Godota." Imunogenetika 2003, 55, 570–581. [CrossRef]

13. Flajnik, MF Hladnokrvni pogled na adaptivno imunost. Nat. Rev. Immunol. 2018, 18, 438–453. [CrossRef]

14. Hirano, M.; Das, S.; Guo, P.; Cooper, MD, poglavje 4—Razvoj prilagodljive imunosti pri vretenčarjih. V napredku imunologije; Frederick, W., ur.; Academic Press: Cambridge, MA, ZDA, 2011; Letnik 109, str. 125–157. [CrossRef]

15. Voskoboynik, A.; Neff, NF; Sahoo, D.; Newman, AM; Puškarjev, D.; Koh, W.; Passarelli, B.; Ventilator, HC; Mantalas, GL; Palmeri, KJ; et al. Zaporedje genoma kolonialnega hordata, Botryllus schlosseri. eLife 2013, 2, e00569. [CrossRef]

16. Corey, DM; Rosenthal, B.; Kowarsky, M.; Sinha, R.; Ishizuka, KJ; Palmeri, KJ; Potres, SR; Voskobojnik, A.; Weissman, IL Razvojni programi celične smrti dovoljujejo citotoksične celice za odpravo histokompatibilnih partnerjev. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2016, 113, 6520–6525. [CrossRef]

17. Rosental, B.; Kowarsky, M.; Seita, J.; Corey, DM; Ishizuka, KJ; Palmeri, KJ; Chen, S.-Y.; Sinha, R.; Okamoto, J.; Mantalas, G.; et al. Kompleksen hematopoetski sistem, podoben sesalcem, najdemo v kolonialnem hordatu. Nature 2018, 564, 425. [CrossRef]

18. Ben-Shlomo, R.; Reem, E.; Douek, J.; Rinkevich, B. Populacijska genetika invazivne ascidije Botryllus schlosseri z južnoameriških obal. Mar. Ecol. Prog. Ser. 2010, 412, 85. [CrossRef]

19. Stoner, DS; Ben-Shlomo, R.; Rinkevič, B.; Weissman, IL Genetska variabilnost invazije Botryllus schlosseri na vzhodno in zahodno obalo ZDA. Mar. Ecol. Prog. Ser. 2002, 243, 93. [CrossRef]

20. Darwin, C.; Kebler, L. O izvoru vrst z uporabo naravne selekcije, ali Ohranjanje favoriziranih ras v boju za življenje; J. Murray: London, Združeno kraljestvo, 1859; 1. zvezek, str. 502.

21. Delsuc, F.; Brinkmann, H.; Courrout, D.; Philippe, H. Najbližji živeči sorodniki vretenčarjev so plaščarji in ne glavohordati. Nature 2006, 439, 965. [CrossRef] [PubMed]

22. Manni, L.; Lane, NJ; Joly, JS; Gasparini, F.; Tiozzo, S.; Caicci, F.; Zaniolo, G.; Burighel, P. Nevrogene in nenevrogene plakode v ascidijah. J. Exp. Zoologija. Del B Mol. Dev. Evol. 2004, 302, 483. [CrossRef]

23. Kowarsky, M.; Anselmi, C.; Hotta, K.; Burighel, P.; Zaniolo, G.; Caicci, F.; Rosental, B.; Neff, NF; Ishizuka, KJ; Palmeri, KJ; et al. Spolni in nespolni razvoj: dva različna programa, ki proizvajata isti plašč. Cell Rep. 2021, 34, 108681. [CrossRef]

24. Manni, L.; Gasparini, F.; Hotta, K.; Ishizuka, KJ; Ricci, L.; Tiozzo, S.; Voskobojnik, A.; Dauga, D. Ontologija za nespolni razvoj in anatomijo kolonialnega hordata Botryllus schlosseri. PLoS ONE 2014, 9, e96434. [CrossRef]

25. Manni, L.; Burighel, P. Skupne in različne poti v alternativnih razvojnih procesih ascidijev. Bioeseji 2006, 28, 902–912. [CrossRef]

26. Milkman, R. Genetske in razvojne študije o Botryllus schlosseri. Biol. Bik. 1967, 132, 229–243. [CrossRef] [PubMed]

27. Cima, F.; Basso, G.; Ballarin, L. Apoptoza in prepoznavanje, posredovano s fosfatidilserinom, med fazo prevzema kolonialnega življenjskega cikla v ascidian Botryllus schlosseri. Cell Tissue Res. 2003, 312, 369–376. [CrossRef] [PubMed]

28. Lauzon, RJ; Ishizuka, KJ; Weissman, IL Ciklični, razvojno regulirani pojav smrti pri kolonialnem urohordatu. Dev. Dyn. 1992, 194, 71–83. [CrossRef] [PubMed]

29. Lauzon, RJ; Patton, CW; Weissman, IL Morfološka in imunohistokemijska študija programirane celične smrti pri Botryllus schlosseri (Tunicata, Ascidiacea). Cell Tissue Res. 1993, 272, 115–127. [CrossRef]

30. Laird, DJ; De Tomaso, AW; Cooper, MD; Weissman, IL 50 milijonov let evolucije strunarjev: Iskanje izvora prilagodljive imunosti. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2000, 97, 6924–6926. [CrossRef] [PubMed]

31. Laird, DJ; De Tomaso, AW; Weissman, IL Matične celice so enote naravne selekcije v kolonialnem ascidiju. Celica 2005, 123, 1351–1360. [CrossRef]

32. Rinkevič, Y.; Voskobojnik, A.; Rosner, A.; Rabinowitz, C.; Paz, G.; Oren, M.; Douek, J.; Alfassi, G.; Moiseeva, E.; Ishizuka, KJ; et al. Ponavljajoče se dolgoročno kroženje domnevnih izvornih celic med nišami v bazalnem hordatu. Dev. Celica 2013, 24, 76–88. [CrossRef]

33. Stoner, DS; Rinkevič, B.; Weissman, IL Tekmovanja dednih zarodkov in somatskih celic v himernem kolonialnem protohordatu. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 1999, 96, 9148–9153. [CrossRef] [PubMed]

34. Stoner, DS; Weissman, IL. Parazitizem somatskih in zarodnih celic pri kolonialnem ascidiji: Možna vloga zelo polimorfnega sistema prepoznavanja alorekov. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 1996, 93, 15254–15259. [CrossRef] [PubMed]

36. Voskoboynik, A.; Soen, Y.; Rinkevič, Y.; Rosner, A.; Ueno, H.; Rešef, R.; Ishizuka, KJ; Palmeri, KJ; Moiseeva, E.; Rinkevič, B.; et al. Identifikacija endostila kot niše matičnih celic v kolonialnem hordatu. Celične matične celice 2008, 3, 456–464. [CrossRef] [PubMed]

36. Sabbadin, A. Le basi genetiche della capacita di fusione fra colonie in Botryllus schlosseri (Ascidiacea). Rend Accad Naz Lincei Ser VIII 1962, 32, 1031–1035.

37. Scofield, V. Allorecognition in mikrobna okužba: vloge v razvoju spola in imunosti. V izvoru in razvoju spola; Halvorson, H., Monroy, A., ur.; Alan R. Liss: New York, NY, ZDA, 1985; 7. zvezek, str. 213.

39. Voskoboynik, A.; Newman, AM; Corey, DM; Sahoo, D.; Puškarjev, D.; Neff, NF; Passarelli, B.; Koh, W.; Ishizuka, KJ; Palmeri, KJ; et al. Identifikacija gena za histokompatibilnost kolonialnih hordatov. Science 2013, 341, 384. [CrossRef]

39. Rinkevič, B.; Tartakover, S.; Gershon, H. Prispevek celic morule k alogenskim odzivom v kolonialnem urohordatu Botryllus schlosseri. Mar. Biol. 1998, 131, 227–236. [CrossRef]

40. Ueno, H.; Weissman, IL Klonska analiza razvoja miši razkriva poliklonski izvor krvnih otokov rumenjakovega mešička. Dev. Cell 2006, 11, 519. [CrossRef]

41. Ueno, H.; Turnbull, BB; Weissman, IL Dvostopenjski oligoklonski razvoj moških zarodnih celic. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2009, 106, 175–180. [CrossRef]

42. Weissman, IL Matične celice so enote naravne selekcije za tvorbo tkiva, razvoj zarodne linije in razvoj raka. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2015, 112, 8922–8928. [CrossRef]

43. Beerman, I.; Bhattacharya, D.; Zandi, S.; Sigvardsson, M.; Weissman, IL; Bryder, D.; Rossi, DJ. Funkcionalno različne hematopoetske matične celice modulirajo potencial hematopoetskega rodu med staranjem z mehanizmom klonske ekspanzije. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2010, 107, 5465–5470. [CrossRef]

44. Pang, WW; Cena, EA; Sahoo, D.; Beerman, I.; Maloney, WJ; Rossi, DJ; Schrier, SL; Weissman, IL Hematopoetske matične celice človeškega kostnega mozga se s starostjo povečujejo in so mieloično pristranske. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2011, 108, 20012–20017. [CrossRef]

45. Rossi, DJ; Bryder, D.; Seita, J.; Nussenzweig, A.; Hoeijmakers, J.; Weissman, IL Pomanjkljivosti pri popravljanju poškodb DNK omejujejo delovanje hematopoetskih matičnih celic s starostjo. Nat. Cell Biol. 2007, 447, 725–729. [CrossRef]

47. Rossi, DJ; Bryder, D.; Zahn, JM; Ahlenius, H.; Sonu, R.; Stave, AJ; Weissman, IL Celične intrinzične spremembe so osnova staranja hematopoetskih matičnih celic. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2005, 102, 9194–9199. [CrossRef]

48. Rossi, DJ; Jamieson, CH; Weissman, IL Izvorne celice in poti do staranja in raka. Celica 2008, 132, 681–696. [CrossRef]

48. Corces, M.; Hong, W.-J.; Weissman, IL; Medeiros, BC; Majeti, R. Prelevkemične mutacije pri človeški akutni mieloični levkemiji vplivajo na epigenetske regulatorje in vztrajajo v remisiji. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2014, 111, 2548–2553. [CrossRef] [PubMed]

49. Jaiswal, S.; Jamieson, CH; Pang, WW; Park, CY; Chao, poslanec; Majeti, R.; Traver, D.; Van Rooijen, N.; Weissman, IL CD47 se poveča na krvotvorne matične celice v obtoku in celice levkemije, da se prepreči fagocitoza. Celica 2009, 138, 271–285. [CrossRef] [PubMed]

50. Jamieson, CH; Ailles, LE; Dylla, SJ; Muijtjens, M.; Jones, C.; Zehnder, JL; Gotlib, J.; Li, K.; Manz, MG; Keating, A.; et al. Predniki granulocitov-makrofagov kot kandidatne levkemične matične celice pri CML v blastni krizi. N. angl. J. Med. 2004, 351, 657–667. [CrossRef] [PubMed]

51. Jan, M.; Snyder, TM; Corces-Zimmerman, MR; Vyas, P.; Weissman, IL; Potres, SR; Majeti, R. Klonalna evolucija predlevkemičnih hematopoetskih izvornih celic pred človeško akutno mieloično levkemijo. Sci. prevod med. 2012, 4, 149ra118. [CrossRef]

52. Mijamoto, T.; Weissman, IL; Akashi, K. Nelevkemične izvorne celice, ki izražajo AML1/ETO, pri akutni mielogeni levkemiji z 8;21 kromosomskimi translokacijami. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2000, 97, 7521–7526. [CrossRef]

53. Sykes, SM; Kokkaliaris, KD; Milsom, MD; Levine, RL; Majeti, R. Klonalna evolucija prelevkemičnih hematopoetskih matičnih celic pri akutni mieloični levkemiji. Exp. Hematol. 2015, 43, 989–992. [CrossRef] [PubMed]

54. Kojima, Y.; Volkmer, J.-P.; McKenna, K.; Civelek, M.; Lusis, AJ; Miller, CL; Direnzo, D.; Nanda, V.; Ja, J.; Connolly, AJ; et al. Protitelesa, ki blokirajo CD47-, obnovijo fagocitozo in preprečijo aterosklerozo. Nature 2016, 536, 86. [CrossRef]

55. Wang, B.; Zhang, F.; Wang, S.; Yang, R.; Chen, C.; Zhao, W. Slikanje endogenega HClO pri aterosklerozi z uporabo nove fluorescenčne sonde s hitrim odzivom. Chem. Komun. 2020, 56, 2598. [CrossRef] [PubMed]

56. Scofield, VL; Schlumpberger, JM; West, LA; Weissman, IL Aloprepoznavanje protohordatov nadzoruje genski sistem, podoben MHC. Nature 1982, 295, 499. [CrossRef] [PubMed]

57. Burighel, P.; Schiavinato, A. Degenerativna regresija prebavnega trakta v kolonialnem ascidiju Botryllus schlosseri (Pallas). Cell Tissue Res. 1984, 235, 309–318. [CrossRef] [PubMed]

59. Ballarin, L.; Burighel, P.; Cima, F. Zgodba o smrti in življenju: naravna apoptoza v kolonialnem ascidijskem Botryllus schlosseri (Urochordata, Ascidiacea). Curr. Pharm. des. 2008, 14, 138. [CrossRef] [PubMed]

59. Ballarin, L.; Schiavon, F.; Manni, L. Naravna apoptoza med blastogenetskim ciklom kolonialnega ascidijanca Botryllus schlosseri: morfološka analiza. Zoöl. Sci. 2010, 27, 96. [CrossRef]

61. Voskoboynik, A.; Rinkevič, B.; Weiss, A.; Moiseeva, E.; Reznick, AZ Vključenost makrofagov za uspešno degeneracijo apoptotičnih organov v kolonialnem urohordatu Botryllus schlosseri. J. Exp. Biol. 2004, 207, 2409. [CrossRef]

61. Lauzon, RJ; Ishizuka, KJ; Weissman, IL Ciklična generacija in degeneracija organov v kolonialnem urohordatu vključuje preslušavanje med starim in novim: model za razvoj in regeneracijo. Dev. Biol. 2002, 249, 333–348. [CrossRef]

62. Rinkevič, B.; Weissman, IL Obsevanje celotne kolonije Botryllus schlosseri (Tunicata): Ali resorpcija senescenčnega zooida in imunološka resorpcija vključujeta podobne dogodke prepoznavanja? J. Exp. Zoöl. 1990, 253, 189. [CrossRef]

63. Rosental, B.; Raveh, T.; Voskobojnik, A.; Weissman, IL Evolucijska perspektiva hematopoetskega sistema skozi kolonialni hordat: Alogenska imunost in hematopoeza. Curr. Opin. Immunol. 2020, 62, 91. [CrossRef]

64. Franchi, N.; Ballarin, L. Imuniteta pri protohordatih: perspektiva plaščarjev. Spredaj. Immunol. 2017, 8, 674. [CrossRef] [PubMed]

65. Lauzon, RJ; Brown, C.; Kerr, L.; Tiozzo, S. Dinamika fagocitov v zelo regenerativnem urohordatu: Vpogled v razvoj in obrambo gostitelja. Dev. Biol. 2013, 374, 357–373. [CrossRef] [PubMed]

66. Peronato, A.; Franchi, N.; Loriano, B. BsTLR1: Nov član družine prepoznavnih proteinov TLR iz kolonialnega ascidiana Botryllus schlosseri. Ribe Školjke. Immunol. 2020, 106, 967. [CrossRef] [PubMed]

68. Khalturin, K.; Becker, M.; Rinkevič, B.; Bosch, TC Urochordates in izvor naravnih celic ubijalk: Identifikacija receptorja, povezanega s CD94/NKR-P1-, v krvnih celicah Botryllus. Proc. Natl. Akad. Sci. ZDA 2003, 100, 622–627. [CrossRef] [PubMed]

68. Franchi, N.; Schiavon, F.; Carletto, M.; Gasparini, F.; Bertoloni, G.; Tosatto, SC; Ballarin, L. Imunske vloge lektina, ki veže ramnozo, v kolonialnem ascidiju Botryllus schlosseri. Imunobiologija 2011, 216, 725–736. [CrossRef]

69. Franchi, N.; Schiavon, F.; Betti, M.; Canesi, L.; Ballarin, L. Vpogled v poti signalne transdukcije, ki sodelujejo pri fagocitozi v kolonialnem ascidiji Botryllus schlosseri. J. Invertebr. Pathol. 2013, 112, 260–266. [CrossRef]

70. Ballarin, L. Imunobiologija sestavljenih ascidij, s posebnim poudarkom na Botryllus schlosseri: Stanje tehnike. Invertebr. Preživeti. J. 2008, 5, 54.

71. Cheung, RCF; Wong, JH; Pan, W.; Chan, YS; Jin, CM; Dan, XL; Ng, TB Morski lektini in njihova uporaba v medicini. Appl. Microbiol. Biotehnologija. 2015, 99, 3755. [CrossRef] [PubMed]

72. Franchi, N.; Ballarin, L. Predhodna karakterizacija komplementa v kolonialnem tunikatu: C3, Bf in inhibicija opsonične aktivnosti C3 s kompstatinom. Dev. Comp. Immunol. 2014, 46, 430. [CrossRef]

73. Peronato, A.; Drago, L.; Rothbacher, U.; Macor, P.; Ballarin, L.; Franchi, N. Sistem komplementa in fagocitoza v kolonialnem protohordatu. Dev. Comp. Immunol. 2020, 103, 103530. [CrossRef]

74. Nicola, F.; Soriano, B. Celice Morula kot ključni hemociti lektinske poti aktivacije komplementa v kolonialnem plaščarju Botryllus schlosseri. Ribe Školjke. Immunol. 2017, 63, 157. [CrossRef]

75. Ballarin, L.; Menin, A.; Franchi, N.; Bertoloni, G.; Cima, F. Morula celice in nesamoprepoznavanje v spojini ascidian Botryllus schlosseri. Invertebr. Preživeti. J. 2005, 2, 1.

76. Palanisamy, SK; Rajendran, NM; Marino, A. Raznolikost naravnih proizvodov morskih ascidij (Tunicates; Ascidiacea) in uspešna zdravila v kliničnem razvoju. Nat. Prod. Bioprosp. 2017, 7, 1–111. [CrossRef]

77. Ramesh, C.; Tulasi, BR; Raju, M.; Thakur, N.; Dufosse, L. Morski naravni proizvodi iz plaščarjev in z njimi povezanih mikrobov. Mar. Drugs 2021, 19, 308. [CrossRef]

78. Copelan, EA Presaditev hematopoetskih matičnih celic. N. angl. J. Med. 2006, 354, 1813. [CrossRef] [PubMed]

80. Doulatov, S.; Notta, F.; Laurenti, E.; Dick, JE Hematopoeza: Človeška perspektiva. Cell Stem Cell 2012, 10, 120. [CrossRef] [PubMed]

80. Osava, M.; Hanada, K.-I.; Hamada, H.; Nakauchi, H. Dolgotrajna limfohematopoetska rekonstitucija z eno samo CD34- nizko/negativno hematopoetsko matično celico. Znanost 1996, 273, 242–245. [CrossRef] [PubMed]

82. Spangrude, GJ; Heimfeld, S.; Weissman, IL Čiščenje in karakterizacija mišjih hematopoetskih matičnih celic. Znanost 1988, 241, 58–62. [CrossRef]

82. Weaver, CT; Hatton, RD; Mangan, PR; Harrington, LE IL-17 Družina citokinov in vse večja raznolikost efektorskih celic T. Annu. Rev. Immunol. 2007, 25, 821. [CrossRef] [PubMed]

83. Miossec, P.; Kolls, JK Ciljanje celic IL-17 in TH17 pri kroničnem vnetju. Nat. Rev. Drug Discov. 2012, 11, 763. [CrossRef] [PubMed]

84. Zhu, S.; Qian, Y. IL-17/IL-17 receptorski sistem pri avtoimunski bolezni: Mehanizmi in terapevtski potencial. Clin. Sci. 2012, 122, 487–511. [CrossRef]

85. van der Waart, AB; van der Velden, WJ; Blijlevens, NM; Dolstra, H. Ciljanje na pot IL17 za preprečevanje bolezni presadka proti gostitelju. Biol. Transpl. krvnega mozga 2014, 20, 752. [CrossRef]

86. Carnevale-Schianca, F.; Leisenring, W.; Martin, PJ; Furlong, T.; Schoch, G.; Anasetti, C.; Appelbaum, FR; Carpenter, PA; Deeg, HJ; Kiem, H.-P.; et al. Longitudinalna ocena obolevnosti in akutne reakcije presadka proti gostitelju po alogenski presaditvi hematopoetskih celic: retrospektivna analiza multicentrične študije faze III. Biol. Transpl. krvnega mozga 2009, 15, 749. [CrossRef]

87. Holt, CD Pregled imunosupresivne terapije pri presaditvi trdnih organov. Anesteziol. Clin. 2017, 35, 365. [CrossRef]

88. Ustun, C.; Jillella, A.; Šah, R.; Sterling, K.; DeRemer, D.; Savage, N.; Awan, F.; Gossage, JR; Dillard, T.; Martin, PJ Drugi alo-SCT od drugega darovalca lahko izboljša hudo na steroide odporno črevesno GVHD. Transpl. kostnega mozga 2010, 45, 1658. [CrossRef] [PubMed]

89. Lindahl, KF; Wilson, DB Histokompatibilnost antigen-aktiviranih citotoksičnih limfocitov T. II. Ocene pogostosti in specifičnosti prekurzorjev. J. Exp. med. 1977, 145, 508. [CrossRef] [PubMed]

90. Macdonald, WA; Chen, Z.; Gras, S.; Archbold, J.; Tynan, FE; Clements, CS; Bharadvaj, M.; Kjer-Nielsen, L.; Saunders, PM; Wilce, MC; et al. Aloprepoznavanje celic T preko molekularne mimikrije. Imuniteta 2009, 31, 897. [CrossRef]

91. Taketa, DA; De Tomaso, AW Botryllus schlosseri allorecognition: Tackling the enigma. Dev. Comp. Immunol. 2015, 48, 254. [CrossRef]

92. De Tomaso, AW; Nyholm, SV; Palmeri, KJ; Ishizuka, KJ; Ludington, WB; Mitchel, K.; Weissman, IL Izolacija in karakterizacija histokompatibilnega lokusa protohordata. Nature 2005, 438, 454. [CrossRef] [PubMed]

Oron Goldstein 1,†, Edna Ayerim Mandujano-Tinoco 1,2,†, Tom Levy 3, Shani Talice 1, Tal Raveh 3, Orly Gershoni-Yahalom 1, Ayelet Voskoboynik 3 in Benyamin Rosental 1,*.

1 Center za raziskave regenerativne medicine in matičnih celic, Oddelek za mikrobiologijo, imunologijo in genetiko Shraga Segal, Fakulteta za zdravstvene vede, Univerza Ben Gurion v Negevu, Beer Sheva 8410501, Izrael; Orongold@post.bgu.ac.il (OG); eamanti24@gmail.com (EAM-T.); shanital@post.bgu.ac.il (ST); orlyge@post.bgu.ac.il (OG-Y.)

2 Laboratorij za vezivno tkivo, Centro Nacional de Investigación y Atención de Quemados, Instituto Nacional de Rehabilitación "Luis Guillermo Ibarra Ibarra", Calzada Mexico-Xochimilco No. 289, Col. Arenal de Guadalupe, Tlalpan, Mexico City 14389, Mehika

3 Inštitut za biologijo izvornih celic in regenerativno medicino, Medicinska fakulteta Univerze Stanford, Pomorska postaja Hopkins, Univerza Stanford, Biohub Chan Zuckerberg, Pacific Grove, CA 93950, ZDA; levyt@stanford.edu (TL); tal6933@stanford.edu (TR); ayeletv@stanford.edu (AV)

* Dopisovanje: rosentab@post.bgu.ac.il

† OG in EAM-T. enako prispeval k temu delu.

For more information:1950477648nn@gmail.com