Spremembe ravni feniletanoidnih glikozidov, antioksidativne aktivnosti in drugih kakovostnih lastnosti v rezinah Cistanche Deserticola z obdelavo s paro

Cistanche deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), splošno znan kot "puščavski ginseng", se na Kitajskem in Japonskem že dolgo uporablja kot tonik. Mesnata stebla se narežejo na rezine za zdravljenje različnih bolezni, vključno z impotenco, žensko neplodnostjo, hladnim občutkom v ledjih in kolenih ter geriatričnim zaprtjem. V zadnjih letih je več študij razkrilo njegovo učinkovitost na eksperimentalnih modelih, ki so povezani z nevrološkimi motnjami, zlasti Alzheimerjevo in Parkinsonovo boleznijo.Trg zdrave hrane postaja vse bolj zainteresiran za to koristno naravno prehransko dopolnilo. Vino in čaj iz sočnih stebel sta priljubljena zdrava živila, ki blažita utrujenost ter krepita učenje in spomin.C. deserticolaje bogat vir feniletanoidnih glikozidov, polisaharidov in topnih sladkorjev, ki imajo predvsem antioksidativne,nevroprotektivno,hepatoprotektivno,krepitev imunosti,odvajalo,in proti staranju učinkov, med katerimi velja, da je antioksidativna aktivnost osnova ostalih farmakoloških učinkov. Ehinakozid in akteozid sta reprezentativna označevalca za nadzor kakovosti Cistanches Herba v Kitajski farmakopeji (izdaja 2015) zaradi njune prevladujoče številčnosti, rodovne specifičnosti in opazne bioaktivnosti. Določanje razredčenih ekstraktov, topnih v etanolu, je prav tako vključeno v kontrolo kakovosti Cistanches Herba. Poročali so tudi, da so cistanozid A, izoakteozid in 2'-acetilakteozid v izobiljuC. deserticola. 

NARAVNI IZVLEČEK CISTANCHE PREHRANSKO DOPOLNILO PROTI UTRUJENOSTI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Povečanjepovpraševanje po C. deserticola je močno spodbudilo njeno gojenje. C. deserticola spada med trajne parazitske rastline, ki večinoma rastejo v sušnih ali polsušnih območjih severozahodne Kitajske. Takoj po obiranju je treba ta surova stebla z visoko vsebnostjo sladkorja posušiti, da se prepreči izguba vsebnosti hranil in kvarjenje. Sveža stebla običajno vsebujejo 75–85 % vode, za njihovo ohranitev pa je treba nivo vode znižati pod 10 %. V večini območij, kjer se pridelujejo cistanke, se cela sveža stebla postavijo na odprta polja za približno 2 meseca za predhodni postopek sušenja. Posušen material nato prepeljejo v tovarne, ga namočijo v vodi, narežejo na rezine in ponovno posušijo. Zamuda pri predelavi rezin je lahko posledica slabo izobraženih ali slabo opremljenih kmetov. Glavni problem pa je pomanjkanje znanja in tehnologije, ki bi omogočala učinkovit proizvodni proces.

Visoko toplotna obdelava se pogosto uporablja za zelenjavo in sadje ter lahko zavira rast mikrobov in podaljša rok uporabnosti. Vendar pa lahko povzroči tudi spremembe videza in sestave hranil. Dokazano je, da se nekatere bioaktivne sestavine in farmakološke aktivnosti, kot je antioksidativna aktivnost, povečajo pri zdravilnih zeliščih po parjenju. Tako lahko kuhanje C. deserticola na pari izboljša številne zdravstvene koristi. Poročali so tudi, da kuhanje na pari ali blanširanje sveže narezane C. deserticola poveča količinoehinakozid in akteozid.19,20) Vendar pa ni bila izvedena nobena podrobna raziskava za primerjavo sprememb bioaktivnih spojin in antioksidativne aktivnosti sveže narezane C. deserticola med postopkom kuhanja na pari. Cilj te študije je bil torej preučiti učinek kuhanja na pari (1, 3, 5, 7 min) na količino feniletanoidnih glikozidov, polisaharidov, topnih sladkorjev, razredčenih v etanolu topnih ekstraktov, izgubo teže in antioksidativne lastnosti. v rezinah C. deserticola v primerjavi s tremi drugimi skupinami (sveže, neposredno sušene v pečici, blanširane).

Eksperimentalno

Kemikalije

Kemikalije analitične kakovosti: metanol, etanol, D-glukoza, žveplova kislina, kalijev hidrogenfosfat in kalijev dihidrogenfosfat monohidrat so bili pridobljeni pri Beijing Chemical Works (Peking, Kitajska). Mravljinčna kislina in fenol sta bila kupljena pri Sinopharm Chemical Reagent Co. (Šanghaj, Kitajska). Metanol stopnje HPLC je bil kupljen pri Fisher Scientific (Toronto, Kanada). Deionizirano vodo smo pridobili s sistemom Milli-Q (Millipore Corp., Bedford, MA, ZDA). 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) je zagotovil Alfa Aesar (Ward Hill, MA, ZDA) in 2,2'-azobis(2-amino-propan) dihidroklorid (AAPH ) Adamas-beta (Šanghaj, Kitajska). 6-Metoksi-2,5,7,8- tetrametilkroman-2-karboksilna kislina (Trolox), 2,6-di-tertbutil-p-krezol (BHT) , in fluorescein (natrijeva sol) (FL) sta bila pridobljena pri TCI (Tokio, Japonska), komplet za analizo celotne antioksidativne kapacitete (T-AOC) pa pri Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Kitajska). Standarda za akteozid (111530-200706) in ehinakozid (111670-200503) sta bila kupljena pri Nacionalnem inštitutu za nadzor hrane in zdravil (Peking, Kitajska). Standardi za2'-acetilakteozid, cistanozid A in izoakteozid je kot darilo predstavil dr. Zhiguo Ma. Ugotovljeno je bilo, da je čistost vsake referenčne spojine nad 98 % z normalizacijo površine vrha, ki jo je zaznal HPLC-diodni niz detektorja (DAD).

Obdelava materiala in določanje izgube teže

Vzorci so bili zbrani spomladi 2{{10}}14 v Ningxia Plantation of Cistanches Herba (106.08 stopinja S, 38,24 stopinja V, 1124,2 m ) na Kitajskem in ga je identificiral eden od nas (prof. Jun Chen). Vzorec vavčerja je bil deponiran na Inštitutu za razvoj zdravilnih rastlin Kitajske akademije medicinskih znanosti Peking Union Medical College. Približno 3 kg stebel C. deserticola smo naključno zbrali in splaknili s čisto vodo. S keramičnim nožem smo odstranili dele socvetja, stebla pa narezali na 3 mm debele rezine. Vsaka 100 rezina je bila izmerjena v teži (W0) kot ponovitev. Ocenjenih je bilo sedem poskusnih zdravljenj s tremi ponovitvami na zdravljenje. Za kuhanje v pari so štiri serije rezin dali v vodno paro pri 93 stopinjah za 1, 3, 5 ali 7 minut. Za blanširanje smo eno obdelavo za 5 minut dali v vodo s temperaturo 96 stopinj. Sveži in neposredno v pečici posušeni rezini sta bili drugi dve obdelavi, poročani v tem poskusu. Obdelane rezine smo stehtali (W1) in posušili pri 60 stopinjah v pečici. Posušene rezine smo nato ponovno stehtali (W2), zmleli in zdrobili v prah (65 mesh). Praške vzorcev smo do dneva analize hranili v vakuumskih vrečkah pri –20 stopinjah. Izguba teže je bila izračunana na naslednji način: izguba teže po visoki toplotni obdelavi (%)=[(W0−W1)/ W0]×100, izguba teže po sušenju v pečici (%)=[(W0 −W2)/W0] × 100, kjer je W0 začetna teža, W1 in W2 pa sta masi, izmerjeni po visoki toplotni obdelavi oziroma sušenju v pečici.

Feniletanoidni glikozidi in antioksidativne lastnosti

Ekstrakcija vzorcev

{{0}}.5-g vzorca v prahu je bil ekstrahiran s 25 ml 60-odstotne vodne raztopine metanola z ultrazvokom KQ-250DE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, Kitajska) pri 40 kHz, 200 W in 40 stopinj za 30 minut. Po ekstrakciji smo obdelane vzorce centrifugirali 10 minut pri 4600 × g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Kitajska). Supernatant je bil filtriran skozi filter z velikostjo por 0.45-µm za nadaljnje analize.

Določanje feniletanoidnih glikozidov

Določanje ehinakozida, cistanozida A,akteozid, izoakteozid in 2'-acetilakteozidiz vzorcev C. deserticola je bila izvedena, kot so opisali Ma et al.21) z nekaterimi modifikacijami. Analiza je bila izvedena z uporabo instrumenta HPLC 2695–2996 (Waters Corp., Milford, MA, ZDA) z ultravijolično absorpcijo, spremljano pri 330 nm. Ločitev je bila izvedena na koloni Merck Purospher® Star RP-C18 (250 mm × 4,6 mm, 5 µm), ki deluje pri 30 stopinjah. Mobilna faza pri pretoku 1 ml/min je bila sestavljena iz topila A (metanol) in topila B (0.1 % vodna raztopina mravljinčne kisline, v/v). Gradientna elucija je bila izvedena na naslednji način: 28 % A ({{30}}–10 min), 28–38 % A (10–30 min), 38 % A (30– 45 min), volumen injekcije pa je bil 10 µL. Mešano raztopino, ki je vsebovala pet referenčnih standardov, smo pripravili z raztapljanjem referenčnih standardov v 60 % metanolu do končne koncentracije 0,20 mg/mL za ehinakozid, 0,21 mg/mL za akteozid, 0,20 mg/mL za 2'-acetilakteozid, 0,05 mg/ml. mL za cistanozid A in 0,05 mg/mL za izoakteozid. Raztopino smo nato razredčili na sedem različnih koncentracij, da smo vzpostavili umeritvene krivulje. Koncentracijo feniletanoidnih glikozidov vzorcev smo izrazili v g/kg sveže teže (FW).

NARAVNI IZVLEČEK CISTANCHE IZBOLJŠA SPOMIN PREHRANSKO DOPOLNILO PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Določanje absorpcijske zmogljivosti kisikovih radikalov (ORAC)

Test ORAC je bil izveden, kot so opisali Huang et al.22) z nekaterimi modifikacijami. Kot pozitivno kontrolo smo uporabili sintetični antioksidant BHT. Na kratko, 25 µL razredčenih ekstraktov vzorcev in 160 µL FL smo zmešali v 96-mikroplošči z vdolbinicami. Zmes smo inkubirali pri 37 stopinjah 15 minut, preden smo dodali 20 µL AAPH. Fluorescenco smo spremljali z uporabo 485 nm (vzbujanje) in 520 nm (emisija) v 3-min intervalih 72 minut z uporabo Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, ZDA). Trolox (2,5–50,0 µmol/L) je bil uporabljen kot referenčni standard, rezultati pa so bili izraženi kot mikromoli Troloxa na maso sveže rezine, µmol TE/g FW.

Določanje 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil aktivnosti lovljenja prostih radikalov (DPPH)

Test DPPH je bil izveden, kot so opisali Goupy et al.23) z nekaterimi modifikacijami. Kot pozitivno kontrolo smo uporabili sintetični antioksidant BHT. Na kratko, 1 ml razredčenega ekstrakta vzorca smo zmešali z 1 ml metanolne raztopine 0.2 mmol/L DPPH. Raztopine smo hranili v temi pri 25 stopinjah 9 0 minut, nato smo izmerili absorbanco pri 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/L) je bil uporabljen kot referenčni standard, rezultati pa so bili izraženi kot mikromoli Troloxa na maso sveže rezine, µmol TE/g FW.

Določanje antioksidativne lastnosti železa (FRAP)

Test FRAP je bil izveden z uporabo kompleta za testiranje T-AOC v skladu z navodili proizvajalca.

Topni sladkorji in polisaharidi

Priprava vzorcev topnih sladkorjev

0.5-g vzorca v prahu smo ekstrahirali s 25 ml 80-odstotne vodne raztopine etanola z ultrazvokom KQ-250DE pri 40 kHz, 150 W in 80 stopinjah 30 minut. Prvo ekstraktivno raztopino smo filtrirali in prenesli v 50- ml merilno bučko. Sedimente smo ponovno ekstrahirali in filtrat združili s prvo ekstrakcijsko raztopino v 50-mL merilni bučki in do oznake napolnili z 80 % vodno raztopino etanola.

Nato smo 1 mL te raztopine odpipetirali v 10-mL stekleno cevko, da smo uparili etanol v vreli vodni kopeli. Dodali smo destilirano vodo (5 mL), da smo raztopili ostanek, nato smo ga prenesli v 100- mL merilno bučko in do oznake napolnili z destilirano vodo. Na koncu smo 2 mL te razredčene raztopine uporabili za določanje topnih sladkorjev.

Priprava vzorcev polisaharidov

Sedimente iz ekstrakcije topnih sladkorjev smo posušili na zraku in ekstrahirali s 25 ml destilirane vode z ultrazvokom KQ- 250DE pri 40 kHz, 150 W in 80 stopinjah 30 minut. Prvo ekstraktivno raztopino smo filtrirali in prenesli v 50- ml merilno bučko. Sedimente smo ponovno ekstrahirali in filtrat združili s prvo ekstrakcijsko raztopino v 50-mL merilni bučki in do oznake napolnili z destilirano vodo. Nato smo 5-mL raztopino tega odpipetirali v 50-mL merilno bučko in do oznake napolnili z destilirano vodo. Na koncu smo 2 mL te razredčene raztopine uporabili za določanje polisaharidov.

Določanje topnih sladkorjev in polisaharidov

Določanje topnih sladkorjev in polisaharidov je bilo izvedeno z metodo fenol-žveplova kislina, kot so opisali Wang et al.24) En mililiter 6% raztopine fenola smo dodali v 2 mL raztopine vzorca in dobro premešali. Nato smo hitro dodali 5 mL koncentrirane žveplove kisline in stresali 5 minut. Zmes smo za 15 minut prenesli v vrelo vodno kopel in hitro ohladili na sobno temperaturo za ultravijolično detekcijo. Ultravijolično absorpcijo smo spremljali pri 490 nm v spektrofotometru UV2550 (Shimadzu Co., Kyoto, Japonska). Kot slepo smo uporabili destilirano vodo. Referenčno standardno brezvodno D-glukozo smo natančno stehtali in raztopili v destilirani vodi do končne koncentracije 0,10 mg/mL. Nato smo 1, 2, 3, 4, 5, 6 in 7 ml osnovne raztopine odpipetirali v sedem 10-mL merilnih bučk in do oznake napolnili z destilirano vodo. Nato je bilo sedem različnih koncentracij standardnih raztopin uporabljenih za vzpostavitev umeritvenih krivulj.

Razredčeni ekstrakti, topni v etanolu

Vzorci (4.0 g) so bili natančno stehtani, da se določijo njihovi razredčeni ekstrakti, topni v etanolu, v skladu z metodo, opisano v Kitajski farmakopeji (izdaja 2015).25) Vzorec v prahu je bil stehtan (W3) in ekstrahiran z 100 ml 50 % vodne raztopine etanola v 250- ml erlenmajerico z občasnim stresanjem 6 ur in pustite stati 18 ur. Ekstraktivno raztopino smo filtrirali in 20 ml filtrata uparili do suhega, sušili pri 105 stopinjah 3 ure in ohladili v eksikatorju (silikagel) 30 minut. Na koncu smo količino natančno stehtali (W4). Vsebnost razredčenega ekstrakta, topnega v etanolu, je bila izražena kot g/kg FW vzorca. Razredčeni v etanolu topni ekstrakti so bili izračunani na naslednji način: razredčeni v etanolu topni ekstrakti (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, kjer je W3 začetna teža , W4 je teža, izmerjena po ekstrakciji, in W5 je izguba teže po sušenju v pečici (%).

Statistična analiza

Za razjasnitev morebitnih razlik med zdravljenimi skupinami je bila uporabljena enosmerna ANOVA z uporabo SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, ZDA). Razlike so bile ocenjene z Duncanovim testom z mejo pomembnosti 0.05. Podatki so bili izraženi kot standardni odklon (SD) (n=3).

Rezultati in razprava

Izguba teže

Teža rezin C. deserticola neposredno določa njeno tržno vrednost na trgu zdravilnih zelišč. Kot je prikazano v tabeli 1, je bila izguba teže C. deserticola analizirana po visoki toplotni obdelavi in ​​sušenju v pečici. Nižje stopnje izgube teže so bile ugotovljene, če so bile rezine neposredno posušene v pečici, namesto kuhane na pari ali blanširane. Blanširani vzorci so imeli največjo stopnjo izgube teže. Vzorci, kuhani na pari, so imeli večjo stopnjo izgube teže z daljšim časom kuhanja v pari. Sedem minut kuhanja na pari, kar je najdaljši čas, ko sveže narezane rezine obdržijo obliko, se je pokazalo pomembno (p<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Feniletanoidni glikozidi

Raven ehinakozida, cistanozida A, akteozida, izoakteozida in 2′-acetilakteozida v rezinah C. deserticola, obdelanih z različnimi metodami, je prikazana na sliki 1. Vzorci, kuhani na pari 7 minut, so vsebovali 2,16 g/kg FW ehinakozida in {{6} }.29 g/kg FW cistanozida A, povečanje za -140 oziroma -6-krat v primerjavi s svežimi rezinami. Vsebnost feniletanoidnih glikozidov se je močno povečala, ko so bili sveži vzorci obdelani z visoko temperaturo in sušenjem, zlastiakteozid, izoakteozid in 2'-acetilakteozid,medtem ko jih v svežih vzorcih niso zaznali. Eden od možnih razlogov za to bi lahko bila razgradnja feniletanoidnih glikozidov s peroksidazo in -glukozidazo. Ti encimi bi bili inaktivirani v vzorcih, posušenih z visokimi temperaturami in zmanjšano vsebnostjo vode, kar bi vodilo v visoke ravni feniletanoidnih glikozidov, ki bi ostali v ekstraktih. Poleg tega so feniletanoidni glikozidi fenolne spojine, ki bi se sintetizirale v svežih rastlinah kot odgovor na stres zaradi visoke temperature in izgube vlage.

NARAVNA CISTANCHE TUBULOSA IZBOLJŠA DELOVANJE LEDVIC PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Poročali so, da sta kuhanje na pari in blanširanje sveže narezane C. deserticola povečala vsebnost ehinakozida in akteozida.19,20) Vendar pa je v tej študiji blanširanje znatno povečalo (p<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by feniletanoidni glikozidiv rezinah C. deserticola se lahko izboljša s kuhanjem na pari.

Poleg tega smo ugotovili, da je čas parjenja ključen pri določanju vsebnosti feniletanoidnih glikozidov. Ehinakozid, cistanozid A, akteozid in izoakteozid so pokazali podoben naraščajoči trend med postopkom kuhanja s paro, ki se je močno povečal (pri 1, 3 min) in dosegel najvišjo raven pri 7 min. Pri štirih zgoraj omenjenih feniletanoidnih glikozidih med postopkom parjenja od 3 do 7 minut niso opazili pomembnih sprememb. Nasprotno, 2'-acetilakteozid se je znatno povečal (str<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

Slika 1. Koncentracija (g/kg FW) ehinakozida (A), cistanozida A (B), akteozida (C), izoakteozida (D) in 2′-acetilakteozida (E) v rezinah Cistanche deserticola glede na različne metode predelave Različne črke (a–e) označujejo statistično pomembne razlike med zdravljenji (Duncanov test, p<0.05, n=3).

Antioksidativno delovanje

Antioksidativne lastnosti rezin, preizkušene z ORAC, DPPH in FRAP, so predstavljene na sliki 2. Kot je bilo pričakovano, so vrednosti ORAC pokazale velike razlike med vzorci, ki so segale od 13,34 µmol TE/g FW v svežih vzorcih do 108,62 µmol TE/g FW pri 7 minutah kuhanja s paro. Med postopkom kuhanja s paro se je vrednost ORAC povečala 4-krat med 1 in 7 minutami kuhanja s paro. Podobne trende so opazili pri testih DPPH in FRAP, ki kažejo hitro povečanje med zdravljenjem s paro. Čeprav so imeli vzorci, obdelani s paro, na začetku nižje vrednosti antioksidantov (po 1 minuti), so med postopkom pokazali veliko boljše zadrževanje antioksidativne sposobnosti. V primeru blanširanja niso opazili bistvenih razlik v antioksidativnih lastnostih v primerjavi z neposrednim sušenjem v pečici.

Slika 2. Ravni (µmol TE/g FW) absorpcijske zmogljivosti kisikovih radikalov (ORAC) (A), 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil aktivnosti lovljenja prostih radikalov (DPPH) (B) in Antioksidantna lastnost železa (FRAP) (C) rezin Cistanche deserticola glede na različne metode predelave Različne črke (a–f) označujejo statistično značilne razlike med zdravljenji (Duncanov test, p<0.05, n=3).

O antioksidativni aktivnosti ORAC v surovih steblih ali rezinah C. deserticola še niso poročali. Vendar pa so bili etanolni ekstrakti surovih stebel C. deserticola izmerjeni v testih DPPH in FRAP,28) pokazali visoko antioksidativno aktivnost, nekoliko nižjo kot 2(3)-t-butil-4-hidroksianizol (BHA) in višji od BHT. Poleg tega so feniletanoidni glikozidi, izolirani iz C. deserticola, pokazali močne lovilne aktivnosti DPPH, nekoliko nižje kot askorbinska kislina29) in višje kot -tokoferol.2) C. deserticola je lahko potencialni vir naravnih antioksidantov, saj so antioksidativne lastnosti izoliranih čistih spojin iz C. deserticola so bile višje kot pri nekaterih sintetičnih antioksidantih. Kot je prikazano v tabeli 2, se je BHT znatno izkazal (str<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

Test DPPH uporablja mehanizme prenosa atoma vodika (HAT) in mehanizma prenosa enega elektrona (SET), medtem ko testa ORAC in FRAP sledita načelom reakcij HAT oziroma SET.30) V tej študiji so splošni trendi antioksidativne zmogljivosti ovrednoteni s tremi testi, so bili zelo podobni. Tako smo potrdili, da so imele posušene rezine C. deserticola (skuhane na pari, neposredno sušene v pečici in blanširane) znatno (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Topni sladkorji, polisaharidi in razredčeni v etanolu topni ekstrakti

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanširano. Blanširane rezine so imele zelo nizko vsebnost topnih sladkorjev, polisaharidov in razredčenega v etanolu topnega ekstrakta, correspose dobro počutijo s svojo veliko izgubo teže. Sveži vzorci so imeli znatno (str<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

Slika 3. Koncentracija (g/kg FW) topnih sladkorjev (A), polisaharidov (B) in razredčenih v etanolu topnih ekstraktov (C) rezin Cistanche deserticola glede na različne metode predelave Različne črke (a–e) označujejo statistično pomembne razlike med zdravljenji (Duncanov test, str<0.05, n=3).

Neposredno v pečici sušene rezine so imele najvišjo vsebnost razredčenih v etanolu topnih ekstraktov (89,26 g/kg TM), medtem ko so imele blanširane rezine najmanjšo (47,60 g/kg TM). Čeprav so vse predelane rezine C. deserticola izpolnjevale standard kitajske farmakopeje (izdaja 2015), da bi bile opredeljene kot Cistanches Herba, bi blanširane rezine prinesle manj koristi za zdravje kot neposredno v pečici posušeni vzorci zaradi velike izgube razredčenega etanola topnega izvlečki. Kar zadeva postopek kuhanja s paro, je bil trend topnih sladkorjev zelo podoben trendu, opaženemu za razredčene v etanolu topne ekstrakte, postopoma se je zmanjševal brez bistvenih sprememb, opaženih od 3 do 7 minut. Koncentracija polisaharidov je nihala z rahlim porastom skozi celotno obdobje parjenja. Predvsem je 7 minut kuhanja na pari pokazalo dobro ohranitev polisaharidov, vendar veliko izgubo topnih sladkorjev, medtem ko je 5 minut kuhanja na pari pokazalo obratno, v primerjavi z neposrednim sušenjem v pečici.

Zaključek

Prvič smo poročali o vplivu kuhanja na pari na bioaktivne spojine in antioksidativno aktivnost v sveže rezani C. deserticola in zagotovili pomembne informacije za razvoj učinkovitih postopkov za obdelavo stebel C. deserticola po žetvi. Sveže rezine so pokazale najslabšo učinkovitost pri ekstrakciji feniletanoidnih glikozidov in antioksidantnih spojin, kar je pokazalo, da so te snovi nagnjene k encimski razgradnji. V nasprotju s tem so imeli vzorci, kuhani na pari, najvišjo raven feniletanoidnih glikozidov in antioksidativnih aktivnosti. Čeprav je blanširanje rahlo povečalo vsebnost akteozida, izoakteozida in 2′-acetilakteozida v primerjavi z neposrednim sušenjem v pečici, so se vrednosti za maso, topne sladkorje, polisaharide in razredčene v etanolu topne ekstrakte dramatično zmanjšale. Pri postopku parjenja so se ravni feniletanoidnih glikozidov in polisaharidov sčasoma rahlo povečale. Kuhanje v pari 5 in 7 minut znatno (str<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sugarje, polisaharide in razredčene ekstrakte, topne v etanolu.

Cistanche TUBULOSA ANTI-OKSIDANT PROTI UTRUJENOSTI PHGS75% ECH 30% ACT 12%