Celomociti deževnika Oligochaeta Lumbricus Terrestris (Linnaeus, 1758) kot evolucijski ključ obrambe: Morfološka študija

Povzetek

Metazoji imajo več mehanizmov notranje obrambe za svoje preživetje. Notranji obrambni sistem se je razvijal skupaj z organizmi. Annelidae ima krožeče celomocite, ki opravljajo funkcije, primerljive s fagocitnimi imunskimi celicami vretenčarjev. Več študij je pokazalo, da so te celice vključene v procese fagocitoze, opsonizacije in prepoznavanja patogenov. Tako kot vretenčarski makrofagi te krožeče celice, ki prežemajo organe iz celomske votline, zajamejo ali inkapsulirajo patogene, reaktivne kisikove vrste (ROS) in dušikov oksid (NO). Poleg tega proizvajajo vrsto bioaktivnih beljakovin, ki sodelujejo pri imunskem odzivu in opravljajo razstrupljevalne funkcije preko svojega lizosomskega sistema.

Celomociti lahko sodelujejo tudi pri litičnih reakcijah proti tarčnim celicam in sproščanju protimikrobnih peptidov. Naša študija imunohistokemično identificira kolomocite Lumbricus terrestris, razpršene v povrhnjici in spodnji vezivni plasti, tako v vzdolžni kot v gladki mišični plasti, prvič imunoreaktivne za TLR2, CD14 in -Tubulin. TLR2 in CD14 nista popolnoma kolokalizirana drug z drugim, kar nakazuje, da lahko ti kolomociti pripadajo dvema različnima družinama. Izražanje teh imunskih molekul na kolomocitih Annelidae potrjuje njihovo ključno vlogo v notranjem obrambnem sistemu teh protostomov Oligochaeta, kar kaže na filogenetsko ohranitev teh receptorjev. Ti podatki bi lahko zagotovili nadaljnji vpogled v razumevanje notranjega obrambnega sistema Annelida in kompleksnih mehanizmov imunskega sistema pri vretenčarjih.

Celomociti so tesno povezani z imunostjo. Koelomociti so celice, povezane z imunskim sistemom. Lahko izločajo različne imunske dejavnike, kot so citokini, interlevkini, antigeni in protitelesa, da uravnavajo in krepijo imunsko sposobnost telesa.

Celomociti opravljajo različne imunske funkcije, vključno z uravnavanjem celičnih imunskih odzivov kot celice, ki predstavljajo antigen, neposrednim ubijanjem patogenov in nenormalnih celic ter sodelovanjem pri uravnavanju vnetja in imunskih odzivov. Poleg tega so nekatere študije pokazale, da lahko celomociti tudi izboljšajo odpornost proti potencialnim patogenom s kopičenjem celic imunskega spomina in s tem izboljšajo imunost telesa.

Zato je vzdrževanje normalne funkcije in količine celomocitov ključnega pomena za imunost telesa. Hkrati lahko z uravnavanjem in izboljšanjem imunske funkcije celomocitov izboljšamo tudi imunost telesa, da bolje preprečimo in zdravimo različne bolezni. Iz tega lahko vidimo pomen imunosti. Cistanche lahko poveča imuniteto. Cistanche je bogat z različnimi antioksidativnimi snovmi, kot so vitamin C, vitamin C, karotenoidi itd. Te sestavine lahko lovijo proste radikale, zmanjšajo oksidativni stres in izboljšajo imunost. odpornost sistema.

Koristi Click cistanche tubulosa

Ključne besede

Anelid, celomociti, deževnik, evolucija, imunost.

Uvod

Notranji obrambni mehanizmi omogočajo preživetje gostitelja v metazoju. Ti mehanizmi z razvojem organizmov postajajo vse bolj zapleteni. Za razliko od devterostomov vretenčarjev protostomi nimajo adaptivne imunosti in svojo obrambo opirajo na prirojeno imunost [56]. Začetna linija obrambe pred bakterijami in mikroorganizmi pri vretenčarjih je hitra aktivacija prirojenih imunskih celic in molekul. V zadnjem času so nevretenčarji postali kandidati za analizo prirojene imunosti, da bi razkrili strategije in kompleksnost adaptivnega imunskega odziva vretenčarjev. Nevretenčarji so razvili vrsto aktivnih imunskih mehanizmov, vključno s proizvodnjo protimikrobnih peptidov, koagulacijo, fagocitozo in reakcijami inkapsulacije [20, 24]. Ti mehanizmi so odvisni od "receptorjev za prepoznavanje vzorcev" (PRR), prirojenih imunskih molekul, ki lahko ločijo "samo" od "ne-samo" komponent membrane.

Prepoznavanje "s patogenom povezanih molekularnih vzorcev" (PAMP) uravnava začetek bistvenih signalnih poti, vse do aktivacije genov, ki kodirajo vnetne mediatorje, protimikrobne peptide in regulatorje fagocitoze [32]. Oligochaete annelids (deževniki) so postali model za primerjalno imunologijo in se tako kot pijavke uporabljajo za biomonitoring kopenskega in vodnega okolja (B.-T. [48, 52, 53, 72]. Deževniki imajo prirojeno, visoko razvito in učinkovite obrambne mehanizme pred nevarnimi okoljskimi mikroorganizmi.Prva mehansko-biološka obrambna linija, ki ločuje telo kolobarjev od zunanjega okolja, je tegument, sestavljen iz povrhnjice in mišičnih plasti.Ima kutikulo s tanko plastjo mukopolisaharide in beljakovine, ki delujejo kot protimikrobna pregrada [20].

Pri deževnikih celični in humoralni imunski sistem prvič v evoluciji metazojev delujeta skupaj. Tekočina v kolomični votlini naj bi bila odgovorna za humoralne imunološke aktivnosti. Celomična votlina deževnikov je napolnjena s tekočino, ki vsebuje proste in tavajoče celomocite in njihove pigmentirane agregate, imenovane rjava telesca, ki so produkt inkapsulacije vsiljivih bakterij in ostankov delcev. Koelomična tekočina deževnikov izvaja več bioloških procesov, vključno s hemolitičnimi, proteolitičnimi, citotoksičnimi in antibakterijskimi [19, 24, 29]. Koelom neposredno komunicira z zunanjim okoljem skozi dorzalne pore in povezane nefridialne tubule, ki izločajo metabolite. Te pore sodelujejo tudi pri izločanju bakterij in izčrpanih celomocitov. Pod stresnimi pogoji se lahko celomična tekočina in suspendirane celice hitro izločijo s povečanjem intrakolonskega tlaka [24].

Celomociti deževnikov so bistveni element prirojene celične imunosti. Te celice so podobne levkocitom vretenčarjev tako po morfologiji kot po funkciji [33]. Celomociti opravljajo širok spekter nalog, vključno s celično citotoksičnostjo, inkapsulacijo in fagocitozo. Razdelimo jih lahko v dve primarni subpopulaciji: melanocite in amebocite (hialinske in zrnate) [33]. Hialinski in zrnati amebociti so vključeni v fagocitozo in inkapsulacijo ter izražajo različne PRR [23, 60]. Te celice v obtoku, ki migrirajo v tkiva iz celomske votline, so zelo podobne vretenčarskim makrofagom, ki zajamejo ali inkapsulirajo patogene, reaktivne kisikove vrste (ROS) in dušikov oksid (NO) [39]. Eleociti proizvajajo široko paleto bioaktivnih beljakovin, ki so vključene v humoralni imunski odziv in tudi razstrupljajo telo preko svojega lizosomskega sistema [24]. Celomociti lahko sodelujejo pri litičnih reakcijah proti tarčnim celicam in sproščanju protimikrobnih peptidov. Med imunskimi mehanizmi so poskusi s presaditvijo pokazali obstoj samoprepoznavanja pri deževnikih [28].

Anelidni celomociti s pomočjo celičnih reakcij hitro tvorijo imunske mehanizme proti bakterijam, parazitom in kvasovkam [59]. Ta hiter odziv posredujejo topne antibakterijske molekule, kot so lizocim, lizenin in lubricin [22, 42, 68]. Zelo ohranjene imunološke molekule, kot so indikatorji celične površine, so bile odkrite na kolomocitih s citometrijo za analizo. Zlasti celomociti so reagirali s protitelesi, specifičnimi za sesalce, in pokazali površinsko pozitivnost proti protitelesom proti CD11a, CD45RA, CD45RO, CDw49b, CD54, b2-M in Ty-1 [30, 34].

Namen naše študije je prvič imunohistokemično ovrednotiti prisotnost TLR2, CD14 in -tubulina v kolomocitih Lumbricus terrestris (Linnaeus, 1758), širokega, večsegmentnega, valjastega deževnika, ki pripada družini Lumbricidae (Annelida, Oligochaeta). , hermafrodit, dolg 8 do 10 cm [55]. Izboljšanje znanja o notranjem obrambnem sistemu nevretenčarjev lahko pomaga pri razumevanju bolj izpopolnjene imunosti vretenčarjev in posledično evolucije imunskega odziva [63].

Materiali in metode

Vzorci in priprava tkiv

Vzorci Lombricusa terrestrisa prihajajo iz naše laboratorijske histoteke. Pred tem so jih vzeli na nekontaminirano odprto polje in jih dva tedna aklimatizirali v sveži zemlji, kot so poročali Licata et al. [51], nato pa so bili pripravljeni z uporabo standardnih metod za svetlobno mikroskopijo. Vzorci so bili dve uri potopljeni v imuno (paraformaldehid 4 odstotki) (05-W01030705, BioOptica Milano SpA, Milano, Italija). Nato smo jih obdelali z dehidracijsko etanolno lestvico (od 30 do 100 odstotkov etanola) in nato pripravili za vključitev v parafin z uporabo ksilena.

Ko smo vključili, sta bila na vsako stekelce postavljena dva tanka odseka 3–5 μm, izrezana z rotacijskim mikrotomom.

Histologija

Za obdelavo preparatov smo uporabili morfološka in histokemična barvanja [4, 6]. Rezine so nato rehidrirali s progresivnimi alkoholnimi raztopinami (od 100 do 30 odstotkov etanola) v destilirano vodo po deparafinizaciji v ksilenu [17], G. [75], nato pa so jih obarvali z Mallory trikromom in AB/PAS [3] . Po obarvanju so bila stekelca nameščena z uporabo Eukitt (BioOptica Milano SpA, Milano, Italija, Evropa). Podatki o sevih, uporabljenih v tej študiji, so vključeni v tabelo 1.

Imunofluorescenca

Deparafnizirane odseke smo obdelali s 5-odstotno raztopino natrijevega borohidrida, da bi odpravili avtofluorescenco, nato smo uporabili 2,5-odstotno raztopino govejega serumskega albumina (BSA), nato pa smo rezine čez noč inkubirali s primarnimi protitelesi proti TLR2, CD14 in -Tubulin [40]. ]. Po tem je bila izvedena inkubacija sekundarnih protiteles. Da bi se izognili beljenju, so bile rezine nameščene z uporabo Fluoromount™ vodnega pritrdilnega medija (Sigma-Aldrich, Taufkirchen Nemčija, Evropa). Poskusi so bili izvedeni brez primarnih protiteles kot negativne kontrole (podatki niso prikazani). Za potrditev, da so bila primarna protitelesa imunopozitivna, so kot pozitivno kontrolo uporabili kožna tkiva podgan (podatki niso prikazani) [5, 47, 74].

Odrezke smo analizirali pod konfokalnim laserskim vrstičnim mikroskopom Zeiss LSM DUO z META modulom (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, Jena, Nemčija, Evropa) s helij-neonskim (543 nm) in argonovim (458 nm) laserjem različnih valovnih dolžin [7]. . Za izboljšanje slik je bil uporabljen Zen 2011 (programska oprema LSM 700 Zeiss, Oberkochen, Nemčija, Evropa). Z uporabo Adobe Photoshop CC različice 2019 (Adobe Systems, San Jose, CA, ZDA) so bile digitalne slike združene v sestavljeno sliko. Krivulje intenzivnosti fluorescence so bile nato ovrednotene s funkcijo Zen 2011 "Display profile" [58]. Podrobnosti o protitelesih so povzete v tabeli 2.

Kvantitativna analiza

Podatke za kvantitativno analizo smo zbrali s pregledom desetih rezov in dvajsetih polj na vzorec. Pozitivnost in število celic sta bila ocenjena s programsko opremo ImageJ 1.53e. Število celomocitov, ki so pozitivni na TLR2, CD14 in -Tubulin, je bilo prešteto z uporabo SigmaPlot različice 14.0 (Systat Software, San Jose, CA, ZDA). Običajno porazdeljeni podatki so bili analizirani z enosmerno ANOVA in Studentovim t-testom. Navedene so srednje vrednosti in standardni odkloni (SD) števila imunoreaktivnih celomocitov: ** p Manjše ali enako 0.01, * p Manjše ali enako 0,05.

Rezultati

Deževnik Lumbricus terrestris ima enoslojni epitelij in pokrivno vlaknato kutikulo, ki sestavljata povrhnjico. Vezivna in mišična tkiva, ki sestavljajo večji del telesne stene, ležijo pod povrhnjico. Epidermalni epitelij ohranja kolagensko povrhnjico ločeno od preostalega organizma in je odgovoren za proizvodnjo tega kutikularnega kolagena. Kožica, povrhnjica, vzdolžna mišica in krožna mišica so vidne s histološkim pregledom prereza telesne stene deževnikov. Povrhnjica je morfološko dobro izražena; je bodisi enoplastni epitel ali psevdostratificiran; sestavljena je iz podpornih, bazalnih, žleznih in senzoričnih celic (slika 1). Imunofluorescenčna analiza pri opazovanju s konfokalnim mikroskopom kaže pozitivne celomocite za TLR2 (sliki 2, 3), CD14 (sliki 2) in -Tubulin (slika 3), razpršene v povrhnjici in vezivni plasti spodaj, oboje v vzdolžni in v gladki mišični plasti. TLR2 in CD14 nista popolnoma kolokalizirana drug z drugim, kar nakazuje, da lahko ti celomociti pripadajo dvema različnima družinama (slika 2). Poleg tega so bile žlezne celice sluznice v povrhnjici pozitivne na tubulin (slika 3). Z analizo funkcije "prikaznega profila" konfokalnega mikroskopa smo potrdili fluorescenčne vrhove kolokalizacije med testiranimi protitelesi.

Kvantitativna analiza je pokazala podobno število pozitivnih celomocitov za posamezna testirana protitelesa, kot je prikazano v tabeli 3.

Diskusija

Odzivi gostiteljev proti vdorom patogenov so fiziološki mehanizmi, ki pripadajo vsem živim organizmom. Od pojava prvih evkariontskih celic se je razvilo več obrambnih procesov, ki zagotavljajo celično celovitost, homeostazo in preživetje gostitelja [25]. Nevretenčarji so razvili vrsto obrambnih odzivov, ki učinkovito prepoznajo in odstranijo tujke, mikrobe ali parazite. Medtem ko imajo hordati prilagodljivo imunost, se lofotrohozoji kot deževniki zanašajo predvsem na prirojene imunske celice, kot so fagociti (amebociti, celomociti), ki vključujejo filogenetsko ohranjene PRR za posredovanje imunskega odziva [41]. Receptorji čistilcev, TLR in Nod podobni receptorji (NLR) so vidni predstavniki pri nevretenčarjih. Po vezavi receptor-ligand transdukcija signala sproži kompleksno kaskado celičnih reakcij, ki vodijo do proizvodnje ene ali več efektorskih molekul, vključenih v imunski odziv [61]. Celomični citolitični protein (CCF), protein, ki veže lipopolisaharide (EaLBI/BPI) in Tollu podoben EaTLR receptor so trije tipi PRR, ki so bili do sedaj identificirani pri deževnikih [65, 66]. CCF je bil identificiran in označen kot imunska molekula celomične tekočine in celomocitov Eisenia foetida (Savigny, 1826). CCF, ki se veže na mikrobne antigene, lahko sproži kaskado profenoloksidaze, pomemben imunski mehanizem nevretenčarjev, ki ima tudi lastnosti opsoniziranja in tako spodbuja fagocitozo [18, 35].

TLR so evolucijsko ohranjeni membranski prepoznavni receptorji [9, 15], ki prepoznajo tuje antigene z uporabo PAMP [2] in prispevajo k modulaciji imunskega odziva [8, 9, 11, 36]. Bodó et al. [24] so dokazali prisotnost TLR na kolomocitih kolobarjaste oligohete Eisenia andrei (Bouché, 1972) [24]. Škanta idr. (2013) izolirali deževnika TLR (EaTLR) iz E. andrei. Velika znotrajvrstna raznolikost tega receptorja kaže na prisotnost več genov TLR v genomu E. andrei. Glede na filogenetske raziskave so si TLR iz obročastega mnogoščetinca Capitella teleta (Blake, Grassle in Eckelbarger, 2009), EaTLR in TLR mehkužcev in iglokožcev zelo podobni [66]. Prochazkova et al. poudarjen EaTLR in večkratni cisteinski grozd (MCC) EaTLR, izražen v telesnih tkivih deževnikov. Prvega je še posebej veliko v prebavnem sistemu, medtem ko lahko drugi deluje v embrionalnem razvoju in odzivu proti parazitom [61]. Poleg tega je lahko njegova prisotnost v celomocitih prekomerno izražena zaradi kopičenja bakterij [66]. Celomociti Lumbricus terrestris so lahko in vitro prepoznali monocite kot nesamo, kar je potrdilo njihovo sposobnost imunskega prepoznavanja [62]. Študije transkriptomike potrjujejo prisotnost 18 TLR-jev v mnogočetinskem kolobarju Arenicola marina (Linnaeus, 1758) [67].

Prej smo dokazali prisotnost TLR2 pri več vretenčarjih [4, 11, 12, 16, 46, 54] in urohordatih [14, 45].

Po teh podatkih je naša študija prvič imunohistokemično označila TLR2 v celomocitih Lumbricus terrestris. Kolokalizirali smo TLR2/CD14 in TLR2/-Tubulin, kar je potrdilo dve vrsti celic celomocitov, kot je poročal Engelmann [33]. Vsi celomociti niso bili kolokalizirani za testirana protitelesa, kar kaže na verjetno funkcionalno in strukturno diverzifikacijo teh celic. Čeprav ni eksperimentalnih dokazov, lahko prisotnost TLR2/CD14 kolokaliziranih celomocitov nakazuje, da so te celice lahko amebociti, vključeni v fagocitozo, medtem ko so celomociti, ki izražajo samo TLR, lahko melanocitne celice, ki sodelujejo pri imunskem odzivu, vendar ne izvajajo fagocitnih funkcij [1, 37]. , 38], SJ [49, 50], str., [57, 71]. Kljub temu, da so Bodó et al. kar kaže na odsotnost TLR v melanocitih E. andrei z uporabo qPCR [23], so TLR2-pozitivni melanociti odkriti v L. terrestris, kar kaže na razliko med vrstami deževnikov, kot je že domnevano na jedrski genomski osnovi [64].

Študija Eguielorja et al. [31] je pri pijavki Glossiphonia complanata (Linnaeus, 1758) morfološko in histokemično identificiral tri glavne tipe celic (makrofagom podobne celice, NK podobne celice, granulociti tipa I in II) z uporabo različnih protičloveških markerjev pri miših, specifičnih za makrofage CD14 in CD61 [44] in celice NK CD56 in CD57 [43]. Ta navzkrižna reaktivnost na protitelesa, ustvarjena proti antigenom CD sesalcev, se ujema z literaturnimi podatki o filogenetskih korelacijah med anelidi in vretenčarji [21, 30] in bi lahko bila primer evolucijskega ohranjanja teh imunskih molekul.

Mišja protitelesa proti humanemu anti-CD24, faktorju tumorske nekroze (TNF)-, anti-CD45RA in anti-CD45RO so bila lokalizirana na površinah celomocitov deževnika Eisenia foetida [30, 34], kar kaže, da so te molekule zelo ohranjen med filogenezo. Te študije so skladne s prejšnjimi raziskavami, ki dokazujejo, da so površinski antigeni celomocitov navzkrižno reaktivni s protitelesi proti CD14, CD11b in CD11c, proizvedenimi pri sesalcih Temiste petricola (Amor, 1964), kar označuje fagocite, pozitivne na protitelesa anti-CD14, CD11b in CD11c [21]. ]. S temi podatki so naši rezultati pokazali, da so fagocitne celice imunoreaktivne na CD14 pri Lumbricus terrestris.

Poleg tega smo dokazali imunopozitivnost celomocitov na -Tubulin, kolokaliziran s TLR2, kar kaže na povezavo med citoskeletom, mikrotubuli in prirojenim imunskim odzivom, ki ga posreduje TLR2. Kolokalizacija TLR2 in -Tubulin potrjuje vpletenost tubulina v transport TLR-jev na površini membrane. Študija Heli Uronen-Hansson et al. [70] so pokazali obsežno tubulovezikularno izražanje TLR2 in TLR4 na notranjih in zunanjih monocitih ter v dendritičnih celicah. Ker so ti receptorji kolokalizirani z -Tubulinom in neposredno povezani z Golgijevim kompleksom, lahko mikrotubuli služijo kot kanal za prenos veziklov TLR [70]. Tubulin je prisoten tudi v povrhnjici, pomaga ohranjati njeno celovitost [27] in posreduje pri celjenju ran [73] ter tako pomaga prirojenemu imunskemu sistemu, kot poročajo tudi študije o Nematoda Caenorhabditis elegans (Maupass, 1900) [27, 69].

Kolokalizacija, potrjena s funkcijo "prikaznega profila" konfokalnega mikroskopa, potrjuje dobljene rezultate in poudarja vrh fluorescence, ki ustreza vezavi protiteles na ustrezne antigene.

Skratka, naša študija s konfokalno mikroskopijo identificira celomocite, imunoreaktivne na TLR2, CD14 in -Tubulin, prvič v Oligochaeta annelid Lumbricus terrestris. Ti podatki ne samo potrjujejo pomembno evolucijsko ohranitev teh molekul, temveč tudi poglabljajo naše znanje o notranjem obrambnem sistemu nevretenčarjev, zlasti kolobarjev, in lahko zagotovijo koristne indikacije za prihodnje študije, ki izboljšujejo študij kompleksnih prirojenih imunskih mehanizmov zgornji vretenčarji.

Izjava institucionalnega nadzornega odbora

Za to študijo so bili opuščeni etični pregled in odobritev, ker za vzorce niso bili uporabljeni nobeni eksperimentalni postopki.

Prispevki avtorjev

Konceptualizacija, Alessio Alesci; formalna analiza, Alessio Alesci in Angelo Fumia; preiskava, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi in Eugenia Rita Lauriano; kuriranje podatkov, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Angelo Fumia, Marco Albano, Emmanuele Messina, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi in Eugenia Rita Lauriano.; pisanje – priprava izvirnega osnutka, Alessio Alesci; pisanje—recenzija in urejanje, Alessio Alesci, Gioele Capillo, Nunziacarla Spanò, Simona Pergolizzi in Eugenia Rita Lauriano; vizualizacija, Alessio Alesci in Angelo Fumia; nadzor, Eugenia Rita Lautiano. Vsi avtorji so prebrali in se strinjali z objavljeno različico rokopisa.

financiranje

Ta raziskava ni prejela zunanjega financiranja.

Dostopnost podatkov in materialov

Podatki, predstavljeni v tej študiji, so na voljo v članku.

Izjave

Etična odobritev in soglasje za sodelovanje

Se ne uporablja.

Konkurenčni interesi

Avtorji izjavljajo, da ni navzkrižja interesov.

Reference

1. Aderem A, Underhill DM. Mehanizmi fagocitoze v makrofagih. Annu Rev Immunol. 1999; 17 (1): 593–623. https://doi.org/10.1146/annur ev.immunol.17.1.593.

2. Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. Prepoznavanje patogenov in prirojena imunost. Celica. 2006; 124 (4): 783–801. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.02.015.

3. Alesci A, Albano M, Savoca S, Mokhtar DM, Fumia A, Aragona M, Lo Cascio P, Hussein MM, Capillo G, Pergolizzi S, Spanò N, Lauriano ER. Konfokalna identifikacija imunskih molekul v celicah Skin Club Zebrafsh (Danio rerio, Hamilton 1882) in njihova možna vloga pri imunosti. Biologija. 2022; 11 (11): 1653. https://doi.org/10.3390/biology11111653.

4. Alesci A, Capillo G, Fumia A, Messina E, Albano M, Aragona M, Lo Cascio P, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Konfokalna karakterizacija črevesnih dendritičnih celic od Myxines do Teleosts. Biologija. 2022;11(7):1045.https://doi.org/10.3390/biology11071045.

5. Alesci A, Capillo G, Mokhtar DM, Fumia A, D'Angelo R, Lo Cascio P, Albano M, Guerrera MC, Sayed RKA, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Ekspresija protimikrobnega peptida Piscidin1 v mastocitih škrg velikega blatnega skakača Periophthalmodon schlosseri (Pallas, 1770). Int J Mol Sci. 2022;23(22):13707. https://doi.org/10.3390/ijms232213707.

6. Alesci A, Cicero N, Fumia A, Petrarca C, Mangifesta R, Nava V, Lo Cascio P, Gangemi S, Di Gioacchino M, Lauriano ER. Histološka in kemijska analiza težkih kovin v ledvicah in škrgah Boops Boops: centri melanomakrofagov in rodletne celice kot okoljski biomarkerji. Toksiki. 2022;10(5):218. https://doi.org/10.3390/toxics10050218.

7. Alesci, A., Fumia, A., Miller, A., Calabrò, C., Santini, A., Cicero, N., in Lo Cascio, P. (2022). Spirulina spodbuja agregacijo makrofagov v jetrih cebrice (Danio rerio). Nat Prod Res, 1–7. https://doi.org/10.1080/14786419. 2022.2089883.

8. Alesci, A., Gitto, M., Kotańska, M., Lo Cascio, P., Miller, A., Nicosia, N., Fumia, A., & Pergolizzi, S. (2022). Imunogenost, učinkovitost, varnost in psihološki vpliv mRNA cepiv proti COVID-19. Humani imunol, S0198885922001586. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2022.08.004.

9. Alesci, A., Lauriano, ER, Aragona, M., Capillo, G. in Pergolizzi, S. (2020). Označevanje Langerhansovih celic vretenčarjev, od rib do sesalcev. Acta Histochemica, 122(7): 151622. https://doi.org/10.1016/j.acthis.2020.151622.

10. Alesci A, Lauriano ER, Fumia A, Irrera N, Mastrantonio E, Vaccaro M, Gangemi S, Santini A, Cicero N, Pergolizzi S. Razmerje med imunskimi celicami, depresijo, stresom in psoriazo: bi lahko uporaba naravnih izdelkov Bodite v pomoč? Molekule. 2022; 27 (6): 1953.

11. Alesci, A., Pergolizzi, S., Capillo, G., Lo Cascio, P. in Lauriano, ER (2022). Celice palčkov v ledvicah zlate ribice (Carassius auratus, Linnaeus 1758): študija svetlobne in konfokalne mikroskopije. Acta Histochemica, 124(3):151876.

12. Alesci, A., Pergolizzi, S., Fumia, A., Calabrò, C., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Mastociti v črevesju zlate ribice (Carassius auratus): Imunohistokemijska karakterizacija. Acta Zoologica.

13. Alesci A, Pergolizzi S, Fumia A, Miller A, Cernigliaro C, Zaccone M, Salamone V, Mastrantonio E, Gangemi S, Pioggia G, Cicero N. Imunski sistem in psihološko stanje nosečnic med COVID-19 .Pandemija: Ali lahko mikrohranila podpirajo nosečnost? Hranila. 2022;14(12):2534. https://doi.org/10.3390/nu14122534. 14. Alesci, A., Pergolizzi, S., Lo Cascio, P., Capillo, G. in Lauriano, ER (2022). Lokalizacija vazoaktivnega intestinalnega peptida in imunoreaktivnih celic, podobnih receptorju 2, v endostilu urohordata Styela plicata (Lesueur, 1823). Microsc Res Tech, https://doi.org/10.1002/jemt.24119.

15. Alesci A, Pergolizzi S, Lo Cascio P, Fumia A, Lauriano ER. Nevronska regeneracija: primerjalni pregled vretenčarjev in nove perspektive za nevrodegenerativne bolezni. Acta Zoologica. 2021. https://doi.org/10. 1111/azo.12397.

16. Alesci A, Pergolizzi S, Savoca S, Fumia A, Mangano A, Albano M, Messina E, Aragona M, Lo Cascio P, Capillo G, Lauriano ER. Odkrivanje črevesnih vrčastih celic širokoškrgega Hagfsh Eptatretus Cirrhatus (Forster, 1801): konfokalna mikroskopska ocena. Biologija. 2022;11(9):1366.https://doi.org/10.3390/biology11091366.

17. Alturkistani HA, Tashkandi FM, Mohammedsaleh ZM. Histološki madeži: pregled literature in študija primera. Global J Health Sci. 2015;8(3):72.https://doi.org/10.5539/gjhs.v8n3p72.

18. Beschin A, Bilej M, Brys L, Torreele E, Lucas R, Magez S, De Baetselier P. Konvergentna evolucija citokinov. Narava. 1999;400(6745):627–8.https://doi.org/10.1038/23164.

19. Bilej M, De Baetselier P, Beschin A. Protimikrobna zaščita deževnika. Folia Microbiol. 2000;45(4):283–300. https://doi.org/10.1007/BF028 17549.

20. Bilej M, Procházková P, Šilerová M, Josková R (2010) Odpornost na deževnike. V: Söderhäll K, edotiro. Imuniteta nevretenčarjev, Vol. 708. Boston: Springer; str. 66–79). https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.

21. Blanco GAC, Escalade AM, Alvarez E, Hajos S. LPS-inducirana stimulacija fagocitoze pri sipunkulanskem črvu Themiste petricola: Možna vpletenost človeških CD14, CD11B in CD11C navzkrižno reaktivnih molekul. Dev Comp Immunol. 1997; 21 (4): 349–62. https://doi.org/10.1016/ S0145-305X(97)00007-4.

22. Bodó K, Boros Á, Rumpler É, Molnár L, Böröcz K, Németh P, Engelmann P. Identifikacija novih homologov lubricina pri deževnikih Eisenia andrei. Dev Comp Immunol. 2019; 90: 41–6.

23. Bodó, K., Ernszt, D., Németh, P., in Engelmann, P. (2018). Različni imunski in z obrambo povezani molekularni prstni odtisi v ločenih celomocitnih podskupinah deževnikov Eisenia andrei. Preživetje nevretenčarjev J, 338–345.

24. Bodó K, Kellermayer Z, László Z, Boros Á, Kokhanyuk B, Németh P, Engelmann P. Prirojeni imunski odziv, povzročen s poškodbo med regeneracijo segmenta deževnika, Eisenia andrei. Int J Mol Sci. 2021;22(5):2363.

25. Buchmann, K. (2014). Razvoj prirojene imunosti: namigi od nevretenčarjev prek rib do sesalcev. Meje v imunologiji.

For more information:1950477648nn@gmail.com