Primerjava vsebnosti feniletanolnih glikozidov v dveh različnih gostiteljskih Cistanches Herba po različnih postopkih sušenja

Primerjali so vsebinofeniletanolni glikozidiv dveh različnih gostiteljihCistanchesHerbapo različnihsušilni tretmajiGAO Peiwen1, GUO Yehong1 *, ZHAO Fafa1, ZHANG Dan2, ZHANG Fangming11 (Agronomy College, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Kitajska)2 (State Key Laboratory of Aridland Crop Science, Lanzhou 730070, Kitajska)

PovzetekZa primerjavo vsebnosti 10 feniletanoidnih glikozidov v različnih predelanih Cistanches Herba iz različnih gostiteljev z uporabo tekočinske kromatografije ultra visoke ločljivosti s trojno kvadrupolno masno spektrometrijo (UPLC-QQQ-MS). Posušeno Cistanches Herba smo zdrobili, presejali skozi 60-mrežasto sito in ekstrahirali z ultrazvokom s 50 % metanolom. Ločevanje je bilo izvedeno na koloni Agilent Eclipse Plus C18 (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm) z uporabo gradientne elucije z mobilno fazo A (0,1 % vodna raztopina mravljinčne kisline) in B (acetonitril). Detekcija je bila izvedena v načinu dinamičnega spremljanja več reakcij z uporabo ionizacijskega vira z elektrosprejem v UPLC-QQQ-MS.

Rezultati so pokazali, da so bile opažene pomembne razlike v sestavi10 feniletanoidnih glikozidovmedCistanches Herba gojene na različnih gostiteljihin podvrženi različnim sušenjem. Liofilizirane Cistanches Herba so pokazale najvišjo vsebnost teh spojin za obe gostiteljski rastlini, čemur je sledilo sušenje pri 80 stopinjah. Čeprav je sušenje z zamrzovanjem ohranilo največjo vsebnost 10 feniletanoidnih glikozidov v Cistanches Herba, je bilo sušenje pri 80 stopinjah stroškovno učinkovitejše za obsežno proizvodnjo.

Ključne besede:tekočinska kromatografija ultra visoke ločljivosti - trojna kvadrupolna masna spektrometrija; Cistanches Herba; Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge; Atriplex canescens (Pursh) Nutt; feniletanoidni glikozidi; način sušenja

Cistanche Raw material

KLIKNITE TUKAJ ZA NARAVNI ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE TUBULOSA S 30 % EHINAKOZIDA IN 12 % AKTEOZIDA

Cistanči Herbaje suho mesnato steblo z luskastimi listiCistanche deserticola YCMaozCistanche tubulosa(Schenk) Wight. Prvič je bil viden v "Shen Nong's Materia Medica" in se uvršča med najvišje ocene. Je dragoceno kitajsko zeliščno zdravilo, ki se lahko uporablja kot zdravilo in hrana. Ker večinoma raste v sušnih območjih, kot so Notranja Mongolija, Xinjiang, Gansu in Ningxia, je znan tudi kot "puščavski ginseng." Cistanche deserticola je sladek, slan in topel ter se vrača v meridiane ledvic in debelega črevesa; ima učinkehranljiva ledvica jang, dopolnitev esence in krvi, vlaženje črevesja in odvajalo itd., in se pogosto uporablja za zdravljenje bolezni, kot je npr.nezadosten ledvični jang, pomanjkanje esence in krvi, impotenca in neplodnost, inšibkost mišic in kosti [1 -4].Feniletanolni glikozidiso glavne učinkovine vCistanche deserticola, in so tudi največkrat poročane snovi v raziskavi o Cistanche deserticola [5]

Tradicionalna gostiteljska rastlinaCistanche deserticolaje Haloxylon ammodendron (CAMey.) Bunge iz družine Chenopodiaceae. Vendar Haloxylon ammodendron raste počasi in ima nizko gospodarsko vrednost. Rastline Haloxylon ammodendron, mlajše od 3 let, je težko uporabiti za gojenje Cistanche deserticola. Da bi ublažili protislovje med ponudbo in povpraševanjem na zdravilnem trgu Cistanche deserticola, povečajte proizvodnjo Cistanche deserticola in dosegite obsežno in standardizirano gojenje Cistanche deserticola. Znanstveni raziskovalci so uspešno predstavili Atriplex canescens (Pursh) Nutt v Gansuju, toda vprašanje, ali je to drevesno vrsto mogoče uporabiti kot novo gostiteljsko rastlino za Cistanche deserticola in ali je njena rast boljša od Haloxylon ammodendron, je postalo vroče vprašanje, ki vzbuja vsesplošno skrb [6]. . Ali lahko Atriplex truncatula v celoti nadomesti Haloxylon ammodendron pri gojenju Cistanche deserticola, je treba še potrditi s širšimi, celovitejšimi in poglobljenimi osnovnimi rezultati raziskav. Čeprav so bile v moji državi opravljene obsežne raziskave o Atriplex truncatula z vidika vnosa, gojenja sadik in analize komponent [7-10], je zelo malo poročil o cepljenju Atriplex truncatula s Cistanche deserticola. V preteklosti so bile raziskave osredotočene predvsem na razvojne in uporabne značilnosti Cistanche deserticola [11-14]. Vendar pa raziskave o učinkovinah dveh gostiteljic Cistanche deserticola niso poročali, zlasti dveh gostiteljic Cistanche deserticola po uporabi različnih postopkov sušenja. Študij o razlikah v zadrževanju učinkovin je malo.

Tekočinska kromatografija ultra visoke ločljivosti – trojna kvadrupolna masna spektrometrija (UPLC-QQQ-MS) uporablja UPLC kot kromatografski ločevalni sistem in trojni kvadrupol (QQQ) kot serijski analizator. To je tehnologija tekočinske masne spektrometrije, ki ima dober učinek ločevanja na več -komponentne kompleksne sisteme in lahko hitro in natančno kvantitativno analizira kompleksne komponente tradicionalne kitajske medicine [15-16]. V tem poskusu je bila uporabljena tehnologija UPLC-QQQ-MS za kvantitativno analizo 10 feniletanolnih glikozidov, vključno z ehinaceazidom, verbaskozidom, izorbaskozidom in antocianozidom A, v posušenih produktih dveh gostiteljskih vrst Cistanche deserticola po različnih postopkih sušenja. Primerjava vsebnosti teh komponent v Cistanche deserticola pri različnih metodah sušenja in različnih gostiteljih zagotavlja teoretično podlago za razvoj in natančno uporabo feniletanol glikozidov v Cistanche deserticola.

Cistanche extract can reduce Inflammatory hyperplasia (2)

1 Materiali in instrumenti

Haloxylon ammodendron Cistanches in Cistanches tetrapterans so bili zbrani v bazi sajenja Cistanche deserticola v okrožju Jingtai, provinca Gansu. Čas žetve je bil marca 2023. Profesor Guo Yehong s Kmetijske univerze Gansu je identificiral mesnata stebla Cistanche deserticola z luskastimi listi. Referenčne snovi stran ehinaceje (C35H46O20, št. CAS: 82854-37-3, čistost 98,30 %), verbaskozid (C29H36O15, št. CAS: 61276-17-3, čistost 99,35 %), tuberoza A (C37H48O21, št. CAS: 112516-05-9, čistost 99,74 %), izomuraskozid (C29H36O15, št. CAS: 61303-13-7, čistost 97,77 %), gardenipozid (C17H24O10, št. CAS: 24512-63-8, čistost 99,11 %), 2 '-acetil verbaskozid (C31H38O16, številka CAS: 94492-24-7, čistost 97,12 %), salidrozid

(C14H20O7, št. CAS: 10338-51-9, čistost 98,43 %), Motherwort (C15H24O9, št. CAS: 52949-83-4, čistost 97,64 %), cistanhezid A (C36H48O20, št. CAS: {{15} }, čistost 93,24 %), angiozid B (C31H38O16, številka CAS: 112516-04-8, čistost 98,57 %), Chengdu Pufeide Biotechnology Co., Ltd.; metanol in acetonitril sta kromatografsko čista, Shanghai Anpu Testing Technology Co., Ltd. Co., Ltd.; mravljinčna kislina, Tianjin Comeo Chemical Reagent Co., Ltd.; voda je bila ultračista voda.

DESKTOP-T2G6S78\6460 tekočinska kromatografija ultra visoke ločljivosti - trojni kvadrupolni tandem masni spektrometer, Agilent Company iz Združenih držav; elektronska analitična tehtnica AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd., Švica; LyoQuest-85 zamrzovalni sušilnik, Telstar, špansko podjetje.

2 Eksperimentalne metode

2.1 Priprava vzorcev Cistanche deserticola z različnimi postopki sušenja

Sveže proizvode Cistanche deserticola iz različnih gostiteljev narežemo na 3 mm debele rezine in jih obdelamo na naslednji način.

(1) Sušenje na soncu: rezine kuhajte na pari 5 minut in jih nato položite na sončno mesto, da se posušijo. Preverite spremembe vsebnosti vlage. Ko je vsebnost vlage manjša od 10 %, jih pospravite za kasnejšo uporabo.

(2) Sušenje: rezine kuhajte na pari 5 minut in jih nato postavite v pečico pri 40, 60 ali 80 stopinjah, da se posušijo, dokler vsebnost vlage ni manjša od 10 %, in jih pospravite za kasnejšo uporabo.

(3) Vakuumsko sušenje z zamrzovanjem: rezine za 2 uri pred predhodnim hlajenjem postavite v hladilnik s temperaturo -80 stopinj, nato jih postavite v vakuumski sušilnik z zamrzovanjem (stopnja vakuuma 650 Pa, temperatura zmrzovanja -55 stopinj ) , sušite 48 ur in pospravite za kasnejšo uporabo.

Cistanche tubulosa (5)

2.2 Kromatografski pogoji

Kolona Agilent Eclipse Plus C18 (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μm); hitrost pretoka: 0.3 ml/min; volumen injekcije 1 μL; mobilna faza: faza A je 0.1 % vodna raztopina mravljinčne kisline, faza B pa je kromatografski acetonitril. Hitrost eluiranja mobilnih faz A in B je 0~1,5 min, 10%~15% B; 1,5~2 in, 15%~20% B; 2~3 min, 20%~25% B; 3~4 min, 25%~30% B; 4~5 min, 30%~32% B; 5~6 min, 32%~34% B; 6~7 min, 34%~36% B; 7~8 min, 36 %~38 % B; 8~9 min, 38%~40% B; 9~9,5 min, 0%~45% B; 9,5~9,6 min, 45%~10% B; 9,6~10 min, 10% B .

2.3 Optimizirani pogoji masne spektrometrije

Vrsta ionskega vira: elektronski razpršilni ionski vir; metoda skeniranja: skeniranje negativnih ionov; temperatura ionskega vira: 350 stopinj; nebulator: 35 psi; način spremljanja več reakcij in dinamični način večkratnih reakcij za spremljanje in analizo vsake spojine. Optimizirani pogoji za masno spektrometrijo 10 snovi so prikazani v tabeli 1.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE

2.4 Priprava referenčne raztopine in raztopine standardne krivulje

Natančno stehtajte standardne praškeehinakozid,verbaskozid, anortozit A, izolebaskozid, gardenipozid, 2'-acetil verbaskozid, salidrozid, leonin, razdalje A in anortozit B. dodajte 50% metanola, da dobite mešano referenčno raztopino, ki vsebuje 0,2 mg na 1 ml; razredčite s 50 % metanola v standardno serijo mešanih raztopin 40,96, 102,4, 256, 640, 1 600, 4 000 ug/L, pritisnite "Pogoji pod 2,2" in 2,3" se zaporedno vbrizgajo iz od nizke koncentracije do visoke koncentracije, nato pa se kvantitativna programska oprema (agilent mass hunter) uporabi za obdelavo rezultatov zaznavanja z uporabo standardne krivulje, ki poteka mimo izhodišča. Izvedite linearno regresijo s koncentracijo snovi X (ng/mL) kot absciso in ionom vrednost odziva Y kot ordinato ter izračunajte regresijsko enačbo in korelacijski koeficient, kot je prikazano v tabeli 2. Znotraj območja obstaja dobra linearna povezava z vrednostjo odziva ionov.

ORGANIC CISTANCHE TUBULOSA EXTRACT WITH 30% ECHINACOSIDE AND 12% ACTEOSIDE