Dihotomni odzivi na kronično fetalno hipoksijo vodijo do vnaprej določenega fenotipa staranja Ⅱ
Nov 29, 2023
Hipoksičen
Fetalne ledvice
Prikaz dereguliranega profila izražanja beljakovin. Za razjasnitev molekularnih poti, ki so podlaga IUGR, ki ga povzroča hipoksija, so bile sveže izolirane ledvice hipoksičnih ali normoksičnih fetusov E18.5 podvržene profiliranju proteoma od spodaj navzgor z uporabo sistema nano-LC (Dionex UltiMate 3{{9). }}00 RSLC), ki je povezan z masnim spektrometrom visoke ločljivosti (Thermo QExactive). Analiza glavnih komponent je pokazala presenetljive razlike med hipoksičnimi in normoksičnimi ledvicami (slika 2A). Skupno je bilo identificiranih 6307 proteinov (FDR <0,01, dodatna tabela S2), od katerih jih je bilo 436 znatno dereguliranih (FDR <0,05); 284 s povečano številčnostjo in 152 z zmanjšano številčnostjo. Funkcionalno združevanje opomb z uporabo genske ontologije (18–20) je razkrilo obogatitev specifičnih mitohondrijskih, lizosomskih, RNA- in DNA-vezavnih proteinov, kot tudi proteinov, vključenih v specifične presnovne procese ali prirojene imunske odzive (slika 2, B–D) . Te beljakovine smo kategorizirali glede na (1) tvorbo nefrona, (2) presnovno prilagoditev in (3) pospešeno staranje, kot je predstavljeno in obravnavano v naslednjih odstavkih.
PRIDOBITE NARAVNI ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE S 25 % EHINAKOZIDA IN 9 % AKTEOZIDA ZA OKUŽBO LEDVIČ
Zatrta replikacija DNA in sinteza beljakovin prispevata k omejeni tvorbi novih nefronov pri kronični hipoksiji
Neželeni dogodki med razvojem, kot je kronična hipoksija ploda, so pogosto povezani z zmanjšanim številom nefronov (27, 29–32). Kljub temu je le redko mogoče dokazati osnovni mehanizem, ki bi prepričljivo pojasnil to ugotovitev. Združevanje vseh 64 dereguliranih proteinov, ki pripadajo izrazoma GO "DNA-binding" in "RNA-binding" (toplotni zemljevid je prikazan na dodatni sliki S2) z uporabo baze podatkov STRING (22), je razkrilo več podmrež, vključno s popravljanjem DNA, replikacijo DNA, spajanje mRNA in ribosomske beljakovine (slika 3A). Obsežnejši seznam obogatenih procesov ali poti je prikazan na sliki 3B (FDR < 0.05). Od teh sta bila "ribosom" in "replikacija DNA" med najpogostejšimi pojmi potlačenih proteinov, medtem ko sta bila spajanje mRNA in "razgradnja RNA" med najpogostejšimi izrazi induciranih proteinov. Postopki popravljanja DNK so pokazali bipartitni vzorec izražanja. Tu so bili proteini, vključeni v izrezovanje nukleotidov ali popravilo neusklajenosti, potlačeni, inducirani pa so bili tisti, ki posredujejo pri "popravljanju izrezovanja baze". Poleg tega se je raven številčnosti zaviralca celičnega cikla p27Kip1 dvakrat povečala (slika 3C), raven številčnosti markerja proliferacije Ki67 pa 34-krat zmanjšana (slika 3D), kar skupaj kaže na upočasnitev celice. proces delitve. Zlasti raven ekspresije mRNA Mki67, gena, ki kodira Ki67, je bila znatno potlačena v mišjih primarnih proksimalnih tubularnih celicah, gojenih v hipoksičnih pogojih (slika 3E). Ta represija je bila posredovana s hipermetilacijo promotorske regije Mki67 v hipoksičnih fetalnih ledvicah (slika 3F). Tako se zdi, da so pri fetalnih hipoksičnih ledvicah sinteza DNA, prevajanje mRNA in večina procesov popravljanja DNA zavrnjeni, kar zmanjšuje sposobnost celic za rast in razmnoževanje. Podatki o profiliranju proteoma prvič tukaj skupaj zagotavljajo molekularne dokaze, ki potencialno pojasnjujejo zmanjšano tvorbo nefronov.
Prirojeni imunski sistem in oksidativni stres se aktivirata v kroničnih hipoksičnih stanjih
Eden najbolj obogatenih izrazov, ki se pojavlja v analizi funkcionalnih opomb vseh 436 proteinov in najvišji za inducirane proteine, je bil "degranulacija nevtrofilcev" (sl. 2, B in C), kar kaže na stalno aktivacijo prirojenega imunskega sistema vhipoksične fetalne ledvice. Od 34 povezanih proteinov je bilo 29 induciranih in pet potlačenih (roza na sliki 4A). Med induciranimi proteini je bilo veliko glikolitičnih in z lizosomom povezanih encimov, več članov družine proteinov S100A, faktor zaviranja migracije makrofagov vnetnih citokinov (MIF), kot tudi primarni in sekundarni zrnati proteini, nevtrofilni zrnati protein (NGP), mieloperoksidaza (MPO) , katelicidin (CAMP), protein za prepoznavanje peptidoglikana 1 (PGLYRP1) in laktoferin (LTF). Da bi preverili pričakovano invazijo nevtrofilcev v hipoksične fetalne ledvice in odkrili njihovo lokacijo v tkivu, so bili ledvični odseki obarvani na MPO. MPO-pozitivne celice so tvorile grozde v nefrogenem območju ledvične skorje, v bližini krvnih žil, ob proksimalnem tubulu, občasno pa jih je bilo mogoče najti v medularnih regijah hipoksičnih vzorcev (slika 4D in dodatna slika S3, A –C). Nasprotno pa normoksične fetalne ledvice niso pokazale infiltracije ali kopičenja nevtrofilcev (slika 4C). Pokazalo se je, da Caveolin-1 (CAV1) povečuje transcelularno migracijo imunskih celic (33). V skladu s tem je bil CAV1 induciran v hipoksičnih fetalnih ledvicah (dodatna slika S3D), kar kaže na okrepljeno obarvanje ledvičnih krvnih žil, vključno s tistimi, ki prečkajo kortikalno regijo fetalne ledvice (sl. 4, E in F). Degranulacija nevtrofilcev povzroči lokalni izbruh reaktivnih kisikovih vrst, kar povzroči povečan oksidativni stres in poškodbe tkiva, vključno z oksidacijo DNK. Pomemben marker oksidacije DNA je 8-hidroksi-2′ -deoksigvanozin (8-OHdG), ki je bil povečan v proksimalnih tubulih in v nefrogenem območju hipoksičnih fetalnih ledvic (slika 4, G in H), v bližini kopičenja nevtrofilcev. Do tega povečanja poškodovane DNK 8-OHdG je prišlo kljub hkratni indukciji MGMT in OGG1 (slika 4, I in J), dveh encimov, odgovornih za odstranitev 8-OHdG. Ti rezultati kažejo na stalno aktivacijo prirojenega imunskega sistema v razvijajočih se ledvicah, kar poleg hipoksičnega stresa povzroči še večjo poškodbo tkiva. Skupaj z neučinkovitim popravljanjem teh tkivnih lezij se lahko sproži začaran krog, ki dodatno poslabša nefrogenezo.
FIG. 2. Proteomsko profiliranje razkriva številne spremembe, povezane s hipoksijo. A, analiza glavnih komponent proteomskih podatkov je pokazala jasno ločitev med normoksičnimi in hipoksičnimi fetalnimi ledvicami. B–D, združevanje funkcionalnih opomb vseh pomembno dereguliranih proteinov (B), induciranih proteinov (C) in zmanjšanih proteinov (D). Znatno spremenjeni delež poti (os x) je prikazan glede na njegov pomen obogatitve (y- os). Velikost vsake točke kodira skupno število članov na tej poti. Inducirane beljakovine so pokazale obogatitev presnovnih procesov (glikoliza), mitohondrijskih ali lizosomskih beljakovin in beljakovin, ki sodelujejo pri odzivu imunskega sistema (degranulacija nevtrofilcev), medtem ko so zmanjšane beljakovine obogatene za poti vezave DNA in RNA (strukturna sestavina ribosoma).
(PGLYRP1) in laktoferin (LTF). Da bi preverili pričakovano invazijo nevtrofilcev v hipoksične fetalne ledvice in odkrili njihovo lokacijo v tkivu, so bili ledvični odseki obarvani na MPO. MPO-pozitivne celice so tvorile grozde v nefrogenem območju ledvične skorje, v bližini krvnih žil, ob proksimalnem tubulu, občasno pa jih je bilo mogoče najti v medularnih regijah hipoksičnih vzorcev (slika 4D in dodatna slika S3, A –C). Nasprotno pa normoksične fetalne ledvice niso pokazale infiltracije ali kopičenja nevtrofilcev (slika 4C). Pokazalo se je, da Caveolin-1 (CAV1) povečuje transcelularno migracijo imunskih celic (33). V skladu s tem je bil CAV1 induciran v hipoksičnih fetalnih ledvicah (dodatna slika S3D), kar kaže na okrepljeno obarvanje ledvičnih krvnih žil, vključno s tistimi, ki prečkajo kortikalno regijo fetalne ledvice (sl. 4, E in F). Degranulacija nevtrofilcev povzroči lokalni izbruh reaktivnih kisikovih vrst, kar povzroči povečan oksidativni stres in poškodbe tkiva, vključno z oksidacijo DNK. Pomemben marker oksidacije DNA je 8-hidroksi-2′ -deoksigvanozin (8-OHdG), ki je bil povečan v proksimalnih tubulih in v nefrogenem območju hipoksičnih fetalnih ledvic (slika 4, G in H), v bližini kopičenja nevtrofilcev. Do tega porasta 8-OHdG poškodovane DNA je prišlo kljub hkratni indukciji MGMT in OGG1 (slika 4, I in J), dveh encimov, ki sta odgovorna za odstranitev 8-OHdG. Ti rezultati kažejo na stalno aktivacijo prirojenega imunskega sistema v razvijajočih se ledvicah, kar poleg hipoksičnega stresa povzroči še večjo poškodbo tkiva. Skupaj z neučinkovitim popravljanjem teh tkivnih lezij se lahko sproži začaran krog, ki dodatno poslabša nefrogenezo.
Presnovne prilagoditve na hipoksijo povzročijo izrazito glikolizo v ledvicah ploda
Kronična hipoksija je hudo stanje, na katerega se morajo celice prilagoditi s presnovnimi spremembami, da preživijo. Predvsem pri tem je vzdrževanje celične proizvodnje ATP, ki v odsotnosti zadostne oksigenacije zahteva premik od oksidativne fosforilacije k glikolizi. Od vseh izrazov, ki izhajajo iz funkcionalne opombe, je bil "glikolitični proces" najpomembnejši (slika 2B). Vseh deset encimov (rdeči ①–⑩ na sliki 5A), potrebnih za pretvorbo glukoze v piruvat, je bilo induciranih vfetalne hipoksične ledvicev primerjavi z normoksičnimi kontrolami (toplotni zemljevid je prikazan na sliki 5C). Poleg tega je bilo okrepljeno tudi izražanje transporterja glukoze 1 (SLC2A1, oranžna na sliki 4A) in laktat dehidrogenaze A (LDHA, temno rdeča na sliki 5A), kar naj bi olajšalo povečan privzem glukoze v celico in povečano zmanjšanje piruvata v laktat oz. Zdi se, da je alternativno uporabo piruvata v ciklu citronske kisline ovirala (1) povečana ekspresija piruvat dehidrogenaze kinaze 1 (PDK1, temno rdeča na sliki 5A), ki inaktivira kompleks piruvat dehidrogenaze v mitohondrijih in s tem oksidacijo piruvata. na acetil-CoA; in (2) z znižanimi nivoji piruvat karboksilaze (PC), ki katalizira pretvorbo piruvata v oksaloacetat. Po drugi strani se je fruktoza-1,6-bisfosfataza 1 (FBP1, modra na sliki 5A) zmanjšala, kar je dodatno povečalo potencialni tok glukoze proti piruvatu. Vse te encimske spremembe dajejo prednost proizvodnji laktata in res je bila koncentracija laktata povečana v hipoksičnih fetalnih ledvicah (slika 5B). Povečana proizvodnja laktata lahko povzroči neugodno zakisanje. Kljub temu smo med obogatenimi proteini našli monokarboksilatna prenašalca SLC16A3 in SLC5A8 (oranžna na sliki 5A), za katera je znano, da izločata laktat v zunajcelični prostor, da bi se izognili toksičnim učinkom zakisljevanja citoplazme. Tako naš model dokazuje izjemno sposobnost fetalnih ledvic, da se prilagodijo kronični hipoksiji s povečanjem glikolitične aktivnosti,
FIG. 3. Tvorba novih nefronov pri hipoksiji je povezana z zatrto replikacijo DNK in sintezo beljakovin. Mreža beljakovinskih interakcij bistveno spremenjenih proteinov, ki vežejo DNK in RNK, izpeljana iz baze podatkov STRING, prikazuje več grozdov proteinov: ribosomske beljakovine (modre), beljakovine, ki sodelujejo pri replikaciji DNK (zeleno), popravljanje DNK (vijolično) in spajanje mRNA ( rdeča). Označevalec proliferacije Ki67 (Mki67) je označen s črno, kar poudarja njegovo tesno povezavo s popravljanjem DNK in replikacijo DNK. B, izbor poti bistveno spremenjenih proteinov, ki vežejo DNA in RNA, iz baz podatkov KEGG in Reactome, ki so pokazale najbolj izrazite spremembe vhipoksične ledvice, prikazano v padajočem vrstnem redu glede na pomembnost. Procesi spajanja RNA in razgradnje RNA so bili obogateni (rdeče), medtem ko so bile poti prevajanja RNA, replikacije DNA in poti popravljanja potlačene (modro). Samo procesi z FDR<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
FIG. 4. Beljakovine, ki sodelujejo pri vnetnem odzivu in oksidativnem stresu, so obogatene v novonastalih nefronih pod hipoksijo. A, prikaz vseh 34 pomembno spremenjenih proteinov za opombo, imenovano degranulacija nevtrofilcev (rožnati krogi) med vsemi pomembnimi (večji sivi krogi) in nepomembnimi (manjši sivi krogi) proteini našega nabora podatkov. 29 jih je imelo višjo stopnjo številčnosti, pet pa zmanjšano. B, toplotni zemljevid, ki prikazuje vse rožnate beljakovine v (A) in njihovo indukcijo ali zatiranje pri hipoksiji, prikazano v padajočem vrstnem redu glede na številčnost beljakovin. C–H, reprezentativne imunohistokemične slike E18.5 normoksičnih ozhipoksične ledvicekaže infiltracijo nevtrofilcev in oksidativni stres. C in D, imunohistokemija za nevtrofilni marker mieloperoksidazo (MPO) je razkrila združevanje teh celic v bližini novonastalih nefronov (zvezdica) in ob ledvičnih krvnih žilah (puščica) hipoksičnih fetalnih ledvic (D). V normoksičnih kontrolah (C) so bile MPO-pozitivne celice redko prisotne. (Lestvica 100 μm). E in F, imunohistokemija, ki prikazuje povečano izražanje kaveolina -1 (CAV1) v ledvičnih krvnih žilah hipoksičnih fetalnih ledvic (F) v primerjavi s kontrolami (E) (lestvica 200 μm). G in H, 8-hidroksi-2′-deoksigvanozin (8-OHdG), označevalec oksidativne poškodbe DNA, je bil vidno povečan v novonastalih nefronih (zvezdica) v ledvični skorji in v celice proksimalnih tubulov (puščica) hipoksičnih ledvic (H), medtem ko je bilo v normoksičnem tkivu (G) obarvanih le nekaj celic (lestvica 200 μm). I in J je do tega povečanja poškodbe DNA prišlo kljub hkratnemu zvišanju O-6-metilgvanin-DNA metiltransferaze (MGMT; neparni dvorepi t test, p=0.0002) (I) in {{ 15}}okso gvanin glikozilaza (OGG1; neparni dvorepi t-test, p=0.0063) (J), dva encima, ki sodelujeta pri popravljanju oksidirane DNA.
ki zagotavlja zadostno proizvodnjo ATP in preživetje v teh neugodnih razmerah.
Fetalna hipoksija spodbuja kompenzacijski uvoz mitohondrijskih beljakovin in sestavljanje dihalne verige
Poleg povečane glikolize smo ugotovili več sprememb v ravni številčnosti mitohondrijskih beljakovin (toplotni zemljevid je prikazan na dodatni sliki S4). Generiranje proteinskih mrež z uporabo STRING je razkrilo več grozdov, ki vsebujejo proteine, vključene v translokacijo proteinov v mitohondrijo, oksidativno fosforilacijo in mitohondrijske ribosomske proteine (sl. 5, D in E). Omeniti velja, da je bilo induciranih več proteinov, povezanih z notranjo mitohondrijsko membrano, mestom, kjer poteka oksidativna fosforilacija (OXPHOS). OXPHOS obsega pet multiproteinskih kompleksov, razporejenih vzdolž notranje mitohondrijske membrane. Med induciranimi proteini so bile komponente kompleksov OXPHOS (NDUSF6), III (UQCR10), IV (COX6B1, COXC in COX7A2) in V (ATP5J, MTATP8), pa tudi UQCC3 in SCO2, ki sta potrebna za pravilno sestavljanje in delovanje kompleksa oziroma IV (slika 5D in dodatna slika S4). SDHC in SDHD, podenoti kompleksa ll, sta bili prav tako povečani (1.6- oziroma 2.5-krat), vendar nista dosegli statistične pomembnosti. Poleg tega v plodu niso bile obogatene le komponente dihalne verigehipoksične ledvice, temveč tudi množico beljakovin, ki posredujejo pri njihovem uvozu v mitohondrije. To je vključevalo člane translokaze zunanje membrane (TOM - TOMM22) in kompleksa translokaze notranje membrane TIM22 (TIMM22, TIMM9 in TIMM10 ter pripadajočega kompleksa TIMM8-TIMM13-) (slika 5D in dodatna slika Med 21 mitohondrijskimi proteini z zmanjšano številčnostjo so bili štirje mitohondrijski ribosomski proteini, pa tudi proteini, vključeni v katabolizem aminokislin, biosintezo vitaminov ali beta-oksidacijo maščobnih kislin (slika 5, D in E ter dodatna slika 1). S4) Te ugotovitve kažejo na preprečevanje morebitne mitohondrijske disfunkcije in očitnih prizadevanj za regeneracijo poškodovanih beljakovin (34), kljub povečani glikolizi in splošni zmanjšani sintezi beljakovin.
Lizosomska biogeneza in avtofagija sta izboljšaniHipoksične fetalne ledviceLizosom je bil drugi organel, za katerega se zdi, da je obogaten v hipoksičnih pogojih. Toda v primerjavi z mitohondriji, kjer je bilo zmanjšanih 36 % beljakovin, so bile skoraj vse beljakovine, povezane z lizosomi, regulirane navzgor (sl. 6, A in B). Med njimi je bilo devet lizosomskih kislinskih hidrolaz, ki predstavljajo skoraj 20 % lizosomskih kislinskih hidrolaz, označenih v poti KEGG za lizosome: štiri proteaze (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), tri glikozidaze (GAA, NAGA, NEU1), lizosomska kisla fosfataza 2 (ACP2) in lizosomska kislinska lipaza A (LIPA). Poleg tega smo našli dokaze za povečano biogenezo lizosomov in sorodnih organelov. Tri od osmih komponent BLOC1 (biogeneza kompleksa organelov, povezanih z lizosomom 1) so bile znatno inducirane (sl. 6, C–E), kot tudi prenašalec izmenjave H/Cl 5 (CLCN5), ki je ključni igralec v zakisanje endosomov (slika 6F). Omeniti velja, da ima Snapin (BLOC1 podenota 7) tudi vlogo pri lizosomskem zakisljevanju ter pri zorenju in delovanju avtofagosomov. Drugi inducirani proteini, za katere je znano, da igrajo vlogo pri avtofagiji, so bili Atg7 in Bnip3 (sl. 6, G in H). Druga zahteva za avtofagni tok je perinuklearno združevanje lizosomov v grozde, posredovano z lizosomskim kompleksom Ragulator (35, 36) in dvema nasprotujočima si družinama motoričnih proteinov. Presenetljivo je, da so bili štirje od petih članov podenot odra regulatorja (LAMTOR1, 2, 3 in 5) znatno inducirani (sl. 6, A in B); LAMTOR4 je bil prav tako 1.81-krat induciran, vendar ni dosegel statistične pomembnosti. Poleg tega so kinezini, ki posredujejo gibanje organelov navzven, pokazali težnjo po potlačitvi, medtem ko so bili inducirani člani družine dynein, ki olajšajo gibanje navznoter, čeprav niso bili statistično pomembni (dodatna slika S5). Te ugotovitve skupaj zagotavljajo trdne dokaze, da je gospodinjska funkcija lizosomov okrepljena vfetalne hipoksične ledvice, popolnoma združljiv s pričakovano potrebo po obnovi poškodovanih mitohondrijev.
Prezgodaj
Staranje ponazarja Janusove vidike hipoksične prilagoditve V nasprotju s kompenzacijskimi mehanizmi popravljanja in pomlajevanja smo našli 15 dereguliranih proteinov, ki pripadajo izrazu GO "staranje" (slika 7A), ki predstavljajo tretjo kategorijo hipoksičnih prilagoditev: pospešeno staranje . Medtem ko ima večina teh proteinov vlogo pri enem od zgoraj opisanih procesov degranulacije nevtrofilcev in lizosomov (MIF, MPO, PSEN1), mitohondrijev (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), glikolize (ALDOC) in popravljanja DNA (OGG1) ; za nekatere je bilo opisano, da neposredno vplivajo na življenjsko dobo miši. Zlasti je bila številčnost beljakovin klotho in sirtuina 6 zmanjšana pri E18.5 hypoxicfetalne ledvice(sl. 7, B in C). Sirtuin 6 je povsod izražen encim z aktivnostjo proteinske deacetilaze in mono-ADP ribozil transferaze, ki sodeluje pri uravnavanju več celičnih funkcij, vključno z vnetjem, glikolizo in popravljanjem DNA. Njegov knockout vodi do hude progerije pri miših z zmanjšano življenjsko dobo od 1 do 3 mesece (37, 38). Ledvica je glavno mesto sinteze kloto (tj. distalni zaviti tubul – DCT prispeva večino proteina z dodatno sintezo v proksimalnih zavitih tubulih), kjer deluje lokalno kot membransko vezana beta-glukuronidaza. Zdi se, da je zmanjšana številčnost klotha specifičen proces, saj drugi proteini DCT, vključno s CALB1, niso bili spremenjeni. Klotho se izloča tudi v krvni obtok bodisi s cepitvijo zunajceličnega dela membransko vezane oblike bodisi s prevajanjem alternativne variante spoja. Raven krožečega klotha (sKL) se s starostjo zmanjšuje (39, 40), kar nas je spodbudilo k oceni njegove koncentracije in koncentracije sirtuina 6 v krvi trupa hipoksičnih ali normoksičnih fetusov E18.5. Dejansko sta bili koncentraciji sKL in sirtuina 6 znatno zmanjšani pri hipoksičnih plodovih E18.5 (sl. 7, D in E). Poleg tega in kar je pomembno, so bile serumske ravni klotha in sirtuina 6 še vedno znatno znižane pri starih miših (slika 7, F in G), kar kaže na trajno zmanjšanje teh dveh beljakovin skozi vse življenje. Za Klotho se zdi, da je to posledica znatno zmanjšanih ravni izražanja mRNA v ledvicah 15-mesečnih hipoksičnih potomcev (slika 7H). Vendar pa so bile ravni ledvične mRNA ekspresije sirtuina 6 nespremenjene med starimi normoksičnimi in hipoksičnimi mišmi (slika 7I). Poleg tega se je izkazalo, da so spremembe v metilaciji DNA eden najpomembnejših mehanizmov ne le za obnovo in diferenciacijo nefronskih matičnih celic (41), temveč tudi za izražanje kloto (42, 43). Vendar pa je bil v nasprotju s hipermetilacijo Mki67 (sl. 3F) promotor klotho hipometiliran med kronično hipoksijo (dopolnilna slika S6). Vzorca metilacije Sirt6 ni bilo mogoče določiti. Kolikor nam je znano, je naš model IUGR prvi, ki opisuje mehanizem, ki vodi do fenotipa prezgodnjega staranja, s sinergijo vnetnih poškodb, neučinkovitega popravljanja, spremenjenega metabolizma in zmanjšane količine proteinov proti staranju, ki se pojavljajo že ob rojstvu.
Zmanjšanje beljakovin proti staranju kot odziv na kronično hipoksijo je ohranjeno med mišmi in ljudmi V zadnjem nizu poskusov smo vprašali, ali je medsebojno delovanje med kronično hipoksijo in zmanjšanimi serumskimi ravnmi proteinov proti staranju evolucijsko ohranjen pojav. V ta namen so bili vzorci seruma iz nadzorovane študije (10) devetih zdravih prostovoljcev (osem moških, ena ženska) zbrani 2 tedna prej (na gladini morja, SL) v treh časovnih točkah v neprekinjenem 28-dnevu bivanja na 3454 m (visoka nadmorska višina, HA3, HA9, HA28) in 1, 7 in 14 dni po vrnitvi v SL (RSL1, RSL7, RSL14) smo analizirali za sKL in SIRT6 (slika 8). Vzorci, pridobljeni na SL, so služili kot kontrola za vsakega udeleženca. Serumski ravni sKL in SIRT6 sta se zmanjšali na visoki nadmorski višini in obe sta dosegli statistično pomembnost pri H28. Po vrnitvi na morsko gladino se je sKL povečal na višje ravni kot pred bivanjem na visoki nadmorski višini pri RSL7 in se je vrnil v normalno stanje pri RSL14 (slika 8A). Po drugi strani pa je SIRT6 še naprej upadal po vrnitvi na gladino morja in se začel spet nagibati šele pri RSL14 (slika 8B), kar kaže na diferencialno regulacijo teh dveh proteinov proti staranju. Če povzamemo, te ugotovitve kažejo, da lahko zmanjšane ravni kloto in sirtuina 6 v serumu na splošno zahtevajo izpostavljenost kroničnim hipoksičnim stanjem in lahko tako predstavljajo evolucijski zelo ohranjen proces.
Podporna storitev Wecistanche-največjega izvoznika cistanche na Kitajskem:
E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/telefon:+86 15292862950
Trgovina za več podrobnosti o specifikacijah:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
