Učinek vodnega izvlečka Cistanches Herba na izgubo kosti pri podganah z ovariektomijo
Mar 04, 2022
Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com
Haidong Liang 1,*, Fang Yu 2, Zhihong Tong 1 in Zaiguo Huang 3
1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn
2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn
3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com
Povzetek:Da bi ocenili sposobnost izvlečka tradicionalne kitajske medicine Cistanches Herba (CHE), da prepreči izgubo kosti pri podganah z ovariektomijo (OVX), so podganam intragastrično dajali izvleček Cistanches Herba (CHE). Samice podgan so bile anestezirane z natrijevim pentobarbitalom (40 mg kg-1, ip) in jajčniki so jim bili obojestransko odstranjeni. Podgane v navidezno operirani skupini so bile anestezirane, laparotomijene in zašite, ne da bi jim odstranili jajčnike. Po 1 tednu okrevanja po operaciji so bile podgane OVX naključno razdeljene v tri skupine in 3 mesece peroralno zdravljene s H2O (skupina OVX) ali CHE (100 ali 200 mg kg-1 dnevno). Lažno operirana skupina (n=8) je bila peroralno zdravljena s H2O. Po 3 mesecih so pri lažno operiranih podganah, ovariektomiranih in zdravljenih z izvlečkom Cistanches Herba pregledali celotno telesno mineralno gostoto kosti (BMD), vsebnost mineralov v kosteh (BMC), biomehanski indeks kosti, ravni mineralov v krvi in aktivnosti antioksidativnih encimov v krvi. Rezultati so pokazali, da je zdravljenje z izvlečkom Cistanches Herba znatno, odvisno od odmerka, povečalo mineralno gostoto kosti (BMD), vsebnost mineralov v kosteh (BMC), največjo obremenitev, premik pri največji obremenitvi, stres pri največji obremenitvi, obremenitev pri samodejnem prelomu, premik ob samodejnem prelomu , in stres ob samodejnem premoru ter aktivnosti antioksidativnih encimov v krvi, znižale ravni Ca, Zn in Cu v krvi v primerjavi s skupino OVX. Ta poskus dokazuje, da dajanje izvlečka Cistanches Herba podganam z ovariektomijo obrne izgubo kosti in prepreči osteoporozo.
Ključne besede:ovariektomija; podgana; kost; antioksidant; Cistanches Herba
1. Uvod
Osteoporoza je bolezen staranja, povezana z izgubo kostne mase, ki se pogosto pojavi brez simptomov, dokler poslabšanje mikroarhitekture ne postane tako pomembno, da pride do zloma kosti vedno na točki, kjer je zmanjšanje kostne mase pod tisto, kar je potrebno za celovitost kosti. Osteoporoza ima v skrbi za zdravje velik pomen. Čeprav imajo zmanjšano maso, so kosti normalne glede na mineralizacijo, histološko pa je prišlo do zmanjšanja debeline korteksa ter števila in velikosti trabekul grobe gobeste kosti [1–3].
V zadnjih letih je bilo izvedenih veliko študij o tej bolezni. Kopičenje podatkov je pokazalo, da izguba estrogena v menopavzi pomembno prispeva k patogenezi bolezni, ker je ta hormon glavni negativni regulator aktivnosti osteoklastov [4–6], osteoklasti pa so glavne celice, odgovorne za preoblikovanje kosti pri osteoporozi. [7].
Postmenopavzalna osteoporoza je najpogostejša presnovna bolezen kosti, za katero je značilna hitra izguba mineraliziranega kostnega tkiva, motnje trabekularne arhitekture kosti in spremembe kristalnih lastnosti mineralnih usedlin, kar ima za posledico strukturno odpoved (zlom) kosti. mesta, bogata s spužvasto kostjo, kot so vretence, kolk in distalna podlaket [8–11]. Pomanjkanje estrogena velja za glavni dejavnik izgube kostne mase pri ženskah po menopavzi. Ovariektomirane podgane in psi so bili v veliki meri uporabljeni v modelih osteoporoze. Leta 1996 so poročali o učinkih ibandronata na ovariektomirane pse [12].
Cistanches Herba (CH), holoparazitska rastlina Cistanche deserticola YC Ma, je v orientalski tradicionalni medicini razvrščena kot tonificirajoče sredstvo in se običajno uporablja za zdravljenje pozabljivosti, izgube sluha, neplodnosti in kroničnega zaprtja. CH ima različne farmakološke aktivnosti, vključno z antinociceptivnimi, protivnetnimi in imunskimi učinki [13, 14]. Prejšnja študija je poročala, da lahko Cistanches Herba vodi kostne mezenhimske matične celice (BMSC), da se diferencirajo v osteoblaste, kar obljublja ugodne možnosti za zdravljenje osteoporoze in ločevanja zlomov kosti [15]. Chen et al. [16] so poročali, da lahko polisaharidi Cistanches Herba spodbujajo prehod celičnega cikla kostnega mozga in okrevanje hematopoetske funkcije pri anemičnih miših z depresijo kostnega mozga, pospešujejo hematogenezo pri sevu rubrum in sevu makronukleusa.
V tej študiji so preučevali mineralno gostoto kosti (BMD), vsebnost mineralov v kosteh (BMC), biomehanski indeks kosti, ravni mineralov v krvi in aktivnosti antioksidativnih encimov v krvi pri lažno operiranih, ovariektomiranih in zdravljenih s Cistanches Herba podganah, da bi preučili učinke zdravljenja. z izvlečkom Cistanches Herba na kakovost kosti.
Tradicionalna kitajska medicina Cistanches Herba ekstrakt (CHE)
2. Materiali in metode
2.1. Priprava vodnih izvlečkov Cistanches Herba
Cistanches Herba je bila leta 2010 nabrana v puščavi v ligi alxa v avtonomni regiji Nei Monggol (Notranja Mongolija).
Posušeno steblo Cistanches Herba smo 2 uri ekstrahirali z destilirano vodo pri 100 stopinjah. Raztopino centrifugiramo pri 4000 vrt/min 10 minut. Ostanke odstranimo s filtracijo in združeni filtrat uparimo s segrevanjem, da dobimo želeno koncentracijo (2,1 g suhega rastlinskega ekvivalenta ekstrakta/mL). Donos ekstrakcije je bil 13,7 odstotka (m/m). Vodni ekstrakt smo hranili pri 2–8 stopinjah.
2.2. Živali
Za študijo smo uporabili 32 podganjih samic Wistar, starih 3 mesece, ki so na začetku poskusa tehtale med 240 in 270 g. Vzdrževali so jih v standardnih laboratorijskih pogojih z 12-urnim ciklom svetlobe in teme, s prostim dostopom do standardne laboratorijske hrane za podgane in vode iz pipe.
2.3. Poskusi na živalih.
Samice podgan so bile anestezirane z natrijevim pentobarbitalom (40 mg kg-1, ip) in jajčniki so jim bili obojestransko odstranjeni. Podgane v navidezno operirani skupini so bile anestezirane, laparotomijene in zašite, ne da bi jim odstranili jajčnike. Po 1 tednu okrevanja po operaciji so bile podgane OVX naključno razdeljene v tri skupine (n=8 v vsaki skupini) in intragastrično zdravljene s H2O (skupina OVX), ekstraktom Cistanches Herba (CHE) (100 ali 200 mg kg −1 na dan) 3 mesece. Lažno operirana skupina (n=8) je bila peroralno zdravljena s H2O.
Zadnji dan študije so bile živali stehtane in žrtvovane ter sočasno odvzeti vzorci krvi. Stegnenice so bile razrezane in osvobojene mehkega tkiva za merjenje biomehanskega testiranja.
Vsi poskusi so bili izvedeni v skladu z raziskovalnimi protokoli, ki jih je določil kitajski odbor za nego živali.
2.4. Kostna denzitometrija
Mineralna vsebnost femoralne kosti (BMC) in mineralna gostota kosti (BMD) sta bili določeni z uporabo Hologic QDR{{0}}W DXA. Instrument je bil prilagojen za način ultravisoke ločljivosti z razmikom vrstic 0.{0254 cm, ločljivostjo 0,0127 cm in kolimatorjem s premerom 0,9 cm. Kosti so bile postavljene v petrijevko. Za simulacijo gostote mehkega tkiva, ki obdaja kosti, so okoli kosti nalili vodo iz pipe, da so dosegli globino 1 cm. Rezultati so podani za BMC in za izmerjeno površino. BMD tega območja se izračuna kot BMC deljeno s površino. Poleg rezultatov za celotno stegnenico sta bili kot podregiji analizirani distalni in srednji del stegnenice [17].
2.5. Biomehansko testiranje kosti
Kosti stegnenice so bile do določitve pretržne trdnosti shranjene pri 4 stopinjah z uporabo 5-kN Flexure Fixture, konfigurirane za preskuse tritočkovnega upogibanja in pritrjene na Instron Universal Testing Machine Model 4502, opremljen z 10- kN tehtalna celica (Instron, Canton, MA, ZDA), kot je opisano prej [18]. Hitrost križne glave je bila 50 mm/min, hitrost vzorčenja podatkov pa 10 vzorcev/s. Največja obremenitev, napetost pri največji obremenitvi, obremenitev ob odpovedi in napetost ob odpovedi so bile določene v stegnenicah s programsko opremo Series IX, v 8.08.00 (Instron).
2.6. Biokemijska analiza
Vsebnost Ca, Zn in Cu v krvi smo izmerili z atomsko absorpcijsko spektrofotometrijo.
Na podlagi metode Kinga in Armstronga [19] je bila aktivnost alkalne fosfataze (ALP) testirana z uporabo dinatrijevega fenil fosfata kot substrata. Razvito barvo smo po 10 minutah odčitali pri 510 nm v UV-vis spektrofotometru. Aktivnosti ALP so bile izražene kot i.e./l.
Koncentracijo krvnega malondialnega hemikalija (MDA) smo določili z uporabo metode, ki so jo opisali Jain et al. [20], ki temelji na reaktivnosti TBA. Na kratko, 0.2 mL eritrocitnih pelet ali supernatanta, pridobljenega iz tkiv, 0.8 mL fosfatnega pufra (pH 7,4), 0.025 mL BHT in { {19}}.5 mL 30 odstotkov TCA smo dodali v epruvete in premešali. Po 2 urah inkubacije pri -20 stopinjah smo mešanico centrifugirali (4000 × g) 15 minut. Po tem smo vzeli 1 ml supernatanta in ga dodali v vsako epruveto, nato pa 0,075 ml 0,1 M EDTA in
0. Dodali smo 25 ml 1-odstotnega TBA. Te epruvete z navojnimi pokrovčki, prevlečenimi s teflonom, smo inkubirali pri 90 stopinjah v vodni kopeli 15 minut in ohladili na sobno temperaturo. Optična gostota je bila izmerjena pri 532 za koncentracijo MDA v krvi.
Aktivnost glutation peroksidaze (GSH-Px) smo določili po metodi Lawrencea in Burka [21]. Testna mešanica je bila sestavljena iz 2.0 mL 75 mM fosfatnega pufra (pH 7.0), 50 μL 60 mM glutationa, {{15} }.1 ml 30 enot/ml glutation reduktaze, 0.1 ml 15 mM EDTA, 0,1 ml 3 mM NADPH in ustrezne količine tkivnega supernatanta do končne prostornine 3,0 ml . Reakcijo smo začeli z dodatkom 0,1 mL 7,5 mM H2O2. Hitrost spremembe absorbance med pretvorbo NADPH v NADP plus smo zabeležili spektrofotometrično pri 340 nm 3 minute. Aktivnost GSH-Px za tkiva je bila izražena kot μmoli NADPH, oksidiranega v NADP plus min-1 mg-1 proteina.
Aktivnost superoksid dismutaze (SOD) smo določali v krvi po metodi Suna in sod. [22]. Princip metode temelji na zaviranju redukcije nitromodrega tetrazolija (NBT) z uporabo sistema ksantin-ksantin oksidaze kot generatorja superoksida. Aktivnost je bila ocenjena v supernatantih 10000 g metanola/kloroforma (5/3, v/v) ekstraktov tkivnih homogenatov (10 odstotkov). Ena enota SOD je bila opredeljena kot količina encima, ki povzroči 50-odstotno inhibicijo stopnje zmanjšanja NBT.
Aktivnost katalaze (CAT) je bila izmerjena z uporabo Abeijeve [23] metode. Serum smo dodali v kiveto, ki je vsebovala 2,89 ml 50 mmol/L fosfatnega pufra (pH 7.0). Reakcijo smo sprožili z dodajanjem 0.1 mL sveže pripravljene 30 mmol/L H2O2, da smo dobili končni volumen 3,0 mL pri 25 stopinjah. Hitrost razgradnje H2O2 smo merili pri 240 nm 5 minut na spektrofotometru. Ena enota (U) CAT je bila opredeljena kot količina encima, ki je potrebna za razgradnjo 1 nmol H2O2 na minuto pri 25 stopinjah in pH 7,8.
2.7. Statistična analiza
Eksperimentalni rezultati so bili izraženi kot povprečje ± SD za osem živali v vsaki skupini. Biokemične parametre smo statistično analizirali z uporabo enosmerne analize variance ANOVA, ki ji je sledil Dunnettov test večkratne primerjave (DMCT). P-vrednost<0.05 was="" considered="" statistically="">
3. Rezultati
Dve živali sta med študijo umrli. Posledično so bile številke za skupine ob zaključku študije: 8 v lažni kontroli; 7 v skupini OVX; 7 v skupini, ki je prejemala CHE (100 mg kg-1 na dan), in 8 v skupini, ki je prejemala CHE (200 mg kg-1 na dan). Dva dni po operaciji je bil vnos hrane in vode pri podganah nekoliko manjši kot pred operacijo. Nobena žival ni utrpela okužbe in anabioze. Pri podganah niso opazili klinično očitnih neželenih učinkov.
Pred operacijo ni bilo pomembne (p > {{0}}.01) razlike v telesni teži podgan med skupinama. Telesna teža skupine OVX je bila značilno (p < 0.01)="" nižja="" kot="" pri="" lažni="" skupini="" (tabela="" 1).="" dajanje="" izvlečka="" cistanches="" herba="" v="" odmerkih="" 100="" in="" 200="" mg/kg="" na="" dan="" je="" značilno="" (p="">< 0,05)="" povečalo="" telesno="" težo="" podgan="" v="" skupini,="" zdravljeni="" s="" che="" (100="" in="" 200="" mg/kg="" na="" dan).="" podatki,="" pridobljeni="" na="" živalih,="" so="" pokazali,="" da="" obstajajo="" statistično="" značilne="" razlike="" med="" bmd="" in="" bmc="" skupine="" ovx="" in="" lažne="" kontrole="" (p="">< 0,01).="" kot="" je="" bilo="" pričakovano,="" je="" dajanje="" izvlečka="" cistanches="" herba="" v="" odmerku="" 200="" mg/kg="" povzročilo="" značilno="" povečanje="" bmd="" in="" bmc="" skupine,="" zdravljene="" s="" che="" (p="">< 0,05;="" p=""><>
4. Razprava
Osteoporoza je ena najpogostejših bolezni, povezanih s pomanjkanjem estrogena in staranjem. Posledica menopavze je povečana presnova kosti, neravnovesje med tvorbo in resorpcijo kosti ter neto izguba kosti. Izguba kosti zaradi pomanjkanja estrogena je predvsem posledica povečane osteoklastične resorpcije kosti pri ljudeh in poskusnih živalih [24].
Čeprav osteoporoza prizadene tako starejše moške kot ženske, so ženske po menopavzi primarno žarišče osteoporoze [25, 26]. Dramatično pomanjkanje ženskih hormonov je najpomembnejši dejavnik za osteoporozo pri ženskah po menopavzi. Podganji model OVX se najpogosteje uporablja v raziskavah postmenopavzalne osteoporoze [27, 28], pri kateri ovariektomija povzroči presežek resorpcije kosti nad nastajanjem kosti na začetku in povzroči izgubo kosti. Operacija OVX povzroči znatno povečanje telesne teže, kar je lahko vodilo za oceno uspešnosti operacije [29]. Ob koncu te študije se je telesna teža skupine OVX izrazito zmanjšala v primerjavi s skupino lažnih, zdravljenje z izvlečkom Cistanches Herba pa je to zmanjšanje v celoti preprečilo. Predvidevamo, da je OVX povzročil resno fiziološko nelagodje, ki je vplivalo na vnos hrane pri podganah. Kasneje se je telesna teža skupine OVX opazno zmanjšala.
Mineralna gostota kosti je bila opisana zgolj kot nadomestno merilo trdnosti kosti [30]; mikroarhitekturne lastnosti pa so na novo nastali marker za oceno resničnega vpliva zdravljenja na kakovost trabekularne kosti. Čeprav je nizka kostna masa glavni dejavnik tveganja za zlome [31], ohranjanje trabekularne kostne arhitekture znatno prispeva h trdnosti kosti in lahko zmanjša tveganje za zlome, ki presega MKG in BMC, kot so pokazale številne študije, ki so poročale o tesni korelaciji med mikrostrukturnimi lastnosti in biomehansko trdnost kosti [32,33]. V tem delu je bilo ugotovljeno, da se BMD in BMC bistveno razlikujeta med lažno in ovariektomirano skupino. Zdravljenje z izvlečkom Cistanches Herba je znatno povečalo BMD in BMC pri podganah OVX. Poleg tega je dajanje izvlečkov Cistanches Herba še vedno znatno, odvisno od odmerka, povečalo največjo obremenitev, premik pri največji obremenitvi, stres pri največji obremenitvi, obremenitev ob samodejnem prelomu, premik ob samodejnem prelomu in stres pri samodejnem prelomu v skupinah, zdravljenih s CHE. v primerjavi s skupino OVX. Ti rezultati so pokazali, da so imele stegnenice podgan, hranjenih z izvlečkom Cistanches Herba, večjo obremenitev ob odpovedi in so zato lahko bolj odporne na stresne zlome. Poleg tega so imele podgane v skupini OVX višje ravni Ca, Zn in Cu v krvi kot tiste v lažni skupini. Dajanje izvlečka Cistanches Herba je znižalo ravni Ca, Zn in Cu v krvi pri podganah OVX.
Zamisel, da je oksidativni status pomemben pri osteoporozi, je v skladu z močno epidemiološko povezavo med osteoporozo in aterosklerozo, boleznijo, pri kateri ima oksidativni stres pomembno vlogo. Poleg tega je bilo nedavno opaženo, da pri ženskah obstaja povezava med oksidativnim stresom (merjenim z biomarkerjem oksidativnega stresa 8-iso-PGF2-) [34], ravnmi antioksidantov [35] in mineralna gostota kosti. Klinične študije, ki so proučevale razmerje med prehranskim in/ali dodatnim askorbatom ter kostno maso pri ljudeh, prav tako kažejo na povezavo s povečano kostno maso [36].
Ker ima MDA visoko reaktivnost proti amino skupinam, zavira sintezo nukleinskih kislin in proteinov ter deaktivira tudi encime [37,38]. Tako je lahko zmanjšanje antioksidativnih encimov stegnenice, opaženo po OVX, posledica povečane peroksidacije lipidov. Antioksidativni encimi so vključeni v obrambni sistem pred poškodbami tkiv ali celic, ki jih povzročajo prosti radikali. Presnavljajo proste radikale ali reaktivne kisikove intermediate v neradikalske produkte. Ti encimi vključujejo družino encimov, odvisnih od glutationa [39]. V tej študiji poročamo o pomembnem znižanju ravni antioksidativnih encimov, tj. SOD, GSH-Px, CAT v krvi podgan z ovariektomijo. Te ugotovitve kažejo, da je pomanjkanje ovarijskih hormonov povezano z nezmožnostjo boja proti oksidativnemu stresu. Dajanje ekstrakta Cistanches Herba pri podganah OVX znatno poveča aktivnosti SOD, GSH-Px in CAT v krvi, odvisno od odmerka. Zdi se, da ti rezultati kažejo na boljši zaščitni učinek izvlečka Cistanches Herba proti oksidativnemu stresu, povzročenem med OVX.
Če povzamemo, izvleček Cistanches Herba je učinkovit pri preprečevanju izgube kosti zaradi pomanjkanja jajčnikovega hormona, kot je razvidno iz BMD stegnenice, BMC vrednosti in ravni Ca, Zn in Cu v krvi. Ker je osteoporoza povezana z oksidativnim stresom, tovrstne študije potrjujejo pomen terapevtskih vrednosti antioksidantov. Predvidevamo, da izvleček Cistanches Herba izboljša kakovost kosti, po možnosti delno s povečanjem aktivnosti antioksidativnih encimov OVX podgan in zmanjšanjem mineralnih elementov kosti.
Izvleček Cistanches Herba: preprečuje izgubo kostne mase
Reference
1. Canalis, E.; Giustina, A.; Bilezikian, JP Mehanizmi anaboličnih terapij za osteoporozo. N. angl. J. Med. 2007, 357, 905–916.
2. Heaney, RP; Recker, RR; Saville, PD Menopavzalne spremembe pri remodeliranju kosti. J. Lab. Clin. Med. 1978, 92, 964–970.
3. McNamara, LM; Ederveen, AGH; Lyons, CG; Price, C.; Schaffer, MB; Weinans, H.; Prendergast, PJ Trdnost gobastega kostnega trabekularnega tkiva normalnih, ovariektomiziranih in z zdravili zdravljenih podgan med staranjem. Kost 2006, 39, 392–400.
4. Compston, JE Hormonsko nadomestno zdravljenje. Clin. Rheumatol. 1997, 11, 583–596.
5. Meiner, SE Širječa pokrajinska osteoporoza: Možnosti zdravljenja danes. Adv. Medicinska sestra.1999, 7, 26–31.
6. Aubin, JE; Bonnelye, E. Osteoprotegerin in njegov ligand: nova paradigma za regulacijo osteoklastogeneze in resorpcije kosti. Osteoporoza. Int. 2000, 11, 905–913.
7. Roodman, GD Napredek v biologiji kosti: osteoklast. Endocr. Rev. 1996, 17, 308–332.
8. Kostanj, CH, III. Zdravljenje z zdravili: kalcitonin, bisfosfonati in anabolični steroidi. Pri osteoporozi: etiologija, diagnoza in zdravljenje; Riggs, BL, Melton, LJ, III, ur.; Lippincott-Raven: Philadelphia, PA, ZDA, 1995.
9. Quan, Q.-M.; Wu, W.; Li, Y.-X.; Cai, Q.-R. Spremembe vsebnosti ikariina in flavonoidov v vrstah Barrenwort. J. Med. Rastline Res. 2010, 4, 1176–1181.
10. Du, XG; Pan, HZ; Zhang, CY; Zhang, HY; Liu, HM; Chen, ZY; Zeng, XY Izvleček Zingiber officinale modulira imunosupresijo, ki jo povzročajo g-žarki pri miših. J. Med. Rastline Res. 2010, 4, 1647–1655.
11. Paschalis, EP; Betts, F.; DiCarlo, E.; Mendelsohn, R.; Boskey, AL FTIR mikrospektroskopska analiza biopsij človeškega ilijačnega grebena iz neobdelane osteoporotične kosti. Calcif. Tissue Int. 1997, 61, 487–492.
12. Motoie, H.; Kanoh, H.; Ogata, S.; Kawamuki, K.; Shikama, H.; Fujikura, T. Preprečevanje izgube kosti z bisfosfonatom YM175 pri ovariektomiranih psih z omejitvijo kalcija v prehrani. Jpn. J. Pharmacol. 1996, 71, 239–246.
13. Lin, LW; Hsieh, MT; Tsai, FH; Wang, WH; Wu, CR Antinociceptivno in protivnetno delovanje, ki ga povzroča Cistanche deserticola pri glodavcih. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177–182.
14. Wu, XM; Gao, XM; Tsim, KW; Tu, PF. Arabinogalaktan, izoliran iz stebel Cistanche deserticola, inducira proliferacijo gojenih limfocitov. Int. J. Biol. Macromol. 2005, 37, 278–282.
15. Zeng, JC; Fan, YG; Liu, JR; Zeng YR; Yi, CZ; Liang Y. Eksperimentalna študija usmerjene diferenciacije kostnih mezenhimskih matičnih celic (BMSC) v osteoblaste, ki jih vodi cistanche deserticola, ki vsebuje serum. Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606–608.
16. Chen, Z.-W.; Zhu, B.-D.; Xu H.-Y. Eksperimentalna študija polisaharidov cistanche, ki živijo v puščavi, na regulirano hematogenezo pri miših z depresijo anemije v kostnem mozgu. brada. Arh. Tradicija. brada. Med. 2007, 25, 1473–1474.
17. Prakasam, G.; Ja, JK; Chen, M.-M.; Castro-Magana, M.; Liang, CT; Aloia, JF Učinki rastnega hormona in testosterona na kortikalno tvorbo kosti in gostoto kosti pri starih ovariektomiranih podganah. Kost 1999, 24, 491–497.
18. McClung, JP; Stahl, CH; Marchitelli, LJ; Morales-Martinez, N.; Makin, KM; Young, AJ; Scrimgeour, AG Učinki prehranske fitaze na povečanje telesne mase, telesno sestavo in biomehaniko kosti pri rastočih podganah, hranjenih z nizko vsebnostjo cinka. J. Nutr. Biochem. 2006, 170, 190–196.
19. Kralj, EJ; Armstrong, AR Priročna metoda za določanje aktivnosti seruma in žolčne fosfataze. Lahko. Med. Izr. J. 1934, 31, 376–381.
20. Jain, SK; McVie, R.; Duett, J.; Herbst, JJ Peroksidacija lipidov membrane eritrocitov in glikoziliran hemoglobin pri sladkorni bolezni. Diabetes 1989, 38, 1539–1543.
21. Lawrence, RA; Burk, RF Aktivnost glutation peroksidaze v jetrih podgan s pomanjkanjem selena. Biochem. Biophys. Res. Komun. 1976, 71, 952–958.
22. Sonce, Y.; Oberley, LW; Ying, L. Preprosta metoda za klinično analizo superoksid dismutaze. Clin. Chem. 1988, 34, 497–500.
23. Abei, H. Katalaza in vitro. Metode Enzymol. 1988, 10, 121–126.
24. Mozaffari, Z.; Azarnija, M.; Abdolhamid Angaji, S. Vrednotenje toksičnih učinkov vodnega ekstrakta listov Trigonella foenum-graecum na razvoj dolgega kostnega tkiva pri plodu podgan. J. Med. Rastline Res. 2010, 4, 1148–1155.
25. Buencamino, MCA; Sikon, AL; Jain, A.; Thacker, HL Opazovalna študija o spoštovanju smernic za zdravljenje osteopenije. J. Zdravje žensk 2009, 18, 873–881.
26. Schmitt, MN; Schmitt, J.; Dören, M. Vloga telesne dejavnosti pri preprečevanju osteoporoze pri ženskah po menopavzi - posodobitev. Maturitas 2009, 63, 34–38.
27. Lelovas, PP; Ksantos, TT; Thoma, SE; Besedila, GP; Dontasi, IA Laboratorijska podgana kot živalski model za raziskave osteoporoze. Comp. Med. 2008, 58, 424–430.
28. Ncango, DM; Pohl, CH; van Wyk, PWJ; Kock, JLF Nesteroidna protivnetna zdravila (NSAID) zavirajo rast patogenov kvasovk. Afr. J. Microbiol. Res. 2011, 5, 1123–1125.
29. Fazliana, M.; Nazaimoon, WMW; Gu, HF; Ostenson, CG Izvleček Labisia pumila uravnava telesno težo in adipokine pri podganah z ovariektomijo. Maturitas 2009, 62, 91–97.
30. Bourrin, S.; Ammann, P.; Bonjour, JP; Rizzoli, R. Obnovitev mineralne gostote in moči kosti proksimalne golenice, vendar ne strukture gobestih kosti, po dolgotrajni terapiji z bisfosfonatom ali selektivnim modulatorjem estrogenskih receptorjev pri starih podganah. Kost 2002, 30, 195–200.
31. Borah, B.; Dufresne, TE; Chmielewski, PA; Gross, GJ; Prenger, MC; Phipps, RJ Risedronat ohranja trabekularno arhitekturo in povečuje trdnost kosti v vretencu pri mini prašičih z ovariektomijo, merjeno s tridimenzionalno mikroračunalniško tomografijo. J. Kostni rudar. Res. 2002, 17, 1139–1147.
32. Müller, R.; Hannan, M.; Smith, SY; Bauss, F. Intermitentni ibandronat ohranja kakovost kosti in moč kosti v ledveni hrbtenici po 16 mesecih zdravljenja pri opici cynomolgus z ovariektomijo. J. Kostni rudar. Res. 2004, 19, 1787–1796.
33. Lane, NE; Kumer, JL; Majumdar, S.; Khan, M.; Lotz, J.; Stevens, RE; Klein, R.; Phelps, KV Učinki sintetičnih konjugiranih estrogenov (Cenestin) na trabekularno kostno strukturo in moč v modelu podgan z ovariektomijo. Osteoporosis Int. 2002, 13, 816–823.
34. Basu, S.; Michaelsson, K.; Olofsson, H.; Johansson, S.; Melhus, H. Povezava med oksidativnim stresom in mineralno gostoto kosti. Biochem. Biophys. Res. Komun. 2001, 288, 275–279.
35. Maggio, D.; Barabani, M.; Pierandrei, M.; Cristina Polidori, M.; Catani, M.; Mecocci, P.; Senin, U.; Pacifici, R.; Cherubini, A. Izrazito zmanjšanje plazemskih antioksidantov pri starejših ženskah z osteoporozo: rezultati presečne študije. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2003, 88, 1523–1527.
36. Morton, DJ; Barrett-Connor, EL; Schneider, DL Uporaba dodatka vitamina C in mineralna gostota kosti pri ženskah po menopavzi. J. Kostni rudar. Res. 2001, 16, 135–140.
37. Bird, RP; Draper, HH Vpliv malonaldehida in acetaldehida na gojene celice sesalcev: morfologija rasti in sinteza makromolekul. J. Okolje. Zdravje 1980, 6, 811–823.
38. Abdelhalim, MAK Potencialni vpliv oksidativnega stresa, ki ga povzroča prehrana z visokim holesterolom, na sestavo in lastnosti rdečih krvnih celic pri kuncih. Afr. J. Microbiol. Res. 2010, 4, 836–843.
39. Chaudiere, J.; Ferrari-Illiou, R. Znotrajcelični antioksidanti od kemičnih do biokemičnih mehanizmov. Food Chem. Toxicol. 1999, 37, 949–962.
