Učinkovitost kombiniranega zdravljenja z izvlečkoma Laminaria Japonica in Cistanche Tubulosa pri rasti las

Kyungha Shin1#, Tae-Su Kim2#, Jangbeen Kyung1, Dajeong Kim1, Dongsun Park1, Ehn-Kyoung Choi1, Sung-Pyo Lee2, Woong-Suk Yang2, Myung-Hwa Kang3, Yun-Bae Kim1*

1 Visoka šola za veterinarsko medicino, Narodna univerza Chungbuk, Cheongju, Koreja

2Misuba RTech Co., Ltd., Asan, Koreja

3Oddelek za živilstvo in prehrano, Univerza Hoseo, Asan, Koreja

Ker se je izpadanje las na lasišču v zadnjem času povečalo tudi pri mladih, kar resno vpliva na kakovost življenja posameznikov, so učinki izvlečka Laminaria japonica (LJE) in spodbujanja rasti las.Cistanche tubulosaekstrakta (CTE). Po potrditvi anagene faze foliklov pri britju so mišjim samcem C57BL/6 21 dni dermalno nanesli 3-odstotni minoksidil ali peroralno dajali kombinacije LJE in CTE. Minoksidil je pospešil ponovno rast las in povečal aktivnosti -glutamil transpeptidaze (-GTP) in alkalne fosfataze (ALP). Poleg tega je minoksidil zvišal raven epidermalnega rastnega faktorja (EGF) in vaskularnega endotelnega rastnega faktorja (VEGF). Sočasno dajanje LJE in CTE pri 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE je imelo sinergistične pospeševalne učinke na ponovno rast las, primerljive s 3 odstotki minoksidila. LJE je prednostno povečal aktivnost ALP, medtem ko je CTE povečal aktivnosti -GTP in ALP ter ekspresije EGF in VEGF. In vivo model vnetja zračne mešičke, s karagenanom povzročeno vaskularno eksudacijo in povečane koncentracije dušikovega oksida in prostaglandina E2 v eksudatih so sinergistično zavirali sočasno dajanje LJE in CTE. Poleg tega je kombinirano zdravljenje znatno zaviralo infiltracijo vnetnih celic. Rezultati kažejo, da kombinirano peroralno zdravljenje z LJE in CTE v ustreznih odmerkih in razmerjih preprečuje izpadanje las in izboljša alopecijo, ki je lahko delno posledica njihovega protivnetnega delovanja.

Ključne besede:Poraščenost, vnetje, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa,kombinirano zdravljenje

Za več informacij se obrnite na:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanchedeserticola ima veliko učinkov, kliknite tukaj, če želite izvedeti več

V zadnjem času izpadanje las na lasišču narašča tudi pri mladih, kar resno vpliva na kakovost življenja posameznika. Čeprav plešavost ne sodi med zdravstvene težave, lahko povzroči globok psihološko-neprijeten socialni stres. Zato je zelo zanimivo razviti nove preventivne in/ali terapevtske materiale za izpadanje in ponovno rast las. Kljub milijarde dolarjev vrednemu trgu je na voljo nekaj trenutno učinkovitih izdelkov [1]. Lasni mešički se preoblikujejo med cikličnimi obdobji rasti (anagen), regresije (katagen), mirovanja (telogen) in izpadanja (eksogen) [2]. Med katagenom,

veliko folikularnih celic je podvrženih programirani celični smrti (apoptozi) [3], kar zmanjša velikost foliklov, ko folikli vstopijo v telogen. Aktivacija redko krožečih epitelijskih izvornih celic, ki se nahajajo v izbočenem območju foliklov, povzroči regeneracijo foliklov na začetku naslednje anagene faze [4]. Potomci matičnih celic tvorijo nov folikularni matriks med zgodnjo anageno, lasno steblo in notranji koreninski ovoj pa izhajata iz teh relativno nediferenciranih matričnih celic [5]. Dobro je znano, da velikost lasnega mešička in trajanje anagene faze določata velikost (premer) in dolžino lasnega stebla. To ciklično rast las uravnavajo različni rastni dejavniki.

Minoksidil, finasterid in propecia so komercialno dostopni za upočasnitev izpadanja las in olajšanje ponovne rasti las. Minoksidil kot vazodilatator je povzročil stranski učinek na pospeševanje rasti las [6], kar je lahko posledica njegovega delovanja na oskrbo s hranili in odpiranje kalijevih kanalčkov [7,8]. Minoksidil je med drugimi zdravili za plešavost učinkovit pri androgeni alopeciji, čeprav njegova učinkovitost izgine v mesecih po prekinitvi zdravljenja. Za primerjavo, finasterid in propecia, terapevtika benigne hiperplazije prostate in raka prostate, sta bila v mnogih državah registrirana za androgeno alopecijo (moško plešavost). Finasterid in propecija sta sintetična antiandrogena, ki zavirata 5- reduktazo tipa II, encim, ki pretvori testosteron v dihidrotestosteron (DHT) v celicah papile na dnu lasnih mešičkov [9]. Laminaria japonica, Undaria pinnatifida in Cladosiphon okamuranus, ki so razširjene v mnogih državah, se že dolgo uporabljajo kot terapevtiki v orientalski medicini. V prejšnjih študijah je bil fukoidan, sulfatni polisaharidni kompleks, ekstrahiran in identificiran iz morskih alg in potrjeno, da ima antioksidativno, antikoagulativno, protirakavo in protivnetno delovanje [10,11]. Nato so bili dokazani koristni učinki fukoidana na vnetne bolezni, ishemijo, imunsko disfunkcijo in tumorje [12,13]. Po drugi strani,Izvleček Cistanche tubulosa(CTE) se pogosto uporablja tudi za tradicionalna zdravila na Kitajskem. CTE izboljša pretok krvi z znižanjem ravni holesterola v krvi [14]. Nedavno so poročali, da je CTE zmanjšal nastajanje faktorja tumorske nekroze (TNF-) in interlevkina-4 (IL-4), ki sta glavna dejavnika za nastajanje dušikovega oksida (NO) v vnetni poti. [15]. Dokazali smo tudi, da fukoidan iz ekstrakta Laminaria japonica (LJE) in CTE sinergistično oslabi vnetje in vitro in in vivo [16]. Predvsem je bilo dokazano, da obstaja tesna povezava med vnetjem kože (zlasti solzne žleze) in alopecijo [17]. Tako se pojavljajo protivnetni vidiki zdravljenja alopecije [18]. Na podlagi aktivnosti za izboljšanje krvnega pretoka in vnetja raziskujemo kombinacijsko učinkovitost LJE in CTE na rast las in osnovne mehanizme(-e) v primerjavi s 3-odstotnim minoksidilom (Hyundai Pharmaceutical, Seul, Koreja), dobro znanim zdravilom za lase. spodbujevalec rasti.

CistancheIzvleček proti izpadanju las

Materiali in Metode

Materiali

LJE in CTE sta bila pridobljena od Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Koreja). Posušen prah Laminaria japonica smo ekstrahirali v prečiščeni vodi pri 60oC 24 ur, filtrirali skozi 0,45 µm membrano, razkužili in posušili z razprševanjem. Cistanche tubulosa je bila ekstrahirana v 80-odstotnem etanolu, razkužena, koncentrirana in posušena. LJE in CTE smo hranili pri 4oC, zmešali (1:3) in pred uporabo raztopili v prečiščeni vodi ter dajali peroralno v volumnu 5 ml/kg.

Živali

Samci miši C57BL/6 za študijo rasti dlak in samci miši ICR za študijo vnetja so bili kupljeni pri Daehan Biolink (Eumseong, Koreja) in nameščeni v sobi s stalnimi okoljskimi pogoji (23±2ºC; 45-65 odstotkov relativne vlažnosti). ; 12-urni cikel svetlo-temno; 150-300 lux svetlost). Krma s peleti in prečiščena voda sta bili na voljo ad libitum. Vse poskuse na živalih je odobril Institucionalni odbor za oskrbo in uporabo živali (IACUC) Nacionalne univerze Chungbuk (CBNU), Koreja, izvedeni pa so bili v skladu s standardnimi operativnimi postopki (SOP) Centra za laboratorijske raziskave na živalih, CBNU.

Zdravljenje za rast las

Po potrditvi anagene faze z opazovanjem homogeno rožnate barve kože hrbtne kože miši C57BL/6 (starih 6 tednov, n=8/skupina) po striženju v telogeni fazi so dlake postrigli [1 ,19,20]. Od naslednjega dne smo izbrali miši brez vidnih prask in jim peroralno dali LJE (18 ali 54 mg/kg), CTE (54 ali 162 mg/kg) ali njihovo mešanico (18 plus 54 ali 54 plus 162 mg/kg) enkrat na dan 21 dni. Nizki odmerki LJE (18 mg/kg) in CTE (54 mg/kg) so bili iz ocenjenih odmerkov za človeka 100 mg/telo (70 kg) in 300 mg/telo po prevodu telesne teže na površino (Km{{23} } za človeka/Km=3 za miško). Visoki odmerki LJE in CTE so bili 3-kratni, sami ali v kombinaciji, da bi ocenili največje sinergijske učinke [16]. Minoksidil (3 odstotke, 0,2 ml) je bil lokalno nanesen enkrat na dan na obrito kožo po istem urniku kot zdravljenje z LJE/CTE.

Grobo opazovanje rasti las

V 3--dnevnih intervalih po britju in med zdravljenjem so miši rahlo anestezirali z dietil etrom in posneli fotografije na hrbtni strani. Razmerje med ponovno rastjo dlak (ponovno vraščena/obrita površina) na fotografijah je bilo analizirano z uporabo računalniškega sistema za analizo slik (Imageinside, Daejeon, Koreja).

Mikroskopski pregled lasnih mešičkov

14. in 21. dan so miši žrtvovali z globoko anestezijo z dietil etrom in jim odstranili hrbtne kože [1]. Hrbtno kožo smo razrezali na dva dela. S formalinom fiksirane, v parafin vdelane odseke tkiva (5 µm v premeru) enega dela smo obarvali s hematoksilin-eozinom, da bi pregledali število lasnih mešičkov in histološke izvide. Drugi del tkiva je bil zamrznjen v tekočem dušiku za encimski in imunski test.

Test encimske aktivnosti

Kožno tkivo smo homogenizirali v 4 volumnih fosfatnega pufra (pH 7,4). Homogenat centrifugiramo pri 3,000 obratih na minuto 20 minut in supernatant uporabimo za analizo aktivnosti -glutamil transpeptidaze (-GTP) in alkalne fosfataze (ALP) z uporabo p-nitrofenol fosfata (PNPP)-DEAV kot substrat [1,21].

Kvantifikacija rastnih faktorjev

Epidermalni rastni faktor (EGF) in vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF) sta bila kvantificirana z uporabo kompletov za encimski imunski test (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, ZDA) v skladu z navodili proizvajalca [1,22].

Zdravljenje vnetja

Miši ICR (stare 7 tednov, n=8/skupino) so bile peroralno zdravljene z LJE (18 ali 54 mg/kg), CTE (54 ali 162 mg/kg) ali njuno mešanico (18 plus 54 ali 54 plus 162 mg/kg) enkrat na dan 7 dni [16]. Prvi dan zdravljenja z LJE in CTE so miši subkutano injicirali 10 ml sterilnega zraka v zadnjo stran, da so oblikovali vrečko [16,23,24]. Po 2 in 5 dneh smo v vrečko ponovno vbrizgali 5 ml zraka. Eno uro po končnem zdravljenju z LJE in CTE je bil v vrečko vbrizgan 1 ml karagenana (1 odstotek v fiziološki raztopini; Sigma-Aldrich, St. Louis, ZDA) ali njegov nosilec (fiziološka raztopina).

Analiza eksudatov

Zračno vrečko smo sprali z 1 ml hladne fiziološke raztopine 6 ur po injiciranju karagenana in neto volumen

zabeležena je bila izpiralna tekočina [16]. Skupno število vnetnih celic, vključno z nevtrofilci, monociti in limfociti, je bilo določeno z uporabo števca Colter. Koncentracije NO in prostaglandina E2 (PGE2) smo določili z Griessovim reagentom (Sigma-Aldrich) in

encimski imunski test (EIA) z uporabo kompleta Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, ZDA) [16].

Cistancheizvleček proti staranju in izpadanju las

Statistična analiza

Podatki so predstavljeni kot povprečje±standardna napaka. Statistična značilnost je bila določena z enosmerno analizo variance, ki ji je sledil posthoc Tukeyjev test večkratne primerjave. P-vrednosti<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Rezultati

Uporaba minoksidila (3 odstotke), referenčnega materiala, je opazno olajšala rast dlak pri miših C57BL/6, saj je pokazala skoraj popolno pokritost (92,4 odstotka) obritega področja (sliki 1, 2B) v primerjavi z 29,2 odstotka pri normalnih miših. rast (sliki 1, 2A) na 21. dan. Čeprav je peroralno zdravljenje z LJE manj učinkovito kot nanos minoksidila, je pospešilo tudi rast dlak, kar je povzročilo 33,5 oziroma 69,1-odstotno pokritost pri 18 oziroma 54 mg/kg (sliki 1, 2C, 2D). CTE je bil učinkovit tudi pri povečanju rasti las, saj je dosegel 73,6 in 80,4 odstotka

pokritost pri 54 oziroma 162 mg/kg (slike 1, 2E, 2F). Predvsem je kombinirana terapija z visokimi odmerki LJE (54 mg/kg) in CTE (162 mg/kg) izjemno povečala rast las od 12. dne, primerljivo z učinkom minoksidila (sliki 1, 2H), čeprav nizki odmerki LJE (18 mg/kg) in CTE (54 mg/kg) imata sinergistični učinek le v zgodnji fazi (sliki 1, 2G).

V primerjavi z običajnimi lasnimi mešički (slika 3A) je uporaba minoksidila izboljšala celovitost lasnih mešičkov, pri čemer so bili vidni večji mešički in debelejše lasne stebla (slika 3B). Takšne učinke so našli tudi na koži miši, zdravljenih z LJE in/ali CTE (slike 3C-3H). Učinkovitost krepitve lasnih mešičkov pri kombiniranem zdravljenju LJE in CTE je bila primerljiva z učinkovitostjo minoksidila.

Uporaba minoksidila je povečala aktivnost -GTP, ki inducira lasne mešičke v anageno fazo za 90-120 odstotkov

14. in 21. dan v primerjavi z ravnijo normalne kože (slika 4). LJE (54 mg/kg) je prav tako povečal encimsko aktivnost, čeprav so bile velike razlike. CTE je imel podobne učinke, saj je pomembno povečal aktivnost -GTP 14. dan. Zanimivo je, da je kombinirano zdravljenje z LJE in CTE dodatno povečalo encimsko aktivnost višje kot pri uporabi samostojnih izvlečkov.

Aktivnost ALP, označevalec rasti kosti in angiogeneze, se je v koži znatno povečala 14. in 21. dan po lokalni uporabi minoksidila (slika 5). LJE in CTE sta tudi povečala aktivnost ALP po peroralni uporabi na način, ki je odvisen od odmerka. Predvsem je bila encimska aktivnost sinergistično povečana s kombiniranim zdravljenjem z LJE in CTE.

Pri analizi EGF, znanega faktorja rasti las, je uporaba minoksidila povečala raven EGF.

3,5-kratna normalna kontrola oba dneva 14 in 21 (slika 6). LJE (18 mg/kg) je povečal EGF le 21. dan, medtem ko je CTE (162 mg/kg) močno povečal njegovo proizvodnjo 14. in 21. dan. Zanimivo je omeniti, da je kombinirano zdravljenje LJE in CTE tudi ob nizki odmerki so pokazali izrazite sinergijske učinke.

Zdravljenje z minoksidilom je povečalo tudi raven VEGF za 50-80 odstotkov nad kontrolno vrednostjo (slika 7). Čeprav je bil LJE neučinkovit, je imel CTE izjemne učinke izboljšanja. Poleg tega je kombinirano zdravljenje LJE in CTE pokazalo sinergistično aktivnost v zgodnji fazi na 14. dan.

Injiciranje karagenana v zračno vrečko miši ICR je povečalo volumen eksudata v vrečki za 6-krat več od kontrolne ravni (tabela 1). Tako povečano izločanje je bilo znatno oslabljeno z zdravljenjem z LJE (18 in 54 mg/kg) ali CTE (54 in 162 mg/kg). Še posebej se je zmanjšalo kombinirano zdravljenje z LJE in CTE

volumen eksudata v primerjavi s posameznimi učinki. Število vnetnih celic se je drastično povečalo z injekcijo karagenana: 34,6, 4,2 in 24,9-kratna kontrolna raven za nevtrofilce, monocite in limfocite (tabela 1). Vendar sta LJE in CTE znatno zmanjšala vnetne celice na načine, odvisne od odmerka, pri čemer je bil LJE nekoliko boljši od CTE. Pričakovano so bili sinergistični učinki pri infiltraciji vnetnih celic doseženi s sočasnim dajanjem LJE in CTE.

Vzporedno z infiltracijo vnetnih celic v vrečki se je po injiciranju karagenana drastično povečala tudi vsebnost NO in PGE2 v vrečki (tabela 1). V primerjavi z blagim učinkom LJE,

CTE je izrazito znižal koncentracijo NO. Kombinirano zdravljenje LJE in CTE je nadalje znižalo raven NO v odvisnosti od odmerka. Na podoben način je bila povečana raven PGE2 sinergistično

potlačeno s kombinirano terapijo LJE in CTE (tabela 1).

Cistancheizvleček krepiimunostin preprečuje izpadanje las

Diskusija

Človeška glava ima v povprečju 100000 lasnih mešičkov.

V življenju vsak folikel zraste in izpade približno 20-krat, kar kaže dnevno izgubo 100 pramenov las [25]. Izpadanje las, vključno z alopecijo in plešavostjo, je težavno stanje za moške in ženske, zlasti v sodobni družbi. Zato je zelo pomembno razvijati nove terapije, ki preprečujejo izpadanje las in izboljšajo zdravljenje las; tj. vaskularni izcedek in infiltracija vnetnih celic sta bili sinergistično potlačeni. V kvantitativni analizi sta bila glavna vnetna mediatorja NO in PGE2 po peroralnem sočasnem dajanju LJE in CTE precej nadzorovana. Zanimivo je, da ker je LJE pokazal večjo protivnetno aktivnost kot polprečiščen fukoidan [16], se domneva, da lahko poleg fukoidana v LJE obstaja še dodatna učinkovina(e).

Rezultati skupaj kažejo, da kombinirano peroralno zdravljenje z LJE in CTE izboljša izpadanje las s povečano regulacijo rastnih faktorjev in z njimi povezanih encimskih aktivnosti ter deloma s protivnetnim potencialom. Zato se predlaga, da bi bila kombinacija, ki vključuje LJE in CTE v ustreznih kliničnih odmerkih in razmerjih, lahko recept za bolnike z izpadanjem las.

Zahvala

To raziskavo so finančno podprli Leading Industry Development for Economic Region of the Chungcheong Leading Industry Office, Korea Institute for Advancement of Technology (KIAT) in Ministrstvo za gospodarstvo znanja (MKE), delno pa tudi Program za razvoj živilske tehnologije z visoko dodano vrednostjo , Ministrstvo za kmetijstvo, prehrano in podeželje (MAFRA; številka donacije 113034-3).

Nasprotje interesov Avtorji izjavljajo, da za objavo teh rezultatov ni finančnega navzkrižja interesov.

Reference

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Spodbujanje učinka mešanic zeliščnih izvlečkov na ponovno rast las pri miših C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.

2. Paus R, Cotsarelis G. Biologija lasnih mešičkov. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.

3. Cotsarelis G. Lasni mešiček: umiranje za pozornost. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.

4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Celice, ki zadržujejo nalepke, se nahajajo v območju izbokline pilosebacealne enote: posledice za folikularne izvorne celice, lasni cikel in rakotvornost kože. Celica 1990; 61(7): 1329-1337.

5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfogeneza in obnova lasnih mešičkov iz odraslih multipotentnih matičnih celic. Celica 2001; 104(2): 233-245.

6. Burton JL, Marshall A. Hipertrihoza zaradi minoksidila. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.

7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Mehanizem delovanja vazodilatacije, ki jo povzroča minoksidil sulfat: vloga povečane prepustnosti K plus. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.

8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoksidil sulfat je aktivni metabolit, ki stimulira lasne mešičke. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.

9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasterid, zaviralec alfa-reduktaze vrste 2 5, pri zdravljenju moških z androgeno alopecijo. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.

10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Protivirusne lastnosti fukoidanovih frakcij iz Leathesia difformis. Fitomedicina 1999; 6(5): 335-340.

11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potencialna antioksidativna in antikoagulantna zmogljivost frakcij fukoidana z nizko molekulsko maso, ekstrahiranih iz Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.

12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan izboljša ledvični pretok krvi v zgodnji fazi ledvične ishemije/reperfuzijske poškodbe pri podganah. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.

13. Li N, Zhang Q, Song J. Toksikološka ocena fukoidana, ekstrahiranega iz Laminaria japonica pri podganah Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.

14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Hipoholesterolemični učinki ekstrakta Cistanche tubulosa, kitajskega tradicionalnega surovega zdravila, pri miših. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.

15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Inhibitorni učinek akteozida, izoliranega iz Cistanche tubulosa, na sproščanje kemičnega mediatorja in proizvodnjo vnetnih citokinov s celicami RBL-2H3 in KU812. Planta Med 2010; 76(14): 1512- 1518.

16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Sinergistični protivnetni učinki ekstrakta Laminaria japonica fucoidan in Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.

17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Povezava vnetja solzne žleze z alopecijo areato. Orbit 2015; 34(1): 45-50.

18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, Lis-Swiety A. Novi vidiki zdravljenja alopecije areate. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.

19. Hattori M, Ogawa H. Biokemijska analiza rasti las z vidika staranja in encimskih aktivnosti. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.

20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Vpliv losjona za lasišče DREAMMO® na spodbujanje rasti las pri modelu alopecije miši C57BL/6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.

21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus

R. Aktivnost alkalne fosfataze in lokalizacija med ciklom mišjih las. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.

22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. Transdukcija signala receptorja VEGF. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.

23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Protivnetni učinki etanolnega ekstrakta Angelice gigas v modelu vnetja karagenansko-zračne vrečke. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.

24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Protivnetni učinki superkritičnega ekstrakta Houttuynia cordata v modelu vnetja karagenansko-zračne vrečke. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.

25. Rebora A. Patogeneza androgene alopecije. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.

26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, nova spojina za pospeševanje rasti las in vitro in in vivo mišji modeli. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.

27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Uporaba aktivnosti gama-glutamil transpeptidaze kot označevalca lasnega cikla in indukcije anagena v lasnih mešičkih miši. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.

28. Hamada K, Suzuki K. Vrednotenje biokemičnih indeksov kot marker lasnega cikla pri miših C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.

29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Sulfirani polisaharid fukoidan stimulira osteogeno diferenciacijo človeških maščobnih izvornih celic. Matične celice Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Rastni faktorji in citokini pri razvoju lasnih mešičkov in kolesarjenju: nedavni vpogledi iz živalskih modelov in možnosti za klinično terapijo. Mol Med danes 1996; 2(11): 460-467.

31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo spodbuja rast lasnih mešičkov miši z nadzorovanim sproščanjem rastnih faktorjev. Biomateriali 2003; 24(13): 2387-2394.

32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Kemotaktični učinek faktorja, pridobljenega iz celic dermalne papile, na celice ovojnice zunanje korenine. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.

33. Stenn KS, Paus R. Nadzor kolesarjenja lasnih mešičkov. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.

34. Chapman RE, Hardy MH Učinki intradermalno vbrizganega in lokalno uporabljenega mišjega epidermalnega rastnega faktorja na rast volne, kožo in volnene mešičke merino ovc. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.

35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Faktor vaskularne prepustnosti/vaskularni endotelijski rastni faktor, mikrovaskularna hiperpermeabilnost in angiogeneza. Am J Pathol 1995; 146(5):

1029-1039.

36. Ellis RA, Moretti G. Vaskularni vzorci, povezani s kategenskimi lasnimi mešički v človeškem lasišču. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448- 457.

37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Angiogene lastnosti podganjega lasnega mešička vibrissa so povezane s čebulico. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.

38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Nadzor rasti las in velikosti foliklov z angiogenezo, posredovano z VEGF. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.

39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Porazdelitev VEGF mRNA indiferentnih stopenj lasnega mešička s fluorescenčno in situ hibridizacijo v kombinaciji s konfokalno lasersko mikroskopijo. V: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; pp 407-412.

40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Uspešno zdravljenje izpadanja las, podobnega alopeciji areati, s kontaktnim senzibilizatorjem dibutilestrom kvadratne kisline (SADBE) pri miših C3H/HeJ. J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.