Učinki Cistanche Deserticola Deserticola in kaempferola na razvoj celic granuloze v piščančjih predhodno agregiranih foliklih

Povzetek:Da bi raziskali učinke Cistanche deserticola in Kaempferola na razvoj piščančjih foliklov, so v poskusu analizirali učinke različnih koncentracij Cistanche deserticola in Kaempferola na aktivnost predhodno razvrščenih granuloznih celic piščancev z metodo MTT in določili optimalno koncentracijo. Fluorescentna kvantitativna PCR v realnem času je bila uporabljena za odkrivanje učinkov Cistanche deserticola in kaempferola na jedrski antigen proliferacijskih celic (PCNA), receptor za folikle stimulirajoči hormon (FSHR) in estrogenski receptor piščančjih predhodno razvrščenih granuloznih celic (ER). vpliv ekspresije mRNA; Učinke Cistanche deserticola in kaempferola na razvoj jajčnih foliklov so analizirali z in vitro kulturo ovarijskega tkiva. Rezultati so pokazali, da tako Cistanche deserticola kot kaempferol pri koncentraciji 1 × At 10-4 mol/L , lahko znatno spodbuja proliferacijo granuloznih celic, hkrati pa spodbuja izražanje mRNA PCNA, FSHR in ER v granuloznih celicah (P<0.01); Cistanche deserticola and Kaempferol significantly increased the number of follicles in ovarian tissue, and granulosa cells proliferated from monolayer to multilayer. Studies have shown that Cistanche deserticola and Kaempferol can promote the proliferation of aggregate granulosa cells, and promote FSHR and ER α MRNA expression promoting the development of pre-grade follicles towards grade follicles.

Ključne besede: Cistanche deserticola; kaempferol; piščanec; Zrnate celice pred stopnjo; Tkivo jajčnika

kitajsko zelišče cistanche

Pri velikih farmah kokoši nesnic stopnja proizvodnje jajc vpliva na gospodarske koristi, razvoj jajčnih foliklov pa neposredno vpliva na proizvodno zmogljivost kokoši nesnic. Folikle delimo na tri stopnje glede na njihov funkcionalni status: primarne folikle, sekundarne folikle in zrele folikle [1]. Vsak dan se izbere folikel, da se razvije do zrelosti, in jajčece se izloči v jajcevod, gre skozi lijak, razširitev, ožino, maternico in vagino ter tvori jajčecu podobno strukturo [2-3]. Iniciacija primitivnih foliklov je povezana z razvojem folikularnih granuloznih celic. Folikle stimulirajoči hormon (FSH) se veže na receptor folikle stimulirajočega hormona (FSHR) na granuloznih celicah, inducira tvorbo receptorja luteinizirajočega hormona (LHR) in stimulira sintezo steroidnih hormonov [4-6]. FSH in luteinizirajoči hormon (LH) sinergistično delujeta na granulozne celice, da pospešita razvoj in zorenje foliklov ter sodelujeta pri izbiri dominantnih foliklov. Raziskave so pokazale, da čeprav so bili primordialni folikli brez granuloznih celic aktivirani, na koncu vsi razvijejo atrezijo [7]. Med razvojem foliklov lahko estrogen spodbuja proliferacijo granuloznih celic jajčnikov, medtem ko sodeluje s FSH in LH za spodbujanje proliferacije in diferenciacije granuloznih celic jajčnikov. Ko se vsebnost estrogena v plazmi poveča, se ta negativno vrne v hipotalamus skozi sistem perifernega krvnega obtoka in tako zavira izločanje gonadotropin-sproščujočega hormona (GnRH) iz hipotalamusa. GnRH lahko stimulira adenohipofizo, da sintetizira in izloča FSH in LH, da pospeši razvoj jajčnih foliklov. Ko je izločanje GnRH nizko, lahko zavre izločanje FSH in LH, kar končno vodi do zaviranja razvoja foliklov [8-9].

Prejšnje študije so pokazale, da imata Cistanche deserticola in Cuscuta chinensis dober učinek popravljanja atrofičnih jajcevodov in poškodovanih jajcevodov po okrevanju ter lahko izboljšata nesnost kokoši nizke nesnice [10]. V živinorejski proizvodnji lahko uporaba flavonoidov znatno izboljša proizvodno zmogljivost živali, poveča odpornost živali na bolezni in izboljša imunsko funkcijo živali.

Kitajska zdravila, kot so ginseng, Cistanche deserticola in astragalus

Celotni flavonoidi Cistanche deserticola lahko bistveno spodbujajo proliferacijo piščančjih pred-grade in grade folikularnih granuloznih celic in vitro, raven transkripcije steroidogenega hitrega regulatornega proteina (StAR), mRNA encima za cepljenje stranske verige holesterola (CYP11A1) in izločanje progesterona. Reprezentativna komponenta skupnih flavonoidov Cistanche deserticola je Cistanche deserticola. Njegova molekulska masa je majhna in njegova prednost je, da prehaja skozi krvno-možgansko pregrado. Hkrati deluje protivnetno, protitumorsko in estrogenom podobno [11]. Glavna kemična sestavina Cuscuta chinensis so skupni flavonoidi Cuscuta chinensis. Trenutno so bili iz Cuscuta chinensis izolirani številni flavonoidi, predvsem kvercetin in kaempferol, ki imata visoko antioksidativno aktivnost.

Uporaba flavonoidnega izvlečka semen vleke pri podganjih samicah kaže estrogensko aktivnost, ki ima določen učinek na spodbujanje izboljšanja funkcije receptorja hCG/LH v jajčnikih; Ima gonadotropni učinek na mlade miši in lahko spodbuja razvoj njihovega reprodukcijskega sistema [12-14].

V tem poskusu smo izbrali piščančje folikularne granulozne celice in raziskali pospeševalni učinek Cistanche deserticola in kaempferola na proliferacijo piščančjih folikularnih granuloznih celic in s tem povezano ekspresijo receptorjev preko učinka Cistanche deserticola in kaempferola na razvoj piščančjih foliklov, zagotoviti teoretično referenco za raziskave in razvoj varnih, učinkovitih krmnih dodatkov brez ostankov za izboljšanje produktivnosti nesnic.

Učinki Cistanche-Tonifying ledvic

1 Material in metode

1.1 Testni materiali

Cistanche deserticola (čistost večja ali enaka 98 odstotkom) je bila kupljena pri Shanghai Jizhi Biochemical Technology Co., Ltd; Kaempferol (čistost večja ali enaka 98 odstotkom) je bil kupljen pri Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.

1.2 Glavni reagenti in instrumenti

Glavni reagenti: kolagenaza tipa II in DMEM sta bila kupljena pri Thermo Fisher Technology (China) Co., Ltd; DMSO je bil kupljen pri Beijing Solebao Technology Co., Ltd; Komplet M5 Super qPCR RT s kompletom za reverzno transkripcijo za odstranjevanje gDNA je bil kupljen pri Beijing Jumei Biotechnology Co., Ltd. Glavni instrument: BCM-1300Delovna miza za čiščenje, kupljena pri Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory; Visokohitrostna zamrzovalna centrifuga AXTGL20M je bila kupljena pri Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd; Inkubator Heracell 150i GP s konstantno temperaturo je bil kupljen pri Bingshan Songyang Biotechnology (Dalian) Co., Ltd; LightCycle ® Instrument za kvantitativno fluorescenčno PCR tipa 96 in instrument za označevanje encima tipa DR-200BS sta bila kupljena pri Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd.

1.3 Izolacija in ekstrakcija granuloznih celic iz foliklov pred razvrščanjem piščancev

Izbranih je bilo 30 150- dni starih zdravih rjavih kokoši nesnic Hailan (ki jih je zagotovilo podjetje Hebei Baoding Dingnong Company), ki so jih usmrtili s krvavitvijo karotidne arterije in jajčnike so jim aseptično odvzeli (in vivo raziskovalni testi na živalih so bili v skladu s smernicami, ki jih je odobril Odbor za etiko živali kmetijske univerze Hebei). Predgradne folikle lahko razdelimo na majhne bele folikle (SWF,<2 mm), large white follicles (LWF, 3-5 mm), small yellow follicles (SYF, 6-8 mm), and large yellow follicles (LYF, 9-12 mm). Collect granulosa cells from pre-graded follicles with a diameter of 6-8 mm and prior stages. The grading of follicles (see Figure 1). 

Opomba: SWF predstavlja majhne bele mešičke, LWF predstavlja velike bele mešičke, SYF predstavlja majhne rumene mešičke, LYF predstavlja velike rumene mešičke in F1, F2, F3, F4 in F5 predstavljajo pet zrelih mešičkov.

Zbrane folikle smo trikrat sprali s 75-odstotnim alkoholom in na koncu enkrat sprali s PBS. Sterilno iglo smo uporabili za sprostitev rumenjakove tekočine v PBS, ki je vseboval 3 odstotke penicilina in streptomicina, odstranili membransko celično plast in ločili zrnato celično plast. Vzeli smo 15 mL epruvete EP, da smo dodali izrezano plast granuloznih celic foliklov in dodali 4 mL 0.1% kolagenaze tipa II. Stresali smo ga v stresalniku pri 37 stopinjah 3 minute. Ko je oscilacija končana, dodajte enako količino raztopine kulture, ki vsebuje 0,5 odstotka FBS, da prekinete prebavo. Filtrirajte s sitom 200 mesh in sitom 400 mesh. Filtrat centrifugirajte 5 minut pri sobni temperaturi pri 1200 obratih/min in dvakrat ponovite centrifugiranje. Zavrzite supernatant, dodajte gojišče, enakomerno prepihajte in aspirirajte ter razredčite celično suspenzijo na 5 × 106 kosov/ml in jo enakomerno dodajte v petrijevko s premerom 100 mm ter gojite pri 37 stopinjah in 5 odstotkih CO2 .

1.4 Učinki Cistanche deserticola in Kaempferola na aktivnost granuloznih celic

Zrnate celice smo rutinsko gojili v mediju DMEM, ki je vseboval 10 odstotkov fetalnega govejega seruma. Celice v fazi logaritemske rasti so bile vzete in prebavljene z 2,5 g/L tripsina. Celice so bile enakomerno porazdeljene v plošče s 96 jamicami. Vsaka plošča je bila razdeljena na 10 skupin s 6 ponovljenimi luknjami v vsaki skupini. Dodajte 200 v luknje okoli plošče s kulturo μ L PBS služi kot vlažilna pora. Koncentracija Cistanche deserticola je nastavljena na 1 × 10-4 mol/L, 1 × 10-5 mol/L, 1 × 10-6 mol/L, 1 × 10-7 mol/ L, 5 × 10-8 mol/L, 1 × 10-8 mol/L, 5 × 10-9 mol/L, 1 × 10-9 mol/L, 1 × {{ 24}} mol/l. Nastavite prazno kontrolno skupino. Po 24-urnem sočasnem gojenju celic s Cistanche deserticola dodajte 10 odstotkov v vsako vdolbino μ 5 mg/mL MTT L. Po nadaljnjem 4-urnem gojenju dodajte 150 v vsako vdolbino μ L DMSO in oscilirajte 3 minute v stresalnik s konstantno temperaturo 37 stopinj. Izmerite absorbanco pri 450 nm. Poskus smo ponovili trikrat, postopek presejanja optimalnega varnega odmerka kaempferola za granulozne celice pa je bil enak kot zgoraj.

Puščavska živa cistanča - tonizirajoča ledvica

1.5 Učinki Cistanche deserticola in kaempferola na jedrski antigen proliferirajočih celic, receptor za folikle stimulirajoči hormon in estrogenski receptor v granuloznih celicah

Učinek ekspresije mRNA so opazili v granuloznih celicah logaritemske rastne faze, inokuliranih v tri posode s kulturo s celično gostoto 5 × 106 kosov/ml. Petrijevke smo razdelili v slepo kontrolno skupino; skupini Cistanche deserticola, to je po 24 urah celične kulture dodajte 1 × 10-4 mol/L Cistanche deserticola; V skupini s kaempferolom dodajte 1 po 24 urah celične kulture × 10-4 mol/l kaempferola; Estrogenska skupina, dodajte 5 po 24 urah celične kulture × Tretirajte z 10 do 8 mol/L estrogena. Po 24 urah gojenja zavrzite ves medij kulture, sperite s PBS, dodajte 1 mL encima trebušne slinavke za prebavo in po nekaj minutah dodajte enako količino medija kulture, da prekinete prebavo. Centrifugirajte celično suspenzijo pri 1000 vrt/min 5 minut, zavrzite supernatant in dodajte reagent Trizol v posodo za led. Nato smo dodali kloroform in ga močno pretresli, dali v posodo za led za približno 3 minute in centrifugirali pri 4 stopinjah pri 12000 vrt/min 10 minut. Prenesite RNA v novo epruveto EP, dodajte enako količino izopropanola, nežno dobro premešajte in pustite stati v posodi z ledom 10 minut. Po 10-minutnem centrifugiranju pri 4 stopinjah pri 12 000 vrt/min zavrzite supernatant in oborino sperite z 80-odstotnim etanolom. Centrifugirajte pri 10 000 vrt/min in 4 stopinje 5 minut, zavrzite etanol, sušite na zraku 5-10 minut in dodajte DEPC vodo za pihanje in odsesavanje, da raztopite oborino. Izmerite koncentracijo RNA z UV spektrofotometrom.

Za pridobitev cDNA uporabite komplet M5 Super plus qPCR RT s kompletom za odstranjevanje gDNA za reverzno transkripcijo. Odkrivanje proliferirajočega celičnega jedrnega antigena, receptorja za folikle stimulirajočega hormona in receptorja za estrogen v granuloznih celicah s fluorescenčno kvantitativno PCR MRNA v realnem času na relativni ravni transkripcije. Podatki o primerjih so prikazani v tabeli 1, začetnike pa je zasnoval in sintetiziral Shenggong Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd. Notranja referenčna skupina – aktin, relativna raven transkripcije mRNA za vsak gen je določena z 2- ΔΔ Izračunano s Ct.

Tabela 1 Podatki o Primeru

1.6 Kultura in vitro in morfološko opazovanje tkiva jajčnikov

Vzemite tkivo jajčnikov 30 40-dnevnih kokoši nesnic Hailan brown in ga trikrat sperite s 75-odstotnim alkoholom. Tkivo jajčnikov narežite na majhne koščke velikosti 1-2 mm3 v ultra čisti mizi, s hitrostjo 500 μL na vdolbino, dodano v medij DMEM in ITS (10 μG/mL insulina, 5 μG/mL transferina). in 30 nmol/l natrijevega selenita). Po 72 urah gojenja v inkubatorju tretirajte glede na situacijo združevanja. Tkivo jajčnikov je bilo razdeljeno na slepo kontrolno skupino, skupino Cistanche deserticola, skupino kaempferola in skupino estrogena. Po 72 urah gojenja je bilo tkivo jajčnikov fiksirano s 4 odstotki formaldehida in odseki tkiva so bili rutinsko pripravljeni za opazovanje pod optičnim mikroskopom.

1.7 Statistika in analiza

Podatki qPCR so bili analizirani s programsko opremo Biorad CFX Manager 2.{1}} in programsko opremo Microsoft Excel, programska oprema SPSS 21.0 pa je bila uporabljena za enosmerno ANOVA. Za več primerjav je bila uporabljena Duncanova metoda. Rezultati so predstavljeni kot "srednja vrednost ± standardni odklon" in narisani s programsko opremo GraphPad Prism 5.0. p<0.05 indicates significant differences, while P<0.01 indicates extremely significant differences.

2 Rezultati in analiza

2.1 Učinki Cistanche deserticola in Kaempferola na proliferacijo granuloznih celic

Iz slik 2 in 3 je razvidno, da lahko Cistanche deserticola in Kaempferol spodbujata proliferacijo granuloznih celic. Pri 1 × 10-4~1 × Znotraj koncentracijskega gradienta 10-10 mol/L je v primerjavi s slepo kontrolno skupino koncentracija 1 × 10-4 mol/L, 1 × {{ 9}} mol/L, 1 × 10-6 mol/L, 1 × Pri 10-7 mol/L je bila razlika izjemno pomembna (P<0.01), with a concentration of 5 × The difference was significant at 10-8 mol/L (P<0.05).

Opomba: "* *" označuje pomembno razliko v primerjavi s prazno kontrolno skupino (str<0.01), and "*" indicates a significant difference compared to the blank control group (P<0.05), the same below.

Slika 2 Vrednosti absorpcije granuloznih celic, izpostavljenih Cistanche deserticola v različnih koncentracijah 24 ur

Slika 3 Vrednosti absorpcije granuloznih celic, izpostavljenih kaempferolu v različnih koncentracijah 24 ur

2.2 Učinki Cistanche deserticola in kaempferola na jedrski antigen proliferirajočih celic, receptor za folikle stimulirajoči hormon in estrogenski receptor piščančjih pregranuloznih celic Vpliv mRNA na relativne ravni transkripcije

Iz tabele 2 je razvidno, da imata skupini Cistanche deserticola in kaempferola učinke na proliferirajoči celični jedrski antigen, receptor za folikle stimulirajoči hormon in receptor za estrogen piščančjih predhodno razvrščenih granuloznih celic. Relativna raven transkripcije mRNA je bila znatno višja od ravni slepe vzorca. kontrolna skupina in estrogenska skupina (P<0.05 or P<0.01), and the follicle-stimulating hormone receptor and estrogen receptor of chicken pre aggregate cells in the Kaempferol group α The transcription level of mRNA is the highest (P<0.01).

Tabela 2 Učinki Cistanche deserticola in kaempferola na jedrski antigen proliferirajočih celic, receptor za folikle stimulirajoči hormon in estrogenski receptor piščančjih pregranuloznih celic Vpliv mRNA na relativne ravni transkripcije

2.3 Histološko opazovanje jajčnikov

Iz slike 4 je razvidno, da se je v primerjavi s kontrolno skupino število foliklov v tkivu jajčnikov, zdravljenih s Cistanche deserticola in kaempferolom, znatno povečalo, granulozne celice pa so proliferirale iz enoplastne v večplastno. V primerjavi s skupino estrogenov imata skupina Cistanche deserticola in skupina Kaempferol bolj očitno sposobnost spodbujanja zorenja in razvoja tkiva jajčnikov, skupina Cistanche deserticola in skupina Kaempferol pa imata bolj očiten učinek kot skupina Kaempferol.

3 Razprava

3.1 Učinek Cistanche deserticola in kaempferola

Celoten proces razvoja foliklov spremlja proliferacija granuloznih celic, ki so zelo pomembne za razvoj foliklov. Sprožijo rast primitivnih foliklov s konstruiranjem ugodnih molekularnih mikrookoljij. Med razvojem foliklov ima apoptoza granuloznih celic pomembno vlogo pri uravnavanju rasti foliklov, zorenja jajčec in izločanja estrogena [15-16]. Cistanche deserticola, kitajsko zeliščno zdravilo, ima učinek spolnih hormonov, ki lahko spodbuja razvoj živalskih foliklov in proizvodnjo sperme, spodbuja normalen prihod estrusa, izboljša delovanje in aktivnost jajčnikov ter izboljša reproduktivno funkcijo. Cuscuta chinensis, kot tradicionalna kitajska medicina za tonificiranje ledvic, ima antioksidativne, reproduktivne učinke in učinke proti staranju, saj njena učinkovita sestavina flavonoidi. Študije so pokazale, da ima določen odmerek flavonoidov iz Cuscuta chinensis proliferativni učinek na intersticijske celice testisov miši [17-18]. V tem poskusu sta bila izbrana Cistanche deserticola in kaempferol, kot glavni sestavini kitajskih tradicionalnih zdravil Cistanche deserticola in vijuga, za preučevanje njunih učinkov na sposobnost izražanja celic piščančjih folikularnih granuloz in z njimi povezanih receptorjev ter tkiva jajčnikov, da bi potrdili učinke Cistanche deserticola in Kaempferol o razvoju reproduktivnega sistema perutnine.

Učinki Cistanche-Tonifying ledvic

Kliknite tukaj za ogled izdelkov Cistanche za zdravljenje bolezni ledvic

【Vprašajte za več】 E-pošta:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

3.2 Jedrni antigen proliferirajočih celic, receptor za folikle stimulirajoči hormon in estrogenski receptor Vloga

PCNA je proliferirajoči celični jedrski antigen, ki ima pomembno vlogo pri začetku celične proliferacije in je dober pokazatelj celične proliferacije. Zato je povečanje PCNA v rezultatih testa potrdilo, da Cistanche deserticola in kaempferol spodbujata celično proliferacijo, ko delujeta na granulozne celice. FSH je glavni hormon, ki spodbuja razvoj foliklov [19], mesto ekspresije receptorja za folikle stimulirajočega hormona (FSHR) pa je v glavnem koncentrirano v jajčniku in foliklu. Glavni način, na katerega FSH sodeluje pri reproduktivnih dejavnostih kokoši, je uravnavanje razvoja foliklov. Ko se izločanje FSH poveča, lahko spodbudi povečanje FSHR v granuloznih celicah, kombinacija obeh pa lahko inducira sintezo LHR z aktiviranjem aromataze. Piščanec lahko povzroči ovulacijo pod sinergističnim učinkom FSH in LH [20-22]. Pred izbiro foliklov granulozne celice izražajo samo bazalne ravni FSHR, ki se uporabljajo za sprejemanje signalov FSH in proizvajajo nizke ravni cikličnega adenozin fosfata za vzdrževanje celične aktivnosti. Ko je izražanje FSHR znatno povečano v granuloznih celicah folikla predgradnje, to nakazuje, da bo folikel izbran, da postane folikel stopnje [23-24]. V tej študiji se je v primerjavi s kontrolno skupino izražanje mRNA FSHR v skupinah Cistanche deserticola in Kaempferol znatno povečalo, kar kaže, da lahko Cistanche deserticola in Kaempferol spodbujata transkripcijo mRNA FSHR, povečata izločanje FSH in spodbujata selekcijo foliklov kot stopnje foliklov. E2 je nekakšen steroidni hormon, ki ga izločajo theca celice. Njegova naloga je spodbujanje spolne zrelosti samic in prikaz druge spolne značilnosti. Pod delovanjem FSH aromataza, ki jo proizvajajo granulozne celice jajčnikov, pretvori androgen v E2, ki ga uravnavata dva estrogenska receptorja (ER in ER). Učinkuje na različne organe živalskih samic in ima pomembno vlogo pri razmnoževanju živali, zlasti v fiziološki dejavnosti, kot je razvoj foliklov Med rastjo foliklov je estrogen ključna intracelularna regulativna molekula, ki pospešuje proliferacijo granuloznih celic in krepi učinke FSH in LH na proliferacijo in diferenciacijo celic jajčnikov ER Glavna prilagoditev je negativna povratna informacija, ER Razvoj foliklov je reguliran tako po notranjih kot zunanjih poteh jajčnika [26] ER se izraža predvsem v tkivih in organih, kot so mlečna žleza, maternica in vagina živali, medtem ko se ER izraža predvsem v testisih. , jajčnikih, prostati in hipotalamusu [27].

V tej študiji je bila raven ekspresije Cistanche deserticola in kaempferola znatno povečana v skupinah Cistanche deserticola in kaempferola, kar nakazuje, da imata cistanche in kaempferol pozitivne učinke na razvoj, zorenje in ovulacijo piščančjih jajčnikov. Rezultati te študije so pokazali, da je bila izmerjena raven izražanja ER relativno nizka. To je v skladu z ugotovitvami raziskave Guo Miao [28], da imajo v embrionalnem razvoju piščancev jajčniki zgodnjih piščancev posebna vezavna mesta za ER. V belih mešičkih, rumenih mešičkih in granuloznih celicah piščancev je ekspresija ER znatno višja od ER. Sojini flavonoidi kot rastlinski estrogen lahko povečajo proizvodnjo jajc pri kokoših nesnicah, če jih dodamo prehrani [29], kar kaže na neposredno povezavo med ravnmi estrogenskega hormona in stopnjo proizvodnje jajc.

Slika 4 Tkivo jajčnika po obarvanju z HE (10 ×）

3.3 Učinki Cistanche deserticola in Kaempferola na tkivo jajčnikov

V tem poskusu je bilo s so-gojitvijo Cistanche deserticola in Kaempferola s tkivom jajčnikov ugotovljeno, da se je število foliklov v tkivu jajčnikov, ki sta jih prizadela Cistanche deserticola in Kaempferol, znatno povečalo, granulozne celice pa so proliferirale iz enoslojne v večplastno. To dodatno dokazuje, da lahko Cistanche deserticola in kaempferol spodbujata razvoj jajčnikov s histološkega vidika. Antigen proliferirajoče celice, receptor za folikle stimulirajoči hormon in receptor za estrogen, izmerjeni v rezultatih tega poskusa. Spremembe indikatorjev so potrdile, da imata Cistanche deserticola in kaempferol učinke, podobne estrogenu, kar daje eksperimentalno osnovo za raziskovanje tarče glavnih sestavin. Cistanche deserticola in vijuga.

4 Zaključek

Ta študija je potrdila, da lahko Cistanche deserticola in kaempferol spodbujata proliferacijo pri piščancih predhodno razvitih granuloznih celic in povečata PCNA, FSHR in ER. Raven transkripcije mRNA lahko znatno spodbuja razvoj foliklov.

Referenca:

［1］Yang Pengyun, Song Beibei, Ma Jinrui, et al Vloga granuloznih celic pri tvorbi jajc [J] Poultry Science, 2021 (11): 50-54

［2］ HUO SY, LI YR, GUO Y, et al. Izboljšanje učinkov flavonoidov Epimedi⁃ um na izbrane reproduktivne lastnosti pri nesnicah po prisilnem taljenju［J］. Perutnina, 2020, 99（5）: 2757-2765.

［3］ HUO SY, LI YR, ZHANG S, et al. Funkcije Epimedium na regresiranem jajčnem kanalu in foliklih prisilno staljenih kokoši nesnic ［J］. Journal of World′s poultry Research, 2020, 10（2）:326- 335.

［4］ RAJU GR, CHAVAN R, DEENADAYAL M, et al. Sinergija luteinizirajočega hormona in folikle stimulirajočega hormona: pregled vloge pri nadzorovani hiperstimulaciji jajčnikov［J］. Journal of human reproductive ences, 2013, 6（4）:227-234.

［5］ SCHMIDT D. Mišji transkripcijski faktor s krilato vijačnico Foxl2 je potreben za diferenciacijo granuloznih celic in vzdrževanje jajčnikov［J］. Razvoj, 2004, 131） (4): 933-942.

［6］ SULLIVAN MW, STEWART-AKERS A, KRASNOW JS, et al. Odzivi jajčnikov pri ženskah na rekombinantni folikle stimulirajoči hormon in luteinizirajoči hormon (LH): vloga LH v končnih fazah zorenja foliklov (J). Journal of clini⁃ cal endocrinology & metabolism, 1999,84（1）:228-232.

［7］ GUO Y, LI YR, ZHANG S, et al. Vpliv skupnih flavonoidov epimedija na razvoj granuloznih celic pri kokoših nesnicah ［J］. Perutnina, 2020, 99（9）: 4598-4606.

［8］ ZHANG WD, LI N, DU ZR, et al. Receptor IGF-1 je vključen v regulativne učinke ikariina in ikaritina v astrocitih zunaj bazalnih pogojev in po vnetnem izzivu［J］. European journal of pharmacology, 2021,906（5）:174269- 174278.

［9］ FREDERIQUE RZ, MIGUEL F, GE Y, et al. Regulatorna arhitektura gonadotropne celice L T2, ki je osnova odziva na gonadotropin sproščajoči hormon［J］. Frontiers in endocrinol⁃ ogy, 2018, 9:34.

［10］ Huo Shuying, Kang Jingmin, Li Yurong, et al Učinek "Yimu Powder" na popravilo jajcevodov in uspešnost nesnosti pri kokoših nesnicah [J] Chinese Poultry, 2018, 40 (19): 4

［11］ WANG S, WANG Q, WANG H, et al. Indukcija ROS in od poškodbe DNA odvisnega staranja z ikaritinom prispeva k njegovi protitumorski aktivnosti v celicah hepatocelularnega karcinoma［J］. Pharmaceutical biology, 2019, 57（1）:424-431.

［12］ Wang Jianhong, Wang Minzhang, Wu Qinghua, et al Učinek flavonoidov iz Cuscuta chinensis na endokrino funkcijo jajčnikov pri podganah pod stresom [J] Kitajska zeliščna medicina, 2002 (12): 46-48

［13］Miao Jiangxia Napredek pri raziskavah o aktivnih sestavinah in mehanizmu delovanja semena vijuge pri uravnavanju razmnoževanja//Zbornik akademske konference o farmacevtski fitokemiji in trajnostnem razvoju virov tradicionalne kitajske medicine (I), 2009: 323-325

［14］ TAO CC, WU Y, GAO X, et al. Protitumorski učinki zdravila Icari⁃ tin proti raku dojke so povezani z estrogenskimi receptorji［J］. Trenutna molekularna medicina, 2020, 21（1）:73-85.

［15］ MONNIAUX, DANIELLE. Spodbujanje folikulogeneze z dialogom oo⁃ cit-somatske celice: lekcije iz genetskih modelov［J］. The⁃ riogenology, 2016,86(1）:41-53.

［16］TAKASHI SHIMIZU A, NAOMICHI KOSAKA A, CHIAKIMU⁃ RAYAMA A, et al. Izražanje receptorjev za apelin in APJ v granuloznih in teka celicah med različnimi stopnjami razvoja foliklov v govejem jajčniku: vpletenost apoptoze in hormonske regulacije - sciencedirect［J］. Znanost o razmnoževanju živali, 2009, 116（1-2）:28-37.

［17］ Lin Siwen, Chen Shaobo, Yin Changchang et al. Estrogeni učinek skupnih flavonoidov Cistanche deserticola deserticola na spodbujanje osteogene diferenciacije ［ J ］ Raziskave in razvoj naravnega proizvoda, 2020, 32 (3): 373-378

［18］ Tao Jinliang, Wang Xiao, Wei Yuanyuan, et al. Zaščitni učinek flavonoidov iz Cuscuta chinensis na nenormalno izločanje moških hormonov, ki jih povzroči BPA, v intersticijskih celicah testisov miši [J] Progress in Animal Medicine 2019, 40 (5): { {4}}

［19］ Wang Peng, Hou Deyu, Shi Liguang, et al Danzhou Chicken FSH Study on Single-nucleotide Polimorphism of Gen ［ J ］ Heilongjiang Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2018, 10 (19): 19-22

［20］ ZHANG M, SHI H, SEGALOFF DL, et al. Ekspresija in lokalizacija receptorja luteinizirajočega hormona v reproduktivnem traktu samice miši［J］. Biologija razmnoževanja, 2001, 64（1）: 179-187.

［21］ Li Qin, Wang Qigui TGF- Napredek raziskav in možnosti družinskih članov, ki uravnavajo razvoj foliklov pri perutnini ［ J ］ Kitajska perutnina, 2019, 41 (19): 1-5

［22］Guan Hongbin, Li Qingzhang Napredek raziskav o folikle stimulirajočem hormonu [J] Journal of Northeast Agricultural University, 2002, 8 (3): 306-311

［23］ Wu Xinpei, Wang Shuying Imunohistokemijska lokalizacija FSHR in LHR v jajčnikih črne koze Laiwu ［ J ］ Life Science Research, 2006, 25 (4): 367-371

［24］ TISCHKAU SA, HOWELL RE, HICKOK JR, et al. Povečanje lu⁃ teinizirajočega hormona uravnava ekspresijo genov cirkadiane ure v piščančjem jajčniku［J］. Chronobiology international, 2011, 28（1）:10-20.

［25］Tang Haifei, Wang Zhiwen, Zheng Xuesong, et al Napredek pri raziskavah delovanja estrogena [J] Reprodukcija in kontracepcija, 2019, 39 (4): 334-340

［26］ Liu Lingbin Učinek monokromatske radiacijske svetlobe na estrogenski receptor (ER , ER ）, Učinek izražanja progesteronskega receptorja (PR-A, PR-B) v tkivu jajčnikov Ya'an: Sichuan Agricultural University, 2013

［27］ COUSE JF, LINDZEY J, GRANDIEN K, et al. Porazdelitev v tkivu in kvantitativna analiza estrogenskega receptorja-alfa（ERal⁃ pha） in estrogenskega receptorja-beta（ERbeta）messenger ribonukle⁃ ične kisline v divjem tipu in ERalpha-knockout miška［J］. En⁃ dokrinologija, 1997, 138（11）:4613-4621.

［28］Guo Miao ER v tkivu jajčnikov kokoši nesnic Navidezna regulacija dinamičnih sprememb in presejanje regulatornega gena Tai'an: Kmetijska univerza Shandong, 2017. [ Zhao Biqian Raziskovalni napredek pri uporabi daidzeina v proizvodnji kokoši nesnic [J ] Guangdong Feed, 2017, 26 (8): 31-33