Učinki izvlečka Cistanche Deserticola na erektilni odziv penisa pri kastriranih podganah

Li Gu, Wen Ting Xiong, Yan Lei Zhuang, Jian Shuang Zhang in Xin Liu*

Raziskovalni center za inženiring hrane in zdravja državnega ministrstva za izobraževanje, univerza Sun Yat-sen, Guangzhou, Kitajska

Povzetek

Cistanche deserticola (CD) že tisočletja velja za krepilno sredstvo za reproduktivno funkcijo. Učinke izvlečka CD na erektilni odziv penisa so raziskali v tej študiji. Po operaciji kastracije so podgane intragastrično zdravili z izvlečkom CD ({{0}}.45, 0.90 in 1,8 g/kg) dnevno štiri tedne. Izmerili so erektilni odziv penisa in na koncu poskusa analizirali serumske hormone. Ocenjeno je bilo, da se je erektilna latenca podaljšala in trajanje erekcije znatno skrajšalo pri kastriranih podganah v primerjavi z navidezno operiranimi kontrolami. Vendar pa je ekstrakt CD-ja skrajšal erektilno latenco in podaljšal trajanje erekcije, da bi zmanjšal negativne učinke kastracije. Pri odmerku 0,9 g/kg je izvleček CD uravnal koncentracijo luteinizirajočega hormona v serumu, ki se je približala normalni ravni pri kastriranih podganah. Te ugotovitve so pokazale, da je CD olajšal erektilni odziv penisa in do neke mere moduliral raven serumskega hormona.

Click cistanche tonic izdelki

UVOD

Cistanche Hoffmg. Et Link, eden od rodov družine Orobanchaceae, je v glavnem razširjen v sušnih deželah in puščavah na severni polobli, kot so avtonomne regije Notranja Mongolija, Xinjiang in Ningxia na Kitajskem, Iranu, Indiji, Mongoliji itd. vrste pripadajo večletnim parazitskim zeliščem, ki se običajno pritrdijo na korenine rastlin, ki utrjujejo pesek, kot so Haloxylox ammo dendron, H. persicum, Kalidium foliated in rastline Tamarix itd. (Jiang in Tu 2009).

Herba Cistanche, steblo vrste Cistanche, velja za vrhunski tonik in si je prislužila čast "puščavskega ginsenga". Med vrstami Cistanche je bila Cistanche deserticola YC MA navedena kot primarni izvorni material Cistanche (Stefanova et al. 2011). Vendar pa zaradi prekomernega nabiranja v zadnjih letih primanjkuje naravnih virov divje C. deserticola (CD), ki je bila nabrana kot ena od rastlin razreda II, ki potrebuje zaščito na Kitajskem, zato so druge vrste tega rodu, kot je npr. C. salsa in C. sinensis se na nekaterih območjih uporabljajo tudi kot nadomestki. Od prvega zapisa v Shen Nongovi kitajski materialni medicini (starodavni farmakološki zbornik) se je v klinični praksi po teoriji tradicionalne kitajske medicine mislilo, da CD tonificira ledvice in poživi "Yang", kar naj bi bilo učinkovito za reprodukcijo, razvoj, in funkcijo plodnosti. Medtem so CD kuhali tudi z ovčetino, krompirjem ali rižem, da so proizvedli krepčilno hrano za zdravljenje motenj, povzročenih s preobremenitvijo, več sto let, kar kaže na to, da ga je varno jemati peroralno (Xiong et al. 2013). Vendar te anekdotične uporabe večinoma obstajajo v kitajskih inkunabulah, z omejenimi znanstvenimi informacijami, obravnavanimi v smislu sodobnih farmakoloških konceptov.

Erektilna disfunkcija (ED) je stanje, za katero je značilna neustrezna erekcija penisa ali erekcija, ki pri odraslih moških ne traja dovolj dolgo (Cohan in Korenman 2000). Kot odziv na sodobne, sofisticirane kemične dejavnike se je ponovno pojavilo zanimanje za iskanje učinkovitih in varnih rastlinskih zdravil za zdravljenje ED (Adimoelja 2000). Prejšnja študija (Liu et al. 2009) je pokazala, da je CD elektruarno pospešil erekcijo penisa pri normalnih podganah, vendar ni bilo podatkov o vplivu CD na erektilno disfunkcijo.

Pri živalih je kirurška kastracija z dvostransko orhiektomijo veljala za standard kastracije pri raziskovanju ED (Tombal 2005). Zato je bila ta študija izvedena za ovrednotenje potencialnih učinkov CD proti ED s preučevanjem erektilne latence in trajanja pri kastriranih podganah.

MATERIALI IN METODE

Kemikalije in materiali

Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >98 odstotkov) je bilo kupljenih pri Nacionalnem inštitutu za nadzor hrane in zdravil (Peking, Kitajska). Metanol stopnje HPLC je bil kupljen pri Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, ZDA). Prečiščena voda je bila proizvedena z uporabo Millipore Milli-Q Integral 3 System in Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, ZDA). Stebla C. deserticola so bila kupljena pri Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (Guangdong, Kitajska) in zmleta v fin prah z pulverizatorjem, prepuščenim skozi sito 60 mesh.

HPLC analiza in priprava rastlinskega materiala

Vsebnost ehinakozida in akteozida v prahu CD je bila določena po naši prejšnji metodi (Zhao et al. 2011). Nato vsakih 100 g posušenega praška zavremo v 1,5

l vode 1,5 ure. Ko smo ohladili na sobno temperaturo, smo mešano tekočino centrifugirali pri 2000 obratih na minuto 10 minut (Eppendorf 5810R, Nemčija) in oborino dvakrat ponovno ekstrahirali pod enakimi pogoji. Združene supernatante smo koncentrirali z vakuumskim rotacijskim uparjalnikom (Heidolph laborota 4001-efficient, Nemčija) pri 60 stopinjah in nato liofilizirali ter dali približno 42 odstotkov posušenega ekstrakta v prahu. Pri izvajanju nadaljnjega poskusa na živalih smo posušen ekstrakt raztopili v prečiščeni vodi pri sobni temperaturi.

Poskusne živali

Odrasli samci podgan Sprague-Dawley (200-220g) so bili pridobljeni iz Medicine Experimental Animal Center v provinci Guangdong (Guangzhou, PR Kitajska), vzdrževani v prostorih z nadzorovano temperaturo s cikli svetlobe/teme 12- ur pri sobna temperatura (22-24 stopinj) in konstantna vlažnost (40-70 odstotkov) v laboratoriju SPF (brez specifičnih patogenov) in hranjeni ad libitum. Eksperimentalni postopki so bili v skladu z navodili Nacionalnega inštituta za zdravje za nego in uporabo laboratorijskih živali.

eksperimentalni postopek

En teden pred dajanjem je bilo petdeset podganjih samcev SD anesteziranih z natrijevim pentobarbitalom intraperitonealno (40 mg/kg) (Jung et al. 1999) in naključno razdeljenih v pet skupin: razen podgan v skupini z lažno operacijo (Sham ), ostali so bili dvostransko kastrirani s skrotalnim pristopom (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Medtem so skupine, ki so prejemale CD, prejele intragastrično 0,45 g/kg (majhen odmerek izvlečka CD, LCD plus Cas), 0,9 g/kg (srednji odmerek ekstrakta CD, MCD plus Cas) in 1,8 g/kg (visok odmerek CD ekstrakt, HCD plus Cas) CD ekstrakt, medtem ko so navidezne in kastrirane skupine dajali samo ustrezno količino vode. Merjenje telesne teže je potekalo na začetku posega in nato vsak teden. Vse podgane so bile podvržene laparotomiji takoj po smrti za odstranitev in posteriorno tehtanje naslednjih organov: preputialne žleze, semenskega mešička, prostate in mišice levator ani.

Merjenje erektilnega odziva penisa

Erektilno funkcijo podgan v vsaki skupini so ocenili po prejšnjih metodah (Ji et al. 2009, Luo et al. 2006). Na kratko, bipolarna elektroda iz nerjavečega jekla (BL420F Data Acquisition & Analysis System, Tme Technology Co., Ltd, Chengdu, PR Kitajska) je bila previdno nameščena na penis, dokler ni bil v erekciji s pulzom električne stimulacije (5 V) 0,2. s. Čas od stimulacije do erekcije je bil zabeležen kot erektilna latenca penisa. Ko so opazili erektilni odziv penisa, je bilo mogoče elektrodo umakniti iz penisa in čas, v katerem je penis ohranil erekcijo, je bil zabeležen kot trajanje erekcije.

Odvzem krvi in ​​analiza serumskih hormonov

Podgane so anestezirali z natrijevim pentobarbitalom intraperitonealno (40mg/kg) (Jung et al. 1999). Vzorci krvi so bili odvzeti in strjeni pri 4 stopinjah 4 ure, iz katerih je bil zbran serum s centrifugiranjem pri 4000 obratih na minuto 5 minut pri 4 stopinjah (Eppendorf 5810 R, Nemčija) in takoj shranjen v zamrzovalniku -20 stopinj do nadaljnje analize . Celotne ravni LH in FSH so bile izmerjene s komercialnimi kompleti za radioimunotest (RIA) (Beijing North Institute of Biological Technology, Peking, Kitajska) v skladu z navodili proizvajalca (Matsumoto et al. 1986). Na osnovi konkurenčne radioaktivne imunske tehnike je bil v testu uporabljen 125-označen LH (ali FSH). Na kratko, 100 µl I125-označenega LH (ali FSH) sredstva smo dodali v 100 µl vzorca seruma in inkubirali s 100 µl očiščenega kunčjega protitelesa pri 4 stopinjah (ali 37 stopinjah) čez noč. Nato smo kompleksu antigen-protitelo dodali oslovsko-proti-zajčje imunsko ločilno sredstvo in ga centrifugirali (3500 vrt/min, 15 min), da smo ločili prosti in na protitelesa vezan 125I-LH (ali FSH). Nato je bila radioaktivnost oborine izmerjena na števcu za radioimunske teste (DMF-96, Zhongcheng electrical technology development Co., Ltd., Hefei, Kitajska). Meji občutljivosti testa LH in FSH sta bili 1,0 mIU/ml.

STATISTIČNA ANALIZA

Analiza podatkov je bila izvedena s programsko opremo SPSS različice 16.0. Vrednosti so bile izražene kot povprečje ± standardni odklon (SD). Parametrični podatki so bili analizirani z analizo enosmerne analize variance (ANOVA), ki so ji sledili post hoc LSD testi. Neparametrične podatke smo analizirali s Kruskal-Wallisovim testom. Razlike so veljale za statistično pomembne, če je bila verjetnost odstopanja manjša od 0.05.

REZULTATI

Kvantitativno določanje vsebnosti ehinakozida in akteozida v prahu CD

Vsebnosti ehinakozida in akteozida v prahu CD so bile 1,27±{2}}.01 odstotek in 0.52±0,003 odstotka, kar je v skladu z zahtevami kitajske farmakopeje. HPLC kromatogram prahu CD je prikazan na sl. 1.

Slika 1

HPLC kromatografski profil praška Cistanche deserticola. Vrh 1, ehinakozid; Vrh 2, akteozid. X os, retencijski čas; Os Y, enota absorbance. Pogoji HPLC: Watersov HPLC sistem (binarna HPLC črpalka 1525, detektor lomnega indeksa 2414, detektor niza fotodiod 2996); stacionarna faza: Symmetry C18(4,6mm×25{{10}} mm, 5 µm, Waters, Milford, MA, ZDA); mobilna faza: 0,5-odstotna (V/V) vodna raztopina ocetne kisline (A) in sestavina metanol (B) (0 min, A: B=25:75; 10- 30 min, A: B{{16 }}: 60; 30 min, A: B=0: 100); pretok: 1ml/min; detektivna valovna dolžina: 330 nm; temperatura: 30.

Slika 2

Zakasnitev in trajanje erekcije penisa pri kastriranih podganah. Podatki so izraženi kot povprečje ± SD (n=10). ##str<0.01 relative to sham-operated group, **p<0.01 relative to castrated group. Abbreviation (below): Sham, sham-operated group; Cas, castration control group; LCD +Cas (0.45g/kg), MCD +Cas (0.9g/kg) and HCD +Cas (1.8g/kg), three groups of CD extract treated in castrated rats

Slika 3

Učinki ekstrakta CD na serumske koncentracije LH pri kastriranih podganah. Podatki so izraženi kot povprečje ± SD (n=10). # str<0.05 relative to sham-operated group, * p<0.05 relative to castrated group.

Telesne teže in relativna teža pomožnih organov

Kot je prikazano v tabeli 1, so imele vse podgane podobno začetno telesno težo s povečanjem od 1. do 28. dne. Vendar pa so se povprečne vrednosti v kastrirani skupini povečale z 216,8 ± 9,2 g na 251,4 ± 12,7, 283,3 ± 15,1, 306,8 ± 15,4 g. in 322,2±18,4 g, s čimer je pridobil manj teže v primerjavi z navidezno operiranimi primerki (p<0.05). There were no statistical differences between the sham group and CD treated group.

Slika 4

Učinki ekstrakta CD na serumske koncentracije FSH pri kastriranih podganah. Podatki so izraženi kot povprečje ±SD (n=10).

Ravni serumskih hormonov

Analizirano s testom RIA je bila povprečna serumska koncentracija LH pri kastriranih podganah 2,50±0,34 mIU/ml, kar kaže na povečanje v primerjavi z navidezno operirano kontrolo (p<0.05). However, the value descended about 49.2% in the MCD +Cas group relative to that in castrated control (p<0.05) (fig. 3). Shown in fig. 4, no statistical differences were observed among all groups on FSH concentration.

DISKUSIJA

Naši rezultati so pokazali, da je kastracija bistveno podaljšala erektilno latenco penisa in skrajšala trajanje erekcije, z izjemno atrofijo pomožnih organov. Vendar pa je izvleček CD olajšal erektilni odziv penisa in do neke mere moduliral serumsko raven LH pri kastriranih podganah.

Spontano erekcijo v glavnem stimulira in vzdržuje androgen preko celičnih, molekularnih in fizioloških mehanizmov, ki vključujejo sprostitev kavernoznih gladkih mišic (Traish et al. 2007, Talha et al. 2007) . Nezadostne ravni testosterona vodijo do zmanjšanja njegove sproščenosti (McClure 1988), kar posledično povzroči impotenco pri moških (Bivalacqua et al. 2000). Zlasti pri podganah ga vzdržuje širok razpon sistemskih koncentracij testosterona kot 10-12 odstotkov, pod katerimi je erektilni odziv oslabljen na način, ki je odvisen od odmerka (Armagan et al. 2006). V tej študiji je bila koncentracija testosterona v obtoku prenizka, da bi dosegla mejo občutljivosti (0,02 ng/ml) pri vseh kastriranih podganah (podatki niso bili prikazani v rezultatih). Vendar pa je ekstrakt CD znatno skrajšal erektilno latenco penisa pri treh odmerkih in podaljšal trajanje erekcije pri 0,90 g/kg in 1,8 g/kg. Verjetno je bila posledica androgenom podobnega učinka CD-ja, omenjenega v nekaterih prejšnjih študijah (He et al. 1996a, He et al. 1996b).

Nekateri pomožni organi, kot sta prostata in semenski mešiček, so odvisni od androgenov, zato lahko spremembe teže odražajo spremembe v endokrinem statusu (Trisomboon et al. 2007, Jang et al. 2011). Obstajala je mejna raven testosterona, pod katero je bila presnova teh organov zavrta (Trachtenberg 1985). V naši študiji je bilo potrjeno, da je kastracija povzročila zmanjšanje teže pomožnih reproduktivnih organov zaradi pomanjkanja testosterona.

Testosteron primarno izloča Leydigova celica testisa, uravnavajo pa ga hormoni hipofize, kot sta luteinizirajoči hormon (LH) in folikle stimulirajoči hormon (FSH), ki imata pomembno vlogo pri ohranjanju delovanja penisa kastriranih živali (Robert et al. 2{ {6}}04). Ker je os hipotalamus-hipofiza-gonade (HPG) krmilni mehanizem s povratno zanko zaprte zanke, lahko nizke ravni gonadnega hormona izmenično uravnavajo izločanje LH in FSH (Morales et al. 2004). Naša študija je raziskala, da se je serumska raven LH znatno povečala pri kastriranih podganah in nato znižala na normalno raven z ekstraktom CD pri 0,90 g/kg, kar se je strinjalo s prejšnjim zaključkom, da je bila povečana raven LH povezana z večjim tveganjem za erektilno disfunkcijo (Kupelian et al. 2006). V testisih LH stimulira sintezo in sproščanje testosterona, katerega povratna kontrola je razmeroma dosledna, medtem ko FSH neposredno deluje na Sertolijeve celice za prehranjevanje s povratno kontrolo (Hellqvist et al. 2008). Te ugotovitve so nudile več podpore za domnevo, da je CD izražal androgenu podoben učinek, ki je lahko v glavnem odgovoren za zmanjšanje serumskega LH bolj kot FSH.

V trenutnem opazovanju je bil vpliv kastracije na razvoj telesne teže pri podganjih samcih podoben ugotovitvam v prejšnji študiji (Christoffersen et al. 2006), v nasprotju z rezultati pri podganjih samicah (Pantaleão et al. 2010). Izvleček CD-ja ni mogel bistveno izboljšati telesne teže, kar je verjetno posledica nezadostnega trajanja zdravljenja ali kompleksnih vplivov na splošno zdravstveno stanje.

Skratka, kastracija je podaljšala erektilno latenco penisa in znatno skrajšala trajanje, s povečanjem serumskega LH in atrofijo pomožnih spolnih organov.

Vendar pa je izvleček CD olajšal erektilni odziv penisa s skrajšanjem erektilne latence in podaljšanjem trajanja erekcije pri kastriranih podganah. Ti učinki so bili verjetno posledica androgenom podobnega učinka, ki je bil podprt z opažanjem, da je izvleček CD normaliziral serumske koncentracije LH, zlasti pri odmerku 0,90 g/kg. Vendar pa so potrebni dodatni dokazi za prikaz učinka izvlečka CD proti ED na hipotalamični in limbični ravni, več pozornosti pa bi lahko namenili tej dragoceni tradicionalni medicini v sodobnem svetu.

ZAHVALA

To delo je bilo podprto z donacijami projekta Science and Technology Support by Project v avtonomni regiji Xinjiang Uygur (PR Kitajska) (200840102-15).

REFERENCE

Adimoelja A (2000). Fitokemikalije in preboj tradicionalnih zelišč pri obvladovanju spolnih disfunkcij. Int. J. Androl., 23: 82-84.

Anderes KL (2003). Biološka karakterizacija novega, oralno aktivnega antagonista gonadotropin-sproščujočega hormona (GnRH) z majhno molekulo z uporabo kastriranih in nepoškodovanih podgan. J. Pharmacol. Exp. Ther., 305: 688-695.

Armagan A, Kim NN, Goldstein I in Traish AM (2006). Razmerje med odmerkom in odzivom med testosteronom in erektilno funkcijo: dokazi za obstoj kritičnega praga. J. Androl., 27: 517-526.

Bivalacqua TJ, Champion HC, Hellstrom WJ in Kadowitz PJ (2000). Farmakoterapija za erektilno disfunkcijo. Trendi. Pharmacol. Sci., 7: 524-540.

Christoffersen B, Raun K, Svendsen O, Fledelius C in Golozoubova V (2006). Vrednotenje kastriranega samca podgane Sprague-Dawley kot modela presnovnega sindroma in sladkorne bolezni tipa 2. Int. J. Obes., 30: 1288- 1297.

Cohan P in Korenman SG (2000). Napredek pri erektilni disfunkciji in hormonskem delovanju. J. Anti-aging Med., 3: 169-175.

Feldman HA, Goldstein I, Hatzichristou DG, Krane RJ in McKinlay JB (1994). Impotenca in njeni medicinski in psihosocialni korelati: Rezultati študije o staranju moških v Massachusettsu. J. Urol., 151: 54-61.

He W, Shu XF, Zong GZ, Shi ML, Xiong YL in Chen MH (1996b). Študije o krepitvi ledvic in Yangu, ki podpirajo delovanje Cistanche deserticola YC Ma pred in po pripravi. brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 534-537.

He W, Zong GZ, Wu GL in Chen MH (1996a). Raziskovanje učinkovin Cistanche na androgenom podobnem učinku. brada. J. Chin. Mater. Med., 9: 564-565.

Hellqvist A, Schmitz M in Borg B (2008). Učinki kastracije in androgenega zdravljenja na izražanje FSH- in LH- pri tribodičastem paličnjaku Gasterosteus aculeatus. Razlike v povratnih informacijah, ki posredujejo fotoperiodični odziv na zorenje? Gen. Comp. Endocr., 158: 178-182.

Jang M, Min JW, In JG in Yang DC (2011). Učinki ekstrakta rdečega ginsenga na gibljivost epididimalne sperme miši, izpostavljenih etanolu. Int. J. Toxicol., 30: 435-442.

Ji DB, Ye J, Li CL, Wang YH in Zhao J (2009). Učinek izvlečka Cordyceps sinensis proti staranju. fitoter. Res., 23: 116-122.

Jiang Y in Tu PF (2009). Analiza kemičnih sestavin v vrstah Cistanche. J. Chromatogr. A., 1216: 1970-1979.

Jung GW, Kwak JY, Kim IH, Koo MY, Park JI, Yoon S, Jung DG, Jung SI, Kwon HY in Yoon JH (1999). Vloga rastnega faktorja pri regeneraciji živcev, ki vsebujejo sintazo dušikovega oksida (NOS), po kavernozni nevrotomiji pri podganah. Int. J. Impot. Res., 11: 227-235.

Kupelian V, Shabsigh R, Travison TG, Page ST, Araujo AB in McKinlay JB (2006). Ali obstaja povezava med spolnimi hormoni in erektilno disfunkcijo? Rezultati študije o staranju moških v Massachusettsu. J. Urology, 176: 2584-2588.

Liu ZR, Zhang D, Wu HJ, Li YL, Chen SP in Yang YM (2009). Učinek Cistanche electuary na sintazo dušikovega oksida in hranjenje ledvic Yang. J. Med. & Pharm. brada. Min., 5: 33-34.

Luo Q, Li Z, Huang X, Yan J, Zhang S in Cai YZ (2006). Polisaharidi Lycium barbarum: zaščitni učinki pred toplotno povzročeno poškodbo testisov podgan in H2O2-povzročeno poškodbo DNK v celicah testisov miši ter ugoden učinek na spolno vedenje in reproduktivno funkcijo hemikastriranih podgan. Life Sci., 79: 613-621.

Matsumoto AM, Karpas AE in Bremner WJ (1986). Kronično dajanje humanega horionskega gonadotropina pri normalnih moških: dokaz, da je folikle stimulirajoči hormon potreben za vzdrževanje kvantitativno normalne spermatogeneze pri človeku. J. Clin. Endocrinol. Metab.,62: 1184-1192.

McClure RD (1988). Endokrina ocena in terapija erektilne disfunkcije. Urol. Clin. N. Am.,15: 53-64.

Morales A, Buvat J, Gooren LJ, Guay AT, Kaufman JM, Tan HM in Torres LO (2004). Endokrini vidiki spolne disfunkcije pri moških. J. Sex Med., 1: 69-81.

Pantaleão TU, Mousovich F, Rosenthal D, Padrón ÁS, Carvalho DP in Costa VMCd (2010). Vpliv ravni serumskega estradiola in leptina na delovanje ščitnice, vnos hrane in povečanje telesne mase pri samicah podgan Wistar. Steroidi, 75: 638-642. Robert WH in Robert EB (2004). Hormonska regulacija spermatogeneze. Int. J. Androl., 27: 335-342.

Schlatt S, Kim SS in Gosden R (2002). Spermatogeneza in steroidogeneza v testisnem tkivu miši, hrčka in opice po krioprezervaciji in heterotopnem cepljenju na kastrirane gostitelje. Reprodukcija, 124: 339-346.

Stefanova NA, Fursova AZ, Sarsenbaev KN in Kolosova NG (2011). Učinki Cistanche deserticola na vedenje in znake katarakte in retinopatije pri podganah OXYS s pospešenim staranjem. J. Ethnopharmacol., 138: 624-632.

Talha M, Bilal G, Gökhan T, Arı Z in Coşkun B (2007). Povezava ravni spolnih hormonov in erektilne disfunkcije: Katere teste je treba opraviti rutinsko? Yonsei. Med. J., 48: 1015

Tombal B (2005). Ustrezna kastracija z agonisti luteinizirajočega hormona sproščajočega hormona (LHRH): Kakšna je optimalna raven testosterona? EUR. Urol. Dodatek, 4: 14-19.

Trachtenberg J (1985). Optimalna koncentracija testosterona za zdravljenje raka prostate. J. Urologija, 133: 888-890

Traish AM, Goldstein I in Kim NN (2007). Testosteron in erektilna funkcija: od osnovnih raziskav do nove klinične paradigme za obravnavo moških z androgensko insuficienco in erektilno disfunkcijo. EUR. Urol., 52: 54-70.

Trisomboon H, Watanabe G, Wetchasit P in Taya K (2007). Učinek dnevnega zdravljenja s tajsko rastlino, Kaempferia parviflora, v Hershbergerjevem testu z uporabo kastriranih nezrelih podgan. J. Reprod. Razviti, 53: 351- 356.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX in Liu X (2013). Antihiperglikemični in hipolipidemični učinki Cistanche tubulosa pri diabetičnih db/db miših tipa 2. J. Ethnopharmacol., 150: 935-945.

Zhao SY, He XY, Jia BG, Peng QY in Liu X (2011). Proizvodnja akteozida iz Cistanche tubulosa z beta-glukozidazo. pak. J. Pharm. Sci., 24: 135-141.

For more information:1950477648nn@gmail.com