Povzetek:Bučno olje je stranski proizvod, bogat s hranili in bioaktivnimi sestavinami, ki spodbujajo številne zdravstvene koristi. Namen te študije je bil primerjati kemične sestave, antioksidativne in farmakološke aktivnosti olj bučnih semen, ekstrahiranih iz Cucurbita moschata Duch. Ex Poir. (PSO1) in Cucurbita moschata (japonska buča) (PSO2) z vodno encimsko ekstrakcijo. V procesu encimske ekstrakcije smo uporabili mešanico encimov, sestavljeno iz pektinaze, celulaze in proteaze (1:1:1). Maščobnokislinsko sestavo olj smo določili z uporabo metil estra maščobne kisline/plinske kromatografsko-masne spektrometrije. Testi antioksidativne aktivnosti so bili izmerjeni z uporabo stabilnega prostega radikala difenilpikrilhidrazila, radikalnega kationa 2, 20 -azinobis-(3- etilbenzotiazolin-6-sulfonata, redukcijske/antioksidativne moči železa in testa železovega tiocianata. Raziskani so bili encimi, ki vključujejo staranje kože in proces beljenja. Linolna kislina je bila glavna sestavina vseh bučnih olj. Poleg tega je bila odkrita tudi znatna količina oleinske kisline, palmitinske kisline in stearinske kisline. PSO2 je imel najvišjo antioksidativno aktivnost v primerjavi z PSO1 in komercialna bučna olja (COM1 in COM2). Tako PSO1 kot PSO2 sta pokazala večje zaviralne učinke na hialuronidazo, kolagenazo in tirozinazo kot reklame. Zato bi vodna encimska ekstrakcija lahko dala bučna olja z večjo antioksidativnostjo, anti-aging in beljenje. To je koristno za nadaljnje farmakološke študije in se lahko uporablja kot funkcionalna hrana za blagodejno delovanje kože.

Glede na ustrezne študije,cistancheje navadno zelišče, ki je znano kot »čudežno zelišče, ki podaljšuje življenje«. Njegova glavna sestavina jecistanozid, ki ima različne učinke kot nprantioksidant, protivnetno, inspodbujanje imunske funkcije. Mehanizem med cistančo inkožo beljenjeleži v antioksidativnem učinku cistančeglikozidi. Melanin v človeški koži nastaja z oksidacijo tirozina, ki jo kataliziratirozinaza, oksidacijska reakcija pa zahteva sodelovanje kisika, zato radikali brez kisika v telesu postanejo pomemben dejavnik, ki vpliva na proizvodnjo melanina. Cistanche vsebuje cistanozid, ki je antioksidant in lahko zmanjša nastajanje prostih radikalov v telesu.zaviranje proizvodnje melanina.

Kliknite na dodatek Cistanche Tubulosa

Za več informacij:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Uvod

Buča spada v rod Cucurbita in družino Cucurbitaceae, pogosta in znana rastlina, ki so jo gojili v severni Mehiki in se je razširila v Evropo, Zahodno Ameriko in Azijo [1]. Buča velja za funkcionalno živilo, ki vsebuje obilo hranil, kot so beljakovine, ogljikovi hidrati, lipidi, vlaknine itd., skupaj s fitokemičnimi spojinami, kot so tokoferoli, karotenoidi in -sitosterol [2]. Ugotovljeno je bilo, da imajo fitonutrienti iz različnih delov buče farmakološko delovanje [2]. Ekstrakt bučne lupine je pokazal ugodne učinke na opeklinske rane na živalskih modelih [3]. Bučna pulpa je pri miših pokazala antioksidativno, protivnetno in antiangiogenezno delovanje [2] ter delovanje proti utrujenosti [4]. Poleg tega so bučna semena dober naravni vir esencialnih maščobnih kislin in fitosterolov, ki zmanjšujejo tveganje za srčno-žilno smrtnost [5,6]. Bučno olje je stranski produkt predelave bučnih semen, ki so bogata z različnimi maščobnimi kislinami in bioaktivnimi spojinami, kot so -karoteni, -tokoferol, vitamin B, lutein, fitosteroli in drugi minerali [7,8]. Olje ima antioksidativne, protivnetne, antibakterijske in celjenje ran [1,9]. Poleg tega ima več zdravstvenih koristi proti boleznim, kot so na primer hipertenzija, sladkorna bolezen in rak [8,10].

Razvite so bile različne metode za pridobivanje semenskega olja, vključno z mehanskimi metodami, kot sta hladno stiskanje [11] in visokotlačna ekstrakcija [12]. Dokumentirana je bila tudi ekstrakcija semenskega olja s topili z uporabo organskih topil, kot so heksan, etil acetat, aceton in metanol [13,14]. Ekstrakcija s pomočjo encimov je alternativna metoda za industrijo rastlinskih olj, ker je okolju prijazna in varna tehnologija. Glavni mehanizem vodne encimske ekstrakcije je hidrolizacija in lomljenje celičnih sten rastlinskega materiala, kar vodi do večje prepustnosti in sproščanja bioaktivnih sestavin, vključno z oljno fazo [15]. Različne mešanice encimov, ki se uporabljajo pri tej ekstrakciji, so sestavljene iz pektinaz, celulaz, hemicelulaz, arabinoze, -glukanaze in ksilanaze [16,17]. Optimizirani pogoji mešanice encimov, na primer temperatura, pH, reakcijski čas, velikost delcev in koncentracija encimov, so prav tako povečali aktivnost encimov [16]. Dandanes se ta metoda pogosto uporablja za pridobivanje olja iz številnih sadežev in rastlinskih semen [18,19]. Nekatere prejšnje študije so pokazale optimizirano stanje bučnega olja za doseganje visokega izkoristka in učinkovitih farmakoloških aktivnosti [20,21].

Trenutno ljudje uživajo bučno olje v sladicah ali solatnih prelivih, je pa tudi priljubljena sestavina v kozmetiki. Staranje kože je kompleksen biološki proces, za katerega so značilni gubanje, izguba elastičnosti, izguba vlage in groba tekstura, ki jo povzročajo oksidativni stres, poškodbe DNK in napredovalo kopičenje končnih produktov glikacije [22]. Hialuronsko kislino, kolagen in elastin, ki so pomembne sestavine kože, lahko razgradijo encimi hialuronidaza, kolagenaza in elastaza, kar povzroči staranje kože. Več rastlinskih olj, kot so olivno olje, olje sončničnih semen, olje grozdnih pečk in jojobino olje, se uporablja za kozmetične lastnosti kože za zadrževanje vlage, izboljšanje funkcije kožne pregrade in preprečevanje staranja kože [23]. Poleg tega je pigmentacija kože spremenljiv in opazen fenotip pri ljudeh, ki vključuje melanogenezo in jo uravnava encim tirozinaza [24]. Trenutno so bili različni rastlinski izvlečki testirani v kozmetičnih in farmacevtskih izdelkih za zmanjšanje proizvodnje melanina, ki deluje kot belilna sredstva [25,26].

2. Materiali in metode

2.1. Rastlinski materiali

2.2. Kemikalije in reagenti 

2.3. Vodna encimska ekstrakcija

Bučna olja iz obeh C. moschata Duch. Ex Poir in C. moschata (japonska buča) sta bili ekstrahirani z metodo vodne encimske ekstrakcije z uporabo parametrov encimske hidrolize iz prejšnje študije Kanopke et al. (2016), vključno s koncentracijo encima, razmerjem med encimom in substratom, reakcijsko temperaturo, pH in reakcijskim časom [21]. Tri različne vrste encimov, vključno s pektinazo, celulazo in proteazo, so združili v masnem razmerju 1:1:1, da bi ustvarili koncentriran koktajl encimov. Nato je bil nastali koktajl koncentrata razredčen v DI vodi, da je nastala 2-odstotna m/m vodna encimska mešanica. Nastali vodni encimski mešanici smo nato dodali neluščična bučna semena v masnem razmerju 1:1. Zmes smo nato fino zmleli z mešalnikom Moulinex DB81 pri sobni temperaturi do homogenosti. pH nastale brozge smo nato prilagodili na 4,7 z uporabo 0,1 M HCl in inkubirali pri 54 °C 15 ur. Ko smo zmes ohladili na sobno temperaturo, smo jo centrifugirali pri 11.500 × g 10 minut. Zgornja plast supernatantov, ki je bila oljna faza, je bila zbrana. Smetana, nastala med postopkom ekstrakcije, ni bila emulgirana, ampak odstranjena s sifoniranjem z mikropipeto. Ostanek bučnega semena smo odstranili s filtracijo skozi filtrirni papir Whatman No.1 pod vakuumom [21]. Bučno olje iz C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) in C. moschata (japonska buča) (PSO2) sta bila do nadaljnjega eksperimentiranja shranjena v dobro zaprtih, svetlobno odpornih posodah pri sobni temperaturi.

2.4. Določanje kemijske sestave bučnega olja z metodo metil estra maščobnih kislin/plinske kromatografije-masne spektrometrije (FAME/GC/MS)

2.5. Določanje antioksidativnih aktivnosti

2.5.1. 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) test odstranjevanja radikalov

Aktivnost lovljenja radikalov DPPH (DPPH•) je bila določena z uporabo metode, ki so jo določili Chaiyana et al. (2017) [27]. Na kratko, 20 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) in linolne kisline, raztopljene v DMSO, smo zmešali s 180 µL 167 µM etanolne raztopine DPPH v 96-plošči z vdolbinicami in nato inkubirali 30 minut pri sobne temperature v temi. Kot pozitivno kontrolo smo uporabili askorbinsko kislino (1 mg/mL). Optično gostoto (OD) smo izmerili pri 520 nm z uporabo čitalnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih. Odstotek inhibicije DPPH je bil izračunan z uporabo enačbe (1):

Inhibicija DPPH (odstotki)={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)

2.5.2. 2,20 -Azino-Bis-3-Etilbenztiazolin-6-Test sulfonske kisline (ABTS)

Aktivnost lovljenja kationskih radikalov ABTS (ABTS• plus) je bila izmerjena s kolorimetrično metodo po Chaiyana et al. (2017) in Paradee et al. (2019) [27,28] z rahlo spremembo. ABTS• plus smo ustvarili z dodajanjem 2 ml 7 mM ABTS s 3 ml 2,45 mM kalijevega persulfata in inkubirali 16–24 ur pri sobni temperaturi v temi. Nastali ABTS• plus smo nato razredčili z etanolom, da smo dobili OD 0,7 ± 0,1 pri 750 nm. Na kratko, 20 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) in linolne kisline, raztopljene v DMSO, smo zmešali s 180 µL ABTS• plus etanolne raztopine v 96-plošči z jamicami in inkubirali 5 minut pri sobni temperaturi . OD smo izmerili pri 750 nm z uporabo bralnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Kot pozitivno kontrolo smo uporabili askorbinsko kislino (1 mg/mL). Standardna krivulja je bila izdelana z risanjem absorbance pri 750 nm v primerjavi z različnimi koncentracijami Troloxa v razponu od 2,5–30 µg/mL. ABTS• plus lovilna aktivnost je bila izračunana iz standardne krivulje Trolox (R2=0.9922) in izražena kot Trolox ekvivalentna antioksidativna kapaciteta (TEAC). Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih.

2.5.3. Test antioksidativne moči železa (FRAP).

Antioksidantna moč, ki zmanjšuje železo (FRAP) vsakega od vzorcev, je bila določena s testom FRAP, kot je opisano v prejšnji študiji Chaiyana et al. (2017), ki je bil nekoliko spremenjen iz Saeio et al. (2011) [27,29]. Reagent FRAP smo sveže ustvarili z mešanjem 300 mM acetatnega pufra (pH 3,6), 10 mM 2,4,6 tripiridil-s-triazina (TPTZ) v 40 mM HCl in 20 mM FeCl3 v razmerju 10:1:1. V tej študiji smo 20 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) in linolne kisline zmešali s 180 µL reagenta FRAP v 96-plošči z vdolbinicami in inkubirali 5 minut pri sobni temperaturi v temi. OD smo izmerili pri 595 nm z uporabo bralnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Kot pozitivno kontrolo smo uporabili askorbinsko kislino (1 mg/mL). Standardna krivulja je bila izdelana z risanjem absorbance pri 595 nm v primerjavi z različnimi koncentracijami železovega sulfata (FeSO4) v razponu od 0,003–0,5 mM. Vrednost FRAP je bila izračunana iz standardne krivulje FeSO4 (R2=0.9965) in izražena kot ekvivalentna kapaciteta (EC1). Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih.

2.5.4. Test železovega tiocianata (FTC).

2.6. Določitev aktivnosti proti staranju

2.6.1. Anti-hialuronidazno delovanje

Merjenje aktivnosti proti hialuronidazi je bilo izvedeno, kot so predhodno opisali Chaiyana et al. (2020) [31]. Najprej smo 20 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) zmešali s 100 µL 15 U/mL raztopine hialuronidaze in inkubirali pri 37 ◦C 10 minut. Po inkubaciji smo dodali 100 µL 0,03-odstotne m/v hialuronske kisline, ki smo jo raztopili v 20 mM fosfatnega pufra (pH 5,35), nato inkubirali pri 37 °C 45 minut. Po tem smo dodali 1 ml 0,1-odstotnega govejega serumskega albumina in inkubirali pri sobni temperaturi 10 minut. OD je bila določena pri 600 nm z uporabo večmodnega detektorja (Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, ZDA). Oleanolna kislina (0,25 odstotka w/v) je bila uporabljena kot pozitivna kontrola. Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih. Odstotek inhibicije hialuronidaze je bil izračunan z uporabo enačbe (3):

2.6.2. Anti-kolagenazno delovanje

Merjenje aktivnosti proti kolagenazi je bilo izvedeno v skladu s postopkom, ki so ga določili Chaiyana et al. (2019) in Thring et al. (2009) z manjšimi spremembami [32,33]. Na kratko, 20 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) smo zmešali z 20 µL 0,1 U/mL raztopine kolagenaze iz Clostridium histolyticum in inkubirali pri 37 ◦C 15 minut. Po inkubaciji dodamo 80 µL 50 mM tricinskega pufra (400 mM NaCl in 10 mM CaCl2, pH 7,5) in 40 µL N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly- Dodali smo raztopino substrata Pro-Ala (FALGPA). OD smo takoj zaznali pri 340 nm in nato neprekinjeno merili 20 minut z uporabo bralnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Oleanolna kislina (1 odstotek w/v) je bila uporabljena kot pozitivna kontrola. Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih. Odstotek inhibicije kolagenaze je bil izračunan z uporabo enačbe (4):

2.6.3. Dejavnost proti elastazi

Merjenje aktivnosti proti elastazi je bilo izvedeno v skladu s postopkom, ki so ga določili Chaiyana et al. (2019) in Thring et al. (2009) z manjšimi spremembami [32,33]. Na kratko, 10 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) smo zmešali s 40 µL 0,03 U/mL raztopine elastaze iz prašičje trebušne slinavke, nato 50 µL 200 mM Tris-HCL pufra (pH 8,0) in 100 µL Dodali smo 0,8 mM raztopino substrata N-sukcinil-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilida (AAAPVN). OD smo takoj zaznali pri 410 nm in nato neprekinjeno merili 20 minut z uporabo bralnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Oleanolna kislina (1 odstotek w/v) je bila uporabljena kot pozitivna kontrola. Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih. Odstotek inhibicije elastaze je bil izračunan z uporabo enačbe (5):

2.7. Določanje aktivnosti proti tirozinazi

Učinek beljenja naravnega izvlečka je bil ugotovljen z meritvijo aktivnosti proti tirozinazi, ki je bila izvedena v skladu s Saeio et al. (2011) in Laosirisathian et al. (2020) [29,34]. L-tirozin in L-DOPA sta bila substrata encima tirozinaze v tej študiji. Na kratko, 10 µL vzorcev olja (PSO1, PSO2, COM1, COM2) smo zmešali s 30 µL tirozinaze v 96-plošči z vdolbinicami, nato pa inkubirali pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji smo dodali 100 µL substrata, ki je 2,5 mM L-tirozina ali L-DOPA, in inkubirali 30 minut. OD smo določili pri 450 nm z uporabo bralnika mikroplošč (Microplate readers EZ Read 2000, Biochrome, Anglija). Kojično kislino (20 µg/mL) smo uporabili kot pozitivno kontrolo. Poskusi so bili izvedeni v treh izvodih in izvedeni v treh neodvisnih. Odstotek inhibicije tirozinaze je bil izračunan z uporabo enačbe (6):

2.8. Statistična analiza

Vsi podatki so bili prikazani kot povprečje ± standardni odklon (SD). Statistična pomembnost je bila analizirana z enosmerno analizo variance (ANOVA), ki ji je sledil Tukeyjev naknadni test z uporabo GraphPad Prism (različica 8.0, programska oprema GraphPad), p < 0.05 je bil upoštevan statistično pomembno.

3. Rezultati in razprava

3.1. Znak bučnega olja

V tej študiji smo za ekstrakcijo bučnega olja iz C. moschata Duch namesto ekstrakcije z organskimi topili uporabili vodno encimsko ekstrakcijo. Ex Poir (PSO1) in C. moschata (PSO2), ker je to preprost, učinkovit in produktiven proces [15,21]. PSO1 je bila temno rjava tekočina z nizko viskoznostjo, medtem ko je bil PSO2 zelenkasto rjava tekočina z nizko viskoznostjo. Obe bučni olji sta imeli značilen vonj. Donosa PSO1 in PSO2 sta bila 17,7 % v/m oziroma 15,6 % v/w. Poleg olja so poročali, da bučna semena vsebujejo različne hranilne spojine. Približne sestave C. moschata so bile predvsem ogljikovi hidrati (39,51 odstotka), sledijo maščobe (28,49 odstotka), beljakovine (19,23 odstotka), voda (7,67 odstotka) in pepel (5,18 odstotka) [35]. Vendar pa je v primerjavi s prejšnjimi študijami z uporabo topila in mehanskega stiskanja ta študija pokazala nižje donose olja C. moschata. Čeprav je bila ekstrakcija s topilom opisana kot najučinkovitejša metoda ekstrakcije olja, saj iz semen izloči do 98 odstotkov olj, obstajajo nekatera vprašanja v zvezi z ostanki topil in čistostjo proizvedenega olja [36]. Poleg tega je topilo, uporabljeno v procesu ekstrakcije, vplivalo na izkoristek proizvedenega olja. Ekstrakcija s heksanom, petroletrom, petroletrom, cikloheksanom, izopropil etrom, etil acetatom, tetrahidrofuranom, propan-2-olom in acetonom je dala 43,4–64,4 odstotka [37,38]. Zato je bilo hladno stiskanje bolj primerno kot ekstrakcija s topilom. Hladna stiskalnica pa lahko povzroči nekaj težav v začetni fazi uporabe vijačne stiskalnice [39]. Zato bi lahko bila vodna encimska ekstrakcija alternativna metoda ekstrakcije, saj je dala večjo vsebnost bučnega olja (36.0 odstotkov) v primerjavi s hladno stiskanim oljem (33,5 odstotka) [21]. Čeprav je bil postopek vodne encimske ekstrakcije bolj zapleten kot postopek hladnega stiskanja, vključuje razmeroma cenejše naložbene stroške, nenehno zniževanje stroškov komercialnih encimskih pripravkov, možnost hkratne izolacije edinstvenih in dragocenih fitokemičnih komponent ter obravnavanje razširjena želja po implementaciji zelenih tehnologij [21]. Preliminarne študije so opisale, da se je več encimov, kot so celulaze, pektinaze, hemicelulaze in proteaze, pogosto uporabljalo za uničenje strukture rastlinske celične stene za izboljšanje bioaktivne ekstrakcije iz rastlin [16,17]. Zato smo zasnovali to študijo za ekstrakcijo semenskega olja z uporabo encimske mešanice, ki vsebuje pektinazo, celulazo in proteazo (1:1:1), kot so predhodno opisali Kanopka et al. (2016), ki je optimiziral pogoje encimske hidrolize za pridobitev največjega izkoristka bučnega olja [21]. Poleg tega ta metoda prikazuje varnejše in okoljsko bolj trajnostne alternative ekstrakciji s topilom, ki jo tukaj imenujemo "zelena ekstrakcija".

3.2. Kemična sestava bučnega olja

Za analizo sestave maščobnih kislin smo bučno olje z uporabo vodne encimske ekstrakcije (PSO1 in PSO2) primerjali in analizirali skupaj s komercialnim bučnim oljem (COM1 in COM2), proizvedenim s hladno stiskano ekstrakcijo. Sestave maščobnih kislin PSO1, PSO2, COM1 in COM2 so prikazane v tabeli 1. Vsi vzorci bučnega olja so bili sestavljeni iz polinenasičenih (PUFA), enkrat nenasičenih (MUFA) in nasičenih maščobnih kislin. Cis-linolna kislina (C18:2) je bila glavna sestavina vseh vzorcev olja. COM2 je vseboval najvišjo vsebnost maščobnih kislin (51,74 odstotka), sledile so COM1 (48.00 odstotkov), PSO1 (39.09 odstotkov) in PSO2 (37,63 odstotka). Podobno je bila cis-oleinska kislina (C18:1) prisotna v visokem odstotku, zlasti v PSO2 (37,45 odstotka), sledijo COM1 (33,39 odstotka), PSO1 (31,22 odstotka) in COM2 (28,64 odstotka). Nasičene maščobne kisline, kot sta palmitinska kislina (C16:0) in stearinska kislina (C18:0), so bile najdene le v majhnih količinah v vsakem od vzorcev olja. Opažene in identificirane so bile tudi količine drugih PUFA, MUFA in nasičenih maščobnih kislin v sledovih.

V literaturi je linolna kislina znana tudi kot omega-6, esencialna maščobna kislina, ki je človeško telo ne more sintetizirati, ampak jo prejme le s hrano. Linolna kislina je pomembno hranilo za zdravstvene funkcije pri ljudeh, vključuje pa predhodnika ceramidov, ki so glavna sestavina celičnih membran, vitamina D in različnih hormonov [40,41]. Študije na živalih so pokazale, da lahko pomanjkanje linolne kisline povzroči luskavost in srbenje kože [23]. Poleg tega je linolna kislina iz rastlinskega olja podpirala celjenje kožnih ran, skupaj s preprečevanjem vnetja kože in aken [23]. Poleg tega je bila oleinska kislina ali omega-9 koristna pri preprečevanju raka, avtoimunskih in vnetnih bolezni [42]. Dejansko je oleinska kislina znatno zmanjšala proizvodnjo dušikovega oksida na mestu rane, kar je povzročilo hitrejše zaprtje rane [43]. Ti podatki potrjujejo, da ima bučno olje, ki obogati linolno kislino (omega-6) ​​in oleinsko kislino (omega-9), potencialne koristi za zdravje.

Po naših ugotovitvah je bučno olje (PSO1, PSO2, COM1 in COM2) sestavljeno iz številnih maščobnih kislin, vključno z linolno kislino (C18:2), oleinsko kislino (C18:2), palmitinsko kislino (C16:0). in stearinsko kislino (C18:0), ki sta pogosti sestavini bučnega olja [44]. V vseh vzorcih olja sta prevladovali linolna kislina (omega-6) in oleinska kislina (omega-9). Največja količina linolne kisline je bila COM2, sledile so COM1, PSO1 in PSO2. Prav tako je bila največja količina oleinske kisline PSO2, sledile so COM1, PSO1 in COM2. Ti rezultati pojasnjujejo, da je imela vodna encimska ekstrakcija bučnega olja nekoliko nižjo vsebnost linolne kisline, ne pa tudi oleinske kisline kot ekstrakcija s hladnim stiskanjem. Razlog za nižjo vsebnost linolne kisline v bučnih semenih iz vodne encimske ekstrakcije kot v komercialnih vzorcih olja je bila razlika v postopku ekstrakcije. Prejšnje študije so odkrile nedoslednosti v količini nenasičenih maščobnih kislin, zlasti oleinske kisline in linolne kisline, v oljih bučnih semen iz različnih ekstrakcij [39]. Vsebnost oleinske kisline se je gibala od 28,19 odstotka v hladno stiskanem bučnem olju do 30,56 odstotka v bučnem olju, ekstrahiranem s pentanom, vsebnost linolne kisline pa je bila v razponu od 43.86 odstotkov v bučnem olju, ekstrahiranem s pentanom. na 46,67 odstotka v hladno stiskanem bučnem olju [39]. Poleg različnih metod ekstrakcije so na vsebnost linolne kisline v rastlinskih semenih vplivala tudi topila, uporabljena v procesu ekstrakcije, in temperatura med zorenjem semena. Prejšnja študija je poudarila, da je petrol eter dal laneno olje z nizko vsebnostjo linolne kisline (26,2 odstotka), medtem ko je n-heksan dal nasprotujoče si rezultate z vsebnostjo linolne kisline 46,5 odstotka [45]. Poleg tega je linolna kislina obratno sorazmerna s temperaturo med zorenjem sončničnih semen [46].

Poleg tega je relativna študija odkrila, da je kemična sestava v smislu sestave maščobnih kislin razkrila, da sta bili linolna in oleinska kislina prisotni v 47,45 odstotka oziroma 35 odstotkov v bučnem olju (C. maxima), ekstrahiranem z dietil etrom [47]. . Po mnenju Akina in sod. (2018) se je vsebnost linolne kisline gibala od 53,19 odstotka do 53,27 odstotka, sledila ji je oleinska kislina, ki je bila prav tako prisotna v visokih količinah, in sicer od 27,52 odstotka do 27,59 odstotka v hladno stiskanem olju iz semen C. pepo L. [48]. ]. Zato je vodna encimska ekstrakcija v tej študiji dosegla tudi nižje izkoristke maščobnih kislin kot ekstrakcija s topilom in ekstrakcija s hladnim stiskanjem, omenjena v prejšnjih študijah. Pri primerjavi sort smo ugotovili, da PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) kaže večjo količino linolne kisline kot PSO2 (C. moschata ali japonska buča). Različno je PSO2 predstavljal večjo količino oleinske kisline kot PSO1. Pomembno je, da so bile razlike v profilih maščobnih kislin in količinah bučnega olja odvisne od izvora določenih kultivarjev, podnebnih razmer in upravljanja po žetvi [49]. Poleg razlik v profilih maščobnih kislin v bučnih oljih, pridobljenih z različnimi metodami ekstrakcije, so poročali, da so olja iz vodne encimske tehnologije bogata s fitosterolom in tokoferolom [50]. Zato sta PSO1 in PSO2, ki sta bila proizvedena z metodo zelene ekstrakcije, predlagana kot alternativna bučna olja za nadaljnjo uporabo.

Za več informacij: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501