Ekstrakcija, fizikalno-kemijske lastnosti, proti staranju in antioksidativne aktivnosti polisaharidov iz ostankov industrijske konoplje 2. del

2.8. Študija aktivnosti proti staranju

2.8.1. Viabilnost celic

In vitro se za oceno toksičnosti testiranih vzorcev pogosto uporabljajo poskusi citotoksičnosti [37]. Učinki IHRP na viabilnost celic HDF in HEK, ki sta bili običajno uporabljeni epidermalni celični liniji, so prikazani na sliki 5. IHRP skorajda niso imeli citotoksičnosti za HDF in HEK. Poleg tega bi lahko IHRP spodbujali celično proliferacijo med 100 in 800 µg/mL. Da bi zagotovili, da koncentracija vzorca ne vpliva na viabilnost celic, smo za naslednje poskuse izbrali koncentracije IHRP pod 400 µg/mL.

Glikozid cistanche lahko tudi poveča aktivnost SOD v srčnem in jetrnem tkivu ter znatno zmanjša vsebnost lipofuscina in MDA v vsakem tkivu, učinkovito lovi različne reaktivne kisikove radikale (OH-, H₂O₂ itd.) in ščiti pred povzročeno poškodbo DNK z OH-radikali. Cistanche feniletanoidni glikozidi imajo močno sposobnost lovljenja prostih radikalov, večjo redukcijsko sposobnost kot vitamin C, izboljšajo aktivnost SOD v suspenziji semenčic, zmanjšajo vsebnost MDA in imajo določen zaščitni učinek na delovanje membrane semenčic. Cistanche polisaharidi lahko povečajo aktivnost SOD in GSH-Px v eritrocitih in pljučnem tkivu eksperimentalno starajočih se miši, ki jih povzroča D-galaktoza, pa tudi zmanjšajo vsebnost MDA in kolagena v pljučih in plazmi ter povečajo vsebnost elastina. dober čistilni učinek na DPPH, podaljša čas hipoksije pri starajočih se miših, izboljša aktivnost SOD v serumu in upočasni fiziološko degeneracijo pljuč pri eksperimentalno starajočih se miših. Pri celični morfološki degeneraciji so poskusi pokazali, da ima Cistanche dobro antioksidativno sposobnost in ima potencial, da postane zdravilo za preprečevanje in zdravljenje bolezni staranja kože. Hkrati ima ehinakozid v Cistanche pomembno sposobnost čiščenja prostih radikalov DPPH in lahko lovi reaktivne kisikove vrste, preprečuje razgradnjo kolagena, ki jo povzročijo prosti radikali, in ima tudi dober učinek popravljanja poškodb anionov prostih radikalov timina.

Kliknite na Cistanches Herba za antioksidante

【Za več informacij:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

2.8.2. Test HDF celic s praskami

Test s praskami je in vitro metoda, ki se pogosto uporablja za ocenjevanje prispevka celičnih in molekularnih mehanizmov k celični proliferaciji in migraciji [38]. Slike stanja celjenja HDF prask so prikazane na sliki 6. Vsi IHRP različnih koncentracij so bili koristni za celjenje celičnih prask v primerjavi s kontrolo. Še več, ko je bila koncentracija IHRP med 50 in 200 µg/mL, bi lahko IHRP znatno pospešili celjenje celičnih prask. Stopnja celjenja prask HDF po 24 urah je bila 64,51 ± 3,69 odstotka (p < 0,01), 58,03 ± 3,90 odstotka (p < 0,05) oziroma 66,21 ± 6,60 odstotka (p < 0,01), ko so IHRPs koncentracija je bila 50, 100 in 200 µg/mL, kot je prikazano v tabeli 6. Poleg tega je bil zdravilni učinek IHRP zelo blizu učinku pozitivne kontrole TGF- (62,29 ± 4,69 odstotka, p < 0,01). Rezultati testa prask so pokazali, da lahko IHRP pospešijo celjenje celičnih prask in spodbujajo celično proliferacijo.

2.8.3. qRT-PCR analiza ekspresije gena HDF

Izvedenih je bilo več študij za oceno potenciala različnih rastlin proti staranju [39,40]. Relativna kvantifikacija genov proti staranju HDF je prikazana na sliki 7. Kot je prikazano na sliki, so bili kot pozitivna kontrola uporabljeni TGF-, Vc in HA. Vrstni red relativne kvantifikacije AQP-3 je bil HA > TGF- > IHRPs > Vc. Vrstni red relativne kvantifikacije COL1A1 je bil TGF- > Vc > HA > IHRPs. Vrstni red relativne kvantifikacije COL3A1 je bil Vc > TGF- > HA > IHRPs. Vrstni red relativne kvantifikacije ELASTINA je bil TGF- > Vc > HA > IHRP. Vrstni red relativne kvantifikacije MMP-1 je bil IHRPs > HA > Vc > TGF-. Zato v primerjavi s pozitivno kontrolo IHRP skorajda niso imeli pozitivnega učinka na izražanje AQP-3, COL1A1, COL3A1 in ELASTINA. Vendar pa so IHRP znatno spodbujali izražanje MMP-1. MMP-1 primarno proizvajajo keratinociti in se v glavnem uporablja za razgradnjo in fragmentacijo kolagenskih vlaken kože [41]. Če povzamemo, lahko IHRP spodbujajo proliferacijo HDF in izražanje genov, povezanih s staranjem, kar kaže na potencial IHRP proti staranju in obnavljanju kože.

3. Materiali in metode

3.1. Materiali in reagenti

IHR je zagotovil Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd. (Kunming, Kitajska). Fenol, -naftol, žveplovo kislino, karbazol, Coomassie blue G-250, fosforno kislino, etanol, kloroform in kontrolo monosaharida je dobavil Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. (Šanghaj, Kitajska). Galakturonsko kislino, glukuronsko kislino, guluronsko kislino in arbutin smo kupili pri Sigma-Aldrich Co., Ltd. (St. Louis, MO, ZDA). Človeški dermalni fibroblast (HDF), človeški epidermalni keratinociti (HEK) in celoten celični medij so bili kupljeni pri Sciencell Co., Ltd. (Carlsbad, CA, ZDA). 12-plošče z vdolbinicami in 96-plošče z vdolbinicami je ponudilo podjetje Corning Co., Ltd. (Corning, NY, ZDA). Komplet za testiranje viabilnosti celic CCK-8 je bil kupljen pri DOJINDO Biology Co., Ltd. (Tokio, Japonska), druge komplete za odkrivanje pa je ponudil Takara Co., Ltd. (Takara, Japonska).

3.2. Optimizacija ekstrakcije IHRP

3.2.1. Primerjava različnih metod ekstrakcije

Perkolacijska ekstrakcija: 100 g IHR smo dodali v 2000 mL deionizirane vode. Ekstrakcijo smo izvedli s pretokom 150 ± 50 ml/h po 2 urah. Ekstrakcija s segrevanjem: 100 g IHR smo dodali v 2000 ml deionizirane vode. Ekstrakcijo smo izvajali pri 98 ◦C 1 uro in postopek dvakrat ponovili. Ultrazvočno podprta ekstrakcija: 100 g IHR smo raztopili v 2000 ml deionizirane vode. Ekstrakcijo smo izvajali 0,5 ure pri 60 ◦C in postopek dvakrat ponovili.

Filtrate smo koncentrirali z uporabo vakuumskega rotacijskega uparjalnika. Nato smo raztopino posušili z vakuumskim sušilnikom. Za izbiro ustrezne metode je bila določena vsebnost polisaharidov.

3.2.2. Enofaktorski poskusi

Za ekstrakcijo IHRP smo določeni količini deionizirane vode dodali 100 g IHR. Temperatura ekstrakcije (40, 60, 80 in 98 ± 2 ◦C), razmerje med trdno in tekočino (1:6, 1:8, 1:10 in 1:15), čas ekstrakcije (0,5, 1,0, 1,5 in 2 h), pH (3, 5, 7, 9 in 11) in več zaporednih ekstrakcij (1, 2, 3, 4) so ​​proučevali ločeno, da bi ocenili vpliv posameznih dejavnikov na ekstrakcijo IHRP.

3.2.3. Ortogonalni eksperimentalni načrt

Pogoji ekstrakcije so bili dodatno optimizirani z ortogonalnim eksperimentalnim načrtom. Kot je prikazano v tabeli 7, so bile štiri izbrane spremenljivke temperatura ekstrakcije (60, 80 in 98 ± 2 ◦C), RS/L (1:6, 1:8 in 1:10), število zaporednih ekstrakcij (1 , 2 in 3) in pH (4, 7 in 10). Ortogonalni eksperimenti so bili razdeljeni v 9 skupin. Teža polisaharidov je bila tarča za oceno pogojev ekstrakcije.

3.3. Pregled pogojev za obarjanje alkohola IHRP

Ekstrakcijsko raztopino smo dobili pri optimalnih pogojih v skladu s 3.2 in dodali 400 ml etanola. Poskusi so bili izvedeni na podlagi različnih stopenj dodajanja alkohola, načina mešanja in hitrosti ohlajanja v tabeli 8. Oborino smo dobili po centrifugiranju in sušenju. Nato sta bili pridobljeni teža in vsebnost polisaharidov, da se določijo primerni pogoji za obarjanje alkohola.

3.4. Določanje izkoristka polisaharidov in kemijske sestave IHRP

Vsebnost beljakovin je bila izračunana na podlagi Bradfordove metode, kot standard pa je bil uporabljen goveji serumski albumin (BSA) [42]. Skupna vsebnost sladkorja v IHRP je bila pridobljena po fenol-sulfatni metodi, glukoza pa je bila uporabljena kot standard [43]. Vsebnost uronske kisline je bila pridobljena z metodo karbazol-žveplova kislina [44]. Dobitek polisaharida je bil dobljen z enačbo (1).

kjer se YP nanaša na izkoristek polisaharida, mA se nanaša na težo IHRP, mB pa predstavlja težo IHR, uporabljenega za ekstrakcijo polisaharida.

3.5. Čiščenje IHRP

Najprej smo pripravili 100 g surovih IHRP v optimalnih pogojih, določenih v razdelkih 3.2 in 3.3. Surovi IHRP so bili nadalje prečiščeni z različnimi metodami.

Adsorpcija z aktivnim ogljem: 10 g surovih IHRP smo dodali v 200 ml deionizirane vode. Aktivno oglje z 1-odstotno, 2-odstotno, 4-odstotno in 8-odstotno maso IHRP je bilo pomešano z raztopino. Nato raztopino mešamo pri 60 ◦C 1 uro in filtriramo. Po izpiranju z deionizirano vodo smo filtrat koncentrirali in posušili.

Membranska filtracija: 10 g surovih IHRP smo dodali v 500 mL deionizirane vode. Nato smo raztopino neprekinjeno filtrirali z membranami z različnimi molekulskimi masami (30,000 Da, 10,000 Da, 1000 Da in 500 Da). Filtrat in retentat smo zbrali in posušili. Končno so bili pridobljeni IHRP z različnimi molekulskimi masami.

Metoda Savage: 1 g surovih IHRP smo dodali v 100 ml deionizirane vode. Nato smo raztopino zmešali z reagentom Sevage (n-butanol: kloroform=1: 5 (v/v)). Zmes smo mešali 15 minut in jo prenesli v lij ločnik za stratifikacijo. Zgornji postopek smo ponovili 5-krat. Nato smo tako organsko kot vodno fazo posušili.

Kolonska kromatografija: 10 g šibko bazične anionske izmenjevalne smole smo za 2 uri potopili v deionizirano vodo, nato naložili v stekleno kolono (2 × 30 cm). 10 g surovih IHRP smo dodali v 200 ml deionizirane vode. Nato smo raztopino počasi spustili skozi plast smole. Kolono smo sprali s 100 ml 30-odstotnega etanola. Eluent smo koncentrirali in posušili.

3.6. Analiza sestave monosaharidov

Test sestave monosaharida je bil izveden po prejšnji metodi z manjšimi modifikacijami [45]; 5 mg IHRP smo hidrolizirali z 1 ml trifluoroocetne kisline (TFA, 2 M) 6 ur pri 105 ◦C. Nato smo raztopino posušili v atmosferi dušika. Posušeni hidrolizat smo dodali k 5 ml deionizirane vode, potem ko smo TFA odstranili z metanolom. Nato 0.5 mL 0.3 M raztopine NaOH in 1 mL 0.5 M 1-fenil-3-metil-5- hidrolizatu smo dodali raztopino metanola pirazolona (PMP). Dobljeno raztopino smo hranili v vodni kopeli 2 uri pri 70 ◦C za derivatizacijo. Nato smo za nevtralizacijo dodali 0.5 ml raztopine HCl (0.3 M). Raztopino smo zmešali z 1 ml kloroforma za HPLC analizo. Kot referenco je bilo uporabljenih več monosaharidov. Kromatografski pogoji: Mobilna faza A (82 odstotkov): 0,1 M raztopina KH2PO4. Mobilna faza B (18 odstotkov): acetonitril. Kolona: C18 (5 µm, 4,6 × 250 mm). Injekcijski volumen: 10 µL. Hitrost pretoka: 1,0 ml/min. Valovna dolžina zaznavanja: 245 nm. Temperatura kolone: ​​30 ◦C.

3.7. Infrardeča spektroskopija s Fourierjevo transformacijo (FT-IR)

Vzorci za analizo FT-IR so bili pripravljeni z mešanjem 5 mg IHRP s 125 mg KBr. FT-IR spektri vzorcev so bili pridobljeni med 4000 in 500 cm−1.

3.8. Študija antioksidativne aktivnosti

3.8.1. DPPH aktivnost odstranjevanja radikalov

Aktivnost DPPH pri lovljenju prostih radikalov IHRP je bila ovrednotena na podlagi opisane metode z nekaj modifikacijami [46]. Na kratko, 2 ml vzorčne raztopine (0.2, 0.4, 0.6, 0.8 in 1.0 mg/ mL) smo zmešali z 2 ml raztopine DPPH (0.1 mM). Zmes smo 30 minut hranili v temi, nato pa smo dobili absorbanco (Abs) pri 517 nm. Hitrost čiščenja DPPH je bila ocenjena z naslednjo enačbo (Enačba (2)) in prešteta je bila 50-odstotna efektivna koncentracija (EC50).

kjer RSD predstavlja hitrost lovljenja prostih radikalov, Ai se nanaša na Abs reakcijskega sistema (DPPH z vzorcem), Aj je Abs ozadja vzorca (topilo z vzorcem) in A0 je Abs negativne kontrole (DPPH s topilom).

3.8.2. ABTS aktivnost odstranjevanja radikalov

Aktivnost odstranjevanja ABTS pri IHRP je bila ovrednotena na podlagi prejšnje metode [47]. Na kratko, raztopino kalijevega persulfata (2,45 mM) smo mešali z raztopino ABTS (7 mM) v temi 12 ur. Dobljeno raztopino ABTS smo razredčili 50-krat na Abs 0.70 ± 0.02 pri 734 nm. Nato je bil 1 ml raztopine vzorca (0.2, 0.4, 0,6, 0,8 in 1,0 mg/mL) dodan 4 ml raztopine ABTS. Zmes smo hitro stresali 1 minuto in jo za 6 minut postavili na temno. Nato smo izmerili Abs pri 734 nm in Vc uporabili kot pozitivno kontrolo. Stopnja čiščenja ABTS je bila izračunana z enačbo (2).

3.9. Študija aktivnosti proti staranju

3.9.1. Celična kultura

Človeški dermalni fibroblast (HDF) in človeški epidermalni keratinociti (HEK) so bili kupljeni pri ScienCell Co., Ltd. Celice so bile gojene z medijem DMEM, ki je vseboval 10 odstotkov FBS. Pogoji kulture so bili 37 ◦C s 5 odstotki CO2.

3.9.2. Viabilnost celic

Test kompleta za štetje celic-8 (CCK-8) je bil izveden za določitev citotoksičnosti IHRP proti celicam HDF in HEK. Celice smo gojili v 96-ploščah z vdolbinicami s koncentracijo 2 × 104 celic/vdolbinico 48 ur. Nato smo dodali 100 µL svežega medija, ki je vseboval vzorce, in vdolbinice inkubirali 24 ur. Nato smo v jamice dodali raztopino CCK-8 v skladu z navodili testnih kompletov in ploščo inkubirali 2 uri. Abs pri 450 nm je bil pridobljen za izračun viabilnosti celic.

3.9.3. Test prask

HDF smo gojili pri 37 ◦C s 5 odstotki CO2. Nato so bile celice posejane v 12-ploščo z vdolbinicami v koncentraciji 1 × 105 celic/vdolbinico. Po 48-urni inkubaciji je bila z iglo brizge ustvarjena praska na celični plasti HDF. Celične fragmente smo očistili s PBS in dodali vzorce z različnimi koncentracijami. Nato so po 24 urah opazili celjenje prask celične plasti, da bi ocenili učinek IHRP na proliferacijo HDF. Dobljene slike so bile kvantificirane s programsko opremo Image J [48]. Transformacijski rastni faktor (TGF-) je bil uporabljen kot pozitivna kontrola. Hitrost celjenja je bila izračunana v skladu z enačbo (3).

kjer A1 predstavlja začetno območje praske, A2 pa se nanaša na končno območje praske.

3.9.4. Kvantitativna analiza RT-PCR (qRT-PCR).

Nato so bile celice posejane v 12-plošče z vdolbinicami s koncentracijo 1 × 105 celic/vdolbinico. Po 48-urni inkubaciji smo vzorce mešali in gojili še 24 ur. Ekstrahirali smo celotno RNA in sintetizirali cDNA. Analize qRT-PCR za gen za akvaporin (AQP-3), gen za kolagen (COL1A1 in COL3A1), gen za elastin (ELASTIN) in matrično metaloproteinazo (MMP-1) so bile izvedene v realnem času Sistem PCR (Applied Biosystems Life Technologies, Inc., ABI StepOnePlus). Relativno kvantifikacijo smo izvedli s primerjalno CT metodo (2-∆∆Ct metoda). Kot pozitivno kontrolo so uporabili hialuronsko kislino (HA), Vc in TGF-.

3.10. Statistična analiza

Rezultati so bili prikazani kot povprečje ± SD (n {{0}}). Statistična pomembnost je bila izvedena z ANOVA. Vrednosti p < 0,05 so veljale za statistično značilne.

4. Sklepi

V tem delu je bila ekstrakcija polisaharida iz IHR optimizirana z enofaktorskimi eksperimenti in ortogonalnim eksperimentalnim načrtom. Optimalni pogoji ekstrakcije pri segrevanju so bili temperatura ekstrakcije 98 ◦C, razmerje med trdno in tekočino 1:10, čas ekstrakcije 1 h, število zaporednih ekstrakcij 2 in pH 4. Razmerje ekstrakcije in vsebnost polisaharidov je bila 2{{40}}.12 odstotkov oziroma 12,35 odstotkov pri pogojih. Poleg tega so bili primerni pogoji za obarjanje alkohola črpanje z 2 L/h, stalno mešanje in kopel z ledeno vodo 4 ure. Surovi IHRP so bili nadalje prečiščeni s kolonsko kromatografijo in vsebnosti polisaharidov/proteinov v prečiščenih IHRP so bile 34,44 odstotka in 1,61 odstotka. Sestava monosaharidov IHRP je bila: fukoza (1,33 odstotka), arabinoza (19,60 odstotka), ramnoza (10,41 odstotka), galaktoza (20,87 odstotka), glukoza (27,42 odstotka), ksiloza (4,23 odstotka), riboza (3,12 odstotka), galakturon. kislino (6,22 odstotka), guluronsko kislino (0,28 odstotka) in glukuronsko kislino (2,37 odstotka). FT-IR je pokazal polisaharidni skelet IHRP. Poleg tega sta bili vrednosti EC50 radikalov ABTS in DPPH 0,34 in 0,47 mg/mL, kar kaže na veliko antioksidativno aktivnost IHRP. IHRP lahko spodbujajo tudi celično proliferacijo HDF in HEK ter celjenje celičnih prask. Poleg tega bi lahko IHRP znatno spodbujali izražanje MMP-1. Zato se domneva, da bi lahko polisaharide iz ostankov industrijske konoplje razvili kot potencialne antioksidante in izdelke proti staranju za kozmetiko ali funkcionalna živila.

Avtorski prispevki:TC, QZ in BZ so oblikovali poskuse. TC in HL (Hang Li) sta izvedla poskuse in napisala začetni osnutek. TC, HL (Hang Li), HL (Hongning Lv), XL in ML so analizirali podatke. MT, SH, QZ in BZ so revidirali rokopis. Vsi avtorji so prebrali in se strinjali z objavljeno različico rokopisa.

financiranje: To raziskavo je financiral Yunnan Hempmon Pharmaceuticals Co., Ltd.

Izjava institucionalnega revizijskega odbora:Se ne uporablja.

Izjava o informirani privolitvi:Se ne uporablja.

Izjava o razpoložljivosti podatkov:Se ne uporablja.

Nasprotja interesov:Avtorji niso izjavili, da ni navzkrižja interesov.

Razpoložljivost vzorcev:Vzorci spojin IHR in IHRP so na voljo pri avtorjih.

Reference

1. Kumar, P.; Mahato, DK; Kamle, M.; Borah, R.; Sharma, B.; Pandhi, S.; Tripathi, V.; Yadav, HS; Devi, S.; Patil, U. Farmakološke lastnosti, terapevtski potencial in pravni status Cannabis sativa L.: Pregled. fitoter. Res. 2021, 35, 6010–6029. [CrossRef] [PubMed]

2. Shoyama, Y.; Yagi, M.; Nishioka, I.; Yamauchi, T. Biosinteza kanabinoidnih kislin. Fitokemija 1975, 14, 2189–2192. [CrossRef]

3. De Meijer, ED; Van der Kamp, H.; Van Eeuwijk, F. Karakterizacija dodatkov konoplje o vsebnosti kanabinoidov o drugih rastlinskih znakih. Euphytica 1992, 62, 187–200. [CrossRef]

4. Luca, SV; Roehrer, S.; Kleigrewe, K.; Minceva, M. Pristop za hkratno izolacijo kanabidiola in odstranjevanje pesticidov iz ekstraktov konoplje s tekočinsko-tekočinsko kromatografijo. Ind. Prod. 2020, 155, 112726. [CrossRef]

5. Bonini, SA; Premoli, M.; Tambaro, S.; Kumar, A.; Maccarinelli, G.; Memo, M.; Mastinu, A. Cannabis sativa: Celovit etnofarmakološki pregled zdravilne rastline z dolgo zgodovino. J. Ethnopharmacol. 2018, 227, 300–315. [CrossRef] [PubMed]

6. Hartsel, JA; Eades, J.; Hickory, B.; Makriyannis, A. Cannabis sativa in konoplja. V nutracevtikih; Gupta, RC, ur.; Academic Press: Boston, MA, ZDA, 2016; Poglavje 53; strani 735–754.

7. Palmieri, S.; Mascini, M.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Eugelio, F.; Fanti, F.; Compagnone, D.; Sergi, M. Kanabinoidni profil v Cannabis sativa L. Vzorci s pomočjo analize LC-MRM/IDA/EPI: nov pristop za razvrščanje sort. J. Agric. Food Chem. 2022, 70, 3907–3916. [CrossRef]

8. Atalay, S.; Jarocka-Karpowicz, I.; Skrzydlewska, E. Antioksidativne in protivnetne lastnosti kanabidiola. Antioksidanti 2020, 9, 21. [CrossRef]

9. Small, E. Evolucija in klasifikacija Cannabis sativa (marihuana, konoplja) o uporabi pri ljudeh. Bot. Rev. 2015, 81, 189–294. [CrossRef]

10. Mazzara, E.; Carletti, R.; Petrelli, R.; Mustafa, AM; Caprioli, G.; Fiorini, D.; Scortichini, S.; Dall'Acqua, S.; Sut, S.; Nunez, S.; et al. Zelena ekstrakcija konoplje (Cannabis sativa L.) z uporabo mikrovalovne metode za predelavo treh dragocenih frakcij (eterično olje, fenolne spojine in kanabinoidi): osrednja študija optimizacije sestavljenega dizajna. J. Sci. Food Agric. 2022, v tisku. [CrossRef]

11. Tan, MZ; Chang, SL; Liu, JN; Li, H.; Xu, PW; Wang, PD; Wang, XD; Zhao, MX; Zhao, B.; Wang, LW; et al. Fizikalno-kemijske lastnosti, antioksidativne in antidiabetične aktivnosti polisaharidov iz semen kvinoje (Chenopodium quinoa Willd.). Molecules 2020, 25, 3840. [CrossRef]

12. Zhai, FG; Liang, QC; Wu, YY; Liu, JQ; Liu, JW Polisaharid rdečega ginsenga izkazuje protirakavo delovanje prek feroptoze, ki jo povzroči znižanje regulacije GPX4. Pharm. Biol. 2022, 60, 909–914. [CrossRef]

13. Zhou, X.; Afzal, S.; Wohlmuth, H.; Munch, G.; Leach, D.; Nizka, M.; Li, CG Sinergistična protivnetna aktivnost izvlečkov ingverja in kurkume pri zaviranju vnetnih mediatorjev, ki jih povzroča lipopolisaharid in interferon gama. Molecules 2022, 27, 3877. [CrossRef] [PubMed]

14. Zou, YF; Li, CY; Fu, YP; Jiang, QX; Peng, X.; Li, LX; Pesem, X.; Zhao, XH; Li, YP; Chen, XF; et al. Primerjava preliminarne strukture in črevesnih protivnetnih in antioksidativnih aktivnosti polisaharidov iz različnih koreninskih delov Angelice sinensis (Oliv.) Diels. J. Ethnopharmacol. 2022, 295, 115446. [CrossRef] [PubMed]

15. Huang, Z.; Zong, MH; Lou, WY Priprava, strukturna pojasnitev in imunomodulatorna aktivnost polisaharida iz Millettia speciosa Champ. Ind. Prod. 2022, 182, 114889. [CrossRef]

16. Cao, WY; Wang, CX; Mayhesumu, X.; Pan, L.; Dang, Y.; Yili, A.; Abuduwaili, A.; Mansur, S. Izolacija, strukturna razlaga, antioksidativna in hipoglikemična aktivnost polisaharidov Brassica rapa L. Molecules 2022, 27, 3002. [CrossRef] [PubMed]

17. Panggabean, JA; Adiguna, SP; Rahmawati, SI; Ahmadi, P.; Zainuddin, EN; Bayu, A.; Putra, MY Protivirusne aktivnosti sulfatiranih polisaharidov na osnovi alg. Molecules 2022, 27, 1178. [CrossRef]

18. Baeva, E.; Blaha, R.; Lavrova, E.; Sushytskyi, L.; Čopikova, J.; Jablonski, I.; Klouček, P.; Synytsya, A. Polisaharidi iz bazidiokarpov gojenja gob Pleurotus ostreatus: izolacija in strukturna karakterizacija. Molecules 2019, 24, 2740. [CrossRef]

19. Xu, JQ; Zhang, JL; Sang, YM; Wei, YN; Chen, XY; Wang, YX; Xue, HK Polisaharidi iz medicinskih in živilskih homoloških materialov: pregled njihove ekstrakcije, čiščenja, strukture in bioloških aktivnosti. Molekule 2022, 27, 3215. [CrossRef]

20. Haustveit, G.; Wold, JK Nekateri ogljikovi hidrati z nizko molekulsko maso, prisotni v Cannabis sativa L. Carbohydr. Res. 1973, 29, 325–329. [CrossRef]

21. Hillestad, A.; Wold, JK; Paulsen, BS Strukturne študije vodotopnih glikoproteinov iz Cannabis sativa L. Carbohydr. Res. 1977, 57, 135–144. [CrossRef]

22. Groce, JW; Jones, LA Vsebnost ogljikovih hidratov in ciklitola v konoplji. J. Agric. Food Chem. 1973, 21, 211–214. [PubMed]

23. Wen, Z.-S.; Xue, R.; Du, M.; Tang, Z.; Xiang, X.-W.; Zheng, B.; Qu, Y.-L. Polisaharidi konopljinega semena ščitijo črevesne epitelne celice pred oksidativnim stresom, ki ga povzroči vodikov peroksid. Int. J. Biol. Macromol. 2019, 135, 203–211. [PubMed]

24. Bao-yao, BY-gW; Jie, TJ-wL Ekstrakcijska izolacija in čiščenje vodotopnih polisaharidov iz konopljinega semena. Food Sci. Technol. 2004, 6, 157–161.

25. Guo, L.; Kong, N.; Zhang, X.; Ma, H. Multimode ultrazvočna ekstrakcija polisaharidov iz mace (Lepidium meyenii): Optimizacija, čiščenje in in vitro imunoregulacijska aktivnost. Ultrason. Sonochem. 2022, 88, 106062. [CrossRef]

26. Chi, YZ; Li, YP; Zhang, GL; Gao, YQ; Ja, H.; Gao, J.; Wang, P. Vpliv tehnik ekstrakcije na lastnosti polisaharidov iz Enteromorpha prolifera in njihova uporabnost pri kelaciji železa. Ogljikovi hidrati. Polym. 2018, 181, 616–623. [CrossRef] [PubMed]

27. Shi, MJ; Wei, X.; Xu, J.; Chen, BJ; Zhao, DY; Cui, S.; Zhou, T. Karboksimetilirani razgrajeni polisaharidi iz Enteromorpha prolifera: Priprava in in vitro antioksidativna aktivnost. Food Chem. 2017, 215, 76–83.

28. Ren, CJ; Zhang, Y.; Cui, WZ; Lu, GB; Wang, YW; Gao, HJ; Huang, L.; Mu, ZM. Polisaharidni ekstrakt listov murve izboljšuje jetrno presnovo glukoze in inzulinsko signalizacijo pri podganah s sladkorno boleznijo tipa 2, ki jo povzroča prehrana z visoko vsebnostjo maščob in streptozotocin. Int. J. Biol. Macromol. 2015, 72, 951–959.

29. Wu, JW; Li, P.; Tao, DB; Zhao, HT; Sonce, RY; Ma, FM; Zhang, BQ Vpliv plazemskega postopka raztopine z vodikovim peroksidom na razgradnjo in antioksidativno aktivnost polisaharida iz Auricularia auricula. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 117, 1299–1304.

30. Fan, SH; Li, JN; Bai, BQ Čiščenje, strukturna pojasnitev in in vivo aktivnost polisaharidov iz semen kvinoje (Chenopodium quinoa Willd.), ki povečujejo imunost. Biosci. Biotehnologija. Biochem. 2019, 83, 2334–2344.

31. Sun, YJ; Hou, ST; Pesem, S.; Zhang, B.; Ai, CQ; Chen, XF; Liu, N. Vpliv kisle, vodne in alkalne ekstrakcije na strukturne značilnosti, antioksidativne aktivnosti polisaharidov Laminaria japonica. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 112, 985–995.

32. Patel, MK; Tanna, B.; Mišra, A.; Jha, B. Fizikalno-kemijska karakterizacija, antioksidativne in antiproliferativne aktivnosti polisaharida, ekstrahiranega iz listov psilija (P. ovata). Int. J. Biol. Macromol. 2018, 118, 976–987. [PubMed]

33. Palmieri, S.; Fanti, F.; Oliva, E.; Viteritti, E.; Sergi, M.; Pepe, A.; Compagnone, D. Kemijska karakterizacija in ocena antioksidativne aktivnosti iz različnih kultivarjev Cannabis sativa L. iz regije Abruzzo. Nat. Prod. Res. 2022, 1–5. [CrossRef] [PubMed]

34. Li, H.; Zhao, Q.-S.; Chang, S.-L.; Chang, T.-R.; Tan, M.-H.; Zhao, B. Razvoj inkluzijskega kompleksa kanabidiola s polnim spektrom olja/2, 6-di-ometil- -ciklodekstrina z izboljšano topnostjo v vodi, bioaktivnostjo in toplotno stabilnostjo. J. Mol. tekočina 2022, 347, 118318.

35. Chen, L.; Yang, W.; Gao, C.; Liao, X.; Yang, J.; Yang, B. Kompleksi kanabidiola, posredovani s premoščenimi dimeri ciklodekstrinov z visoko solubilizacijo, in vitro antioksidativno aktivnostjo in citotoksičnostjo. J. Mol. tekočina 2022, 345, 117017.

36. Russo, C.; Lavorgna, M.; Nugnes, R.; Orlo, E.; Isidori, M. Primerjalna ocena protimikrobnih, antiradikalnih in citotoksičnih aktivnosti kanabidiola in njegovega propilnega analoga kanabidivarina. Sci. Rep. 2021, 11, 22494.

37. Khatun, B.; Baishya, P.; Ramteke, A.; Maji, TK Študija kompleksiranja strukturno modificiranega kurkumina s hidroksipropil beta-ciklodekstrinom in njegov učinek na delovanje proti raku. New J. Chem. 2020, 44, 4887–4897.

38. Bobadilla, AVP; Arevalo, J.; Sarro, E.; Byrne, HM; Maini, PK; Carraro, T.; Balocco, S.; Meseguer, A.; Alarcon, T. Metoda kvantifikacije migracije celic in vitro za teste s praskami. JR Soc. Interface 2019, 16, 20180709. [CrossRef]

39. Salem, MA; Radwan, RA; Mostafa, ES; Alseekh, S.; Fernie, AR; Ezzat, SM Uporaba neciljanega metabolomičnega pristopa na osnovi UPLC/MS za ocenjevanje antioksidativne zmogljivosti in potenciala za preprečevanje staranja izbranih zelišč. RSC adv. 2020, 10, 31511–31524.

40. Campa, M.; Baron, E. Učinki izbranih botaničnih rastlin proti staranju: znanstveni dokazi in trenutni trendi. Kozmetika 2018, 5, 54.

41. Freitas-Rodriguez, S.; Folgueras, AR; Lopez-Otin, C. Vloga matričnih metaloproteinaz pri staranju: preoblikovanje tkiv in več. Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell Res. 2017, 1864, 2015–2025.

42. Bradford, MM Hitra in občutljiva metoda za kvantitacijo mikrogramskih količin beljakovin z uporabo principa vezave proteinskega barvila. Analno Biochem. 1976, 72, 248–254. [PubMed]

43. Dubois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Kolorimetrična metoda za določanje sladkorjev in sorodnih snovi. Analno Chem. 1956, 28, 350–356. [CrossRef]

44. Grenko, T.; Muir, HM Modificirana reakcija karbazola z uronsko kislino. Analno Biochem. 1962, 4, 330–334. [CrossRef]

45. Dai, J.; Wu, Y.; Chen, JZ; Zhu, S.; Yin, HP; Wang, M.; Tang, JA Določanje sestave sladkorja polisaharidov iz Dunaliella salina z modificirano metodo RP-HPLC derivatizacije pred kolono s 1-fenil-3-metil-5-pirazolonom. Ogljikovi hidrati. Polym. 2010, 82, 629–635.

46. ​​Gao, J.; Zhang, T.; Jin, ZY; Xu, XM; Wang, JH; Zha, XQ; Chen, HQ Strukturna karakterizacija, fizikalno-kemijske lastnosti in antioksidativna aktivnost polisaharida iz Lilium lancifolium Thunb. Food Chem. 2015, 169, 430–438.

47. Xiao, H.; Fu, X.; Cao, C.; Li, C.; Chen, C.; Huang, Q. Sulfatna modifikacija, karakterizacija, antioksidativne in hipoglikemične aktivnosti polisaharidov iz Sargassum pallidum. Int. J. Biol. Macromol. 2018, 121, 407–414.

48. Allaw, M.; Manconi, M.; Aroffu, M.; Marongiu, F.; Porceddu, M.; Bacchetta, G.; Ušač, I.; Rached, RA; Rajha, HN; Maroun, RG; et al. Ekstrakcija, karakterizacija in vključitev izvlečka Hypericum Scruglii v ad hoc formulirane fosfolipidne vezikle, zasnovane za zdravljenje kožnih bolezni, povezanih z oksidativnim stresom. Farmacevtika 2020, 12, 1010.

【Za več informacij:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】