Obremenitveni test s furosemidom in intersticijska fibroza v biopsijah ledvic pri kronični ledvični bolezni

Jesús Rivero1, Francisco Rodríguez2, Virgilia Soto2, Etienne Macedo3, Lakhmir S. Chawla3, Ravindra L. Mehta3, Sucheta Vaingankar2, Pranav S. Garimella3, Carlos Garza2 in Magdalena Madero2*

Povzetek

Ozadje:Intersticijska fibroza(IF) na biopsijo ledvic je eden najmočnejših dejavnikov tveganja za napredovanje bolezni ledvic. Obremenitveni test s furosemidom (FST) je validirano orodje, ki napoveduje resnost akutnegaledvicapoškodba(zlasti po 2 urah) pri kritično bolnih bolnikih. Ker se furosemid izloča skozi ledvične tubule, odgovor na FST predstavlja tubularno sekretorno kapaciteto. Kolikor nam je znano, ni podatkov o korelaciji med funkcionalno tubularno kapaciteto, ocenjeno s FST, in IF na biopsijah ledvic bolnikov zkroničnoledvicabolezen(CKD). Namen te študije je bil ugotoviti povezavo med izločanjem urina (UO), izločeno maso furosemida (FEM) in IF na biopsijah ledvic po FST.

Metode:Ta študija je vključevala 84 bolnikov, ki so bili podvrženi biopsiji ledvic za klinične indikacije in FST. Odstotek fibroze je bil določen z morfometrično tehniko in pregledan s strani nevropatologa. Vsi bolniki so pred biopsijo opravili FST. Volumen urina in natrij v urinu so izmerili poleg koncentracij furosemida v urinu ob različnih časih (2, 4 in 6 ur). Za določitev MKE smo uporabili uveljavljeno enačbo. Vrednosti so bile izražene kot povprečje, standardni odklon ali odstotek in Pearsonova korelacija.

Rezultati:Povprečna starost udeležencev je bila 38 let, 44 odstotkov pa je bilo moških. Prevalenca sladkorne bolezni, hipertenzije in uporabe diuretikov je bila znatno višja z naprednejšo stopnjo fibroze. Nefrotski sindrom in akutna disfunkcija ledvičnega presadka sta bili najpogostejši indikaciji za biopsijo. eGFR je bil obratno sorazmeren s stopnjo fibroze. Preiskovanci z najvišjo stopnjo fibroze (stopnja 3) so pokazali bistveno nižji UO ob prvi uri FST v primerjavi z nižjimi stopnjami fibroze (p {{0}}.015). Podobno sta bila skupni UO in FEM postopoma nižja z višjimi stopnjami fibroze. Inverzno linearna korelacija med FEM in stopnjo fibroze (r=− 0,245,p = 0.02).

Sklepi:Naše ugotovitve kažejo, da intersticijska fibroza korelira s skupnim izločanjem urina in FEM. Potrebne so nadaljnje študije, da bi ugotovili, ali bi UO in FST lahko bili neinvazivni orodji za oceno intersticijske fibroze.

Poskusna registracija:ClinicalTrials.gov NCT02417883.

Ključne besede:intersticijska fibroza, ureza,Biopsija ledvic, Obremenitveni test s furosemidom

Za več informacij kontaktirajteemily.li@wecistanche.com

cistanche acteoside izboljšajo delovanje ledvic

Ozadje

Kronična ledvična bolezen(CKD), zlasti v napredovalih fazah, velja za enega najresnejših javnozdravstvenih problemov po vsem svetu [1, 2]. Že dolgo si prizadevamo razumeti dejavnike tveganja, povezane z razvojemfibroza ledvic, saj velja za enega najmočnejših dejavnikov tveganja za napredovanje KLB, neodvisno od etiologije KLB, saj predstavlja končno skupno pot pred poškodbo [3]. Tubuli in intersticijski oddelek skupaj predstavljajo približno 80 odstotkov ledvične mase in so zato več kot kompleksna struktura podpornega sistema [4–6]. Obstajajo tri glavne priznane histološke strukture, ki jih je mogoče oceniti za fibrozo: glomeruloskleroza, vaskularna skleroza in tubularna atrofija/tubulointersticijska fibroza (IFTA) [7, 8]. IFTA je končni rezultat anatomskega in funkcionalnega neravnovesja, kjer poškodbe ledvic presegajo znani kompenzacijski mehanizmi popravljanja, kjer različni mediatorji ustvarjajo prehod iz normalne tubularne strukture v miofibroblaste in elemente zunajceličnega matriksa [9, 10]. Na tej točki so spremembe nepovratne in zato močno povezane zbolezni ledvicnapredovanje [11]. Preskusi, opravljeni pri bolnikih s presaditvijo ledvice, kažejo, da je IFTA močno vpletena v odpoved presadka, napredovanje in povečano umrljivost [12–14].

Več desetletij vrednotenjedelovanje ledvictemelji predvsem na merjenju hitrosti glomerularne filtracije (mGFR) ali na enačbah, ki temeljijo na kreatininu ali cistatinu C, kjer se ocenjuje hitrost glomerulne filtracije [15–29]. Te metode pa ne merijo tubularne funkcije niti ne ocenjujejo stopnje tubularne atrofije ali intersticijske fibroze. Preizkušena so bila nekatera orodja za vrednotenje za oceno tubularne funkcije, kot so sposobnost redčenja, koncentracija [18–31] in zakisanje urina [31–33], poleg izločene frakcije natrija in sečnine (FENA in FEUN) [34–36]. ], vendar se ti v klinični praksi niso pogosto uporabljali. Dokazano je, da obremenitveni test s furosemidom (FST) napoveduje resnost in akutnoledvicapoškodba(zlasti po 2 urah) pri kritično bolnih bolnikih in se je izkazal za boljšega od urinskih biomarkerjev [37]. Furosemid se mora aktivno prenašati s prenašalci človeških organskih anionov (toplota) v proksimalnem tubulu v lumen tubula, da se lahko izloči. Ker je izločanje furosemida v urinu posredovano s transportnim sistemom organskih anionov proksimalnih tubulov, smo ocenili, ali sta izločanje furosemida v urinu in s tem povezan diuretični odziv povezana z resnostjo tubulointersticijske okvare, ugotovljene v biopsijah ledvic. Odločili smo se, da ocenimo čas in obseg izločanja furosemida in izločanja urina ter ugotovimo, ali so lahko ti ukrepi informativni v zvezi z IF pri bolnikih, ki jim opravljajo biopsijo ledvic.

Metode

Metode

Vključili smo bolnišnične bolnike, ki so bili sprejeti v bolnišnico zaradi biopsije ledvice s klinično indikacijo (alotransplantat in nativni). Bolniki so bili sprejeti na nefrološki oddelek na Instituto Nacional de Cardiologia Ignacio Chavez. Bolniki so morali biti starejši od 18 let, imeti so eGFR za kreatinin, večji ali enak 15 ml/min po CKD-EPI [38], in so morali biti hemodinamsko stabilni. Preiskovanci so bili izključeni, če niso sprejeli sodelovanja v študiji ali če medicinska ekipa ni menila, da je bolnik primeren za študijo, če so imeli znano alergijo na furosemid, so bili na nadomestnem zdravljenju z ledvicami ali so bili noseči (slika 2). 1). Študija je bila izvedena med aprilom 2015 in avgustom 2017.

Raziskavo je odobril institucionalni odbor za raziskovalno etiko in jo registriral pod številko 15–920. Od vseh udeležencev je bilo pridobljeno pisno informirano soglasje.

Intervencija

Med hospitalizacijo zaradi biopsije ledvice je bil opravljen test furosemida. Večina FST je bila opravljena 1 dan po opravljeni biopsiji ledvice s popolnim soglasjem medicinske ekipe. Da bi se izognili napakam pri merjenju urina pri bolnikih, ki na dan preiskave niso imeli katetra v mehurju, je bila opravljena meritev volumna mehurja po praznjenju s sonografijo medenice.

Vseh 84 biopsij ledvic je bilo opravljenih ob bolnikovi postelji z ultrazvočnim vodenjem (Sonosite®). Za biopsije ledvic smo uporabili Biopsy Gun (BARD Magnum®) in igle, posege smo izvajali v lokalni anesteziji.

Obremenitveni test s furosemidom

Intravenski furosemid so dajali v odmerku 1 mg/kg, če preiskovanci v zadnjih 7 dneh niso bili izpostavljeni diuretikom, in v odmerku 1,5 mg/kg, če so bili v 7 dneh pred študijo izpostavljeni diuretikom Henlejeve zanke. [37]. Opravljen je bil zdravniški nadzor in stroga urna kvantifikacija UO. UO je bil zbran na začetku in vsako uro do šeste ure (slika 2). Stanje volumna je ocenil lečeči zdravnik, bolniki, ki so bili hipovolemični ali so imeli hemodinamsko nestabilnost, so bili izključeni iz študije (n=5), 76 oseb je bilo euvolemičnih in 8 oseb je bilo hipervolemičnih. Nadomeščanje tekočine pri osebah z euvolemijo, kot se daje v razmerju 1:1 cc na podlagi prejšnjega urnega izločanja urina. Hipervolemični bolniki niso prejeli intravenskega nadomeščanja tekočine.

Histopatološka analiza

Ledvični vzorec

Biopsijo ledvice je obdelal oddelek za patologijo na Instituto Nacional de Cardiologia Ignacio Chávez. Vsa tkiva biopsije ledvic so veljala za zadostna za histopatološko oceno. Izkušen ledvični patolog, ki ni vedel za rezultate FST, je opisal stopnjointersticijska fibroza, z neposredno vizualizacijo svetlobne mikroskopije, s poudarkom na barvanju Massonovega trikroma. Poleg tega je bil odstotek fibroze ocenjen z optičnim lektorskim strojem (morfometrija) z uporabo mikroskopa Olympus BX51 Analyzer, slikovne programske opreme Image-PN-Plus 6 in kamere: VF Evolution C (pol Cybernetics). Ta tehnika je bila sprejeta kot standard, saj je bolj ponovljiva [39]. Rezultat IF je bil razvrščen v tri skupine glede na odstotek fibroze: I. stopnja < 25="" odstotkov,="" 2.="" stopnja="" 26–50="" odstotkov="" in="" 3.="" stopnja=""> 50 odstotkov. Ker sta tubularna atrofija (TA) in IF tako močno povezana, TA ni rutinsko opisana v naših poročilih o patologiji.

Izločanje furosemida v urinu: UO je bil zbran vsako uro na uro 6 ur in shranjen ločeno v alikvotih. Analize furosemida so bile določene v posameznih vzorcih, zbranih ob urah 2 (0–2 h), 4 (2–4 h), 6 (4–6 h) in v mešanici vseh urinov.

HPLC analiza furosemida v vzorcih urina je bila očiščena s kartušo Oasis MCX (del št. 1860{{10}}0254 kartuša Oasis MCX 3 cc 60 mg 30 μm). Vložek smo sprali z 2 ml metanola, ki mu je sledilo 2 ml vode Milli-Q, in ga napolnili z vzorcem urina (0,5 ml naravnanega na pH 6,0 z 2 M HCl in razredčenega z 0,5 ml vode MilliQ). Nato smo vložek sprali z 1 ml 2-odstotne mravljinčne kisline, da smo odstranili kisle spojine, čemur je sledil 1 ml metanola, da smo odstranili nevtralne snovi, in vezan furosemid smo eluirali z 1 ml 5-odstotnega amonijevega hidroksida v metanolu. Eluirano frakcijo amonijevega hidroksida smo posušili v speed-vacu, rekonstituirali v 100 ul vode MilliQ in kvantificirali s validiranim testom HPLC [40]. Uporabljena kolona HPLC je bila Thermo Scientific Acclaim 120 T, 3X150 mm, C18, 3 um, 120 A, z zaščitnim vložkom TSK 120 T. Hitrost pretoka je bila 0,5 ml/min, temperatura kolone 40 stopinj in čas delovanja 15 minut. Topilo za izokratno elucijo je bilo 30 odstotkov acetonitrila in 70 odstotkov monobazičnega pufra kalijevega fosfata (10 mM, pH 3,85). Vbrizgali smo volumen vzorca 50 ul in zaznali furosemid pri UV 233 nm, retencijski čas 6,3 min.

Ocenili smo enačbo mase izločenega furosemida (FEM), izraženo v odstotkih z naslednjo enačbo:

Statistična analiza

Vse vrednosti so bile izražene kot srednje vrednosti, standardni odklon in odstotki. Rezultati so bili izraženi kot povprečje, standardna deviacija (SD) ali deleži, kot je ustrezno. Primerjave so bile narejene z uporabo chi [2] za deleže in s študentovim T-testom za neodvisne vzorce (primerjava med skupinami) glede na odziv na furosemid. Za ugotavljanje korelacije med stopnjo fibroze in odzivom na FST smo uporabili Pearsonov test. Uporabili smo statistični program SPSS 16 verzija.

Rezultati

Povprečna starost je bila 38 let, 44 odstotkov je bilo moških, povprečna eGFR pa je bila 64 ± 42 ml/min/1,72 m2. Prisotnost sladkorne bolezni, hipertenzije in uporabe diuretikov je bila pretežno višja pri fibrozi stopnje III. Med študijo ni prišlo do epizod hipotenzije ali hipokaliemije. Kot je bilo pričakovano, se je eGFR zmanjšal kotintersticijska fibrozapovečala (tabela 1). Nefrotski sindrom in akutna disfunkcija ledvičnega presadka sta bili najpogostejši indikaciji za biopsijo.

Opazili smo, da so osebe s fibrozo stopnje 3 pokazale znatno nižji volumen urina ob 1., 4. uri in skupni urin v primerjavi s stopnjama I in II (155 ml ± 181 v primerjavi s 316 ml ± 262 v primerjavi s 328 ± 353) (tabela 2). (FEM) je bil postopoma nižji z višjimi stopnjami fibroze ob 2. in 4. uri (1,6 in 0,8 za fibrozo stopnje III v primerjavi s 6,8 in 4.0) (tabela 2 in slika 3 ). Pri ločeni analizi je bila korelacija med FEM2 in fibrozo pomembna (p=0,04) v nativnih ledvicah, ne pa tudi v

skupina za presaditev (p=0.26)

Izvedena je bila podanaliza za ovrednotenje obnašanja FEM v različnih obdobjih glede na mejno vrednost, ki je pokazala najboljše območje pod krivuljo v predhodno poročanih kohortah v literaturi z akutno poškodbo ledvic (200 ml enureze), ugotavljanje, da je bila FEM ob drugi uri meritev, ki je najbolje korelirala s to rezalno točko. (tabela 4)

Opazili so inverzno korelacijo med UO in stopnjo fibroze (večji kot je odziv pri izločanju urina, nižja je stopnja fibroze) (kvadratna korelacija {{0}}.072, na vsak ml spremembe UO je prišlo do 0.2 spremembe fibroze). Analiza občutljivosti Ker je albumin nujen za izločanje furosemida, smo ovrednotili Pearsonovo korelacijo med serumskim albuminom in izločanjem urina ter FEM. Obstajala je pomembna korelacija med serumskim albuminom in skupnim UO (p=0,008) (pri višjem serumskem albuminu smo opazili višji UO), vendar ni bilo pomembne korelacije med albuminom in FEM (p=0).64 ). Prav tako ni bilo korelacije med ravnmi proteinurije in FEM (p=0,48). Pri ločeni analizi se korelacija med proteinurijo in FEM pri domačih in presajenih ledvicah ni razlikovala (p=0.25 v primerjavi s p=0.86). Kot je bilo pričakovano, je obstajala pomembna korelacija med eGFR (CKDEPI) in FEM2 (p=0.001) ter med eGFR in fibrozo (p=< 0.001)="" (sl.="" 4a,="" b).="" ker="" je="" bila="" večina="" biopsij="" alogenskega="" presadka="" opravljena="" zaradi="" disfunkcije="" alotransplantata,="" smo="" ocenili="" stopnjo="" akutne="" poškodbe="" ledvic="" v="" naši="" populaciji.="" kreatinine="" so="" ocenili="" 3="" mesece="" pred="" in="" 3="" mesece="" po="" študiji="" z="" uporabo="" neparametričnega="" testa="" (wilcoxonov="" test="" razpona)="" za="" primerjavo.="" v="" vseh="" primerjavah="" sorodnih="" vzorcev="" smo="" našli="" vrednosti="" p="" večje="" od="" 0,1="" (p="NS)." rezultati="" se="" med="" alograftom="" in="" nativnimi="" ledvicami="" niso="">

Diskusija

V naši študiji nam je uspelo ugotoviti povezavo med funkcionalno tubularno oceno s FST in stopnjo intersticijske fibroze, pridobljeno pri biopsijah ledvic. Volumen urina je bil v korelaciji s stopnjo fibroze, izločena masa furosemida pa se je z naraščanjem fibroze zmanjšala. Kolikor vemo, je to prva študija, ki je vzpostavila cevasto anatomsko-funkcionalno razmerje.

Ugotovili smo, da je masa izločenega furosemida po 2 urah (FEM2) korelirala z nizkim izločanjem urina v istem časovnem okviru. FEM2 je zasnovan tako, da deluje podobno kot forsirani izdihani volumen (FEV1) pri testih pljučne funkcije. Zdrav človek lahko izdihne večino zraka iz pljuč v 1 s. Podobno lahko zdrava oseba s polnim naborom delujočih nefronov hitro odstrani furosemid iz urina. Če pa je prisotna tubularna disfunkcija, kot je to v primeru tubulno-intersticijske fibroze, fibrozna ledvica izgubi sposobnost učinkovitega premikanja furosemida iz plazme v lumen tubula. Ta vrsta funkcionalnega testiranja je lahko osnova za ocenjevanje tubularne funkcije na neinvaziven način. označevalec tubularne funkcije in je bil povezan z upadom eGFR in srčno-žilnimi izidi.

Nekaj ​​prvih študij za oceno tubularne funkcije je naša skupina in drugi izvedla pred 30 leti. V teh študijah je bila tubularna funkcionalna zmogljivost ovrednotena z opazovanjem razlike med očistkom kreatinina in očistkom inulina [43]. V teh študijah je bila glomerularna rezerva ocenjena z beljakovinskim izzivom. Te študije so bile izvedene pri treh skupinah bolnikov: zdravih bolnikih, darovalcih ledvic in bolnikih s kronično ledvično boleznijo, pri čemer so pri slednjih dokazali nižjo sposobnost povečanja GFR pred dajanjem beljakovin in omejen tubulni očistek kreatinina [44]. Vendar ti testi ostajajo raziskovalno orodje in so lahko okorni zaradi obremenitve beljakovin kot take, ki ima omejeno klinično uporabnost.

Ideja za oceno tubularne funkcije z uporabo intravenskega furosemida temelji na sposobnosti zdravila, da se izloča v proksimalnem tubulu. Da bi furosemid povečal izločanje urina, se mora furosemid aktivno izločati v proksimalni lumen, ohraniti pa je treba funkcije debelega naraščajočega kraka, luminalne prehodnosti in zbiralnega kanala. Obremenitveni test s furosemidom se je v klinični praksi uporabljal le v kontekstu akutne ledvične poškodbe in dokazano napoveduje izide pri tej populaciji. Standardni odmerek intravenskega furosemida je bil dostavljen kritično bolnim bolnikom z AKI stopnje I ali II KDIGO, nato pa je bil ocenjen odziv na izločanje urina. Izločanje urina {{0}}h < 100="" ml/h="" kot="" odziv="" na="" izziv="" s="" furosemidom="" napoveduje="" napredovanje="" aki="" stopnje="" iii="" kdigo="" v="" 14="" dneh="" z="" značilnim="" območjem="" pod="" krivuljo="" (auc)="" sprejemnega="" operaterja="" 0,87="" [37="" ].="" ta="" test="" je="" bil="" boljši="" od="" mnogih="" urinskih="" biomarkerjev,="" ki="" se="" uporabljajo="" za="" napovedovanje="" aki.="" poznejše="" študije="" fst="" pri="" aki="" so="" pokazale,="" da="" je="" delovanje="" fst="" robustno="" in="" dosledno="" deluje="" za="" oceno="" napredovanja="" in="" okrevanja="" aki="" [45–48].="" vendar="" nobena="" od="" teh="" študij="" ni="" merila="" izločene="" mase="">

Ocena in spremljanje kronične ledvične bolezni sta osredotočena predvsem na GFR in stopnjo proteinurije. Čeprav v tej študiji ni dokazano, lahko FST ponudi neinvazivno funkcionalno orodje za klinika za oceno tubularne funkcije pri bolnikih z boleznijo ledvic. Kljub temu se zdi, da FST ponuja nove informacije za te bolnike.

Naša študija ima več prednosti. Prvič, študija raziskuje nov koncept tubularne funkcije in njeno povezavo z intersticijsko fibrozo pri biopsijah ledvic. Drugič, količino fibroze na biopsijah ledvic so ocenili tudi z morfometrijo, ki je patologu odstranila morebitno pristranskost opazovanja. Tretjič, poleg izločanja urina smo izmerili maso furosemida, izločenega z urinom. Nazadnje ta analiza dokazuje, da FST ponuja več informacij v primerjavi s klasično oceno GFR.

Naša študija ima tudi omejitve. Prvič, to je presečna študija in nimamo podatkov o vplivu FST na upadanje delovanja ledvic skozi čas. Drugič, moč povezave med različnimi analiziranimi spremenljivkami (intersticijska fibroza, FEM, CKD-EPI in skupno izločanje urina) je bila pomembna samo v podskupini nativnih ledvic v primerjavi s skupino po presaditvi ledvic, verjetno v povezavi z večjo ledvične mase in večje velikosti vzorca skupine nativnih ledvic. Nazadnje, čeprav so bile statistično pomembne, korelacije niso bile močne.

Sklepi

Skratka, naše ugotovitve to podpirajointersticijska fibrozakorelira s FST tako s skupnim izločanjem urina kot z maso izločenega furosemida. To bi lahko bilo uveljavljeno kot neinvazivno orodje za oceno intersticijske fibroze in bi lahko ponudilo več prognostičnih informacij kot samo eGFR in proteinurija. Potrebne so nadaljnje longitudinalne študije, da se ugotovi, ali je FST povezan zledvicafunkcijosčasoma upadajo.

Reference

1. Jha V, Garcia-Garcia G, Iseki K, et al. Kronična ledvična bolezen: globalna razsežnost in perspektive. Lanceta. 2013; 382: 260–72.

2. De Nicola L, Zocalli C. Razširjenost kronične ledvične bolezni v splošni populaciji: heterogenost in skrbi. Presaditev Nephrol Dial. 2016; 31: 331–5.

3. Liu Y. Celični in molekularni mehanizmi ledvične fibroze. Nat Rev Nephrol. 2011; 7: 684–96.

4. Kaissling B, Hegyi I, Loffing J, et al. Morfologija intersticijskih celic v zdravi ledvici. Anat Embryol. 1996; 193: 303–18.

5. Alcorn D, Maric C, McCausland J. Razvoj ledvičnega intersticija. Pediater Nephrol. 1999; 13: 347–54.

6. Kaissling B, Le Hir M. Ledvični kortikalni intersticij: morfološki in funkcionalni vidiki. Histochem Cell Biol. 2008; 130: 247–62.

7. Hewitson TD. Fibroza v ledvicah: ali je skupna težava prepolovljena? Popravilo fibrogeneze tkiva. 2012; 5: S14.

8. Iwano M, Neilson EG. Mehanizmi tubulointersticijske fibroze. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2004; 13: 279–84.

9. Tampa D, Zeisberg M. Potencialni pristopi za odpravo ali popravilo ledvične fibroze. Nat Rev Nephrol. 2014; 10: 226–37.

10. Portilla D. Apoptoza, fibroza in staranje. Nephron Clin Pract. 2014; 127: 65–9.

11. Nath K. Tubulointersticijske spremembe kot glavna determinanta napredovanja okvare ledvic. Am J Kidney Dis. 1992; 20: 1–17.

12. Mannon RB, Matas AJ, Grande J, et al. Vnetje na območjih tubularne atrofije pri biopsijah ledvičnega alogenskega presadka: močan napovedovalec odpovedi alotransplantata. Am J Transplant. 2010; 10: 2066–73.

13. Haas M. Kronična alograftska nefropatija ozintersticijska fibrozain tubularna atrofija: kaj je ime? Curr Opin Nephrol Hypertens. 2014; 23: 245–50.

14. Venner JM, Famulski KS, Reeve J, et al. Odnosi med poškodbami, fibrozo in časom pri presaditvi ledvic pri človeku. JCI Insight. 2016; 1: e85323.

15. Smith HW. Ledvica: zgradba in delovanje v zdravju in bolezni. New York: Oxford University Press, Inc; 1951. str. 191–2.

16. Myers GL, Miller WG, Coresh J, et al. Priporočila za izboljšanje merjenja serumskega kreatinina: poročilo laboratorijske delovne skupine Nacionalnega izobraževalnega programa za ledvične bolezni. Clin Chem. 2006; 52: 5–18.

17. Ferguson M, Waikar SS. Uveljavljeni in nastajajoči označevalci delovanja ledvic. Clin Chem. 2012; 58: 680–9.

18. Gowda S, Desai PB, Kulkarni SS, et al. Označevalci testov delovanja ledvic. N Am J Med Sci. 2010; 2: 170–3.

19. Bauer JH, Brooks CS, Burch RN. Klinična ocena očistka kreatinina kot meritev hitrosti glomerularne filtracije. Am J Kidney Dis. 1982; 2: 337–46.

20. Nilsson-Ehle P, Grubb A. Novi markerji za določanje GFR: očistek joheksola in koncentracija cistatina C v serumu. Kidney Int Suppl. 1994; 46: S17–9.

21. Levey AS, Bosch JP, Lewis JB, et al. Natančnejša metoda za oceno hitrosti glomerulne filtracije iz serumskega kreatinina: nova enačba za napovedovanje. Ann Intern Med. 1999; 130: 461–70.

22. Grubb AO. Cistatin C—lastnosti in uporaba kot diagnostični marker. Adv Clin Chem. 2000; 35: 63–99.

23. Knight EL, Verhave JC, Spiegelman D, et al. Dejavniki, ki vplivajo na ravni cistatina C v serumu, razen delovanja ledvic, in vpliv na merjenje delovanja ledvic. Kidney Int. 2004; 65: 1416–21.

24. Coresh J, Astor BC, McQuillan G, et al. Kalibracija in naključna variacija testa serumskega kreatinina kot kritični elementi uporabe enačb za oceno hitrosti glomerulne filtracije. Am J Kidney Dis. 2002; 39: 920–9.

25. Cockcroft DW, Gault MH. Napovedovanje očistka kreatinina iz serumskega kreatinina. Nefron. 1976; 16: 31–4.

26. Luka RG. Urea in ŽEMLJICA. N Engl J Med. 1981; 305: 1213–5.

27. Herrington D, Drusano GL, Smalls U, et al. Lažno zvišanje ravni kreatinina v serumu. JAMA. 1984;252:2962.

28. Ibrahim H, Mondress M, Tello A, et al. Alternativna formula za formule Cockcroft-Gault in spremembo prehrane pri ledvičnih boleznih pri napovedovanju GFR pri posameznikih s sladkorno boleznijo tipa 1. J Am Soc Nephrol. 2005; 16: 1051–60.

29. Froissart M, Rosset J, Jacquot C, et al. Napovedna učinkovitost spremembe prehrane pri ledvični bolezni in Cockcroft-Gaultove enačbe za oceno delovanja ledvic. J Am Soc Nephrol. 2005; 16: 763–73.

30. Zerbe RL, Robertson GL. Primerjava meritev vazopresina v plazmi s standardnim indirektnim testom pri diferencialni diagnozi poliurije. N Engl J Med. 1981; 305: 1539–46.

31. Halperin ML, Richardson RM, Bear RA, et al. Amonijev urin: ključ do diagnoze distalne ledvične tubularne acidoze. Nefron. 1988; 50: 1–4.

32. Batlle DC. Segmentna karakterizacija napak pri zakisanja zbiralnih tubulov. Kidney Int. 1986; 30: 546–54.

33. Sabatini S, Kurtzman NA. Patofiziologija ledvičnih tubulnih acidoz. Semin Nefrol. 1991; 11: 202–11.

34. Carvounis CP, Nisar S, Guro-Razuman S. Pomen frakcijskega izločanja sečnine pri diferencialni diagnozi akutne odpovedi ledvic. Kidney Int. 2002; 62: 2223–9.

35. Rabb H. Vrednotenje urinskih markerjev pri akutni odpovedi ledvic. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1988; 7: 681–6.

36. Miller TR, Anderson RJ, Linas SL, et al. Urinski diagnostični indeksi pri akutni odpovedi ledvic: prospektivna študija. Ann Intern Med. 1978; 88: 47–57.

37. Chawla LS, Davison DL, Brasha-Mitchell E, et al. Razvoj in standardizacija stresnega testa furosemida za napovedovanje resnosti akutne ledvične poškodbe. Crit Care. 2013;17:R207.

38. Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, et al. Nova enačba za oceno hitrosti glomerulne filtracije. Ann Intern Med. 2009; 150: 604–12.

39. Farris AB, Adams CD, Brousaides N, et al. Morfometrična in vizualna ocena fibroze v biopsijah ledvic. J Am Soc Nephrol. 2011;22:176–86.

40. Youm I, Youan BB. Validirana tekočinska kromatografija visoke ločljivosti z reverzno fazo za kvantifikacijo furosemida v tabletah in nanodelcih. J Anal Methods Chem. 2013;2013:207028.

41. Schardijn GH, Statius van Eps LW. Beta 2-mikroglobulin: njegov pomen pri oceni delovanja ledvic. Kidney Int. 1987; 32: 635–41.

42. Garimella PS, Biggs ML, Katz R, et al. Urinarni uromodulin, delovanje ledvic in kardiovaskularna bolezen pri starejših odraslih. Kidney Int. 2015; 88: 1126–34.

43. Herrera J, Rodriguez-Iturbe B. Stimulacija tubularne sekrecije kreatinina pri zdravju in v pogojih, povezanih z zmanjšano maso nefrona. Dokazi za tubularno funkcionalno rezervo. Presaditev Nephrol Dial. 1998; 13: 623–9.

44. Barai S, Gambhir S, Prasad N, et al. Funkcionalna rezervna zmogljivost ledvic v različnih fazah kronične ledvične bolezni. Nefrologija. 2010; 15: 350–3.

45. Udomkarnjananun S, Townamchai N, Iampenkhae K, et al. Obremenitveni test s furosemidom kot napovedni biomarker za zapoznelo delovanje presadka pri presaditvi ledvice. Nefron. 2019; 141: 236–48.

46. ​​Lumlertgul N, Peerapornratana S. Trakarnvanich Tet al. Zgodnji začetek nadomestnega ledvičnega zdravljenja v primerjavi s standardnim pri bolnikih z akutno ledvično okvaro, ki se ne odzivajo na stresni test furosemida (preskušanje FST). Crit Care. 2018;22:101.

47. Rewa OG, Bagshaw SM, Wang X, et al. Obremenitveni test s furosemidom za napovedovanje poslabšanja akutne poškodbe ledvic pri kritično bolnih bolnikih: multicentrična, prospektivna, opazovalna študija. J Crit Care. 2019; 52: 109–14.

48. Van der Voort PH, Boerma EC, Pickkers P. Obremenitveni test s furosemidom za napoved delovanja ledvic po neprekinjenem nadomestnem zdravljenju z ledvicami. Crit Care. 2014; 18: 429.