Izoastilbin zavira nevronsko apoptozo in oksidativni stres v Aratovem modelu ishemijsko-reperfuzijske poškodbe v možganih: vpletenost SIRT1/3/6

Za več informacij pošljite e-poštotina.xiang@wecistanche.com

Povzetek

Ozadje.Dokazano je, da ima izoastilbin (IAB).antioksidativnoin anti-apoptotične funkcije. Nedavna študija je pokazala, da lahko IAB zmanjšaoksidativnostres pri Alzheimerjevi bolezni. Vendar ostaja neznanka, ali je antioksidativna funkcija IAB tudi zaščitna pri drugih možganskih boleznih.
Cilji.Raziskati vloge in osnovne mehanizme IAB pri reperfuziji okluzije srednje možganske arterije (MCAO/R) pri podganah.
Materiali in metode.Samci podgan Wistar so bili naključno razdeljeni v 5 skupin: lažna skupina, skupina MCAO/R in 3 skupine MCAO/R, ki so prejemale IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg ali 80 mg/kg) enkrat na dan 3 dni. Velikost infarkta, modificirana ocena nevrološke resnosti (mNSS),oksidativnostresoznačevalci in markerji nevronske apoptoze so bili uporabljeni za analizo delovanja IAB.
Rezultati.V primerjavi s skupino MCAO/R je uporaba IAB zmanjšala velikost infarkta in rezultate mNSS pri podganah MCAO/R. Izoastilbin je tudi znižal raven malondialdehida (MDA) in povečal aktivnost katalaze (CAT), superoksid dismutaze (SOD) in glutation peroksidaze (GSH-PX). Zdravljenje z izoastilbinom je oslabilo nevrone, ki jih povzroča MCAO/Rapoptozav primerjavi s skupino MCAO/R, kot kažejo rezultati X-dUTP nick-end (TUNEL) in Western blot testov, posredovanih s terminalno deoksinukleotidno transferazo. Izoastilbin je tudi obrnil znižanje ekspresije proteina SIRT1/3/6, ki ga povzroči MCAO/R.
Sklepi.Ta opažanja kažejo, da IAB ščiti predoksidativnostresa in nevronske apoptoze pri podganah po cerebralni ishemično-reperfuzijski (I/R) poškodbi s povečano regulacijo SIRT1/3/6, kar kaže, da je IAB lahko obetavno terapevtsko sredstvo za cerebralno I/R poškodbo.
Ključne besede:apoptoza, oksidativni stres, izoastilbin, žariščna cerebralna ishemija-reperfuzijska poškodba

Ozadje

Ishemična in hemoragična možganska kap sta med glavnimi vzroki invalidnosti in smrti po vsem svetu.1,2Ishemično možgansko kap povzročijo ovire v krvnih žilah, zaradi česar so tarčni organi izpostavljeni tveganju celične smrti.3Čeprav je najučinkovitejše zdravljenje možganske ishemije hitro ponovno vzpostavijo oskrbo s krvjo, lahko trombolitična terapija poveča velikost infarkta in poslabša ishemično-reperfuzijsko (I/R) poškodbo v možganih.1,4 Zato je nujno treba razviti nova zdravila za zdravljenje možganske poškodbe I/R.

Ishemijsko-reperfuzijska poškodba v možganih vključuje kompleksno patofiziologijo, vključno s pojavomoksidativnostres, apoptoza in izčrpavanje adenozin trifosfata (ATP), kar lahko vodi do nevronskih poškodb.5 Reaktivne kisikove vrste (ROS) nastajajo med ishemijo, kar vodi do nevronskihapoptozain nevrološka disfunkcija.6 Natančneje, NADPH oksidaze ustvarjajo ROS med poškodbo I/R, ki povzročioksidativnostres. Ta stres zaznamujejo povečana peroksidacija lipidov, zmanjšana aktivnost katalaze (CAT) in superoksid dismutaze (SOD) ter znižana raven glutationa (GSH).7–11 Visoke ravni ROS inoksidativnostresbo nato sprožil celično smrt po mitohondrijski apoptotični poti po cerebralni I/R poškodbi.12 Prehodne pore mitohondrijske prepustnosti se lahko odprejo kot posledica odvečnega kopičenja ROS, kar ima za posledico nižji mitohondrijski transmembranski potencial in povečano proizvodnjo aktivatorjev kaspaze, kot je kot citokrom c, ki končno sproži kaskado kaspaze in povzroči celično smrt.12 Geng et al. predlagal, da apoptozo nevronskih celic vsaj delno posreduje pot mitohondrijske apoptoze pri cerebralni I/R poškodbi.13 Posledično sta inhibicija ali odprava oksidativnega stresa in nevronska apoptoza obetavni novi metodi za ublažitev cerebralne I/R poškodbe.

Da bi raziskali mehanizem, prek katerega IAB ublaži poškodbe, ki jih povzroči I/R, smo se osredotočili na signalno kaskado SIRT. Nedavne študije so pokazale zaščitno vlogo SIRT1/3/6 pri različnih boleznih, vključno z nevralno degeneracijo v možganih, vnetjem krvnih žil in kopičenjem telesne maščobe. Dejansko smo ugotovili, da zdravljenje z IAB poveča raven izražanja SIRT med poškodbo I/R, kar kaže, da lahko IAB zaščiti pred celicami.apoptozaz uravnavanjem izražanja SIRT. Naši rezultati skupaj kažejo, da je IAB potencialno koristno zdravljenje klinične cerebralne poškodbe I/R.

Cilji

Naš splošni cilj je bil preučiti učinke in osnovne mehanizme IAB pri poškodbah I/R z uporabo živalskega modela MCAO/R.

Materiali in metode

Živali

Samci podgan Wistar so bili pridobljeni od podjetja Shanghai Laboratory Animal Company (Šanghaj, Kitajska). Podgane, stare 60–90 dni z normalno telesno težo (200–250 g), so hranili ad libitum s hrano in vodo ter jih vzdrževali v doslednem okolju (25 ±2 stopinji, 40 ±10 odstotkov relativne vlažnosti in 12-urni cikel svetlobe/teme) . Z živalmi so ravnali v skladu s smernicami za nego in uporabo laboratorijskih živali Jiamusi Collegea, Univerze tradicionalne kitajske medicine Heilongjiang, Kitajska. Odbor za institucionalno oskrbo in uporabo živali Jiamusi College, Univerze kitajske medicine Heilongjiang je odobril postopke na živalih (št. odobritve 20190815).

Vzpostavitev poškodbe MCAO/R in zdravljenja IAB

Toksičnost IAB je bila določena, kot je opisano prej.15 Izoastilbin (Chengdu Purechem-Standard Co., Ltd., Chengdu, Kitajska) je bil razredčen na končne koncentracije 20 mg/kg, 40 mg/kg in 80 mg/kg v fosfatu. -puferirana raztopina (PBS). Živali so bile randomizirane v 5 skupin: 1. lažne; 2. MCAO/R; 3. MCAO/R, ki mu sledi 20 mg/kg IAB; 4. MCAO/R, ki mu sledi 40 mg/kg IAB; in 5. MCAO/R, ki mu sledi 80 mg/kg IAB.

Podgane smo anestezirali z intraperitonealno (ip.) injekcijo 50 mg/kg natrijevega pentobarbitala (Sinopharm Chemical Reagent, Peking, Kitajska). Za uvedbo MCAO/R smo izpostavili karotidne arterije, in sicer zunanjo karotidno arterijo (ECA), desno skupno karotidno arterijo (CCA) in notranjo karotidno arterijo (ICA). ECA in CCA sta bila proksimalno ligirana. ICA je bila ligirana z 0,285 mm monofilamentnim šivom, vstavljenim v lumen ICA za približno 18 mm skozi ECA štrcelj, da bi oviral srednjo možgansko arterijo (MCA). LaserDoppler (USCN KIT INC., Wuhan, Kitajska) je bil uporabljen za potrditev, da je pretok krvi zmanjšan na manj kot 20 odstotkov normalne ravni. Lažna skupina je prestala enako operacijo; vendar arterije niso bile ligirane. Po 2 urah okluzije so ligirane arterije reperfuzirali in podganam nato dajali IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg ali 80 mg/kg) ali PBS dnevno 3 zaporedne dni. Nazadnje, 72 ur po MCAO/R, so ocenili nevrološko zmogljivost podgan.

Vrednotenje volumna možganskega infarkta pri podganah

Po zdravljenju z IAB so možgane hitro stehtali, da bi izmerili njihovo mokro težo. Nato so bili možgani dehidrirani pri 100 stopinjah 24 ur, da bi ocenili njihovo suho težo. Koncentracija vode v možganih je bila izračunana kot: ((mokra teža ‒ suha teža)/mokra teža) × 100 odstotkov.

Spremenjena ocena nevrološke resnosti (mNSS)

Senzorične, motorične, ravnotežne in refleksne nevrološke funkcije so bile ocenjene 72 ur po operaciji MCAO z uporabo mNSS.17 Resnost nevroloških izpadov je bila razvrščena na lestvici od 0 do 10, pri čemer je višja ocena pomenila hujšo poškodbo živčni sistem.

Merjenje superoksid dismutaze (SOD), malondialdehida (MDA), katalaze (CAT) in glutation peroksidaze (GSH-PX)

Po zdravljenju z IAB smo določili vsebnost beljakovin iz možganskih tkiv. Koncentracijo beljakovin kortikalnih homogenatov smo določili z uporabo BCA kompletov (Beyotime, Šanghaj, Kitajska). SOD, MDA, CAT in GSH-PX so bili odkriti z ustreznimi kompleti (kataloška št. A003-1, A001-3, A007 in A005; Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kitajska). Na kratko, zbrali smo supernatant kortikalnega homogenata. Za SOD smo vzorce inkubirali z delovno raztopino WST-8/encim pri 37 stopinjah 30 minut. Absorpcijo smo izmerili pri valovni dolžini 450 nm. Ena enota encimske aktivnosti SOD (U) je bila definirana kot količina vzorca, potrebna za doseganje 50-odstotne stopnje inhibicije barvila WST-8 formazan. Za MDA smo vzorce zmešali z delovno raztopino in nato 15 minut segrevali pri 100 stopinjah. Absorpcijo supernatanta smo izmerili pri valovni dolžini 532 nm. Za CAT smo vzorce zmešali s pufrom za odkrivanje CAT in raztopino vodikovega peroksida ter nato inkubirali pri 25 stopinjah 5 minut. Absorpcijo smo zaznali pri valovni dolžini 520 nm. Za GSH-PX smo vzorce mešali z GSH pri 37 stopinjah 5 minut. Absorpcijo supernatanta smo izmerili pri valovni dolžini 412 nm. Ena enota (U) encimske aktivnosti je bila opredeljena kot količina GSH-PX v 1 mg beljakovine, ki je katalizirala porabo 1 μmol/L GSH, medtem ko je bil odštet učinek neencimske reakcije.

Barvanje terminalne deoksinukleotidil transferaze dUTP nick end marking (TUNEL)

Možganska tkiva ipsilateralne hemisfere so bila izolirana, fiksirana v 4-odstotnem paraformaldehidu in vdelana v parafin. Tkiva smo nato razrezali na rezine 5- μm in antigen izpostavili po 10 minutah mikrovalovnega segrevanja v citratnem pufru. Nevronska apoptoza je bila ocenjena s testom TUNEL (In Situ Cell Death Detection Kit; Roche, Penzberg, Nemčija) v skladu z navodili proizvajalca. Na kratko, rezine možganov smo za 30 minut dali v ledeno hladen 4-odstotni paraformaldehid in nato 1 uro inkubirali v temi z reakcijsko mešanico TUNEL pri 37 stopinjah. Nato so bila jedra obarvana z 6-diamidino-2-fenilindolom (DAPI; Sigma-Aldrich). Vzorci so bili slikani in indeks apoptoze je bil izračunan kot število celic, pozitivnih na TUNEL, deljeno s skupnim številom celic.

Western blot

Podganja možganska tkiva so bila lizirana z uporabo pufra radioimunoprecipitacije (RIPA) (Beyotime, Dalian, Kitajska). Beljakovine smo podvrgli elektroforezi v 12–15-odstotnem natrijevem dodecil sulfat-poliakrilamidnem gelu (SDS-PAGE) in nato prenesli na membrane iz poliviniliden fluorida (PVDF) (Millipore, Billerica, ZDA). Membrane so bile blokirane s 5-odstotnim mlekom brez maščobe in inkubirane s primarnimi protitelesi pri 4 stopinjah čez noč. Sekundarna protitelesa, konjugirana s peroksidazo hrena (HRP), so bila nato 2 uri inkubirana pri sobni temperaturi. Specifične signale označenih proteinov smo odkrili s kemiluminiscenčnim sistemom. -aktin je bil uporabljen za normalizacijo ravni ekspresije beljakovin Bcl-2, Bax in Sirtuin (SIRT1/3/6). Slike so bile analizirane s programsko opremo ImageJ.

Statistične analize

Podatki so predstavljeni kot povprečje ± standardni odklon (SD) iz 3 neodvisnih poskusov. S Shapiro–Wilkovim testom je bilo potrjeno, da podatki iz vsake skupine sledijo normalni porazdelitvi. Razlike med skupinami so analizirali z enosmerno analizo variance (ANOVA), ki ji je sledil Tukeyjev post hoc test z uporabo programske opreme Prism v. 8 (GraphPad Software, San Diego, ZDA). Vrednost p< 0.05 indicated="" statistical="" significance.="" a post="" hoc="" power="" analysis="" was="" performed="" using="" g*power="" 3.1.9.7="" software="" (heinrich="" heine="" university,="" düsseldorf,="">

Rezultati

Izoastilbin ščiti nevrone pred poškodbami, ki jih povzroči MCAO/R

Da bi raziskali, ali so IAB zaščiteni nevroni, izpostavljeni cerebralnemu I/R, so analizirali koncentracijo vode v možganih in volumen infarkta. Pri kontrolnih živalih ni bilo infarkta in koncentracija vode je bila relativno nizka (slika 1B, C; lažna skupina). Po operaciji MCAO/R smo opazili znatno povečanje velikosti infarkta in koncentracije vode (slika 1B, C). Infarkt in ishemični edem kažeta, da je naš pristop uspešno ustvaril I/R model pri podganah. Zanimivo je, da ko smo takoj po poškodbi uporabili različne koncentracije IAB (20 mg/kg, 40 mg/kg in 80 mg/kg), smo opazili od odmerka odvisno okrevanje infarkta in ishemičnega možganskega edema (sl. 1B, C). Ta rezultat nakazuje, da IAB ščiti pred poškodbami možganov, ki jih povzroča ishemija. Nato smo pregledali celicoapoptozaz uporabo testa mNSS. Kot je prikazano na sliki 1D, lažno operirane podgane niso pokazale očitnih nevroloških izpadov, medtem ko so podgane MCAO/R pokazale znatno povečane rezultate mNSS. V skladu z morfološkimi spremembami, prikazanimi na sliki 1B in sliki 1C, je zdravljenje z IAB znatno zmanjšalo rezultat mNSS podgan MCAO/R (slika 1D). Ti rezultati skupaj dokazujejo, da ima IAB nevroprotektivno funkcijo v modelu cerebralne I/R poškodbe Vivo pri glodalcih. Glede na to, da je imela višja koncentracija IAB boljše zaščitne učinke brez očitnih stranskih učinkov, smo za naslednje poskuse uporabili 80 mg/kg.

Izoastilbin zmanjša oksidativni stres pri podganah MCAO/R

Za oceno vpliva IAB naoksidativni stres, so bile po zdravljenju z IAB ocenjene ravni GHS-PX, MDA, SOD in CAT. Zaradi povečanja oksidativnega stresa so imele podgane, izpostavljene MCAO/R, višje ravni MDA v primerjavi z lažnimi podganami. Ta učinek je bil oslabljen z zdravljenjem z IAB (slika 2A). Poleg tega so se ravni CAT, SOD in GHS-PX zmanjšale pri podganah MCAO/R v primerjavi z lažnimi podganami (slika 2B, D). Zdravljenje z IAB je zvišalo ravni CAT, SOD in GHS-PX pri podganah MCAO/R (sl. 2B, D), kar kaže, da je IAB zaščitil pred cerebralno I/R poškodbo z zmanjšanjem oksidativnega stresa.

Izoastilbin zavira apoptozo nevronov pri podganah MCAO/R

Nato smo uporabili test TUNEL za oceno nevronovapoptozapo cerebralni I/R poškodbi. Kot je prikazano na sliki 3A, je bilo pri podganah MCAO/R povečano število TUNEL-pozitivnih celic, ki se je zmanjšalo z zdravljenjem z IAB (slika 3A). Da bi raziskali osnovne mehanizme zaščite IAB, smo preučili izražanje apoptoznih proteinov Bax in Bcl-2 z uporabo Western blota. Pri podganah, ki so bile podvržene MCAO/R, je bila ekspresija Bax (pro-apoptotični marker) regulirana navzgor, medtem ko je bila ekspresija Bcl-2 (anti-apoptotični marker) zmanjšana v primerjavi z lažno skupino (slika 3B, C ). Vendar pa je zdravljenje z IAB preprečilo spremembe, ki jih povzroča MCAO/R (slika 3B, C). Ti rezultati kažejo, da je IAB zaviral nevronsko apoptozo pri podganah MCAO/R.

Izoastilbin poveča izražanje SIRT

Nato smo poskušali preučiti, kako IAB ščiti nevrone predoksidativni stres. Ugotovljeno je bilo, da je SIRT, od NAD plus odvisna deacetilaza, ki je v glavnem lokalizirana v mitohondrijih, povezana s celičnim preživetjem in apoptozo, celičnim metabolizmom in odzivom na stres. SIRT lahko aktivira mitohondrijske signale in poti za spodbujanje proliferacije mitohondrijev in ustvarjanje ATP. Sodeluje tudi pri vnetju, tako da zmanjšanje SIRT vodi do povečanja faktorjev kroničnega vnetja, kot sta aktivnost NFκB in RelA/p65.18–20 Zanimivo je, da je več študij pokazalo, da ima SIRT nevronski zaščitni učinek in zmanjšuje oksidativno stres v patofiziologiji cerebralne I/R poškodbe.21 Tu smo raziskovali možgansko izražanje SIRT1/3/6 pri podganah, ki so bile izpostavljene MCAO/R. Ugotovili smo, da je poškodba MCAO/R zmanjšala raven beljakovin SIRT1/3/6, medtem ko je zdravljenje z IAB oslabilo te učinke (sl. 4A–D). Ti podatki kažejo, da bi IAB lahko zaščitil pri podganah MCAO/R z uravnavanjem izražanja SIRT1/3/6 pri zaščiti pred oksidativnim stresom.

Diskusija

Koncentracija ROS se dvigne do vrha, kar lahko povzroči apoptozo ali celično nekrozo.25–28 Obstaja več dobro uveljavljenih označevalcev oksidativnega stresa. Na primer, MDA, citotoksična spojina, ki nastane s peroksidacijo lipidov,29 se poveča v kardiomiocitih podgan po poškodbi I/R.30 Antioksidativni encimi SOD, CAT in GHS-PX igrajo pomembno vlogo pri čiščenju superoksidov in preprečevanju oksidativne poškodbe.31, 32 Poleg tega so spremembe v aktivnosti teh encimov povezane tudi z oksidativnim stresom. Zmanjšanje oksidativnega stresa je možen način zaščite tkiv pred I/R poškodbo.

Nedavna študija je pokazala, da je nevroprotektivni učinek IAB lahko posledica modulacije oksidativnega stresa. Natančneje, študija je pokazala, da je IAB zaviral nastajanje ROS in induciral SOD in GSH-PX za izboljšanje oksidativne škode v mišjem AD modelu.15 Vendar, če in kako IAB ščiti pred I/R poškodbo v možganih, še ni znano. V tej študiji smo dokazali, da IAB uspešno ublaži cerebralno I/R poškodbo z zmanjšanjem volumna infarkta in nevroloških izpadov po poškodbi MCAO/R. Da bi preverili, ali so učinki IAB posledica oslabitve vrst ROS, smo izmerili več markerjev oksidativnega stresa. Ugotovljeno je bilo, da zdravljenje z izoastilbinom po MCAO/R zmanjša ravni MDA, vendar poveča aktivnost CAT, SOD in GSH-PX. Ti rezultati kažejo, da je osnovni mehanizem IAB-posredovane nevroprotekcije pred I/R poškodbo zmanjšanje oksidativnega stresa.

Dejansko je možganski I/R sposoben inducirati apoptozo nevronov. 33,34 Aktivacija proapoptotičnih proteinov (Bax in Bak) in vzporedna inaktivacija antiapoptotičnih proteinov (kot je Bcl-2) sta se pojavili med možgansko I/R poškodba. Oba, Bcl-2 in Bax, se nahajata v zunanjem delu mitohondrijske membrane in sodelujeta pri modulaciji celične apoptoze.35–37 Prejšnje študije so pokazale, da čezmerna ekspresija Bcl-2 blokira nevronsko smrt in vitro in in vivo.38Erfani et al. ugotovili, da je bilo razmerje Bax/Bcl-2 povečano med cerebralno I/R poškodbo, kar je prispevalo k nevronski apoptozi.39 Poleg tega so v mišjih možganih, izpostavljenih MCAO/R, odkrili regulacijo Bax navzgor in Bcl-2. 40 Poleg tega je bilo ugotovljeno, da IAB modulira ravni ekspresije proteinov Bcl-2 in Bax za izboljšanje redoks sistema pri miših z AD, kar kaže na anti-apoptotično vlogo IAB v tem stanju.15 V sedanjosti študijo smo pokazali, da je dajanje IAB zmanjšalo I/R-inducirano nevronsko apoptozo in vivo z znižanjem regulacije Bax in zvišanjem regulacije Bcl-2. Te ugotovitve kažejo, da je nevroprotektivna sposobnost IAB odvisna od njegove anti-apoptotične aktivnosti pri podganah. Vendar pa lahko I/R povzroči tudi nekrozo, ki je ne posreduje oksidativni stres.25–28 Zelo zanimivo je preučiti, ali lahko IAB deluje tudi z zaviranjem nekroze za zmanjšanje poškodbe I/R.

Da bi preučili mehanizem, s katerim IAB zmanjša oksidativni stres, smo se osredotočili na proteine ​​SIRT. V prejšnjem poročilu je bilo ugotovljeno, da prekomerna ekspresija SIRT3 zavira mitohondrijsko fisijo za zaščito pred cerebralno I/R poškodbo. Poleg tega lahko SIRT6 zaščiti možgane pred I/R poškodbo z zaviranjem oksidativnega stresa.2 Tukaj smo odkrili, da SIRT1/3/ 6 je bil znatno zmanjšan pri podganah MCAO/R, medtem ko je dajanje IAB povečalo izražanje SIRT1/3/6. Kolikor nam je znano, je ta študija prva, ki dokazuje, da lahko IAB poveča ekspresijo proteina SIRT1/3/6 za zmanjšanje oksidativnega stresa in nevronske apoptoze, ki jo povzroča cerebralna I/R poškodba.

Omejitve

Obstaja veliko različnih zaščitnih poti proti oksidativnemu stresu. Tukaj smo pokazali, da signalni mehanizem zaščite IAB poteka prek SIRT 1/3/6. Vendar pa je treba dodatno pojasniti druge mehanizme proti oksidativnemu stresu ali cerebralni I/R poškodbi. Med poškodbo I/R sta vključeni tako apoptoza kot nekroza; vendar smo se osredotočili le na apoptozo. Zato bodo potrebne nadaljnje raziskave o vlogi IAB pri nekrozi, da bi v celoti pojasnili zaščitno funkcijo IAB med poškodbo I/R.

Sklepi

Tu smo dokazali, da lahko IAB ublaži oksidativni stres in apoptozo nevronov pri podganah, ki so bile izpostavljene cerebralnemu I/R. Poleg tega se lahko antioksidativni stres in anti-apoptotične funkcije IAB pojavijo z regulacijo izražanja SIRT1/3/6. Naši podatki skupaj kažejo, da je IAB kandidat za zdravljenje cerebralne I/R poškodbe.

ORCID iDs Lifeng An  https://orcid.org/0000-0002-4835-1817 Dandan Zhu  https://orcid.org/0000-0001-9119-9956 Xin Zhang  https://orcid.org/0000-0002-9496-1691 Jingwen Huang  https://orcid.org/0000-0001-6449-5362 Guangbao Lu https://orcid.org/0000-0002-2465-8996

Lifeng An1,B,D, Dandan Zhu2,B, Xin Zhang2,C, Jingwen Huang1,C, Guangbao Lu1,A,F

1 Jiamusi College, Univerza kitajske medicine Heilongjiang, Kitajska

2 Podiplomski študij, Univerza kitajske medicine Heilongjiang, Jiamusi, Kitajska

A – koncept in zasnova raziskave; B – zbiranje in/ali sestavljanje podatkov; C – analiza in interpretacija podatkov;

D – pisanje članka; E – kritična predelava članka; F – končna odobritev artikla

Reference

1. Rossi DJ, Brady JD, Mohr C. Presnova in signalizacija astrocitov med možgansko ishemijo. Nat Neurosci. 2007; 10 (11): 1377–1386. doi:10.1038/ nn2004
2. Ribeiro PW, Cola PC, Gatto AR, et al. Povezava med disfagijo, rezultatom lestvice možganske kapi National Institutes of Health in napovedovalci pljučnice po ishemični možganski kapi. J Stroke Cerebrovasc Dis. 2015; 24 (9): 2088–2094. doi:10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2015.05.009
3. Hu X, De Silva TM, Chen J, Faraci FM. Cerebralna vaskularna bolezen in nevrovaskularna poškodba pri ishemični možganski kapi. Circ Res. 2017; 120 (3): 449–471. doi:10.1161/circresaha.116.308427
4. Tabassum R, Vaibhav K, Shrivastava P, et al. Perililni alkohol izboljša funkcionalne in histološke rezultate proti ishemično-reperfuzijski poškodbi z zmanjšanjem oksidativnega stresa in zatiranjem COX-2, NOS-2 in NF-κB pri podganah z okluzijo srednje možganske arterije. Eur J Pharmacol. 2015; 747: 190–199. doi:10.1016/j.ejphar.2014.09.015
5. Woodruff TM, Thundyil J, Tang SC, Sobey CG, Taylor SM, Arumugam TV. Patofiziologija, zdravljenje ter živalski in celični modeli človeške ishemične možganske kapi. Mol Neurodegener. 2011; 6 (1): 11. doi:10.1186/1750- 1326-6-11
6. Gonzalez-Rodriguez PJ, Xiong F, Li Y, Zhou J, Zhang L. Fetalna hipoksija poveča ranljivost hipoksično-ishemične poškodbe možganov pri neonatalnih podganah: vloga glukokortikoidnih receptorjev. Neurobiol Dis. 2014; 65: 172–179. doi:10.1016/j.nbd.2014.01.020
7. Rodrigo R, Fernández-Gajardo R, Gutiérrez R, et al. Oksidativni stres in patofiziologija ishemične možganske kapi: Nove terapevtske možnosti. Cilji zdravil za nevrološke motnje CNS.2013; 12 (5): 698–714. doi:10.2174/ 1871527311312050015
8. Zhang C, Ling CL, Pang L, et al. Neposredna makromolekularna dostava zdravil na območje cerebralne ishemije z uporabo nanodelcev, posredovanih z nevtrofilci. Teranostika. 2017; 7 (13): 3260–3275. doi:10.7150/thno.19979
9. Kahles T, Luedike P, Endres M, et al. NADPH oksidaza igra osrednjo vlogo pri poškodbah krvno-možganske pregrade pri eksperimentalni možganski kapi. Možganska kap. 2007;38(11):3000–3006. doi:10.1161/strokeaha.107.489765
10. Chen H, Song YS, Chan PH. Inhibicija NADPH oksidaze deluje nevroprotektivno po ishemiji-reperfuziji. J Cereb Blood Flow Metab. 2009; 29 (7): 1262–1272. doi:10.1038/jcbfm.2009.47
11. Kapoor M, Sharma N, Sandhir R, Nehru B. Učinek zaviralca NADPH oksidaze apocinina na ishemično-reperfuzijsko poškodbo hipokampusa v možganih podgan. Biomed Pharmacother. 2018; 97: 458–472. doi:10.1016/j. biofa.2017.10.123
12. Yu S, Wang C, Cheng Q, et al. Aktivna komponenta polipeptidov Achyranthes bidentata zagotavlja nevroprotekcijo z zaviranjem mitohondrijsko odvisne apoptotične poti v gojenih nevronih in na živalskih modelih možganske ishemije. PLoS One. 2014; 9(10):e109923. doi:10.1371/journal.pone.0109923
13. Geng HX, Li RP, Li YG, et al. 14,15-EET zavira apoptozo nevronov pri ishemiji-reperfuziji po mitohondrijski poti. Neurochem Res.2017;42(10):2841–2849. doi:10.1007/s11064-017-2297-6
14. Du Q, Li L, Jerz G. Čiščenje astilbina in izoastilbina v ekstraktu korenike smilax glabra s protitočno kromatografijo visoke hitrosti. J Chromatogr A. 2005; 1077 (1): 98–101. doi:10.1016/j.chroma. 2005.04.072
15. Yu H, Yuan B, Chu Q, Wang C, Bi H. Zaščitne vloge izoastilbina proti Alzheimerjevi bolezni prek Nrf2-posredovane antioksidacije in anti-apoptoze. Int J Mol Med.2019;43(3):1406–1416. doi:10.3892/ijmm. 2019.4058
16. Zhou X, Xu Q, Li JX, Chen T. Strukturna revizija dveh flavanonolnih glikozidov iz Smilax glabra. Planta Med. 2009;75(6):654–655. doi:10. 1055/s-0029-1185360
17. Morimoto J, Yasuhara T, Kameda M, et al. Električna stimulacija poveča migracijsko sposobnost presajenih stromalnih celic kostnega mozga v modelu ishemične kapi glodalcev. Cell Physiol Biochem. 2018; 46 (1): 57–68. doi:10.1159/000488409
18. Torrens-Mas M, Pons DG, Sastre-Serra J, Oliver J, Roca P. Utišanje SIRT3 senzibilizira celice raka dojke za citotoksično zdravljenje s povečanjem proizvodnje ROS. J Cell Biochem. 2017; 118 (2): 397–406. doi:10.1002/jcb.25653
19. Nassir F, Arndt JJ, Johnson SA, Ibdah JA. Regulacija mitohondrijskih trifunkcionalnih beljakovin modulira brezalkoholno maščobno bolezen jeter pri miših. J Lipid Res. 2018; 59 (6): 967–973. doi:10.1194/jlr.M080952
20. Torrens-Mas M, Hernández-López R, Oliver J, Roca P, Sastre-Serra J. Sirtuin 3 utišanje izboljša učinkovitost oksaliplatina z acetilacijo MnSOD pri raku debelega črevesa. J Cell Physiol. 2018; 233 (8): 6067–6076. doi:10.1002/jcp.26443
21. Hernández-Jiménez M, Hurtado O, Cuartero MI, et al. Tihi informacijski regulator 1 ščiti možgane pred cerebralno ishemično poškodbo. Možganska kap. 2013; 44 (8): 2333–2337. doi:10.1161/strokeaha.113.001715
22. Chen GY, Nuñez G. Sterilno vnetje: zaznavanje in odziv na poškodbe. Nat Rev Immunol. 2010; 10 (12): 826–837. doi:10.1038/nri2873
23. Eltzschig HK, Eckle T. Ishemija in reperfuzija: od mehanizma do prevoda. Nat Med. 2011; 17 (11): 1391–1401. doi:10.1038/nm.2507
24. Dziedzic T. Sistemsko vnetje kot terapevtska tarča pri akutni ishemični možganski kapi. Expert Rev Neurother.2015; 15 (5): 523–531. doi:10.1586/ 14737175.2015.1035712
25. Yemisci M, Gursoy-Ozdemir Y, Vural A, Can A, Topalkara K, Dalkara T. Krčenje pericitov, povzročeno z oksidativno-nitrativnim stresom, poslabša kapilarno reflow kljub uspešnemu odprtju zamašene možganske arterije. Nat Med. 2009; 15 (9): 1031–1037. doi:10.1038/nm.2022
26. Chen H, Yoshioka H, ​​Kim GS, et al. Oksidativni stres pri ishemični poškodbi možganov: Mehanizmi celične smrti in potencialne molekularne tarče za nevroprotekcijo. Antioksidni redoks signal. 2011; 14 (8): 1505–1517. doi:10.1089/ars.2010.3576
27. Olmez I, Ozyurt H. Reaktivne kisikove vrste in ishemična cerebrovaskularna bolezen. Neurochem Int. 2012; 60 (2): 208–212. doi:10.1016/j. neuint.2011.11.009
28. Guo J, Cheng C, Chen CS, et al. Prekomerna ekspresija fibulina-5 zmanjša ishemijo/reperfuzijsko poškodbo po okluziji srednje možganske arterije pri podganah. Mol Neurobiol. 2016; 53 (5): 3154–3167. doi:10.1007/s12035- 015-9222-2
29. Qiang M, Xu Y, Lu Y, et al. Avtofluorescenca MDA-modificiranih proteinov kot in vitro in in vivo sonda v analizi oksidativnega stresa. Proteinska celica. 2014; 5 (6): 484–487. doi:10.1007/s13238-014-0052-1
30. Hou S, Zhao MM, Shen PP, et al. Nevroprotektivni učinek salvianolnih kislin proti cerebralni ishemiji/reperfuzijski poškodbi. Int J Mol Sci. 2016; 17 (7). doi:10.3390/ijms17071190
31. Adibhatla RM, Hatcher JF. Oksidacija in peroksidacija lipidov pri zdravju in bolezni CNS: od molekularnih mehanizmov do terapevtskih priložnosti. Antioksidni redoks signal. 2010; 12 (1): 125–169. doi:10.1089/ ars.2009.2668
32. Staroń A, Mąkosa G, Koter-Michalak M. Oksidativni stres v eritrocitih bolnikov z revmatoidnim artritisom. Rheumatol Int. 2012; 32 (2): 331–334. doi:10.1007/s00296-010-1611-2
33. Aşcı S, Demirci S, Aşcı H, Doğuç DK, Onaran İ. Nevroprotektivni učinki pregabalina na cerebralno ishemijo in reperfuzijo. Balkan Med J. 2016;33(2):221–227. doi:10.5152/balkanmedj.2015.15742
34. Tao T, Li CL, Yang WC, et al. Zaščitni učinki propofola proti celotni cerebralni ishemiji/reperfuzijski poškodbi pri podganah z zaviranjem poti faktorja, ki inducira apoptozo. Brain Res.2016; 1644: 9–14. doi:10.1016/j.brainres.2016.05.006
35. Martinou JC, Youle RJ. Mitohondriji v apoptozi: družinski člani Bcl-2 in mitohondrijska dinamika. Dev Cell. 2011; 21 (1): 92–101. doi:10.1016/j.devcel.2011.06.017
36. Borner C, Andrews DW. Apoptotična pora na mitohondrijih: Ali se prebijamo ali smo še vedno obtičali? Celična smrt se razlikuje. 2014; 21 (2): 187–191. doi:10.1038/cdd.2013.169
37. Siddiqui WA, Ahad A, Ahsan H. Skrivnost družine BCL2: proteini Bcl-2 in apoptoza. Posodobitev. Arch Toxicol. 2015; 89 (3): 289–317. doi:10.1007/s00204-014-1448-7
38. Maes ME, Schlamp CL, Nickells RW. BAX do osnov: kako družina genov BCL2 nadzoruje smrt ganglijskih celic mrežnice. Prog Retin Eye Res. 2017; 57: 1–25. doi:10.1016/j.preteyeres.2017.01.002
39. Erfani S, Khaksari M, Oryan S, Shamsaei N, Aboutaleb N, Nikbakht F. Nampt/PBEF/visfatin ima nevroprotektivne učinke proti ishemiji/reperfuzijski poškodbi z modulacijo razmerja Bax/Bcl-2 in preprečevanjem kaspaze{ {2}} aktivacija. J Mol Neurosci. 2015; 56 (1): 237–243. doi:10.1007/s12031-014-0486-1

40. Chen L, Cao J, Cao D, et al. Zaščitni učinek deksmedetomidina

proti cerebralni ishemiji/reperfuzijski poškodbi, ki jo poslabša diabetična hiperglikemija: študija in vivo in in vitro, Life Sdi, 2019:235:116553.doi; 10.1016/ilfs.2019116553

41. Zhao H, Luo Y, Chen L, et al. Sirt3 zavira cerebralno ishemijo-reperfuzijsko poškodbo z normalizacijo poti Wnt/-katenin in blokiranjem mitohondrijske fisije. Spremljevalci celičnega stresa. 2018; 23 (5): 1079–1092. doi:10.1007/s12192-018-0917-y

42. Zhang W, Wei R, Zhang L, Tan Y, Qian C. Sirtuin 6 ščiti možgane pred cerebralno ishemijo/reperfuzijsko poškodbo z aktivacijo NRF2. Nevroznanost.2017;366:95–104. doi:10.1016/j.neuroscience.2017.09.035