Matrična metaloproteinaza 12 je neodvisen prognostični dejavnik, ki napoveduje pooperativno ponovitev običajnega karcinoma ledvičnih celic – kratko poročilo
Mar 15, 2022
za več informacij:ali.ma@wecistanche.com
Bence Beres1· Maria Yusenko2· Lehel Peterf1· Gyula Kovacs1,3· Daniel Banyai1
Povzetek
Namen Približno 15 odstotkov klinično lokaliziranih običajnihledvičnacelični karcinomi(cRCC) razvijejo metastaze v 5 letih po spremljanju. Sarkomatozni cRCC je zelo maligni rak ledvic. Namen naše študije je bil identificirati biomarkerje za oceno pooperativnega napredovanja cRCC.
Metode Globalna analiza genske ekspresije RCC na osnovi mikromrež z in brez sarkomatoznih sprememb je pokazala, da je visok MMP12 (Matrična metaloproteinaza 12)izraz je bil povezan s sarkomatozno histologijo. Poleg tega smo analizirali ekspresijo MMP12 z uporabo večtkivnega niza, ki je obsegal 736 bolnikov s cRCC brez metastaz v času operacije. Mediani čas spremljanja je bil 66±29 mesecev.
Rezultati Imunohistokemija je pokazala ekspresijo MMP12 v 187 od 736 cRCC z dobrimi nadaljnjimi podatki. Kasnejša Kaplan-Meierjeva analiza je pokazala, da so imeli bolniki z MMP12 pozitivnimi tumorji znatno krajše preživetje brez tumorja (p<0.001). in="" multivariate="" cox="" regression="" analysis,="" a="" weak="" to="" strong="">(Matrična metaloproteinaza 12)izraz je pokazal 2,4–2,8-krat večje tveganje za ponovitev pooperativnega tumorja (str<0.001;><0.003,>
Sklepi MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)lahko služi kot biomarker za oceno ponovitve pooperativnega cRCC in kot možna tarča za zdravljenje s penfuridolom.
Ključne besede Konvencionalnoledvičnacelični karcinom · Sarkomatozniledvičnacelični karcinom· MMP12 · Imunohistokemija · Prognoza
1. Uvod
Konvencionalni RCC (cRCC) predstavljajo 85 odstotkov vsehledvičnamaligne bolezni [1]. Približno 20–25 odstotkov bolnikov z diagnozo cRCC že nosi metastaze v času predstavitve. Metastatski CRCC so odporni na kemoterapijo in radioterapijo ter kažejo nizek odziv na ciljno zdravljenje [2]. Trenutno je zgodnja diagnoza v povezavi s kirurškim posegom najboljša možnost za zdravljenje cRCC, medtem ko lahko adjuvantno zdravljenje samo podaljša življenje bolnikov z metastatsko boleznijo.
Zaradi široke uporabe slikovnih tehnik vedno več bolnikov dobi diagnozo naključno odkritih majhnihledvičnamase, omejene na ledvice [3]. Število naključno odkritih pT1a (<4 cm="" in="" diameter)="" and="" pt1b=""><7 cm="" in="" diameter)="" tumours="" is="" increasing="" in="" the="" operation="" statistics="" of="" most="" urological="" centres.="" however,="" approximately="" 15%="" of="" clinically="" localised="" crccs="" operated="" with="" curative="" intent="" will="" develop="" metastases="" within="" 5="" years.="" in="" the="" case="" of="" pt1="" crcc="" confined="" to="" the="" kidney,="" tnm="" classification="" cannot="" be="" used="" to="" estimate="" the="" postoperative="">
Splošno sprejeto je, da cRCC nastane iz proksimalnih tubulov odrasle ledvice. Med razvojem in napredovanjem velika večina cRCC ohrani svoje epitelijske značilnosti. Vendar pa so najagresivnejše različice cRCC podvržene epitelno-mezenhimskemu prehodu (EMT) s postopno izgubo epitelijskih značilnosti in pridobivanjem sarkomatne histologije [4]. Med EMT tumorske celice izgubijo izražanje več membranskih proteinov, ki igrajo ključno vlogo pri vzdrževanju in delovanju normalnih polariziranih proksimalnih tubularnih celic. Invazivna in metastatska rast cRCC ni odvisna samo od pridobitve fibroblastom podobne/rabdoidne histologije, temveč tudi od sposobnosti razgradnje bazalne membrane in spreminjanja zunajceličnega matriksa [5].
Tu smo analizirali globalne vzorce izražanja genov cRCC in papilarnih RCC (pRCC) ter tistih, ki kažejo sarkomatozno histologijo in hitro napredovanje. Identificirali smo MMP12 kot najbolj izrazito čezmerno izražen gen v sarkomatoznih cRCC. Kasnejša imunohistokemijska analiza velike kohorte cRCC je pokazala, da izražanje MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)pomembno korelira s pooperativnim recidivom cRCC, omejenim na ledvico v času operacije.
Kliknite zacistanche para que sirve za zdravljenje bolezni ledvic
2 Materiali in metode
2.1 Analiza izražanja genov na osnovi mikromrež
Vzorci RCC in ustrezni normalni vzorci ledvic so bili zbrani na Oddelku za urologijo Univerze v Heidelbergu v Nemčiji v obdobju 1995–1996. Homogena področja vzorcev tumorjev so bila takoj po operaciji hitro zamrznjena v tekočem dušiku in shranjena pri –80 stopinj za nadaljnjo analizo. Vzporedno so bili vzorci tumorjev fiksirani v 4-odstotnem formaldehidu za histološko preiskavo. Za globalno analizo izražanja genov smo izbrali 17 cRCC, 18 pRCC z epitelno histologijo. kot tudi 3 cRCC in 2 pRCC s sarkomatozno histologijo. Diagnoza tumorjev je bila pred uporabo v tej študiji potrjena genetsko. RNA je bila izolirana z uporabo Qiagen RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Nemčija). Poznejša sinteza cDNA in hibridizacija sta bili izvedeni v Genomics Core Facility EMBL v Heidelbergu z uporabo niza Affymetrix Human Genome U133 Plus 2.0 (Affymetrix, Santa Clara, CA, ZDA), ki vsebuje 54.675 sond. Normalizacija je bila izvedena z uporabo algoritma R, ki ga je zagotovil Biocon ductor. Diferencialno izraženi geni so bili identificirani z analizo obogatitve genskega nabora. Vizualizacija različno izraženih genov je bila izvedena s programsko opremo Multiple Array Viewer (HTTP://www.tm4.org/index.html). Podatki o profilu ekspresije so deponirani v NCBI Gene Expression Omnibus pod pristopno številko GSEA 11151.
2.2 Pacienti in vzorci tumorjev
Uporabljeno kohorto je sestavljalo 736 bolnikov, pri katerih je bila med letoma 2000 in 2015 opravljena radikalna ali delna tumorska nefrektomija. Histološko diagnozo in klasifikacijo TNM je določil eden od avtorjev (GK) v skladu s klasifikacijo Heidelberg in sistemi TNM z uporabo 3 trier stopnjevanja [6]. , 7]. Zadržali smo se pri Heidelberški klasifikaciji, ker temelji na robustnih genetskih spremembah, specifičnih za tumor, in ne na spremenljivih citoloških značilnostih. Približno 70 odstotkov cRCC je bilo sestavljenih iz "bistrih" celic, preostanek pa iz "eozinofilnih" (prej imenovanih "zrnatih") celic ali mešanih bistrih in eozinofilnih celic. Podatke o rednem spremljanju in smrti zaradi tumorja smo pridobili iz registra Urološkega oddelka. Spremljanje je bilo opredeljeno kot čas od operacije do zadnje zabeležene kontrole ali smrti zaradi raka. Bolniki, ki so umrli zaradi vzrokov, ki niso RCC, niso bili vključeni v to analizo. Predoperativno klinično določanje je vključevalo računalniško tomografijo (CT) trebuha in prsnega koša. Skeni kosti in CT možganov so bili opravljeni le, če so bili indicirani s kliničnimi znaki. Prisotnost nodalnih metastaz je bila potrjena s histološko preiskavo, oddaljenih metastaz pa z rentgenskim pregledom. Pooperativne bolnike smo vsakih 6 mesecev pregledali z ultrazvokom trebuha in merjenjem serumskega kreatinina in eGFR ter vsakih 12 mesecev s CT slikami.
2.3 Konstrukcija tkivnih mikromrež (TMA).
Reprezentativna področja tumorja so bila identificirana z uporabo preparatov, obarvanih s hematoksilinom in eozinom, ter izbrana za konstrukcijo TMA. Iz tumorjev z območji različne morfologije ali stopnjevanja so bile odvzete 2–4 biopsije. Biopsije s premerom 0,6 mm so bile postavljene v prejemni blok z uporabo ročnega niza tkiv (MTA1, Beecher Instruments, Inc., Sun Prairie, ZDA). V TMA so bile vključene fetalne in odrasle biopsije ledvic, možganov in jeter.
2.4 Imunohistokemija
4 µm TMA rezine smo razvoskali v ksilenu in rehidrirali v stopnjevanem etanolu. Nato smo izvedli pridobivanje antigena s prekuhavanjem stekelcev v EnVision FLEX Target Retrieval Solution, visok pH (DAKO, Glostrup, Danska) v 2100-Retriever (Pick-Cell Laboratories, Amsterdam, Nizozemska). Aktivnost endogene peroksidaze in nespecifično obarvanje smo blokirali z reagentom za blokiranje peroksidaze Envision FLEX (DAKO) 10 minut pri sobni temperaturi. Nastala preparata smo nato eno uro inkubirali v vlažni komori z anti-MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)protitelesa (NBP{{0}}, Novus Biologicals, Littleton, CO, ZDA) pri razredčitvi 1:250. EnVision, ki mu sledi FLEX konjugirano sekundarno protitelo s konjsko peroksidazo (DAKO) 30 minut pri sobni temperaturi. Kot negativno kontrolo smo preparate inkubirali samo s sekundarnim protitelesom. Signale smo vizualizirali z DAB (3,3'-Diaminobenzidin) (DAKO). Tkivne odseke smo kontrastno obarvali z Mayerjevim hematoksilinom (Lilliejeva modifikacija, DAKO) in po 10 sekundah modrenja v raztopini amonijevega hidroksida namestili v glicergel (DAKO). Imunske reakcije sta ovrednotila BB in GK, zaslepljena glede na klinične podatke. Fotografije so bile posnete z mikroskopom Leitz DMRBE, opremljenim z objektivom HC PLAN APO 20×0,70 in kamero Progres C14. Ker je odstotek pozitivno obarvanih celic predstavljal vsaj 90 odstotkov tumorskih celic v vseh pozitivnih biopsijah, števila pozitivnih celic nismo ovrednotili kot parameter. Intenzivnost obarvanja smo razvrstili kot brez obarvanja, šibko obarvanje ali močno obarvanje (glej sliko 1 bd).
Cistanche za izboljšanje delovanja ledvic
2.5 Statistična analiza
Analiza podatkov je bila izvedena s programskim paketom SPSS Statistics različice 20.0 (IBM,35 Armonk, NY, ZDA). Korelacije med MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)ekspresijo in klinično-patološke parametre smo ocenili s testom hi-kvadrat. Učinek različnih spremenljivk (starost, spol, velikost tumorja, klasifikacija TNM, stopnja, stadij in izražanje MMP12) na čas preživetja bolnikov je bil ocenjen z uporabo Kaplan-Meierjeve analize. Primerjave krivulj preživetja so bile narejene s testom Log-rank. Univariatne in multivariatne analize preživetja so bile izvedene z uporabo regresijskega modela COX. Živi bolniki brez bolezni so bili cenzurirani. Razlike so bile ocenjene kot pomembne na str<>
3 Rezultati in razprava
Ocenili smo ekspresijske profile 17 cRCC in 18 pRCC z epitelno histologijo v primerjavi s profili treh cRCC in dveh pRCC s sarkomatozno histologijo. Nato smo izbrali 50 genov z analizo obogatitve genskega nabora (GSEA), ki so bili uravnani v sarkomatoznih RCC. Rezultati treh najizraziteje izraženih genov (MMP12, ANLN in ADAM12) so prikazani na sliki 1A. MMP12(matrična metaloproteinaza 12)je bil prekomerno izražen tudi v štirih agresivno rastočih epitelijskih cRCC. Noben od pRCC ni pokazal prekomerne ekspresije MMP12.
Slika 1 MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)izražanje v normalnih ledvicah inledvičnacelični karcinom(RCC). (A) Del toplotne karte, ki prikazuje diferencialno izražanje genov pri običajnem RCC (cRCC), papilarnem RCC (pRCC) in sarkomatoznem RCC (sRCC). Ekspresija MMP12, kot tudi ANLN in ADAM12, je povečana v sRCC (rdeča). Noben od pRCC, ampak 4 cRCC brez sarkomatozne histologije, ni pokazal visoke ekspresije MMP12. (B) Imunohistokemija izražanja MMP12. (a) Močno izražanje MMP12 v distalnih tubulih (DT) odrasle ledvice; proksimalni tubuli (PT) so negativni. (b) Pomanjkanje izražanja MMP12 v cRCC. ( c ) Difuzna, šibka ekspresija MMP12 v cRCC z epitelno histologijo. ( d ) Močna ekspresija MMP12 v sRCC. (e) Močna citoplazemska ekspresija MMP12 v rabdoidnem cRCC. (f) Papilarno rastoči epitelijski cRCC, ki kaže močno izražanje MMP12 v bazalnih regijah tumorskih celic (puščice).
Ekspresija MP12 je bila odkrita izključno v distalnih tubularnih celicah normalnih fetalnih in odraslih ledvic, medtem ko so bile proksimalne tubularne celice negativne (slika 1B, a). Imunohistokemija je pokazala šibko ali močno citoplazmatsko obarvanje MMP12 pri 187 od 736 cRCC, medtem ko je bilo 549 cRCC negativnih (slika 1B, bf). Pozitivno obarvanje je bilo omejeno na tumorske celice in v mikrookolju tumorja niso odkrili proteina MMP12 z izjemo nekaterih makrofagov, povezanih s tumorjem. Večina šibko pozitivnih cRCC je pokazala epitelijsko histologijo, medtem ko so tumorji z močnim MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)izražanje je pokazalo sarkomatozne ali rabdoidne značilnosti (slika 1B. d, e). Pri več tumorjih so opazili kopičenje proteina MMP12 na meji tumor-stroma (slika 1B f).
Od 736 bolnikov s cRCC je bilo 426 (58 odstotkov) moških in 310 (42 odstotkov) žensk. Povprečna starost bolnikov je bila 60,9 ± 11,2 let (razpon 23–88 let). Povprečna velikost tumorja je bila 49,5±25,3 mm. Med medianim spremljanjem 66±29 mesecev so ponovitev tumorja opazili pri 119 bolnikih (16 odstotkov). Od 736 tumorjev jih je bilo 574 (78 odstotkov) razvrščenih kot pT1. Večina cRCC (510 od 736; 69 odstotkov) je imela tumor stopnje G1. Kar zadeva stopnjo tumorja, je bilo 668 (91 odstotkov) primerov razvrščenih v stopnjo I ali II. Asociacije med MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)ekspresija in klinično-patološki parametri, kot so ponovitev in velikost pooperativnega tumorja, stopnja, T-stadijum in stopnja tumorja, kot tudi koagulacijska nekroza, so prikazani v tabeli 1. Vsi parametri so pokazali pomembno korelacijo (p<0.001) with="" mmp12="">
Kaplan-Meierjeva analiza je pokazala, da so imeli bolniki s cRCC, ki so imeli šibko ali močno izražanje MMP12, znatno krajše preživetje brez bolezni v primerjavi s tistimi brez izražanja MMP12 (slika 2). Celotna 5-letna stopnja preživetja za močno, šibko pozitivno in negativno skupino MMP12 je bila 52,8 odstotka, 75,2 odstotka oziroma 95,3 odstotka. Povprečno preživetje za bolnike z močno MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)barvanje je bilo 74 (61–87)±7 mesecev, s šibkim barvanjem 105 (85–125) ± 10 mesecev in z negativnim barvanjem 176 (164–188)±6 mesecev, s celotnim preživetjem 154 (143–164) ±5 mesecev. Univariatna Coxova regresijska analiza je pokazala, da so velikost tumorja, stopnja, klasifikacija T, nekroza in pozitivnost MMP12 pomembno povezani s pooperativnim napredovanjem tumorja (vsi p<0.001). however,="" in="" multivariate="" cox="" regression="" analysis="" only="" tumour="" grade,="" stage="" and="" mmp12="" positivity="" remained="" as="" independent="" predictors="" of="" relapse.="" in="" this="" correlation,="" a="" weak="" or="" strong="" mmp12="" staining="" indicated="" a="" 2.4–2.8="" times="" higher="" risk="" of="" postoperative="" tumour="" relapse=""><0.001 and=""><0.003, respectively)="" (table="">
Tabela 1 Povezava izražanja MMP12 s klinično-patološkimi parametri običajnih RCC brez metastaz v času operacije (n=736)
Slika 2 Kaplan–Meierjeve ocene preživetja brez ponovitve bolezni glede na imunohistokemijo pri 736 bolnikih brez metastatske bolezni v času operacije. Šibek ali močan MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)izraz odraža svojo napovedno vrednost (str<>
Tabela 2 Multivariatna analiza: izražanje MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)beljakovina je neodvisen prognostični dejavnik, ki kaže na 2–3-krat večje tveganje za ponovitev raka (p Manjše ali enako 0.001; p Manjše ali enako 0,003)
Splošno sprejeto je, da cRCC nastane iz proksimalnih tubulov ledvice, ki je mezodermalnega izvora. Med razvojem ledvic so blastemalne celice podvržene mezodermalnemu prehodu v epitel (MET), da tvorijo polarizirane celice proksimalnega tubularnega sistema. Pri zelo malignem sarkomatoznem cRCC pride do nasprotnega biološkega procesa, tj. EMT, ki povzroči ne le izgubo polariziranega epitelijskega značaja tumorskih celic, ampak tudi izgubo celičnega stika [4]. Hkratne spremembe v tumorskem mikrookolju (TME), vključno s spremembami zunajceličnega matriksa (ECM), lahko utrejo pot invazivni rasti in metastazam [8]. ECM je sestavljen iz fibrilarnih in nefibrilarnih proteinov, topnih zunajceličnih proteinov, citokinov in encimov, ki razgrajujejo ECM, kot je MMP12(Matrična metaloproteinaza 12). Med metastazo tumorske celice prebijejo bazalno membrano, ki jih ločuje od TME, s čimer napadejo TME in nato krvne žile. V tem zapletenem procesu imajo s tumorjem povezane fibroblaste in imunske celice temeljne vloge s proizvodnjo interlevkinov, rastnih faktorjev in encimov, ki razgrajujejo matriks [9]. Tumorske celice lahko tudi spremenijo lastno mikrookolje s proizvodnjo rastnih faktorjev in encimov, ki razgrajujejo matriks, kot je MMP12. Ker imajo MMP pomembno vlogo pri metastatski rasti tumorjev, so lahko prognostično pomembni [10]. Znano je, da so MMP vključeni v normalne fiziološke procese, kot so embrionalni razvoj, celjenje ran in preoblikovanje tkiva, ter da podpirajo invazivno rast in širjenje rakavih celic [11, 12]. Ugotovljeno je bilo, da je izražanje MMP12 povezano z napredovanjem več vrst raka [13–16]. Poleg svoje vloge pri odpravljanju fizičnih ovir lahko MMP12 ustvari proangiogene dejavnike, kot je VEGF, da tvori nove krvne žile, potrebne za rast tumorja [8]. Nasprotno pa je bilo ugotovljeno, da ima lahko MMP12 protitumorski učinek s hidrolizo plazminogena, da nastane močan zaviralec angiogeneze angiostatin [17–19]. Zato ima lahko MMP12 tako tumorogene kot tudi protitumorogene učinke, odvisno od vrste prizadetega tkiva.
Tukaj prikazujemo, da MMP12 deluje kot pro-tumogeni faktor pri cRCC. MMP12(matrična metaloproteinaza 12)izraz pomembno korelira s pojavom pooperativnega recidiva RCC. Izražanje MMP12 se lahko uporabi za identifikacijo bolnikov z visokim tveganjem za napredovanje tumorja, za natančno pooperativno spremljanje in za čim zgodnejšo uporabo ciljne terapije. Pred kratkim je bilo dokazano, da je visoka ekspresija MMP12 lahko povezana z napredovanjem pljučnega adenokarcinoma in da lahko zdravljenje s penfuridolom zadrži migracijo in metastatsko rast tumorskih celic, ki izražajo MMP12 [20]. Predlagamo, da MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)lahko služi tudi kot terapevtska tarča za penfuridol pri RCC.
Avtorski prispevki GK je zasnoval in nadzoroval projekt ter izdelal TMA. BB je opravil IHC barvanje in s pomočjo GK analiziral rezultate. MY je opravil statistično analizo. BB, PL in DB so napisali prvi osnutek, GK pa je dokument pregledal. Vsi avtorji so prebrali in se strinjali s predloženo različico rokopisa.
Financiranje Financiranje odprtega dostopa, ki ga zagotavlja Univerza v Péchu. To študijo je podprla štipendija Medicinske fakultete Univerze v Pecsu na Madžarskem (PTE-AOK-KA-2018/41) za DB
Dostopnost podatkov Celotni podatki bodo na voljo pri ustreznem avtorju na razumno zahtevo.
Cistanche - simptomi bolezni ledvic
Izjave
Izjava institucionalnega nadzornega odbora Zbiranje in uporabo vseh vzorcev tkiv za to študijo je odobril Odbor za etiko Univerze v Pecsu na Madžarskem (št. 5343/2014).
Izjava o privolitvi po obveščanju Privolitev po obveščanju je bila pridobljena od vseh bolnikov, vključenih v to študijo.
Nasprotje interesov Avtorji izjavljajo, da niso v navzkrižju interesov.
Odprt dostop Ta članek je licenciran pod licenco Creative Commons Attribution 4.0 International License, ki dovoljuje uporabo, skupno rabo, prilagajanje, distribucijo in reprodukcijo v katerem koli mediju ali formatu, če navedete ustrezno priznanje izvirnemu avtorju( s) in vir, navedite povezavo do licence Creative Commons in navedite, ali so bile narejene spremembe. Slike ali drugo gradivo tretjih oseb v tem članku so vključeni v licenco Creative Commons za članek, razen če je v kreditni liniji za gradivo navedeno drugače. Če gradivo ni vključeno v licenco Creative Commons za članek in vaša nameravana uporaba ni dovoljena z zakonskimi predpisi ali presega dovoljeno uporabo, boste morali pridobiti dovoljenje neposredno od imetnika avtorskih pravic. Če si želite ogledati kopijo te licence, obiščite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.
Reference
1. F. Bray, J. Ferlay, I. Soerjomataram, RL Siegel, LA Torre, A. Jemal, Globalna statistika raka 2018: GLOBOCAN ocenjuje incidenco in umrljivost po vsem svetu za 36 vrst raka v 185 državah. CA Cancer J. Clin. 68, 394–424 (2018)
2. V. Mollica, V. Di Nunno, L. Gatto, M. Santoni, M. Scarpelli, A. Cimadamore, A. Lopez-Beltran, L. Cheng, N. Battelli, R. Montironi, F. Massari, Resistance sistemskim povzročiteljem vledvična celični karcinomnapovedati in premagati genomske strategije, ki jih sprejme tumor. Raki 11, 830 (2019)
3. WH Chow, LM Dong, SS Devesa, Epidemiologija in dejavniki tveganja za raka ledvic. Nat. Rev. Urol. 7, 245–257 (2010)
4. JL Conant, Z. Peng, MF Evans, S. Naud, K. Cooper, Sarkomatoidkarcinom ledvičnih celicje primer epitelno-mezenhimskega prehoda. J. Clin. Pathol. 64, 1088–1092 (2011)
5. K. Kessenbrock, V. Plaks, Z. Web, Matrične metaloproteinaze: regulatorji tumorskega mikrookolja. Celica 141, 52–67 (2010)
6. G. Kovacs, M. Akhtar, BJ Beckwith, P. Bugert, CS Cooper, B. Delahunt et al., Heidelberška klasifikacijaledvičnacelični tumorji. J. Pathol. 183, 131–133 (1997)
7. JD Brierley, MK Gospodarowicz, C. Wittekind (ur.), TNM klasifikacija malignih tumorjev, 8. den. (Wiley Blackwell, Oxford, 2017)
8. M. Wang, J. Zhao, L. Zhang, F. Wei, Y. Lian, Y. Wu, Z. Gong, S. Zhang, J. Zhou, K. Cao et al., Vloga tumorskega mikrookolja pri tumorigeneza. J. Rak 8, 761–773 (2017)
9. AD Theocharis, SS Skandalis, C. Gialeli, NK Karamanos, Struktura zunajceličnega matriksa. Adv. Zdravilo Deliv. Rev. 97, 4–27 (2016)
10. G. Gonzalez-Avila, B. Sommer, AA García-Hernández, C. Ramos, Vloga matričnih metaloproteinaz v tumorskem mikrookolju. Adv. Exp. Med. Biol. 1245, 97–131 (2020)
11. J. Lyu, CK Joo, Wnt-7a poveča izražanje matrične metaloproteinaze-12 in spodbuja celično proliferacijo v epitelijskih celicah roženice med celjenjem ran. J. Biol. Chem. 280, 21653–21660 (2005)
12. LA Schuman-Moss, S. Jensen-Taubman, WG Stetler-Stevenson, Matrične metaloproteinaze: spreminjanje vlog pri napredovanju tumorja in metastazah. Am. J. Pathol. 181, 1895–1899 (2012)
13. E. Ella, Y. Harel, M. Abraham, H. Wald, O. Benny, A. Karsch Bluman et al., Matrična metaloproteinaza 12 spodbuja širjenje tumorja v pljučih. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 155, 2164–2175 (2018)
14. FZ Lv, JL Wang, Y. Wu, HF Chen, XY Shen, Knockdown MMP12(Matrična metaloproteinaza 12)zavira rast in invazijo celic pljučnega adenokarcinoma. Int. J. Immunopathol. Pharmacol. 28, 77–84 (2015)
15. F. Ren, R. Tang, X. Zhang, WM Madushi, D. Luo, Y. Dang, Z. Li, K. Wei, G. Chen, Prekomerna ekspresija članov družine MMP deluje kot prognostični biomarker za raka dojke bolniki: sistematični pregled in metaanaliza. PLoS ONE 10, e0135544 (2015)
16. R. Yang, Y. Xu, P. Li, X. Zhang, J. Wang, D. Gu, Y. Wang, JM Kim, HJ Kim, BS Koo et al., Izražanje matrične metaloproteinaze{{1} } so povezani z ekstrakapsularnim širjenjem tumorja iz vozlišč z metastazami v ploščatoceličnem karcinomu glave in vratu. EUR. Arh. Otorinolaringol. 270, 1137–1142 (2012)
17. LA Cornelius, LC Nehring, E. Harding, M. Bolanowski, HG Velgus, DK Kobayashi, RA Pierce, SD Shapiro, Matrične metaloproteinaze ustvarjajo angiostatin: Učinki na neovaskularizacijo. J. Immunol. 161, 6845–6852 (1998)
18. MS O'Reilly, L. Holmgren, Y. Shing, C. Chen, RA Rosenthal, M. Moses, WS Lane, Y. Cao, EH Sage, J. Folkman, Angiostatin: Nov zaviralec angiogeneze, ki posreduje zatiranje metastaz Lewisovega pljučnega karcinoma. Celica 79, 315–328 (1994)
19. MJ Gorrin Rivas, S. Arii, M. Furutani, M. Mizomoto, A. Mori, K. Hanaki, M. Maeda, H. Furuyama, Y. Kondo, M. Imamura, Prenos gena za metaloelastazo mišjega makrofaga v miško melanom zavira rast primarnega tumorja z zaustavitvijo angiogeneze. Clin. Cancer Res. 6, 1647–1654 (2000)
20. WY Hung, WJ Lee, GZ Cheng, CH Tsai, YC Yang, TC Lai, JQ Chen, CL Chung, JH Chang, MH Chien, Blokiranje MMP12-moduliranega epitelno-mezenhimskega prehoda s ponovno uporabo penfuridola zadržuje pljučni adenokarcinom metastaze po poti uPA/uPAR/TGFb/AKT. Celica. Oncol. 44, 1087–1103 (2021)
Opomba založnika Springer Nature ostaja nevtralen glede trditev o pristojnosti v objavljenih zemljevidih in institucionalnih povezavah.
