Pregled sestavin florotaninov v Fucalesu, 3. del

Glikozid cistanche lahko tudi poveča aktivnost SOD v srčnem in jetrnem tkivu ter znatno zmanjša vsebnost lipofuscina in MDA v vsakem tkivu, učinkovito lovi različne reaktivne kisikove radikale (OH-, H₂O₂ itd.) in ščiti pred povzročeno poškodbo DNK z OH-radikali. Cistanche feniletanoidni glikozidi imajo močno sposobnost lovljenja prostih radikalov, večjo redukcijsko sposobnost kot vitamin C, izboljšajo aktivnost SOD v suspenziji semenčic, zmanjšajo vsebnost MDA in imajo določen zaščitni učinek na delovanje membrane semenčic. Cistanche polisaharidi lahko povečajo aktivnost SOD in GSH-Px v eritrocitih in pljučnem tkivu eksperimentalno starajočih se miši, ki jih povzroča D-galaktoza, pa tudi zmanjšajo vsebnost MDA in kolagena v pljučih in plazmi ter povečajo vsebnost elastina. dober čistilni učinek na DPPH, podaljša čas hipoksije pri starajočih se miših, izboljša aktivnost SOD v serumu in upočasni fiziološko degeneracijo pljuč pri eksperimentalno starajočih se miših. Pri celični morfološki degeneraciji so poskusi pokazali, da ima Cistanche dobro antioksidativno sposobnost in ima potencial, da postane zdravilo za preprečevanje in zdravljenje bolezni staranja kože. Hkrati ima ehinakozid v Cistanche pomembno sposobnost čiščenja prostih radikalov DPPH in lahko lovi reaktivne kisikove vrste ter preprečuje razgradnjo kolagena, ki jo povzročajo prosti radikali, ima pa tudi dober učinek popravljanja poškodb anionov prostih radikalov timina.

Kliknite na Kje lahko kupim Cistanche

【Za več informacij:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Kar zadeva Eckols, jih je zaradi prisotnosti struktur dibenzodioksina mogoče razlikovati od drugih skupin na podlagi njihovih deprotoniranih molekularnih ionov, ki so običajno 2 Da nižji od drugih PT z enakimi DP, za vsak motiv dibenzodioksina, ki je prisoten v strukturi (slika 5D). Na primer, eckol predstavlja [MH]− pri m/z 371, medtem ko so trifokal, trifloretol in fukofloretol vsi prisotni [MH]− pri m/z 373. V zameno vabijo, ki imajo v hrbtenici dve strukturi dibenzodioksina, predstavljajo [MH]− pri m/z 741, medtem ko njihovi heksamerni ekvivalenti predstavljajo [MH]− pri m/z 745. Enako velja za karmalole, ki so v bistvu hallovi, ki vsebujejo dibenzodioksinske strukture [120]. Končno je za nekatere PT, ki vsebujejo furanove obroče, kot sta fukofuroekol in florofukofuroekol, značilen dehidriran-deprotoniran molekularni ion, tj. [MH]−, ki je za 18 Da nižji v primerjavi z njihovimi ekvivalenti, ki ne vsebujejo furan, z enakimi DP. (npr. strukture fukofuroekola in floroekola se razlikujejo samo glede prisotnosti/odsotnosti furanovega obroča in kažejo [MH]− pri m/z 496 oziroma 478) [120]. Tabela 3 prikazuje podatke MS, zbrane iz različnih študij, osredotočenih na identifikacijo PT v Fucales.

Čeprav so te osnove lahko uporabne za doseganje razumne strukturne identifikacije PT z nizko molekulsko maso, se velike težave pojavijo, ko gre za oligomere in polimere z visoko molekulsko maso, saj se njihova izomerizacija eksponentno povečuje, več možnosti za razporeditve in kombinacije floroglucinola pa je težko razkriti. pojasnjeno z MS ali MS/MS. Kljub temu lahko v takih primerih MS še vedno zagotovi dragocene informacije o DP spojin, ki so prisotne v mešanici florotanina. V zvezi s tem predstavlja matrično podprta laserska desorpcija/ionizacija-čas letenja MS (MALDI-TOF-MS) primernejši pristop za analizo večjih oligomerov, saj lahko zazna molekule z m/z nad zgornjo mejo ESI- GOSPA. Ta tehnika je bila uporabljena za preučevanje frakcije florotanina Sargassum wightii, kar je omogočilo potrditev prisotnosti dimerjev, trimerjev in heksamerov floroglucinola [125]. MS z visoko ločljivostjo (HRMS) je alternativni pristop, ki se lahko uporablja tudi za analizo PT z visoko molekulsko maso, ki se opira na ione z več naboji in spremembe vzorca izotopa plus 1 13C. Z drugimi besedami, ko je spojina dvojno ali trojno nabita, kaže plus 1 13C izotopski vzorec z razlikami m/z 0.5 oziroma 0.33 . Na tem principu so Steevensz et al. [78] so lahko profilirali sestavo PT P. canaliculata, F. spiralis, F. vesiculosus in A. nodosum glede na DP, pri čemer so zaznali spojine z molekulsko maso do 6000 Da, ki bi sicer presegle masni razpon ESI-MS.

Na splošno, čeprav je masna spektrometrija lahko iznajdljiva tehnika za kvalitativno analizo PT in celo dovolj močna, da doseže razmeroma dobro karakterizacijo spojin z nizko molekulsko maso, ne uspe pridobiti dovolj podrobnosti o vrsti in položaju povezave izomernih oblik spojin. z višjim DPS. Kadar je torej cilj v celoti razjasniti strukturne značilnosti PT, je NMR edina učinkovita metoda, ki lahko ponudi zadostno ločljivost za tako poglobljeno analizo.

5.2.3. NMR

NMR spektroskopija obsega neposredno in nedestruktivno analizo, ki je lahko uporabna ne le za dostop do vsebine PT, ampak tudi za popolno razjasnitev strukturnih značilnosti PT. Kadar so predvideni kvantitativni podatki, se resonančni signali 1H NMR vseh fenolnih spojin, ki jih vsebujejo izvlečki alg, integrirajo in primerjajo s tistimi ustreznega internega standarda; te spojine morajo biti stabilne, kemično inertne, na voljo v zelo čisti obliki in popolnoma topne v istem devteriranem topilu(-ih) kot vzorec. Na splošno so avtorji uporabljali različne pristope in metodologije za kvantifikacijo fenolnih spojin in/ali PT s to tehniko, vključno z vzorci, pridobljenimi iz Fucale.

V 2009, Parys et al. je prvič opisal uporabo kvantitativne 1H NMR (NMR) za določanje variabilnosti vsebnosti florotanina v A. nodosum med letom. Pri njihovem delu je bila uporabljena trimezinska kislina kot interni standard (2.0 mg trimezinske kisline v 0,8 mL devteriranega metanola in 0,2 mL devterijevega oksida), umeritvena krivulja pa je bila izdelana z uporabo floroglucinola. Kljub višji vsebnosti PT, ki jo je zaznal qHNMR, v primerjavi s tistimi, pridobljenimi s kolorimetrično metodo FC, sta obe metodi sledili istemu trendu sezonskih sprememb [126]. Pomembno je omeniti, da se v nasprotju s kolorimetričnim testom, ki ni specifičen za PT ali celo za fenolne spojine, integracija resonančnih signalov 1H NMR spektrov v qHNMR primerja s signali internega standarda. Zaradi teh glavnih razlik med obema metodologijama ni mogoče natančno primerjati [127,128].

Z uporabo posebnega pristopa so Stiger-Pouvreau in sodelavci uporabili vrtenje s čarobnim kotom visoke ločljivosti (HR-MAS) za kvantificiranje PT v rjavih algah Cystoseira tamariscifolia. V tej študiji je bil NMR v trdnem stanju uporabljen za odkrivanje floroglucinola (monomera) in vivo, 1H qNMR pa je bil uporabljen za oceno kvantifikacije monomera (z uporabo trimetilsililpropionata –d4 (TSP) kot internega standarda). Singlet floroglucinola pri δ 6,02 ppm, integriran v tri protone, je potrdil njegovo prisotnost v vzorcu. Natančnost te metode je bila ocenjena z uporabo standardne raztopine floroglucinola in rezultati so bili potrjeni s primerjavo s tistimi pri testu FC. Nazadnje so avtorji trdili, da je predstavljena metodologija sestavljena iz inovativne in hitre metode za kvantificiranje floroglucinola, ki jo je mogoče uporabiti za vse vrste alg. Edina omejitev metode qNMR je v tem, da je treba vsaj enega od signalov spektra (singlet, dublet itd.) nedvoumno pripisati eni in samo eni spojini [129].

V začetku leta 2010 so isti avtorji že pokazali potencial in vivo 1H HR-MAS NMR, povezanega z masno spektrometrijo (LC/ESI–MSn), za opazovanje globalnega kemijskega profila petih vrst rodu Cystoseira, prisotnih ob obalah. iz Bretanje v Franciji: C. baccata, C. foeniculacea, C. humilis, C. nodi caulis in C. tamariscifolia [130]. The

glavni cilj njihovega dela je bil identificirati vzorce Cystoseira in razpravljati o njihovi taksonomiji. Rezultati so dokazali učinkovitost predstavljenega pristopa pri razlikovanju predvsem C. nodicaulis in C. tamariscifolia, saj so njuni spektri dokazovali prisotnost značilnih signalov, kar omogoča njuno nedvoumno identifikacijo. V primeru singleta pri 2,91 ppm za prvo in za slednjo je vrh pri natanko 6.00 ppm označil vrsto in nakazal možno pojavljanje preprostega florotanina. Za Foeniculacea in C. humilis je bila na splošno značilna pojavnost dveh dvojnikov enake intenzivnosti pri 7,90 in 7,36 ppm. Vendar je absolutna diskriminacija med obema signaloma ostala nemogoča. Podobnost in vivo NMR signalov, skupaj z rahlo intraspecifično kemično raznolikostjo obeh vrst, je upravičila te rezultate. Nazadnje, v primeru C. baccata je kljub prikazu najpomembnejše kemične raznolikosti veliko signalov omogočilo stalno diskriminacijo od drugih vrst.

Leta 2020 so Walsh in sodelavci [131] dokazali protimikrobni potencial dveh prečiščenih izvlečkov florotanina iz A. nodosum in F. serratus, dveh medplimskih rjavih morskih alg. V tem delu je analiza 1H in 13C NMR omogočila ne samo kvantitativno in kvalitativno oceno skupnih fenolnih spojin, ampak tudi dostop do razlik v profilu povezav med prečiščenimi fenolnimi ekstrakti obeh vrst. Kar zadeva test FC, je bila ugotovljena znatno višja raven skupnih fenolnih spojin pri A. nodosum kot pri F. serratus, rezultati pa so bili potrjeni s testom FC. Poleg tega so doseženi rezultati z uporabo qNMR in FC testa pokazali obstoj variacij med vzorci, zbranimi vsak mesec, in med obema metodologijama.

Za razjasnitev strukture PT so Glombitza in njegova skupina v 70. letih prejšnjega stoletja prvič uporabili analizo 1H in 13C NMR, ko so identificirali floroglucinol v različnih vrstah rjavih alg. Kompleksnost spektrov, povezanih s temi derivati, je omogočila le identifikacijo manjših polifenolnih struktur. Tako je bilo leta 1974 prvič razjasnjeno kemijsko strukturo bifuhalola in difloretola iz 80-odstotnega etanolnega ekstrakta C. tamariscifolia [132].

Kljub temu je bilo od takrat z uporabo NMR razjasnjenih več kot sto struktur PT [133]. Za to se ekstrakti običajno podvržejo koraku predhodne obdelave s heksanom ali petroletrom, da se oborijo veliki PT. Poleg tega se za preprečevanje nestabilnosti PT, olajšanje analize NMR in spreminjanje polarnosti teh spojin pogosto acetilirajo z anhidridom ocetne kisline in piridinom, s čimer se omogoči njihovo normalno fazno kromatografsko čiščenje s silicijevim dioksidom [119]. Pri 1H NMR spektrih te vrste spojine je treba opozoriti na dva vidika: resonanca aromatskih protonov se pojavi med δ 6.0 in 7,5 ppm, acetilne skupine pa se pojavijo kot singletni vrhovi med δ 2 in 3 ppm. . To je uporabno orodje za ugotavljanje števila prostih hidroksilnih skupin v prvotnih nezaščitenih fenolih. Dve vrsti sistemov aromatskih obročev, ki se lahko pojavita, sta predstavljeni na sliki 6. Posebno kemijsko okolje obeh vrst protonov (Ha in Hb) spremeni mnogoterost opazovanih signalov v 1H NMR, pa tudi njihovo integracijo.

Skupaj z 1H NMR spektroskopijo so bili 13C in HSQC ter HMBC NMR spektri uporabljeni za razjasnitev struktur prečiščenih PT, vključno s Fucales. Heteronuklearna korelacija-NMR-spektroskopski pristop je uporaben za identifikacijo razreda PT iz vzorčne matrice (monomer, gorivo, kloroetil, polni, fukofloroetol itd.) [134]. Značilni 13C-NMR signali PT so povzeti v tabeli 4. Ogljikove resonance različnih vrst ogljikovih atomov skupaj z njihovo intenzivnostjo, ki se pojavijo pri značilnih kemijskih premikih, omogočajo pripisovanje nekaterih signalov določenim razredom PT, zlasti floretolov e dvoran .

Leta 1997 so Glombitza et al. [135] je opisal izolacijo in karakterizacijo 33 PT iz rjave alge Cystophora torulosa. Ugotovljeni so bili različni razredi PT, vključno s floretoli in hallovi ter fukofloretoli in hidroksifukofloretoli (primeri na sliki 7). Poleg tega je bilo v zvezi s slednjim identificiranih in karakteriziranih (NMR in MS) sedem novih hidroksifukofloretolov, ki nosijo dodatne hidroksilne skupine. Kot je bilo že omenjeno, so avtorji za preprečevanje oksidacije in povečanje lipofilnosti izoliranih derivatov PT njihovo izolacijo opisali kot acetate [82].

Koch et al. so tudi pokazali uporabo 1H in 13C NMR za karakterizacijo večjih fuhalolacetatov v B. bifurcate [136]. HSQC in HMBC (2D) NMR spektroskopske tehnike so uporabili Cérantola et al. za prikaz prisotnosti struktur fukola in fukofloretola v izvlečkih Fucus spiralis [137]. Enak pristop je bil uporabljen za Halidrys siliquosa, ki je v Bretanji bogat. Uporaba 1D in 2D NMR ter MS analize je omogočila identifikacijo štirih fenolnih derivatov: trifuhalolov in tetrafuhalolov ter prvič difloretolov in trifloretolov [125]. Tabela 5 povzema zgoraj omenjene študije, v katerih sta 1H in 13C NMR prispevala k razjasnitvi strukture PT, ekstrahiranih iz alg, ki pripadajo Fucales.

【Za več informacij:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】