Del Ⅱ Qi Sui Zhu Shui Mavec Zavira signalizacijo AQP1 in MAPK Zmanjša poškodbe jeter, ki jih povzroči cirozni ascites

Rezultati

1. Cirotični ascites.

Kot je prikazano na sliki 1(a), je jedro obarvano s hematoksilinom v izrazito modri barvi. Komponente v citoplazmi in zunajceličnem matriksu so bile obarvane z eozinom v različnih odtenkih rdeče. Vsi hepatociti v modelni skupini so pokazali steatozo, psevdolobularne strukture so bile očitne v vzorcih četrtega tedna, vzorci šestega tedna pa so pokazali sklerotične nekrotične značilnosti z neorganizirano razporeditvijo hepatocitov, degeneracijo hepatocitov in nekrozo, očitno proliferacijo fibroznega vezivnega tkiva in obsežno tvorbo psevdolobularnih struktur. Po desetih tednih in treh dneh injiciranja ogljikovega tetraklorida in olivnega olja so podgane v modelni skupini počasi povečevale svojo telesno težo in po prvem tednu se je med kontrolno in modelno skupino začela pojavljati pomembna razlika v telesni teži ( P < 0.001) in izračunan je bil koeficient obsega trebuha (obseg trebuha/telesna teža) in ugotovljeno je bilo, da so podgane v kontrolni skupini normalno povečale obseg trebuha in telesno težo. Nasprotno, obseg trebuha modelnih podgan se je s časom še naprej povečeval. Povečanje obsega trebuha je bilo bistveno večje v modelni skupini kot v kontrolni skupini v 3. tednu (slika 1(b)). Tako lahko cirotični ascites vodi do nenormalnega povečanja trebušnega obsega in hude poškodbe jeter pri podganah.

2. QSZSP lajša visceralne poškodbe, ki jih povzroča cirotični ascites.

Kot je prikazano na sliki 2, je bila v modelni skupini s cirozo jetrna struktura motena in vidna je bila obsežna vakuolarni podobna degeneracija ter poškodba ledvičnega tkiva, glomerularna hipertrofija, povečanje strome tilakoidne regije, infiltracija vnetnih celic, glomerularni epitel odstop celic in ledvični tubuli so bili razširjeni; peritonealne mezotelne celice so bile povečane, submezotelna stroma je bila odebeljena in peritonealno tkivo je bilo odebeljeno. Po štirih tednih zdravljenja z visokim odmerkom QSZSP je bila struktura jetrnega tkiva nedotaknjena, s središčnimi jedri in rdeče obarvano citoplazmo; večina glomerulov je imela normalno strukturo in normalne tubule; peritonealne mezotelne celice so se izločile, debelina peritonealnega tkiva pa se je zmanjšala v primerjavi z modelno skupino

3. QSZSP uravnava dejavnike, povezane z delovanjem jeter pri podganah s cirotičnim ascitesom.

Kot je prikazano na sliki 3, so bile koncentracije TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na in Ca v modelni skupini znatno višje (P < 0.0{{5} }1) kot pri tistih v kontrolni skupini in so se znatno zmanjšale po zdravljenju z visokimi odmerki QSZSP. Koncentracije ALB v modelni skupini so bile bistveno nižje (P <0,001) kot tiste v kontrolni skupini, njihove koncentracije pa so se po zdravljenju z visokim odmerkom QSZSP pomembno povečale (P <0,001). Če združimo zgornja dva rezultata, lahko ugotovimo, da lahko QSZSP modulira dejavnike, povezane z delovanjem jeter, za ublažitev poškodb jeter, ledvic in peritoneja, ki jih povzroča cirotični ascites.

4. QSZSP uravnava izražanje proteina AQP1 v jetrih, ledvicah in peritoneju.

Kot je prikazano na sliki 4, cirotični ascites vodi do nenormalno visoke ekspresije proteina AQP1 v jetrih, ledvicah in peritoneju podgan (P < 0.001). V primerjavi z modelno skupino je bila ekspresija proteina AQP1 zmanjšana po zdravljenju z majhnim odmerkom QSZSP in znatno zmanjšana (P <0,001) po zdravljenju z visokim odmerkom QSZSP, vendar je bila ekspresija proteina AQP1 v jetrih, ledvicah in peritoneju še vedno višji od tistega v kontrolni skupini v tem času. QSZSP je lahko zaviral visoko ekspresijo proteina AQP1, ki jo povzroča cirotični ascites.

5. QSZSP Zavira signalno pot MAPK.

Kot je prikazano na sliki 5, je bila aktivacija p-ERK, p-JNK in p-p38 v modelni skupini istočasno odkrita v jetrih, ledvicah in peritoneju. Izražanje beljakovin p-ERK, p-JNK in p-p38 se je zmanjšalo po zdravljenju s QSZSP, ravni izražanja beljakovin p-ERK, p-JNK in p-p38 pa so bile znatno nižje (P <{13}}. 001) po zdravljenju z visokim odmerkom QSZSP kot tisti v modelni skupini.

6. QSZSP povzroči povečanje obsega trebuha pri podganah s cirotičnim ascitesom.

Kot je prikazano na sliki 6, je po štirih tednih zdravljenja telesna teža modelne skupine podgan vedno nižja kot pri ostalih treh skupinah, po zdravljenju z visokim odmerkom QSZSP pa so podgane s cirotičnim ascitesom pokazale znatno povečanje telesne mase in tudi telesna teža podgan v skupini z nizkimi odmerki QSZSP je bila višja od tiste v modelni skupini (slika 6(a)). Zanimivo je, da so podgane v skupini z visokimi odmerki QSZSP pokazale trend zmanjševanja obsega trebuha skupaj s povečanjem telesne teže in po štirih tednih zdravljenja so bile podgane v skupini z visokimi odmerki QSZSP bistveno nižje od modelne skupine. V kombinaciji z rezultati obarvanja s HE bi lahko kazalo, da je QSZSP ublažil poškodbe organov, ki jih povzroča cirotični ascites, in zmanjšal nenormalno rast obsega trebuha.

Diskusija

Ascites pri cirozi je patološki pojav kopičenja tekočine v trebušni votlini, ki ga povzroči kombinacija dejavnikov med dekompenzirano fazo ciroze in je najpogostejši prvi pojav v dekompenzirani fazi ciroze. Bolnikom z boleznijo jeter ne prinaša le neznosnih bolečin in bistveno zmanjša kakovost življenja, temveč povzroča tudi vodno-elektrolitske motnje in poslabšanje notranjega okolja telesa, kar lahko privede do resnih zapletov, kot so jetrna encefalopatija, krvavitve v zgornjih prebavilih in hepatorenalnega sindroma in je eden glavnih dejavnikov smrti pri bolnikih z boleznijo jeter [31, 32]. Študije so pokazale, da imajo bolniki s cirotičnim ascitesom 3-letno stopnjo obolevnosti in umrljivosti 50 odstotkov in 5-letno stopnjo preživetja le 5–10 odstotkov [33]. Ta študija ni le ugotovila, da je cirotični ascites povzročil resno poškodbo jeter, peritoneuma in ledvic, ampak tudi ugotovila, da so podgane s cirotičnim ascitesom upočasnile pridobivanje telesne teže in prekomerno rast v obsegu trebuha (slika 1). Po 4 tednih zdravljenja so podgane začele pridobivati ​​na teži in njihov obseg trebuha se je zmanjšal (slika 6).

Kliknite tukaj, da dobiteprednosti zdravila Cistanche

Tie et al. [29] so ugotovili, da je v celicah raka prostate s hipoksijo povzročena povečana regulacija proteina AQP1 na ap38-odvisen način, da je bil AQP1 povzročen s hipoksijo na transkripcijski ravni in da je bila regulacija AQP1 v PC-3M odvisna na kalcij, PKC in p38MAPK kot tudi na napetost kisika. AQP1 je široko izražen v limfnih žilah, kapilarah in endotelijskih celicah majhnih ven ter je porazdeljen v jetrih, peritoneju, ledvicah, poprsnici, dihalih, prebavnem traktu od požiralnika do debelega črevesa, srčni mišici, gladkih mišicah in možganih [ 24]. Huebert et al. [34] so ugotovili, da se je v zgodnjih fazah fibroze jeter izražanje AQP1 na celičnih membranah jetrnega tkiva ustrezno povečalo, ko je stopnja fibroze jeter napredovala. Liu et al. [30, 35] so ugotovili, da je peptidoglikan zaviralec poti transdukcije p38 MAPK, lipopolisaharid pa zaviralec poti p38/JNK/ERK, ki končno deluje na gen AQP1, kar povzroči znižanje ekspresije AQP1 v človeških plevralnih mezotelnih celicah in da zmanjšanje v AQP1 izražanje odvisno od odmerka in časa. V tej študiji je QSZSP lahko zaviral visoko ekspresijo beljakovin AQP1, ki jo povzroča cirotični ascites v osi "jetrni peritonej-ledvica" pri podganah s cirozo ascitesa. QSZSP je lahko zaviral visoko ekspresijo proteina AQP1, ki jo povzroča cirotični ascites, prav tako je bila v tem času zavirana signalna pot MAPK na osi "jetra peritonej-ledvica". To je pokazalo, da je aktivacija signalne poti MAPK vključena v poškodbe organov v osi "jetra-peritonej-ledvica" pri podganah s cirozo ascitesa in je bila povezana z AQP1. Končno je bilo ugotovljeno, da so imele zdravljene podgane nižji Cr in TBiL ter znatno višjo ALB v serumu, kar je v kombinaciji s povečanjem telesne teže po zdravljenju pokazalo, da je QSZSP nekoliko vplival na izboljšanje kakovosti življenja.

Izvleček Cistanche

Vendar pa bo zdravilo za zdravljenje bolnikov s cirotičnim ascitesom povečalo vnos vode, kar je v nasprotju z načelom omejevanja vode pri tej bolezni; zlasti pri bolnikih z velikim številom ascitesov bo dajanje zdravila dodatno povečalo bolnikove simptome napihnjenosti trebuha, njihova udeležba pa je slaba. Kitajska medicina je pomembna zunanja metoda zdravljenja v tradicionalni kitajski medicini, ki lahko reši protislovje med tradicionalno kitajsko medicino in zdravljenjem ciroznega ascitesa z omejitvijo vode in lahko deluje neposredno na obolelo mesto. V prejšnji fazi je bil zaključen razvoj postopka formulacije, standarda kakovosti in varnosti gelne oblike QSZSP [36–39].

Prejšnje študije mehanizma nastanka ascitesa pri cirozi so se osredotočale predvsem na patološko vlogo jeter in ledvic, kot je sprememba portalne hemodinamike zaradi ciroze, učinek zadrževanja vode in natrija v ledvicah ali hormonske spremembe, ki jih sprožita oba , zanemarjanje vloge peritoneja in vloge jeter-peritoneja-ledvic kot organske celote pri nastanku ascitesa pri cirozi.

Cistanche v prahu

Na podlagi prejšnje študije je ta študija kot izhodišče vzela patološko naravo motenj presnove vode pri cirotičnem ascitesu in je bila prva, ki je predlagala hipotezo, da je os "jetra-peritonej-ledvica" funkcionalna os presnove vode, ki je sodeluje pri "proizvodnji-absorpciji-izčrpanju" peritonealne tekočine z akvaporinskimi beljakovinami kot skupno materialno osnovo in igra ključno vlogo pri nastanku cirotičnega ascitesa. Dokazano je bilo, da lahko QSZSP zavre aktivacijo signalne poti MAPK in zaščiti delovanje jeter pri podganah s cirozo ascitesa, in ugotovljeno je bilo, da ima AQP1 osi "jetra-peritonealno-ledvica" vlogo olajšanja v procesu ascitesa pri cirozi ascites. Študija je tudi pokazala, da QSZSP uravnava izražanje AQP1 v osi "jetra-peritonealno-ledvica", s čimer se doseže terapevtski učinek blokiranja ascitesa. QSZSP zavira izražanje AQP1 v jetrih, peritoneju in ledvicah ter tako zmanjša obseg trebuha. Ta proces je povezan z zaviranjem aktivacije poti MAPK s QSZSP.

Številne študije so pokazale, da je signalna pot MAPK vključena v uravnavanje ascitesa pri cirozi. V tej študiji smo ugotovili, da je bila aktivacija signalne poti MAPK zavrta po zdravljenju s QSZSP, vendar v tej študiji ni znano, ali QSZSP cilja na signalno pot MAPK za zdravljenje ciroznega ascitesa. Kot omejitev te študije bo morda ciljno razmerje signalne poti MAPK v QSZSP za zdravljenje ciroznega ascitesa preverjeno in vitro v prihodnjih študijah jeter.

Zaključek

QSZSP zavira aktivacijo MAPK in ekspresijo proteina AQP1 v osi "jetra-peritonealno-ledvica", da ublaži poškodbo ascitesa pri cirozi.

Učinki zdravila Cistanche

Učinek Cistanche tubulosa na poškodbe jeter, ki jih povzroča cirotični ascites

Ciroza je kronična bolezen jeter, ki lahko povzroči različne zaplete, vključno z ascitesom, ki se nanaša na kopičenje tekočine v trebušni votlini. Cirotični ascites pogosto povzroči poškodbe jeter, kar povzroči visoko stopnjo obolevnosti in umrljivosti. Cistanche tubulosa (CT) je tradicionalno kitajsko zeliščno zdravilo, ki se že vrsto let uporablja za zdravljenje bolezni jeter in ledvic. Nedavne študije so pokazale, da ima izvleček CT različne terapevtske lastnosti, kot so protivnetni, antioksidativni in imunomodulatorni učinki. Poleg tega je bilo ugotovljeno, da ima ekstrakt CT zaščitne učinke na več organov, kot sta jetra in srce. Zato so raziskovalci raziskali, ali bi lahko izvleček CT imel terapevtski potencial pri poškodbah jeter, ki jih povzroča cirotični ascites. Preliminarne študije na živalskih modelih so pokazale, da je zdravljenje z izvlečkom CT vodilo do znatnega zmanjšanja označevalcev poškodbe jeter in izboljšanih indikatorjev delovanja jeter. Izvleček CT ima lahko te koristne učinke zaradi svoje sposobnosti zmanjšanja vnetja in oksidativnega stresa ter spodbujanja regeneracije tkiva. Vendar so potrebne nadaljnje raziskave za določitev varnosti in učinkovitosti izvlečka CT v preskušanjih na ljudeh.

Reference

[28] E. McCoy in H. Sontheimer, "MAPK inducira izražanje AQP1 v astrocitih po poškodbi," Glia, vol. 58, št. 2, str. 209–217, 2010.

[29] L. Tie, N. Lu, XY Pan, et al., "Hypoxia-induced up-regulation of aquaporin-1 protein in prostate rakavih celicah na ap38-odvisen način," Cellular Physiology in biokemija: International Journal of Experimental Cellular Physiology, Biochemistry, and Pharmacology, vol. 29, št. 1-2, str. 269–280, 2012.

[30] L. Liu in C. Xie, "Učinki znižane regulacije akvaporina1 s peptidoglikanom in lipopolisaharidom prek poti MAPK v celicah MeT-5A," Lung, vol. 189, št. 4, str. 331–340, 2011.

[31] J. Uriz, A. C´ardenas in V. Arroyo, "Patofiziologija, diagnoza in zdravljenje ascitesa pri cirozi," Najboljša praksa in raziskave Klinična gastroenterologija, vol. 14, št. 6, str. 927–943, 2000.

[32] W. Hou in AJ Sanyal, "Ascites: diagnosticiranje in zdravljenje," Medical Clinics of North America, vol. 93, št. 4, str. 801–817, 2009.

[33] BS Sandhu in AJ Sanyal, "Obvladovanje ascitesa pri cirozi," Klinike za bolezni jeter, vol. 9, št. 4, str. 715–732, 2005.

[34] RC Huebert, MM Vasdev, U. Shergill, et al., "Aquaporin-1 olajša angiogeno invazijo v patološki neovaskulaturi, ki spremlja cirozo," Hepatology, vol. 52, št. 1, str. 238–248, 2010.

[35] L. Liu, L. Du, Y. Chen et al., "Zmanjšana regulacija Aquaporin1 (AQP1) s peptidoglikanom prek poti p38 MAPK v primarnih plevralnih mezotelnih celicah podgan," Experimental Lung Research, vol. 40, št. 4, str. 145–153, 2014.

[36] QH Yuehong, "Študija o postopku ekstrakcije etanola za gelno kremo Qisui Zhushui," Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 30, št. 10, str. 150–152, 2014.

[37] MD Qiu Hua, X. Liu in Y. Guo, "Študija o tehnologiji ekstrakcije vode gelnega mazila Qisui Zhushui," Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, vol. 21, št. 2, str. 60–63, 2015.

[38] WN Qiu Hua, X. Liu, D. Mao, X. Xing in Y. Guo, "Študije o standardu kakovosti gelnih mazil Qishui Zhushui," Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, vol. 18, št. 3, str. 540–544, 2016.

[39] MD Qiu Hua, X. Liu in Y. Guo, "Matrična formulacija gelnih mazil Qishui Zhushui, optimizirana z ortogonalnim testom," Guangxi Journal of Traditional Chinese Medicine, vol. 37, št. 5, str. 4, 2014.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 in Zhen Heng Song 3

1 Oddelek za hepatologijo, Prva pridružena bolnišnica Univerze kitajske medicine Guangxi, Nanning, Kitajska

2 Oddelek za medicinski laboratorij, Prva pridružena bolnišnica Univerze kitajske medicine Guangxi, Nanning, Kitajska

3 Oddelek za hepatologijo, Univerza kitajske medicine Guangxi, Nanning, Kitajska