Že obstoječa T-celična imunost na SARS-CoV-2 pri neizpostavljenih zdravih kontrolah v Ekvadorju, kot je bila odkrita s testom sproščanja interferona gama COVID-19

POVZETEK

Ozadje: Študije imunskih odzivov T-celic proti SARS-CoV-2 so pomembne za razumevanje imunskega statusa posameznikov ali populacij. Tu uporabljamo preprost, poceni in hiter test stimulacije polne krvi – test sproščanja interferona gama (IGRA) – za preučevanje T-celične imunosti na SARS-CoV-2 pri bolnikih, ki okrevajo s COVID-19 in neizpostavljeni zdravi kontakti iz Quita v Ekvadorju. Metode: Nastajanje interferona gama (INF-g) smo izmerili v heparinizirani krvi rekonvalescentov in neizpostavljenih oseb po 24-urni stimulaciji s proteinom SARS-CoV-2 Spike S1, proteinom receptorske vezavne domene (RBD) oz. proteina nukleokapsida (NP). Prisotnost protiteles proti proteinu IgG-RBD smo v obeh študijskih skupinah ugotavljali z "in-house" testom ELISA. Rezultati: Kot je bilo izmerjeno s proizvodnjo INF-g, je imelo 80 odstotkov rekonvalescentov bolnikov s COVID-19, ki so bili vsi seropozitivni na IgG-RBD, močan T-celični odziv.

Vendar pa je nepričakovano imelo 44 odstotkov neizpostavljenih zdravih kontrolnih oseb, vseh seronegativnih za IgG-RBD, močan za virus specifičen T-celični odziv s COVID-19 IGRA, verjetno zaradi predhodne izpostavljenosti koronavirusom, ki povzročajo prehlad, ali drugim virusnih ali mikrobnih antigenov. Zaključek in razprava: Visok odstotek neizpostavljenih zdravih oseb z že obstoječo imunostjo nakazuje, da ima del ekvadorskega prebivalstva verjetno T-celice, reaktivne na SARS-CoV-2. Glede na to, da je tehnika IGRA preprosta in jo je mogoče enostavno povečati za preiskave, kjer je potrebno veliko število bolnikov, lahko ta COVID-19 IGRA služi za ugotavljanje, ali odziv samo celic T predstavlja zaščitno imunost proti SARS-CoV -2 okužba v populacijski študiji. © 2021 Avtorji. Izdal Elsevier Ltd v imenu Mednarodnega združenja za nalezljive bolezni.

Ob istem času, ko je naša imuniteta nizka, obstaja veliko načinov za izboljšanje imunosti, uživanje živil, ki lahko okrepijo imuniteto, kot je cistanča, polisaharidi, beljakovine, aminokisline in druge snovi, ki jih vsebuje cistanča, lahko pogosto uravnavajo telesnoiimunski sistem.

Kliknite izdelek v prahu z izvlečkom cistanche tubulosa

Uvod

Imunski odziv na okužbo s SARS-CoV-2 ne vključuje le proizvodnje protiteles, ampak okužba sproži tudi T-celični odziv pri bolnikih (Lipsitch et al., 2020, Ni et al., 2020). Na splošno se ugotavljanje prisotnosti in obsega specifičnega spominskega T-celičnega odziva na to okužbo s koronavirusom izvaja s testom ELISPOT z ugotavljanjem števila limfocitov, ki proizvajajo IFN-g po stimulaciji z za bolezen specifičnimi antigeni ali peptidi (Ni et al., 2020, Pai et al., 2014, Abate et al., 2013, Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al., 2020, Sekine et al., 2020).

Za to tehniko mononuklearne celice periferne krvi (PBMC) izoliramo iz sveže heparinizirane krvi s centrifugiranjem z gradientom gostote; izločanje citokinov posameznih T-celic kvantificiramo pod mikroskopom ali s posebnim aparatom – čitalnikom ploščic ELISPOT. Test ELISPOT je tehnika "samo za raziskovalne laboratorije", ki je zelo naporna, tehnično zahtevna, razmeroma draga in je ni mogoče zlahka uporabiti v kliničnem laboratoriju ali uporabiti v populacijskih študijah. Zaradi stroškov, infrastrukture in laboratorijskih zahtev, potrebnih za izvedbo testa, je njegova uporaba v okoljih z omejenimi viri, kot je Ekvador, lahko minimalna.

Celične imunske odzive je mogoče določiti tudi z enostavnejšim testom: test sproščanja interferona gama (IGRA). Ta test, krvni test in vitro, kvantificira citokine, ki jih izločajo T-celice (tj. gama interferon (IFN-g); vendar je mogoče kvantificirati tudi druge citokine, kot sta TNF ali IL-2) po stimulaciji polne krvi (ne samo izoliranih limfocitov) s specifičnimi antigeni (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013). Izločeni citokin IFN-g se meri s testom ELISA, ki je lahko dostopna tehnika v večini laboratorijev, rezultati pa se odčitajo z bralnikom plošč ELISA. IGRA so našli uporabo v kliničnem laboratoriju in se uporabljajo za določanje latentne okužbe z Mycobacterium tuberculosis (MTB) kot tudi za merjenje celično posredovane imunosti, specifične za citomegalovirus (CMV), in napovedovanje okužbe s CMV pri prejemnikih presadkov (Pai et al. , 2014, Abate et al., 2013). Ti testi IGRA so bili obsežno ovrednoteni in v primerjavi s testom ELISPOT so pokazali podobne zmožnosti za napovedovanje okužbe z MTB ali CMV. Poleg tega je na voljo več komercialnih testov in testov z oznako FDA ali CE za odkrivanje imunosti proti TB ali CMV, ki se pogosto izvajajo.

V tej študiji raziskujemo uporabo COVID-19 IGRA in ocenjujemo obseg sproščanja IFN-g pri okrevajočih bolnikih s COVID-19 in zdravih bolnikih s COVID-19 naivno kontrolo kot odziv na specifične antigeni virusa SARS-CoV-2: protein RBD; del S1 proteina Spike; ali nukleokapsid (N) protein. Poleg tega ugotavljamo prisotnost protiteles IgG, specifičnih za SARS-CoV-2, pri teh udeležencih z "internim" testom ELISA (Amanat et al., 2020, Guevara et al., 2021). Pokažemo, da ima znaten odstotek neizpostavljenih darovalcev T-celice, reaktivne na SARS-CoV-2, in razpravljamo o teh rezultatih.

Material in metode

Oboleli bolniki s COVID-19, zdrave kontrole in okolje

Ta študija je bila izvedena v Quitu v Ekvadorju septembra 2020. Za vnaprejšnjo določitev velikosti vzorca niso bile uporabljene nobene statistične metode. Tabela 1 prikazuje značilnosti 32 bolnikov v tej študiji: trinajst rekonvalescentnih bolnikov s COVID-19, vsi z blagimi simptomi/znaki COVID-19 in pozitivno diagnozo RT-PCR junija 2020; in 17 neizpostavljenih zdravih kontrol. Te zdrave kontrole so bile med pandemijo izredno previdne, izogibale so se stikom z drugimi ljudmi in same niso poročale o tipičnih znakih in simptomih COVID-19 med trajanjem pandemije, kot so vročina, trdovraten kašelj, ali izguba vonja ali okusa. V to študijo sta bila vključena tudi dva asimptomatska nosilca SARS-CoV-2. Ti dve osebi nista nikoli kazali simptomov ali znakov bolezni COVID-19; junija 2020 pa je bila pri njih kot pogoj za delovno dovoljenje opravljena tehnika RT-PCR, ki je privedla do pozitivnih diagnoz.

Serologija

Serologija in IGRA za vse bolnike in kontrole so bili opravljeni v zadnjih dveh tednih septembra 2020, tri mesece po diagnozi RT-PCR rekonvalescentov. Za določitev prisotnosti protiteles IgG, specifičnih za koronavirus, v naši študijski skupini je bil uporabljen "notranji" test SARS-CoV-2 receptorsko vezavne domene (RBD) IgG ELISA (9, 10).

Test sproščanja interferona gama (IGRA)

Za IGRA je bil odvzet vzorec heparinizirane krvi (4 mL) in razdeljen na alikvote po 250 mL ter stimuliran z 2 mg/mL proteina RBD (postopek izolacije iz reference 9) ali 2 mg/mL komercialno dostopnega nukleokapsida. (N) protein ali Spike (S1) protein (ViroGen, kataloške številke: 00, 221-V oziroma 00, 226-V). Za določitev optimalne koncentracije antigenov za stimulacijo v IGRA je bila uporabljena krivulja koncentracija odmerka-odziv s krvjo IGRA-pozitivnih in IGRA-negativnih bolnikov. Pri 2 ug/ml je bil najvišji odziv IFN-g v krvi preiskovancev s COVID-19 brez stimulacije pri neokuženih kontrolah. Za vsakega udeleženca je bila vključena nestimulirana kontrola (NIL) in testirali smo 250 ml vzorca krvi z mitogen fitohemaglutininom (PHA), pozitivno kontrolo za oceno stopnje citokinskega odziva vzorca krvi. Stimulacija je bila izvedena v 96-plošči ELISA z vdolbinicami z ravnim dnom pri 37 C 24 ur. Zbrali smo plazmo in določili proizvodnjo IFN-g s humanim IFN-g ELISA (MaxTM Standard Set Biolegend kat. št. 430,101).

Rezultati

Test RBD IgG ELISA je pokazal, da so bili vsi bolniki s simptomi COVID{{0}} (pozitivni na RT-PCR) tri mesece po diagnozi RT-PCR pozitivni na protitelesa IgG proti proteinu RBD. Dva asimptomatska RT-PCR pozitivna bolnika in vsi zdravi neizpostavljeni kontrolni bolniki so bili pri tem ELISA seronegativni (glejte tabelo 1). Rezultati stimulacije polne krvi v testu COVID-19 IGRA so prikazani na sliki 1. Močno indukcijo proizvodnje IFN-g so ugotovili pri 80 odstotkih bolnikov s simptomi COVID-19 z vsi trije antigeni, vendar sta bila protein N in protein S najmočnejša stimulatorja odziva IFN-g (slika 1 A, B, C). Dva asimptomatska, vendar RT-PCR-pozitivna bolnika (bolnika 14 in 15), oba brez specifičnih protiteles SAR-CoV-2, sta prav tako pokazala močan inducibilni T-celični imunski odziv. Od bolnikov, ki še niso bili okuženi s COVID{19}}, jih je 45 odstotkov pokazalo inducibilno T-celično imunost. Odziv pri teh zdravih neizpostavljenih kontrolnih osebah z odzivom T-celic se statistično značilno ni razlikoval po obsegu od rekonvalescentov bolnikov s COVID-19 za katerega koli od stimulirajočih antigenov (p-vrednost=0.271, 0,437, in 0,719 za beljakovine RBD, N in S1).

Slika 1. Proizvodnja IFN-g po stimulaciji polne krvi okrevajočih bolnikov s COVID-19 in zdravih neizpostavljenih kontrolnih osebkov z beljakovinami RBD, N ali S1.

Rezultati stimulacije rekonvalescentov in kontrolnih bolnikov z RBD, N ali S1 proteinom so prikazani na slikah 1A, B in C. Na sliki 1D so odzivi INF-g vsakega bolnika in na tri antigeni so združeni. Bolniki s potrjeno okužbo s COVID-19 so označeni s številkami 1–15, od tega so bili bolniki 14 in 15 asimptomatski. Subjekti 16–33 so bolniki, ki še niso bili okuženi s COVID-19.

Po 24 urah stimulacije so bile koncentracije IFN-g v plazmi določene s komercialno dostopnim kompletom na osnovi encimskega imunskega testa humanega IFN-g (Biolegend kat. št. 430,101). Velikost stimulacije je bila izražena kot optična gostota pri 450 nm (OD450) za kri, stimulirano z antigenom, minus OD450 za kri brez stimulacije z antigenom. OD 1,0 je ustrezal približno 400 pg/ml IFN-g. Fitohemaglutinin (PHA) je bil uporabljen kot mitogen pri končni koncentraciji 5 mg/mL v IGRA za oceno kakovosti in odzivne sposobnosti krvi. Vsi bolniki in kontrole so pokazali največjo produkcijo citokina s tem mitogenom s srednjo optično gostoto (OD450) 2,54 (SD=0.13), kar predstavlja približno 1000 pg/mL IFN-g. Ni bilo razlike v mediani ravni IFN-g v nestimulirani krvi rekonvalescentov in zdravih kontrolnih bolnikov (OD450=0.38, SD=0.14 v primerjavi z OD450=0.32. SD=0.16). Ti rezultati niso prikazani. V vsakem grafu je bila narisana vodoravna črta, ki predstavlja mejno vrednost za stimulacijo. Ta vrednost je bila določena z izračunom povprečja in dveh standardnih deviacij odziva devetih subjektov (bolniki 16, 18, 19, 22, 27–31) iz kontrolne skupine z najnižjo produkcijo INF–g po stimulaciji.

Razprava in sklepi

Z uporabo enostavnega testa polne krvi, ki ocenjuje odzive T-celic, smo ugotovili, da ima večina rekonvalescentov in velik delež zdravih neizpostavljenih posameznikov specifičen in močan odziv T-celic, določen s proizvodnjo INF-g po stimulaciji s specifičnimi antigeni SARS-CoV-2 (slika 1). Več študij, vse z uporabo testa ELISPOT, je poročalo o prisotnosti T-celičnega odziva pri večini ali vseh rekonvalescentih bolnikov s COVID-19 (Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al. , 2020, Sekine et al., 2020, Moderbacher et al., 2020, Mateus et al., 2020, Peng et al., 2020).

Kar zadeva odziv T-celic pri zdravih neizpostavljenih kontrolnih osebah, so poročali o stopnjah odziva med 28 in 50 odstotki (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch et al., 2020, Sagar et al., 2020) in več študije ne poročajo o odzivu T-celic pri bolnikih s COVID-19 naivno kontrolno skupino (de Vries, 2020, Moderbacher et al., 2020, Schwarzkopf et al., 2021). Večina teh študij je bila izvedenih s testom ELISPOT, vendar so v Italiji in ZDA za odkrivanje T-celičnega odziva SARS-CoV-2 uporabili tudi IGRA (Petrone et al., 2020, Murugesan et al. ., 2020). V obeh študijah so pri rekonvalescentih odkrili specifičen T-celični odziv; vendar pa IGRA ni zaznala odziva INF-g pri zdravih neizpostavljenih osebah.

Že obstoječa T-celična imunost na SARS-CoV-2 pri osebah, ki še niso bile okužene s COVID-19, je bila pregledana v več publikacijah (Altmann in Boyton, 2020, Dosho et al., 2020, de Vries, 2020, Sette in Crotty, 2020). Razlog, zakaj bi lahko specifični T-celični odziv COVID-19 zaznali pri zdravem neizpostavljenem subjektu, ostaja nejasen in je predmet špekulacij. Večina študij ELISPOT z osebami, ki še niso bile okužene s COVID{11}}, je uporabila vzorce človeške krvi, pridobljene pred odkritjem virusa SARS-CoV-2 leta 2019, torej pred kakršno koli možnostjo izpostavljenosti. Iz tega razloga so te študije ELISPOT zaključile, da odziv T-celic pri neizpostavljenih zdravih osebah verjetno izvira iz predhodnega stika s krožečimi koronavirusi »prehlada« (Grifoni et al., 2020, Matheus et al., 2020) ali predhodne izpostavljenosti gripi. in/ali virusi CMV (Mahajan et al., 2020) ali drugi virusni ali mikrobni antigeni (Tan et al., 2020). V naši študiji smo uporabili kri, odvzeto med pandemijo prostovoljcem, ki so sami poročali o ničelnem stiku, bili seronegativni za antigen COVID-19 RBD in nikoli niso kazali nobenih znakov ali simptomov COVID-19.

Zato ne moremo izključiti, da odziv T-celic pri nekaterih naših »naivnih« zdravih kontrolnih osebah s COVID-19 izvira iz asimptomatskih okužb z virusom SARS-CoV-2. Primer tega sta bolnika 14 in 15 iz naše študije. Ti posamezniki so bili razvrščeni kot bolniki s COVID-19 zaradi pozitivnega RT-PCR; vendar sta bila asimptomatska in nista razvila protitelesnega odziva proti proteinu RBD, vendar sta oba pokazala močan T-celični odziv.

Možno je, da je po kolonizaciji nazofarinksa s SARS-CoV-2 imunski sistem teh dveh asimptomatskih bolnikov pustil odziv samo na spominske T-celice in ni bilo specifičnih protiteles za SARS-CoV-2 povzročeno. Druga razlaga je, da T-celični odziv izvira iz prejšnje okužbe, podobne koroni, in da je že obstoječi T-celični imunski odziv ta dva bolnika zaščitil pred razvojem bolj invazivnega vzorca bolezni. Že obstoječe navzkrižno reaktivne T-celice bi lahko bile pomembne pri razlagi nekaterih razlik v stopnjah okužb ali patologiji (Le Bert et al., 2020, Sagar et al., 2020). Kar zadeva kohorto naivnih kontrol, smo izključili, da ta skupina vsebuje precejšnje število posameznikov, okuženih s SARSCoV-2, z neodkrito asimptomatsko okužbo, v bistvu zato, ker so vsi integrandi kontrolne skupine IgG seronegativni za antigen RBD.

Drugi razlog je, da je razširjenost okužbe v Ekvadorju relativno nizka. V času te študije, septembra 2020, je Ekvador poročal o približno 200000 potrjenih primerih COVID-19 (približno 1,1 odstotka prebivalstva). Seveda bi lahko bila dejanska razširjenost okužbe nekajkrat višja, a kljub temu je malo verjetno, da bi se okužilo 45 odstotkov te kontrolne skupine in da torej gledamo odziv T-celic, specifičen za SARS-CoV{ {9}} okužba.

Skratka, ugotovitev visokega odstotka neizpostavljenih zdravih oseb z že obstoječo imunostjo v Quitu v Ekvadorju vzbuja pričakovanja, da bo velik del naše populacije verjetno imel T-celice, reaktivne na SARS-CoV-2, ker predhodne izpostavljenosti gripi, virusom CMV ali koronavirusom, ki povzročajo prehlad. Cilj prihodnjih preiskav bi moral biti ugotovitev, ali je že obstoječi imunski odziv zaščiten in/ali lahko premaga hujšo bolezen COVID-19 ali prispeva k hitrejšemu okrevanju.

Pomen in omejitev te študije

Naša študija je pokazala, da je COVID{0}} IGRA uporabno in občutljivo novo orodje, ki lahko oceni izpostavljenost koronavirusom ali navzkrižno reaktivnost na podobne viruse z določanjem sproščanja IFN-g po stimulaciji z virusno specifičnimi antigeni. Tehnika je preprosta, razmeroma poceni in se lahko uporablja v kliničnem laboratoriju. To zagotovo ne velja za test ELISPOT. Poleg tega je mogoče test IGRA enostavno povečati za populacijske študije in preiskave, kjer je potrebno veliko število bolnikov. Skupaj s serologijo lahko IGRA uporabimo za pregled protiteles in odzivov T-celic posameznih bolnikov, da bi bolje razumeli imunost na populacijski ravni in določili obstoječo imunost pri seronegativnih posameznikih.

Pomembna omejitev naše študije je, da študijski vzorec ni reprezentativen za populacijo. Za vnaprejšnjo določitev velikosti vzorca niso bile uporabljene nobene statistične metode. Poleg tega naš test ni razlikoval med produkcijo IFN-g celic CD4 plus ali CD8 plus, vendar je mogoče upoštevati stimulacijo z definiranimi peptidi CD8(plus) in CD4(plus) (Grifoni et al., 2020, Peng et al. , 2020) in je bil uporabljen v IGRA, opisanih v Petrone et al., 2020 in Murugesan et al., 2020). S to IGRA je mogoče izmeriti tudi indukcijo drugih citokinov (Petrone et al., 2020). Podobno se lahko IGRA uporabi za spremljanje cepljenja za določitev razvoja T-celičnega odziva pri cepljenih posameznikih ali pa se lahko uporabi za ugotavljanje, ali je prisotnost navzkrižno reaktivnih spominskih T-celic povezana z zaščitno imunostjo in lahko zmanjšajo manifestacije bolezni zaradi okužbe s SARS-CoV-2 (Sagar et al., 2020).

Etična odobritev in soglasje za sodelovanje

Kri je bila zbrana po informiranem pisnem soglasju. Odbor za etiko Ministrstva za zdravje Ekvadorja je odobril protokol študije 004–2020.

Konflikt interesov

Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov.

Avtorski prispevki

Oblikovanje študija; JHW in GE; Zbiranje podatkov in laboratorijski poskusi: GE, AG, JC, AMR in MMV; Analiza podatkov; JHW, GE in ET; Pisanje: JHW, GE in ET.

Zahvala

Zahvaljujemo se vsem donatorjem in zdravstvenemu osebju, ki je sodelovalo pri tem delu, zlasti Sandri Vivero in Sandri Fonseca, za pomoč pri zbiranju vzorcev. To študijo je podprl raziskovalni sklad Universidad de las Américas. Inštitut za trajnostne znanosti, San Francisco, Kalifornija, ZDA, in fundacija "Por Todos" v Ekvadorju sta zagotovila beljakovino RBD in "interno" ELISA. Hvala Howardu E. Takiffu in Flor Pujol (IVIC, Venezuela), Paulini E. Andrade (USFQ, Ekvador) in Lilly Verhagen (UMC, Nizozemska) za njihove plodne razprave.

Reference

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. Primerjava citomegalovirusnih (CMV) encimsko vezanih imunosorbentnih testov za sproščanje interferona gama in kvantifikatorja CMV pri ocenjevanju tveganja okužbe s CMV pri prejemnikih ledvičnega presadka. J Clin Microbiol 2013; 51 (8): 2501–7.

Altmann DM, Boyton RJ. SARS-CoV-2 T-celična imunost: specifičnost, funkcija, trajnost in vloga pri zaščiti. Sci Immunol 2020; 5 (49) eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. Serološki test za odkrivanje serokonverzije SARS-CoV-2 pri ljudeh. Nat Med 2020; 26: 1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F, et al. SARS-CoV-2- reaktivne celice T pri zdravih darovalcih in bolnikih s COVID-19. Narava 2020; 587: 270–4.

de Vries RD. SARS-CoV-2-specifične T-celice pri neizpostavljenih ljudeh: prisotnost navzkrižno reaktivnih spominskih celic ne pomeni zaščitne imunosti. Sig Transduct Target Ther 2020; 5: 224.

Doshi P. Covid-19: ali ima veliko ljudi že obstoječo imunost? BMJ 2020; 370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher CR, et al. Cilji odzivov Tcell na koronavirus SARS-CoV-2 pri ljudeh z boleznijo COVID-19 in neizpostavljenih posameznikih. Cell 2020; 181 (7) 1489–501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. Nizkocenovni SARS-CoV-2 rRBD ELISA za odkrivanje serostatusa pri ekvadorskem prebivalstvu s COVID-19. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A, et al. SARS-CoV-2- specifična Tcelična imunost v primerih COVID-19 in SARS ter neokužene kontrole. Narava 2020; 584 (7821): 457–62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Navzkrižno reaktivne spominske celice T in čredna imunost na SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M, et al. Imunodominantni T-celični epitopi iz koničastega antigena SARS-CoV-2 razkrivajo močno že obstoječo T-celično imunost pri neizpostavljenih posameznikih. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM, et al. Selektivni in navzkrižno reaktivni epitopi celic T SARS-CoV-2 pri neizpostavljenih ljudeh. Znanost 2020; 370 (6512): 89–94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D, et al. Antigensko specifična adaptivna imunost na SARS-CoV-2 pri akutnem COVID-19 in povezave s starostjo in resnostjo bolezni. Celica 2020; S0092-8674(20):31235–6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K, et al. Test sproščanja interferona gama za natančno odkrivanje T-celičnega odziva SARS-CoV-2. Clin Infect Dis 2020;ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H, et al. Odkrivanje SARS-CoV-2- specifične humoralne in celične imunosti pri prebolevajočih posameznikih COVID-19. Imuniteta 2020; 52 (6) 971–7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. Testi sproščanja interferona gama za odkrivanje okužbe z Mycobacterium tuberculosis. Clin Microbiol Rev 2014; 27 (1): 3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D, et al. Širok in močan spomin CD4 plus in CD8 plus celice T, ki jih povzroča SARS-CoV-2 pri rekonvalescentih v Združenem kraljestvu po COVID-19. NatImmunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T, et al. Test polne krvi za merjenje SARS-CoV-2-specifičnega odziva pri bolnikih s COVID-19. Clin Microbiol Infect 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L, et al. Nedavna endemična okužba s koronavirusom je povezana z manj hudo boleznijo COVID-19. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM, et al. Celična imunost pri COVID{0}} rekonvalescentih z okužbo, potrjeno s PCR, vendar z nezaznavnim SARS-CoV-2-specifičnim IgG. Emerg Infect Dis. 2021; 27 (1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A, et al. Močna T-celična imunost pri rekonvalescentih z asimptomatsko ali blago boleznijo COVID-19. Cell 2020; 183 (1) 158–68.

Sette A, Crotty S. Že obstoječa imunost na SARS-CoV-2: znane in neznane. Nat Rev Immunol. 2020; 20 (8) 457–8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Že obstoječe navzkrižne reaktivnosti na SARS-CoV-2, posredovane s celicami T, ni mogoče razložiti samo s predhodno izpostavljenostjo endemičnemu človeškemu koronavirusu. bioRxiv 2020;2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com