Tehnologija priprave za Wenyang Tongbian granule

Povzetek:

CiljDoločiti in optimizirati tehnologijo priprave granul Wenyang Tongbian.

MetodeEkstrahirali smo vodno decokcijo. Kot indeksa sta bila uporabljena vsebnost glikozida ehinaceje v zdravilu monarchdrug in spojina izkoristka. Ortogonalni test L9 (34) je bil uporabljen za optimizacijo ekstrakcije zrnc Wenyang Tongbian. Najboljši proces oblikovanja je bil optimiziran glede na težave pri granulaciji, sposobnost oblikovanja in izkoristek delcev. Rezultati Optimalna ekstrakcija je vključevala dodajanje 10 krat vode in ekstrakcijo 3-krat, vsakokrat 1 uro. Najboljši postopek tvorbe: vrsta pomožnega materiala je bil dekstrin, razmerje pomožnih snovi je bilo 1∶0,9, najboljše omočilno sredstvo pa je bil 85% etanol. Zaključek Postopek ekstrakcije in oblikovanja sta stabilna in razumna, enostavna in izvedljiva, z dobro ponovljivostjo, kar lahko zagotovi osnovo za industrijsko proizvodnjo granul Wenyang Tongbian.

Ključne besede: Wenyang Tongbian granlue; ortogonalni test; ekstrakcija; oblikovanje

NOVA ZELIŠČNA FORMULACIJA ZA LEDVICEPOMANJKANJE JANG-a

Podporna služba Wecistanche

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Zaprtje zaradi pomanjkanja jangaje pogost pri starejših in ženskah. Metoda zdravljenja ne sme biti preprosto čiščenje. Z metodo Warming Yang lahko dosežemo dobre rezultate [1]. Wenyang Tongbian Granules so pripravek za uporabo v bolnišnici, razvit na podlagi kliničnih izkušenj profesorja Lin Aizhena iz bolnišnice tradicionalne kitajske medicine province Hubei pri zdravljenju funkcionalnega zaprtja pri starejših. Sestavljen je iz Cistanche deserticola, cimetove skorje, astragalusa in Atractylodes macrocephala. V formuli ima Cistanche deserticola funkcije toniziranja ledvičnega janga in koristi esenci in krvi ter je glavno zdravilo, ki ogreje jang; cimetova skorja ima funkcijo segrevanja meridianov in deblokade krvnih žil, dopolnjuje ogenj in podpira jang; astragalus ima funkcije dviga janga in dopolnjevanja qi-ja, striže rane in spodbuja regeneracijo tkiva; in Atractylodes macrocephala ima funkcije krepitve vranice in obnavljanja qi-ja, sušenja vlage in spodbujanja diureze.

Študije so pokazale, da so feniletanol glikozidi glavne aktivne sestavine v Cistanche deserticola [2]. Med njimi sta ehinakozid in verbaskozid značilni sestavini za nadzor kakovosti Cistanche deserticola, kot je določeno v kitajski farmakopeji. Liu Xianhong et al. [3] so s preskušanji na ljudeh in vivo ugotovili, da je Cistanche deserticola primerna za klinično zdravljenje zaprtja in lahko zdravi tako simptome kot osnovni vzrok. Glavne kemične sestavine cimetove skorje vključujejo hlapna olja, polisaharide, flavonoide itd. Sodobne farmakološke študije so pokazale, da ima cimetova skorja farmakološke učinke, kot so vazodilatacija, proti želodčni razjedi in antibakterijski učinki [4]. Polisaharidi astragalusa, flavonoidi in astragalozid IV so glavne kemične sestavine, ki imajo imunomodulatorne učinke [5]. Atractylodes macrocephala krepi vranico in uravnava motnje črevesne flore in se lahko klinično uporablja za zdravljenje gastrointestinalne disfunkcije [6]. Prvotni recept se uporablja predvsem v decokcijah kitajske medicine, vendar ima slabosti, kot so neprijetnosti pri decokciji, veliko odmerjanje in neprijetnosti pri prenašanju. Da bi se ta recept za klinične izkušnje široko uporabljal v klinični praksi, so ga razvili v zrnca. Ta poskus je kot indikatorja uporabil izkoristek paste in vsebnost ehinakozida, glavne učinkovine v glavnem zdravilu, še naprej je uporabljal tradicionalni postopek kuhanja vode in uporabil ortogonalno preskusno metodo L9 (34) za optimizacijo količine dodane vode. , čas razkuževanja in časi razkuževanja v procesu ekstrakcije, da dosežete najboljši postopek ekstrakcije. Hkrati je bil raziskan postopek oblikovanja granul, da bi se določil stabilen in razumen postopek oblikovanja, ki je zagotovil referenco za pilotno proizvodnjo, nadzor kakovosti in klinično uporabo pripravka [7-8].

1 Instrumenti in reagenti

1.1 Instrumenti

Zavezništvo e2695tekočinski kromatograf visoke ločljivosti, 2998 diodni detektor (Waters, ZDA), ES225SMDR 1/100,000 analitična tehtnica (Precisa, Švica), UPT-11-10T stroj za ultračisto vodo (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dvofrekvenčni CNC ultrazvočni čistilec (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Preskusna zdravila

Vinske Cistanche rezine(številka serije: 2322050113, proizvedeno v Notranji Mongoliji), rezine cimeta (številka serije: 2323020103, proizvedeno v Guangxi), rezine astragalusa (številka serije: 2323020105, proizvedeno v Gansuju), rezine Atractylodes macrocephala (številka serije: 2322080101, proizvedeno v Zhejiangu ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., vse rezine je kot pristne označil Chen Shuhe, glavni farmacevt Inštituta zaTradicionalna kitajska medicinabolnišnice tradicionalne kitajske medicine province Hubei in so kvalificirani v skladu z izdajo 2020kitajski Farmakopejadel I). Referenčna snov ehinakozid(številka serije: 111670-201907, čistost: 91,8 %, Kitajska raziskava nadzora hrane in zdravil).

Dekstrin (številka serije: 230102), koruzni škrob (številka serije: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), saharoza (številka serije: TF28221205), mikrokristalna celuloza (številka serije: TF471211001), laktoza (številka serije: TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metode in rezultati

2.1 Določanje vsebnosti ehinakozida

2.1.1 Kromatografski pogoji: Kot kromatografsko kolono smo uporabili Agilent 5 TC-C18 (250 nm×4,6 mm, 5 μm); metanol je bil uporabljen kot mobilna faza A, 0,1 % raztopina mravljinčne kisline je bila uporabljena kot mobilna faza B, gradientna elucija (0-17 min, 26,5 %A; 17-20 min, 26,5 % → 29,5 %A; 20-54 min,

29,5 % A, 54-55 min, 29,5 % → 26,5 % A; 55-60min, 26,5 %A); pretok 1.0 mL·min-1; temperatura kolone 30 stopinj; detektor niza diod, valovna dolžina detekcije 330 nm; volumen injekcije 10μL; teoretično število ploščic, izračunano na podlagi vrha ehinakozida, ne sme biti manjše od 3000[9].

2.1.2 Priprava referenčne raztopine

Vzemite ustrezno količino ehinakozida, natančno odtehtajte 9,65 mg, dajte v 25 ml merilno bučko, dodajte 50 %

metanol, da se raztopi in razredči do oznake kot referenčna osnovna raztopina. Natančno odpipetirajte 1 ml osnovne raztopine ehinakozida v 25 ml merilno bučko, dodajte 50 % metanola, da razredčite do oznake, dobro pretresite in pripravite referenčno raztopino, ki vsebuje 14,17 ug na 1 ml [9].

2.1.3 Priprava preskusne raztopine

Vzemite približno 0,5 g suhe paste v prahu, jo zdrobite v prah, natančno stehtajte, dajte v stožčasto steklenico z rjavim zamaškom, natančno dodajte 50 ml 50 % metanola, dobro zamašite, dobro pretresite, stehtamo, ultrazvočno obdelamo 40 min (moč 250 W, frekvenca 45 kHz), pustimo, da se ohladi, ponovno stehtamo, dodamo 50 % metanola, da nadomestimo izgubljeno težo, dobro pretresemo, pustimo stati, vzamemo supernatant, filtrirajte in vzemite filtrat.

2.1.4 Priprava raztopine negativnega vzorca

Vzemite približno 0,5 g suhe paste v prahu formule brez zdravilnih snovi vina Cistanche in pripravite raztopino negativnega vzorca v skladu z metodo pod "2.1.3".

2.1.5 Preskus specifičnosti

Natančno odpipetirajte preskusno raztopino, referenčno raztopino in raztopino negativnega vzorca ter izmerite v skladu s kromatografskimi pogoji pod "2.1.1". Posnemite kromatogram. Rezultati so prikazani na sliki 1. Ni motenj pri negativnem vzorcu. Rezultati kažejo, da ima metoda dobro specifičnost.

Slika 1 Specifični kromatogram zrnc Wenyang Tongbian

2.1.6 Preiskava linearnega razmerja

Vzemite ustrezno količino ehinakozida, ga natančno stehtajte na 10,11 mg, ga dajte v 25 ml merilno bučko, dodajte 50 % metanola, da ga razredčite v vrsto koncentracij referenčne raztopine, in ga injicirajte v skladu s kromatografskimi pogoji pod "2.1". .1" za določitev vrednosti površine vrha ehinakozida. Narišite standardno krivuljo z referenčno količino vbrizganega ehinakozida kot vodoravno osjo (ug, X) in vrednostjo integralne površine vrha kot navpično osjo (Y) in izvedite linearno regresijo.

Regresijska enačba je Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Rezultati kažejo, da je integralna vrednost površine vrha injicirane količine ehinakozida v dobrem linearnem razmerju med 1,4850 in 371,2392 ug.

2.1.7 Preskus natančnosti

Natančno aspirirajte 10 μL referenčne raztopine (masna koncentracija 37,12 ug·mL－ 1) pod "2.1.6", injicirajte 6-krat, zabeležite vrednost površine vrha ehinakozida in izračunajte vrednost RSD na 1,1 %, kar kaže da ima instrument dobro natančnost.

2.1.8 Preskus ponovljivosti

Vzemite isto suho pasto, jo zdrobite v prah, natančno stehtajte 6 obrokov, od katerih vsak tehta približno 0,5 g, in jih dajte v stožčasto steklenico z rjavim zamaškom. Ekstrahirajte po metodi pod "2.1.3", določite vsebino in izračunajte. Rezultati kažejo, da je povprečna vsebnost ehinakozida v vzorcu 1,46 mg·g－ 1, vrednost RSD pa 2,7 %, kar kaže na dobro ponovljivost te metode.

2.1.9 Preskus stabilnosti

Vzemite isto raztopino vzorca, natančno odvzemite 10 μL in jo injicirajte v 0, 2, 4, 8, 12, 18 oziroma 24 urah. Vrednost RSD površine vrha je 0,71 %, kar kaže, da ima raztopina vzorca dobro stabilnost v 24 urah.

2.1.10 Preskus izkoristka vzorca

Natančno stehtajte 6 obrokov iste serije preskusnih vzorcev, 0.24 g vsakega, in jih dajte v stožčasto steklenico z rjavim zamaškom. V skladu z masnim razmerjem 1:1 komponent v preskusnem vzorcu natančno dodajte 0.9 mL referenčne snovi ehinakozida (masna koncentracija je 371,24 ug·mL－ 1) pod "2.1.6", pripravite preskusno raztopino po metodi pod "2.1.3", določite kromatografsko površino vrha ehinakozida in izračunajte vsebnost. Rezultati kažejo, da je povprečna stopnja izkoristka ehinakozida 101,09 %, vrednost RSD pa 1,6 %.

2.2 Načrt eksperimenta in kazalniki vrednotenja

Količina dodane vode (A), čas ekstrakcije (B) in število ekstrakcij (D) so bili izbrani kot dejavniki, ki jih je treba preiskati. Tri ravni faktorjev so bile nastavljene glede na rezultate prejšnje raziskave posameznega faktorja, glej tabelo 1. V poskusu je bila uporabljena ortogonalna testna tabela L9 (34), glej tabelo 2. Test je uporabil izkoristek paste in vsebnost ehinakozida kot kazalniki vrednotenja za raziskovanje optimalnega postopka pridobivanja vode.

Zavihek 1 Faktor in raven ortogonalnega testa

2.2.1 Ortogonalni test

V skladu z razmerjem predpisovanja stehtajte 18 porcij vsake zdravilne arome, po 55 g, in izvedite ekstrakcijo vodnega decokta v skladu s pravokotno načrtovalno shemo v tabeli 2. Vsaka skupina ima 2 vzporedni porciji. Decokcijo filtriramo skozi 80-mrežasto sito, filtrat združimo, ohladimo, izmerimo prostornino decokcije, 50 mL natančno odpipetiramo v izparilno posodo, ki je bila konstantno tehtana, uparimo do suhega , in posušimo pod znižanim tlakom pri 60 stopinjah, da dobimo ortogonalno eksperimentalno suho pasto. Izračunajte izkoristek paste (izkoristek paste=(masa suhe paste × prostornina medicinske tekočine) / (50 × teža kosa decoctiona) × 100 %). V skladu s kromatografskimi pogoji pod "2.1.1" in metodo pod "2.1.3" je bila določena ekstrakcijska količina ehinakozida v 9 skupinah ortogonalnih testnih ekstraktov. Količina ekstrakcije ehinakozida=teža suhe paste × vsebnost ehinakozida / teža kosa decokcije vina Cistanche. Obsežen rezultat=vsebnost ehinakozida ÷ največja vsebnost × 0,5 × 100 % + izkoristek paste ÷ največji izkoristek paste × 0,5 × 100 % [10]. Rezultati so prikazani v tabeli 2.

Kot je prikazano v tabeli 3, ob upoštevanju izkoristka paste in celovite ocene vsebnosti ehinakozida kot kazalcev vrednotenja, vrednost R v razponu v tabeli kaže, da sta primarni in sekundarni učinek vsakega dejavnika D > B > A; rezultati analize variance kažejo, da je faktor D (časi dekokcije) statistično značilen (P < 0.05), izbrana pa je raven D3; faktor A (dodajanje vode) in faktor B (čas razkuževanja) nista statistično pomembna (P > 0,05). Glede na to, da je stopnja absorpcije vode zdravilnih materialov v tem pripravku razmeroma visoka (155 %) in v kombinaciji z dejavniki, kot so dejanske proizvodne potrebe, so optimalni pogoji ekstrakcije izbrani kot A2B1D3, to je dodajanje 10-krat vode, dekoktiranje 3-krat, vsakič po 1 uro.