Hkratno določanje ehinakozida in 2,3,5,4'-tetrahidroksi stilbene-2-O- -D-glukozida v peroralni tekočini Congrong Tongbian s HPLC

Povzetek:Cilj je bil sočasno določiti ehinakozid in 2,3,5,4'-tetrahidroksi stilben-2-O- -D-glukozid v prebavni peroralni tekočini Congrong s HPLC. Uporabljena je bila kolona Tech Mate C18-ST (4,6 mm×250.0 mm, 5 μm) z gradientnim eluiranjem z acetonitrilom-0.2 % raztopina mravljinčne kisline; valovna dolžina detekcije je bila 330nm; hitrost pretoka je bila 1.0 ml/min. Rezultati so pokazali, da sta ehinakozid in 2,3,5,4'-tetrahidroksi stilben-2-Ο- -D-glukozid v vzorcu predstavljala dobro ločljivost sosednjih kromatografskih vrhov z dobrim linearnim razmerjem v območju 0 .159 3-0.955 8 ug in 0.385 3-4.623 5 ug. Uveljavljena metoda je preprosta in natančna in se lahko uporablja za določanje ehinakozida in stilbenskega glikozida v prebavni peroralni tekočini Congrong.

Ključne besede:Congrong Degestiv peroralna tekočina;ehinakozid; 2,3,5,4'-tetrahidroksistilben-2-O- -D-glukozid; HPLC

ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE S 30 % EHINAKOZIDA IN 12 % AKTEOZIDA

Trenutni standardi kakovostiCistanche Rongprebavne peroralne tekočine imajo težave, kot so preprosti testni predmeti, slabo upravljanje ter okorni in dolgotrajni postopki. Poleg splošnih inšpekcijskih postavk standard vsebuje le tankoplastne identifikacijske elemente za Polygonum multiflorum in Citrus aurantium ter Polygonum multiflorum in Citrus aurantium. Dejanska metoda identifikacije s tankoplastno kromatografijo ni dovolj stroga in je slabo uporabna. Postavka za določanje vsebnosti uporablja ultravijolično spektrofotometrijo za odkrivanje 1,8-dihidroksiantrakinona v peroralni tekočini Cistanche purpurea. Ker ta metoda zahteva večkratne refluksne ekstrakcije, je operacija okorna in dolgotrajna, ponovljivost in natančnost pa sta slabi. Kakovosti izvirnih zdravilnih surovin ni mogoče nadzorovati, manjka pa tudi kontrola kakovosti kraljeve droge Cistanche deserticola. V tem standardnem raziskovalnem delu je določitevechinaceaside v Cistanche deserticolainstilbenski glikozid v Polygonum multiflorumv oralni tekočini Cistanche deserticola so proučevali. Na podlagi sestave formule in značilnosti postopka je bila ugotovljena visoko zmogljiva tekoča faza. Kromatografska metoda je bila uporabljena za določanje glikozidov ehinakozida in stilbena v prebavni peroralni tekočini Cistanche Rong, njene mejne vrednosti vsebnosti pa so bile oblikovane za nadaljnje izboljšanje in izboljšanje standardov nadzora kakovosti. Metoda določanja je enostavna in hitra, vsebinske omejitve pa razumno oblikovane. Po metodološkem preverjanju so točnost, natančnost, linearnost, vzdržljivost in natančnost razpona dobre in jih je mogoče uporabiti za določanje vsebnosti peroralne tekočine Cistanche Rong Tongbang [1-5].

1 Instrumenti in reagenti

1.1 Instrumenti

Watersov tekočinski kromatograf visoke ločljivosti (2695 in ARC); 1/100,000 elektronska tehtnica (MS205DU), 1/10,000 elektronska tehtnica (ME204E, Mettler-Toledo).

1.2 Testna zdravila in reagenti

Echinacea stran (številka serije 110670-201706, čistost 89,7 %); stilbenski glikozid (številka serije 110844-201915, čistost 90,7 %), vse zagotavlja Kitajski inštitut za nadzor hrane in zdravil; Peroralna tekočina Cistanche purpurea (številka serije 20191204, 20191206, 20200404, 20200405, 20200406, 20200407, 20200408, 20200409, 20200410), ki jo je zagotovilo farmacevtsko podjetje v Gansuju; metanol itd. so kromatografsko čisti; voda je ultra čista voda; drugi reagenti so analitske kakovosti.

2 Metode in rezultati

2.1 Kromatografski pogoji

Kot kromatografsko kolono uporabite Tech Mate C{{0}}ST (4,6 mm × 250.0 mm, 5 μm), kot mobilno fazo A uporabite acetonitril in uporabite 0,2 % raztopina mravljinčne kisline kot mobilna faza B. Izvedite gradientno elucijo po predpisih v tabeli 1; temperatura stolpca Temperatura je 35 stopinj; valovna dolžina detekcije je 330 nm; hitrost pretoka je 1,0 ml/min; prostornina vbrizga preskusnega vzorca in referenčne snovi je po 10 µL; število teoretičnih plošč ne sme biti manjše od 4000 glede na vrh echinaceaside.

2.2 Priprava raztopine

Priprava referenčne raztopine: vzemite ustrezni količini referenčne snovi ehinaceazida in referenčne snovi stilbenskega glikozida, ju natančno stehtajte in dodajte 70% metanola, da pripravite mešano raztopino, ki vsebuje 70 ug ehinaceazida in 150 ug stilbenskega glikozida na 1 ml. , to je to. Priprava testne raztopine: izdelek dobro pretresite, vzemite približno 0,3 g, natančno stehtajte, dajte v 25 ml rjavo merilno steklenico, dodajte ustrezno količino 70 % metanola, sonicirajte 30 minut, pustite, da se ohladi, dodajte 70 % metanola, da ga razredčite do Scale, dobro pretresite, filtrirajte in vzemite preostali filtrat, da ga dobite. Priprava raztopine negativnega vzorca: Natančno odtehtajte približno 0,3 g negativnega vzorca in ga pripravite v skladu z metodo priprave testne raztopine.

Slika 1 Kromatogrami HPLC prebavne peroralne tekočine Congrong

2.3 Metodološki pregled

2.3.1 Delovna krivulja in linearno območje

Natančno narišite mešano referenčno raztopino in dodajte 70% metanola, da pripravite serijo mešanih referenčnih raztopin. Natančno odvzemite 1{{20}} µL vsake od zgornjih serij kontrolnih raztopin, jo vbrizgajte v tekočinski kromatograf in izmerite integrirano vrednost površine vrha. Vzemite koncentracijo referenčne raztopine (µg/mL) kot ordinato (x) in integrirano vrednost površine vrha kot absciso (y). Narišite graf, da dobite ravno črto, ki poteka skozi izhodišče. Regresijska enačba je y1=1.510 4×106x-1.177 2×105 (r=0.999 9), {{10} }.644 0×106x-6.3836×105 (r=0.999 9). Rezultati kažejo, da imata ehinaceazid in stilbenski glikozid dobro linearno razmerje v masnem območju od 0.159 3 do 0.955 8 ug in 0.385 3 do 4.623 5 ug.

Cistanche Tubulosa

2.3.2 Preskus natančnosti

Natančno odvzemite 10 µL mešane referenčne raztopine in ponovite injiciranje 6-krat pod kromatografskimi pogoji "2.1". RSD površin vrhov ehinakozida in stilbenskega glikozida je bil izmerjen na 0.66 % oziroma 0,59 %, kar kaže, da je natančnost instrumenta dobra.

2.3.3 Preskus stabilnosti

V skladu z metodo pod "2.1" vzemite ta izdelek (št. serije 20191205) za pripravo testne raztopine, vbrizgajte vzorce za merjenje ob 0 h, 4 h, 8 h, 12 h, 20 h in 24 ur po pripravi in ​​zabeležite površino vrha. , je relativni standardni odklon med 2,37 % in 2,79 %. Rezultati kažejo, da je testna raztopina stabilna v 24 urah.

2.3.4 Preskus ponovljivosti

Vzemite 6 alikvotov iste serije preskusnih vzorcev (številka serije 20191205) in vbrizgajte vzorce za merjenje v skladu s kromatografskimi pogoji pod "2.1". Rezultati Relativni standardni odklon ehinaceazida je bil 1,48 % z dobro ponovljivostjo; relativni standardni odklon stilbenskega glikozida je bil 1,10 % z dobro ponovljivostjo.

Cistanche Tubulosa

2.3.5 Določitev stopnje okrevanja

Sprejmite dodajanje in predelavo vzorca, da zagotovite 50% količine vzorca (0,3 g) testnega vzorca in vsebnost vzorčenja 1.0:0 .5, 1.{{10}}:1.0, 1.0:1,5 in natančno absorbirajo rezervno raztopino referenčne snovi 1 (vsebnost glikozida ehinaceje je 0.431 5 mg/mL) 1.0 mL, 2.0 mL in 3,0 mL vsakega, nato pa natančno dodajte osnovno raztopino referenčne snovi 2 (stilbenski glikozid masna koncentracija 0.8678 mg/mL) 1,25 ml, 2,50 ml oziroma 3,75 ml. Dodajte v 25 ml merilne bučke z uporabo

Posušite s puhalnikom z dušikom. Nato natančno stehtajte 9 vzorcev iste serije z znano vsebino (št. serije 20191205, vsebnost ehinaceazida je 7.810 2 mg/g, vsebnost stilbenskega glikozida je 14.232 4 mg/ g), količina vzorca vsakega vzorca pa je Količina vzorca preskusnega vzorca je približno 0,15 g. Dodajte ga v zgornjo merilno bučko. Pripravite ga v skladu z metodo pod preskusno raztopino. Izmerite ga v skladu z zakonom. Izračunajte stopnjo okrevanja. Rezultat je enostaven.

Povprečni izkoristki stilbenskih glikozidov in stilbenskih glikozidov so bili 98,28 % oziroma 98,43 %, RSDs pa 1,56 % oziroma 0.97 %, kar kaže na dobro natančnost instrumenta.

ČE VAS ZANIMA TA ČLANEK, NAS LAHKO KONTAKTIRATE:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Trgovina za več podrobnosti o specifikacijah:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop