SLC37A2, fosforju sorodna molekula, poveča število celic gladkih mišic v kalcificirani aorti Ⅱ

Rezultati

Iščite kandidatne molekule vpoapnen zaradi fosfatovAoSMC. Za iskanje molekul, katerih izražanje se poveča v kalcificiranem AoSMC, je bila izvedena analiza mikromrež DNA približno 26 genov000 z uporabo mRNA kalcificiranega AoSMC in nekalcificiranega AoSMC. Slika 1 prikazuje HeatMap različnih genov, izraženih med AoSMC, ki niso gojeni z 2,6 mM, in tistimi, ki so bili gojeni z 2,6 mM P 12 dni. Skupaj 3066 genov se je povečalo za več kot dvakrat na kultiviranem AoSMC v primerjavi z nekulturnim. Geni s povečanim izražanjem so bile molekule, povezane s tvorbo osteoblastov, kot so osteopontin, periostinski osteoblast-specifični faktor (POSTN), Wnt3, interlevkin-6 (IL-6) inrastni faktor fibroblastov23 (FGF23) kot tudi več molekul v superdružini SLC (tabela 1). Med temi molekulami smo se osredotočili na SLC37A2, za katero se je mRNA povečala približno 3,1-krat na AoSMC, gojenem z 2,6 mM P 12 dni, v primerjavi z AoSMC, ki ni bila gojena z 2,6 mM P. Poročali so, da je SLC37A2 povezan z regulacijo P, vendar njegova podrobna funkcija ni znan učinek vnetja na izražanju SLC37A2.Vaskularna kalcifikacijaPoročali so, da ga spodbuja vnetje, zato smo preučili, ali na mRNA SLC37A2 vpliva vnetni odziv. 24 ur po zdravljenju z LPS se je IL-6 znatno povečal v primerjavi z AoSMC, ki ni bil zdravljen z LPS (slika 2A). Ti rezultati so bili vidni tudi 72 ur po zdravljenju z LPS. Med skupinami ni bilo pomembnih razlik v izražanju SLC37A2mRNA (slika 2B).

KLIKNITE TUKAJ ZA NARAVNI ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE S 25 % EHINAKOZIDA IN 9 % AKTEOZIDA ZA DELOVANJE LEDVIC

Podporna storitev Wecistanche-največjega izvoznika cistanche na Kitajskem:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Trgovina za več podrobnosti o specifikacijah:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Ekspresija SLC37A2 v kalcificiranem AoSMC, ki ga povzroči fosfat. Da bi ugotovili, ali je SLC37A2 vpleten v kalcifikacijo, smo pregledali ekspresijo mRNA SLC37A2 na nekalcificiranem in kalcificiranem AoSMC (slika 3). Kalcifikacija je bila opažena v AoSMC, gojenih z 2,6 mM P 6 dni, naprednejša kalcifikacija pa je bila opažena v AoSMC, gojenih z 2,6 mM P 12 dni (slika 3A). mRNA Runx2 se je znatno povečala na kalcificiranem AoSMC v primerjavi z nekalcificiranim AoSMC (slika 3B). mRNA SLC37A2 se je začela znatno povečevati 3. dan pri kalcificiranem AoSMC, 9. dan pa se je kalcificiran AoSMC znatno povečal za približno dvakrat v primerjavi z nekalcificiranim AoSMC (slika 3B). 3C). Ekspresija proteina SLC37A2 se je 6. dan znatno povečala za približno dvakrat v kalcificiranem AoSMC v primerjavi z nekalcificiranim AoSMC (slika 3D).

Izražanje SLC37A2 pri podganah v modelu CKD.

Da bi razkrili, ali je SLC37A2 vključen v vaskularno kalcifikacijo in vivo, smo pregledali ekspresijo mRNA SLC37A2 na žilah podgan s kronično ledvično boleznijo, ki jih povzroča adenin. Podgane s kronično ledvično boleznijo, ki jih povzroča adenin, so bile ustvarjene v skladu s protokolom, prikazanim na sliki 4A. Tabela 2 prikazuje telesno težo in biokemične podatke na dan žrtvovanja. Telesna teža odz adeninom povzročena kronična ledvična bolezenpri podganah je bil bistveno nižji v primerjavi s podganami brez KBB. V primerjavi s skupino brez kronične ledvične bolezni so imele skupine s kronično ledvično boleznijo višje ravni P in Cr v plazmi ter nižje ravni Ca v plazmi in 24--urno izločanje P, Ca in Cr z urinom. Poleg tega so bili ti rezultati izrazitejši v skupini s KLB-HP, kot je razvidno iz prejšnjih študij.37,39) Tako se je ledvična funkcija zmanjšala v skupini s KLB, zlasti v skupini s KB-HP. Pregledali smo ekspresijo mRNA v aortnih žilah podgan s kronično ledvično boleznijo (slika 4). Čeprav ni bilo bistvenih razlik v izražanju mRNA Runx2, transkripcijskega faktorja, ki se premakne zgodaj v mehanizmu vaskularne kalcifikacije, se je med skupinami (slika 4B) izražanje mRNA osteopontina znatno povečalo v skupini s CKD-HP v primerjavi s skupino brez Skupina CKD inSkupina CKD-LP(Slika 4C). Ekspresija mRNA SLC37A2 je bila prav tako znatno povečana v skupini CK D-HP v primerjavi s skupino brez CKD in skupino CKD-LP (slika 4D). Ker so bile pri teh podganah velike individualne razlike, smo preučili korelacijo med osteopontinom in mRNA SLC37A2 in ugotovili pomembno korelacijo med tema molekulama (slika 4E). Histološki pregled torakoabdominalne aorte je pokazal medialno kalcifikacijo le v aorti skupine CKD-HP (slika 5A). Da bi pregledali ekspresijsko mesto SLC37A2 na aorti, smo izvedli imunsko barvanje aorte CKD-HPrats. SLC37A2 je bil močno izražen na območju, kjervaskularna kalcifikacija(slika 5B).

Slika 1. HeatMap različno izraženih genov med AoSMC, ki niso kultivirani z 2,6 mM P, in AoSMC, gojenimi z 2,6 mM P. Rdeča barva predstavlja gene z visoko stopnjo signala, zelena pa gene z nizko stopnjo signala. Gladke mišične celice aorte AOSMC. Oglejte si sliko v spletni različici.

Diskusija

Raziskali smo kandidate P-povezane molekule, ki sodelujejo pri kalcifikaciji žil. Naši rezultati so pokazali, da je SLC37A2 ena od molekul, ki se povečujejo zvaskularna kalcifikacijain vitro in in vivo.

Družina SLC37 spada v superdružino SLC in vključuje proteine: SLC37A 1-440) Družina SLC37 vsebuje transmembranske proteine ​​v membrani endoplazmatskega retikuluma in ima zaporedje, ki je homologno bakterijskemu organofosfatfosfatnemu antiporterju. (41) SLC37A4 je bolj znan kotprenašalec glukoze6-fosfata.(2-44 Vendar pa je malo poročil o SLC37A2 in podrobnosti o njegovi funkciji niso v celoti razumljene. SLC37A2, znan tudi kot SPX2, je obilno izražen v mišjih makrofagih, vranici, timusu in belem maščobnem tkivu (WAT ) modelov genetsko debelih miši in osteoklastom podobnih celic, pridobljenih iz celic Raw264.7. (45.6) Protein SLC37A2 prenaša izmenjave glukoza-6-fosfat/fosfat in fosfat/fosfat. (4) Nedavno so poročila pokazala povezavo SLC37A2 z boleznijo živali. (47-49) Napaka SLC37A2 povzročakraniomandibularna osteopatija(CMO), samoomejujoča proliferativna bolezen kosti pri pasmah terier. (47) Pri govedu molznicah je homozigotna mutacija SLC37A2 odgovorna za embrionalno smrt. (8.9) Poleg tega. SLC37A2 velja za tarčo ciljnih genov vitamina D. (torej) Upoštevan je bil tudi potencial ciljnega gena fosfor-Ser294 progesteronskega receptorja pri napredovanju raka dojke (1). Poročali so, da lahko vnetje povzroči in poslabša vaskularno kalcifikacijo. (2s26) Še več. SLC37A2 je obilno izražen v makrofagih in WAT, na katere vpliva infiltracija makrofagov. (s) Zato. menili smo, da bi lahko bila SLC37A2 molekula, izražena med vnetjem. Vendar pa naše ugotovitve niso pokazale povečanja izražanja SLC37A2 v AoSMC, ki je bil izpostavljen vnetnemu odzivu, zdi se, da na to molekulo vnetna stimulacija ne vpliva neposredno. SLC37A2 je lahko vpleten v vaskularno kalcifikacijo prek mehanizma, ki ni vnetje.

Poročali so, da SLC37A2 deluje kot P-vezanprotiporter. (41) Poleg tega so poročali, da je SLC37A2 ciljni gen za vitamin D, gen SLC37A2 pa vsebuje glavno mesto za vezavo vitamina Dreceptor (ss2). Sistematično povezane spremembe v izražanju genov SLC37A2 in krožečih oblik vitamina D. opazili v človeških mononuklearnih celicah periferne krvi. (50) Receptorji vitamina D se vežejo na 1a, 25-dihidroksi vitamin D, ki je metabolit vitamina D, in uravnavajo izražanje genov. lo, 25-dihidroksivitamin D, deluje pri absorpciji Ca in P v črevesju, mobilizaciji Ca v kosteh in reabsorpciji Caina v ledvicah. (3) Obstaja poročilo, da je bil pri podganah na modelu kronične ledvične bolezni, povzročene z adeninom, serumski la, 25-dihidroksi vitamin D bistveno višji pri podganah z visoko vsebnostjo p diete z napredovalo vaskularno kalcifikacijo v primerjavi s podganami z nizko -p dietni vnos.39) SLC37A2 je lahko povezan z regulacijo P prek vitamina D. Potrebne so nadaljnje študije za pojasnitev, da vitamin D vpliva na izražanje SLC37A2 in vitro in vivo.

Dokazano je, da je mehanizem vaskularne kalcifikacije podoben mehanizmu tvorbe kosti. Pomanjkanje SLC37A2, ki ga povzroča CMO, je klinično primerljivo s človeško infantilno kortikalno hiperostozo, znano tudi kot Caffeyjeva bolezen.7 Poleg tega obstajajo poročila, da se SLC37A2 izraža v kostnem mozgu in osteoklastih. o Hytone et al. (7 so domnevali, da je disfunkcija SLC37A2 bi povzročil neravnovesje v delovanju osteoblastne in osteoklastične tvorbe kosti in posledično povzročil hiperostozo.

Runx2 je bistven transkripcijski faktor za vaskularno kalcifikacijo. Poroča se tudi, da je Runx2 transkripcijski faktor diferenciacije osteoblastov, izražen v razvoju epitelijskih celic dojke. (s435) Zdi se, da je Runx2 potreben za regulacijo fosfor-Ser294 progesteronskih ciljnih genov, ki so povezani z napredovanjem raka dojke. SLC37A2 velja za kandidata za ciljni gen fosfor-Ser294 progesteronskega receptorja. (s1) Zato velja, da lahko Runx2 uravnava SLC37A2. V tej študiji je bila ekspresija mRNA SLC37A2 v aorti podgan CkD povezana z mRNA osteopontina, ki cilja na gen Runx2.