Študija o kemičnih sestavinah Cistanche Deserticola, kitajskega zeliščnega zdravila za hranjenje ledvic in krepitev Yang
Mar 09, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
uvod
Cistanche deserticolaki spada v družino Orobanchaceae, je suho mesnato steblo Cistanche deserticola, ki je sladko, slano in toplo. Ima učinke toniziranja ledvic, krepitve janga, vlaženja črevesja in sproščanja črevesja. Uporablja se predvsem za zdravljenje impotence, prehlada in bolečin v pasu in kolenih, neplodnosti, suhosti črevesja in zaprtju. Poročali so tudi o farmakoloških učinkih Cistanche deserticola.
Inštitut za tradicionalno kitajsko medicino Kitajske akademije za tradicionalno kitajsko medicino je izvedel kemijske in farmakološke študije oCistanche deserticola. Dokazano je, da izvleček etanola vpliva na imunski sistem. Devet spojin je bilo ločenih in identificiranih kot D-manitol - sitosterol, daukosterol, jantarna kislina, triakontanol, 8-epibrucin glukozid, betain, glikolipid kofeinske kisline in polisaharidne spojine. Poleg manitola in 8-epibrucin glukozida so bile iz Cistanche deserticola prvič pridobljene tudi druge komponente. Glikolipid kofeinske kisline, betain, manitol, jantarna kislina in druge spojine imajo različne fiziološke aktivnosti. Vplivajo na imunski sistem, spolno funkcijo, srčno-žilni sistem, jetra, zavirajo staranje itd.
Eksperimentalni del
Tališče smo izmerili z mikroskopom Boetius PHMK, termometer pa nismo nastavljali; Masno spektrometrijo (EI) smo določili z instrumentom MMH 70-70 (UK), FD pa z M-80 plinsko kromatografsko-masnim spektrometrom (Japonska); Jedrska magnetna resonanca (vodikov spekter) je bila določena z instrumentom tipa JEOL FX 90Q (Japonska); ultravijolični spekter je bil določen z instrumentom tipa UV-3000; infrardeči spekter je bil izmerjen z instrumentom tipa Hitachi 260-50, tabletiranje KBr in silikageli so bili izdelani v pomorski kemični tovarni Qingdao, gel LH-20 je bil izdelan na Švedskem. Posušena mesna stebla Cistanche deserticola so bila kupljena pri pekinškem podjetju za medicinske materiale, identificiral pa jih je Zhang Yanzhen.
1. Ekstrakcija in ločevanje
Cistanche deserticola zdrobimo, perkoliramo s 95-odstotnim etanolom, topilo obnovimo, raztopimo v majhni količini vode, ekstrahiramo z etrom, kolonsko kromatografijo na silikagelu, eluiramo s petroleter-eter (6:4), da dobimo bele kristale ( JAZ). Vodno plast, ekstrahirano z etrom, uparimo, segrejemo in raztopimo z etanolom, ohladimo, da dobimo flokulentno oborino (II). Cistanche deserticola se prelije s 50 odstotki etanola. Ekstrahiramo z etil acetatom, kolonsko kromatografijo s silikagelom, eluiramo z etil acetatom, vsak po 20ml (enako spodaj). Skupno smo zbrali 37 vzorcev in pregledali s tankoplastno kromatografijo. Del, ki je vseboval kristal (III), ki je prvotno iztekel, smo združili. 24 ~ 37 vzorcev smo odfiltrirali iz belih kosmičev (II) in jih uparili do suhega. Ostanek izpostavimo kolonski kromatografiji s silikagelom in eluiramo z butanon-etil acetatom-benzenom-vodo (4:3:2:0,2). Zbranih je bilo 12 vzorcev, od katerih je bilo 8 do 11 vzorcev ločenih od oranžnih kristalov; vodno plast, ekstrahirano z etil acetatom, ekstrahiramo z n-butanolom, kolonsko kromatografijo s silikagelom in eluiramo s kloroformom-metanolom-vodo (6:4:1). Peti vzorec je raztopil tankorezninsko kristalizacijo (IV), drugi del tankoplastne kromatografije v kombinaciji z modrim fluorescenčnim delom, nato pa uporabil kolonsko kromatografijo s silikagelom, eluiran s kloroformom-metanolom-vodo (7:3:2,5). ), uporabil isto metodo v kombinaciji z modrim fluorescenčnim delom, prečkal kolono gela LH-20, eluiral z metanolom in vodo (1:1). Osmi vzorec je raztopil nekaj rumenega prahu (V), nadaljeval z eluiranjem na 37 delov, v kombinaciji z zahtevanim delom zgoraj, kolonsko kromatografijo s silikagelom, namažemo z butanon-etil acetatom-benzenom-vodo (4:3:2:0,2), odrežemo modri fluorescentni segment in eluiramo z metanolom, da dobimo svetlobo rjav prah (VI).
95-odstotni etanolni ekstrakt, odstranitev petroletra in diklorometana, raztapljanje v metanolu, nizkotlačna kolonska kromatografija s silikagelom, eluiranje z metanol-kloroformom (9:l), po 20 ml, 18. ~ 28. del je raztopil nekaj brezbarvnih kristalov (VII) ; ekstrahirali z vodo ostanek Cistanche deserticola po ekstrakciji z etanolom, nato koncentrirali ostanek, ohladili, raztopili veliko število belih kristalov (VIII), odstranili kristalizirano vodno raztopino in nato obdelali s 4-kratno količino etanola, da bi dobili več padavin (IX).
2. Identifikacija
Spojina I: beli igličasti kristal je bil dobljen s prekristalizacijo z acetonom, mp136 ~ 137 stopinj. Reagent z žveplovo kislino, koncentriranim anhidridom ocetne kisline, je pokazal pozitivno reakcijo (zeleno). EIMS m/z:414 (M plus). Vrednost Rf za tankoplastno kromatografijo in infrardeči spekter sta bila skladna s standardom - Sitosterol, zato je potrjeno kot - Sitosterol.
Spojino II prekristaliziramo s segrevanjem in dvakratnim refluktiranjem z etanolom, da dobimo belo kosmičasto oborino, mp290 ~ 291 stopinj. Reagent z žveplovo kislino, koncentriranim anhidridom ocetne kisline, je pokazal pozitivno reakcijo (zeleno), - reagent naftol je pokazal pozitivno reakcijo. EIMS m/z: 396 (bazni vrh), 382, 255, 213, 81, 57, 43. Tankoplastna kromatografija je bila skladna z znanim produktom daukosterola in tališče zmesi ni padlo. Potrjeno je bilo kot daukosterol.
Spojina III metanol je rekristaliziral v nekaj podolgovatih kristalov, mpl87 ~ 189 stopinj, pH 2. EIMS m/z: 119 (M plus 1), 118 (M plus), 101, 100, 74, 73, 55 (osnovni vrh), 45, 28, 27. IR (KBr) cm-1: 3100 ~ 2500 (širina, OH), 1690 (C=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. RF vrednost tankoplastne kromatografije je enak standardu jantarne kisline. Poleg tega je skladen s standardnim masnim spektrom in standardnim infrardečim spektrom jantarne kisline, tališče zmesi pa se ne zniža. Potrjeno je kot jantarna kislina
Spojino IV prekristaliziramo z etanolom kot belo sijočo trdno snov, mp83 ~ 84 stopinj. EIMS m/z: 420 (M plus -H2O), 57 (osnovni vrh). Vrednost Rf tankoplastne kromatografije je enaka vrednosti znanega triakontanola, tališče zmesi pa se ne zniža. Zgornji podatki so skladni s triakontanolom, navedenim v literaturi.
Spojina VI: po raztapljanju z acetonom smo izvedli kolonsko kromatografijo s silikagelom in eluirali s 60 odstotki metanola, da smo dobili svetlo rumene tanke amorfne kristale, ki so lahko topni v vodi in topni v metanolu, etanolu in acetonu, reagent - Naftol je pokazal pozitivno reakcijo . IR (KBr) cm-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C=C), 1440, 1350 , 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV λ nm (log ε): 218 (sh, 4,30), 249 (3,91), 291 (4,08), 330 (4,15). H-NMR (CD3COD3) 5 ppm: 1,18 (3H, D, J=6, CH3 na ramnozi), 2,75 (2h, t, J=7.2, 2H na položaju C), 4,75 ( 1H, D, J=8, C1-H na glukozi), 5,17 (1H, D, J=1.8, C1-H na ramnozi), 4,20 ~ 3,30 (12H, m, 2H na položaju C, 6H na glukozi, 4H na ramnozi), 6,27 (1H, D, J=16, 1H na položaju C), 7,52 (1H, a, J {{76} } Položaj C (1H), 6,60 (1H, a, J=8, C5 "'- H), 6,90 (1H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7,10 (1H, D, J=2, C2 "'- H), 6,70 (1H, D, J=2, C2-H), 6,65 (1H, D, J {{ 105}}, C5-H), 6,52 (1H, DD, J=8/2, C6-H), H-NMR (DMOS) 8 ppm: 7,43 (1H. s, OH), 8,07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), izginilo po poslabšani izmenjavi vode [a] 22D: - 68.37 stopinj (C {{126} }.67MeOH).FDMS m/z:647 (M plus plus Na), 625 (M plus plus 1), 624 (M plus ), 479 (M plus 1-ramnozil), 478 (M plus -ramnozil ), ki je v skladu z molekulsko formulo C29H36O15.Po kislinski hidrolizi spojine VI sta na papirnem kromatu prikazani dve rjavi lisi grafijo. Vrednost Rf je popolnoma skladna z ramnozo in glukozo, tališče pa ne pade, če ga mešamo z znanim akteozidom. Zgornji podatki so skladni s 3,4-dihidroksi skupino, opisano v literaturi - Fenetoksi-o- - L-ramnozil (1 → 3) - 4-o-skupina kofeinske kisline- D- glukopiranozid je v osnovi karcinogen.
Spojina VII je bel kristal, pridobljen s prekristalizacijo aceton metanola, nad mp299 stopinj (razpad), izjemno topen v vodi, zlahka raztopljen in topen v etanolu in metanolu. Alkaloidni reagent kaže pozitivno reakcijo. Eksperimentalne vrednosti (odstotki) elementarne analize: C47.29,H9.16,N10.54; teoretične vrednosti (v odstotkih): C47.54,H9.52,N11.11. Ustreza molekulski formuli C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) cm-1: 3360 (povezani NH, OH), 2940, 1620 (C=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- NMR (D20) 5 ppm: 3,28 (9 H, s, 3 x CH3), 3,88 (2 H, s, CH2), 4,68 (D2O). EIMS m/z:117(M plus), 100, 85, 73, 59, 58 (osnovni vrh), 44, 42. Tankoplastna kromatografija je popolnoma skladna z vrednostjo Rf betainskega standarda in tališčem mešanica ne pade. Spekter jedrske magnetne resonance, infrardeči spekter in masni spekter so skladni s standardnim spektrom betaina, zato je betain prepoznan.
Spojina IX: raztopimo v vodi, ekstrahiramo z n-butanol-kloroformom (1:4) in odstranimo nečistoče. Vodno plast smo obdelali s 4-kratno količino etanola, oborino raztopili v vodi, razbarvali z vodikovim peroksidom in majhne molekularne spojine odstranili z dializo. Membrano smo obdelali s 5-kratno količino etanola, da smo dobili svetlo rumeno oborino. Fehlingova reakcija je bila pred hidrolizo oborine negativna, po hidrolizi pa je nastala rjavkasto rdeča oborina. Po kislinski hidrolizi smo hidrolizat podvrgli papirni kromatografiji. V primerjavi s standardnim sladkorjem je bila zaznana samo glukoza, zato je bilo potrjeno, da so bili zaznani polisaharidi, ki so pretežno sestavljeni iz glukoze.
