Študija o optimizaciji tehnologije ekstrakcije in antioksidativne aktivnosti polisaharidov iz cvetov Yunnan Coffee Arabica

Povzetek: Optimizirati tehnologijo ekstrakcije in preučitiantioksidantdejavnostpolisaharidiiz kavnega cveta (ACP) so raziskali ultrazvočno temperaturo, ultrazvočni čas, razmerje med tekočino in trdno snovjo, ultrazvočno moč, čas potopitve vzorca in volumski odstotek etanola z uporabo izkoristka ekstrakcije polisaharida kot indikatorja. Nato so bili ultrazvočni temperatura, ultrazvočni čas in ultrazvočna moč uporabljeni kot glavni dejavniki vpliva, tehnologija ekstrakcije je bila optimizirana z metodo odzivne površine.antioksidantaktivnost ACP so raziskali z učinki DPPH· in ABTS plus · ter s testi FRAP. Rezultati so pokazali, da so bili optimalni tehnološki pogoji za ultrazvočno ekstrakcijo: ultrazvočna temperatura 69,5 stopinj, ultrazvočni čas 93 min, ultrazvočna moč 175 W, razmerje tekočina-trdna snov 10:1 mL/g, čas potopitve vzorca 3{{ 17}} min in volumski odstotek etanola 80 odstotkov. Pri tem je bil izkoristek polisaharidov 2,292 odstotka. Rezultati so pokazali, da je bila vrednost IC50 na podlagi DPPH· lovilnega učinka ACP 3,844 mg·mL−1, ABTS plus · lovilna aktivnost 0,921 mmol Trolox/g ACP. Vrednosti FRAP za ACP s testom FRAP so bile 0,0565 mmol Fe2 plus /g ACP, kar je pokazalo, da ima ACP šibkoantioksidantdejavnost. Ta študija bi zagotovila teoretično podlago za celovito uporabo in razvoj kavnih stranskih proizvodov.

Ključne besede:kavni cvetovi;polisaharid;ekstrakcija;antioksidativno delovanje

Kavaje rastlina iz rodu Rubiaceae (Coffea), razširjena predvsem v državah, kot so Južna Amerika, Srednja Amerika, Afrika in Azija, gojijo pa jo v več kot 80 državah po vsem svetu [1]. Po "kitajski Materia Medica" ima kava osvežilne, diuretične in želodčne učinke, uporablja pa se predvsem pri duševni utrujenosti in izgubi apetita. Pogosto se uporablja kot osvežilno, diuretično in želodčno zdravilo. Sodobne raziskave so pokazale, da kava vsebuje vrsto aktivnih sestavin, kot so alkaloidi, fenolne kisline, flavonoidi in terpeni, ki imajo različne farmakološke aktivnosti, kot so zaščita jeter, nevroprotekcija,antioksidantin antidiabetik [2-3]. moje državekavapri gojenju prevladuje drobnozrnata kava, več kot 99 odstotkov pa je distribuirane v Yunnanu. Drobnozrnata kava Yunnan je bogata s snovmi, poleg kofeina, klorogenske kisline, trigonelina in drugih sestavin vsebuje tudi askarozide

I~II[4], panikulozid VI[4], kofarilozid I[4], vilanovan I[4], kafarolidi A~H[5], kafruenol AB[6], kafruoni AD[6] in kafruolid AB[7] in nekaj novih terpenoidov. Med njimi je bilo potrjeno, da imajo kafarolidi C, D in F določeno aktivnost aktiviranja agregacije trombocitov in vitro [5]; caffruenol AB in caffruolide AB zavirata nastajanje NO, ki ga povzroči lipopolisaharid, v 264,7 makrofagih [7]. S poglobljenim preučevanjem kave se dodana vrednost kave še povečuje. V zadnjih letih so kavni stranski proizvodi bogati s fenolnimi kislinami, flavonoidi, terpeni, alkaloidi in drugimi biološkimi

Učinkovine, ki se lahko uporabljajo kot naravni in trajnostni viri učinkovin kot nprantioksidanti, zaščita jeter in zaščita živcev, povzročajo vse večjo zaskrbljenost raziskovalcev pri raziskavah stranskih produktov kave [8–10]. Campa et al. poročali, da kavni listi vsebujejo fenolne spojine [11]; Chen je pregledal bogate kemične sestavine alkaloidov, flavonoidov, fenolnih kislin, terpenov itd. v kavnih listih in njihove farmakološke aktivnosti, kot so antioksidativne, protivnetne in antibakterijske. [12] in proučevali učinke metod predelave kavnih listov in starosti listov na njihovo kemično sestavo in aktivnost [13].

Poleg tega sta Fu Xiaoping et al. [14–15] so ugotovili, da ima surovi izvleček majhne kavne lupine Yunnan določen zaščitni in obnovitveni učinek na poškodovane endotelijske celice človeške popkovne vene in ima tudi potencialantioksidantučinke in ugotovil, da sta glavni cvet cianidinov cianidin-3-glukozid in cianidin-3-rutinozid.

Kavni cvetovi so pogosto zavrženi kot glavni stranski proizvod v industriji gojenja kave. Vendar pa so obstoječe študije pokazale, da so cvetovi kave bogati s kemičnimi sestavinami. Stašenko idr. [16] so uporabili GC-MS za analizo hlapnih in polhlapnih komponent v majhnih cvetovih kave, rezultati pa so določili skupno 150 spojin z vsebnostjo n-pentadekana. Najvišja, sledi geraniol. Poleg tega Nguyen et al. [17] so preučevali učinkovine v kavnih cvetovih in ugotovili, da imajo kavni cvetovi visoko vsebnost fenolnih spojin, zato se kavni cvetovi lahko uporabljajo kot surovine za pridobivanje naravnihantioksidantaktivne sestavine. Poleg tega kavni cvetovi vsebujejo tudi kofein in trigonelin. Kofein je povezan z zmanjšanim tveganjem za nevrodegenerativne bolezni [18–19]

Trigonelin lahko prepreči sladkorno bolezen in poškodbe ledvic, poleg tega pa vpliva tudi na zdravljenje nevrodegenerativnih bolezni [20-21]. Pinheiro et al. [22] so analizirali vsebnost štirih aktivnih komponent trigonelina, klorogenske kisline, galne kisline in kofeina v kavnih cvetovih pri različnih metodah sušenja in ekstrakcije s HPLC, med katerimi sta imela najvišjo vsebnost kofein in trigonelin; Antioksidativno delovanje smo ovrednotili z ABTS in DPPH eksperimentoma, ki sta potrdila, da kavni cvet deluje antioksidativno in se lahko uporablja kot potencialna surovina za pripravo čajnih napitkov. Trenutno je malo poročil o raziskavah kavnih cvetov, vendar je iz obstoječih poročil razvidno, da imajo kavni cvetovi široke možnosti uporabe kot potencialni vir bioaktivnih spojin.

Polisaharidiso makromolekularne spojine, sestavljene iz več kot 10 monosaharidov, vezanih z glikozidnimi vezmi, in jih široko najdemo v živalih, rastlinah in mikroorganizmih. Polisaharidi so strukturno kompleksni, z različnimi konformacijami in relativnimi molekulskimi masami ter sekundarno strukturo znotrajverižnih in medverižnih vodikovih vezi. Sodobne študije so pokazale, da imajo polisaharidi farmakološke aktivnosti, kot so antioksidanti [23-24], zavirajo staranje [25], uravnavajo imunski sistem [26], delujejo protivnetno [27] in delujejo proti tumorjem [28]. Biološka aktivnost polisaharidov je povezana z njihovo čistostjo, kemijsko strukturo, topnostjo itd. V zadnjih letih je biološka aktivnost polisaharidov postala raziskovalna točka naravnih zdravil, je pa tudi kanal za odkrivanje novih zdravil in razvoj funkcionalnih živil. . Zato imajo polisaharidi pomembno vlogo na področju medicine in prehrane. Yunnan moje države je glavno pridelovalno območje za sajenje kave in kavni cvetovi imajo potencialno razvojno vrednost, vendar je malo raziskav o razvoju kavnih cvetov Yunnan in potencialna vrednost kavnih cvetov ni bila izkoriščena. Zato ta prispevek vzame cvetove drobnozrnate kave Yunnan kot raziskovalni objekt za izvedbo raziskav o njenih aktivnih polisaharidah, s ciljem poglobljeno raziskati celovito uporabno vrednost drobnozrnate kave Yunnan.

V tem dokumentu jepolisahariddonos je bil uporabljen kot ocenjevalni indeks za optimizacijo procesa ekstrakcije polisaharidov in antioksidativne zmogljivosti kavnih cvetov, zbranih v mestu Baoshan v provinci Yunnan, da bi zagotovili osnovne podatke za nadaljnji razvoj biološko aktivnih polisaharidov. In zagotovite referenco za preučevanje drobnozrnate kave Yunnan in izboljšanje njene dodane vrednosti.

1 Materiali in metode

1.1 Materiali in instrumenti

Kavacvetje Mesto Baoshan, provinca Yunnan; Brezvodni alkohol Tianjin Chemical Reagent Co., Ltd.; Anthrone čistost 98.0 odstotkov, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; koncentrirana žveplova kislina, klorovodikova kislina Chongqing Chuandong Chemical Co., Ltd.; 1,1-difenil-2- trinitrofenilhidrazin (DPPH), 2,2'-diaza-bis-3-etilbenzotiazolin{{10}}sulfonska kislina (ABTS), 2, 4,6-tripiridiltriazin (TPTZ), čistost rutina 98.0 odstotkov, Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; vodotopni vitamin E čistosti 98,0 odstotkov, Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd.; železov klorid heksahidrat analitsko čist, zahodni

Long Science Co., Ltd.; Analitska stopnja kalijevega persulfata, tovarna kemičnih reagentov Damao Tianjin; PBS pufer, natrijev acetatni pufer Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Kliknite tukaj, če želite izvedeti več o Rich inpolisaharid

Cistanche instant kavni izdelek

FA2104N Elektronska tehtnica, 722-Spektrofotometer Shanghai Qinghua Technology Co., Ltd.; Ultrazvočni instrument KQ-250DB, SHZ-D (Ⅲ) Vakuumska črpalka za obtočno vodo Gongyi Yuhua Instrument Co., Ltd.; Večnamenski brusilnik Xuman 1000Y Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; 800 električna centrifuga Jintan Fuhua Instrument Co., Ltd.; VFD-3000 vakuumski zamrzovalni sušilnik Beijing Bo Yikang Experimental Instrument Co., Ltd.

1.2 Eksperimentalna metoda

1.2.1 Ekstrakcija kavnega cvetapolisaharidiGlejte metodo Zheng Tingting et al. [29] s spremembami. Kavne cvetove, zbrane v mestu Baoshan v provinci Yunnan, smo posušili v senci pri sobni temperaturi, zdrobili v prahu in jih za uporabo presejali skozi 80-mrežasto sito. Odtehtajte 20 g prahu kavnega cvetja, dodajte 20,0 ml čiste vode, namakajte 30 minut,

Ultrazvočno pri 100 W 30 minut pri 40 stopinjah, ohladimo na sobno temperaturo in filtrat obdržimo po vakuumski filtraciji. Filtratu smo dodali etanol do koncentracije 80 odstotkov za obarjanje in pustili stati 12 ur. Po 10-minutnem centrifugiranju pri 4000 vrt/min supernatant zavržemo, oborino pa raztopimo v vodi in liofiliziramo pri -80 stopinjah, da dobimo surovi polisaharid.

Pripravite 5 mg·mL-1 raztopino polisaharida kavnega cveta in odstavite.

1.2.2 Priprava polisaharidne standardne krivulje in določanje vsebnosti polisaharidov v kavnih cvetovih. Glukozna standardna krivulja je bila narisana glede na metodo antron-žveplove kisline [30]. Pripravite 0.0, 25.{{10}}, 50.0, 100.{{23} }, 150,0 in 200,0 ug/mL standardne raztopine glukoze. Natančno odpipetirajte 1,00 mL zgornje standardne raztopine glukoze z različnimi koncentracijami, dodajte 1,00 mL čiste vode in jo postavite v 25 mL epruveto z zamaškom. Dodajte 5,0 ml 2,1 mg·mL-1 raztopine antron žveplove kisline, dobro pretresite, ohladite v kopeli z ledeno vodo, segrevajte v kopeli z vrelo vodo 7 minut in hitro ohladite na sobno temperaturo v kopeli z ledeno vodo. Uporaba deionizirane vode kot slepe kontrole,

Absorbanco A smo izmerili kolorimetrično pri 625 nm. Če upoštevamo vsebnost brezvodne glukoze kot absciso (0.0, 25.0, 50.0, 1{{1{{12} }}}0.0, 150.0, 200.0 ug) in vrednost absorbance kot ordinato, narišite standardno krivuljo in enačba standardne krivulje je: Y=0.0051X−0.0092 ( R2=0.9970) (kjer je: Y vrednost absorbance, X količina glukoze, ug).

Natančno odpipetirajte določeno prostornino zgoraj pripravljene raztopine polisaharida kavnega cveta 5 mg/ml v 25 ml epruveto z zamaškom in dodajte čisto vodo, da dopolnite do 2.00 ml. Dodajte 5.0 mL 2,1 mg·mL-1 raztopine antron-žveplove kisline, dobro pretresite, ohladite v kopeli z ledeno vodo, segrevajte v vreli vodni kopeli 7 minut in hitro ohladite na sobno temperaturo v kopel z ledeno vodo. Absorbanco A smo izmerili kolorimetrično pri 625 nm z deionizirano vodo kot slepo kontrolo. Dobitek polisaharida kavnega cveta smo izračunali v skladu z enačbo standardne krivulje glukoze in vsak vzorec smo ponovili 3-krat. Rezultati so bili izraženi kot povprečna vrednost, formula za izračun pa je bila naslednja:

Dobitek polisaharida kavnega cveta (v odstotkih) =X×m1×10−35×V×ms×100

V formuli: X je vsebnost polisaharidov v V volumnu raztopine polisaharida kavnega cveta, ug; V je izmerjena prostornina raztopine polisaharida, ml; 5 je koncentracija pripravljene raztopine polisaharida kavnega cveta, 5 mg·mL−1; m1 liofiliziran kavni cvet Skupna masa polisaharida, g; ms masa vzorca kavnega cveta, g.

1.2.3 Enofaktorski poskus

V procesu ultrazvočne ekstrakcije polisaharida kavnega cveta pomembni dejavniki, ki vplivajo na izkoristek polisaharida, vključujejo predvsem ultrazvočno temperaturo, ultrazvočni čas, razmerje med tekočino in materialom, ultrazvočno moč, čas namakanja in koncentracijo obarjanja alkohola. Izbranih je bilo pet ravni ultrazvočne temperature: 40, 50, 60, 70 in 80 stopinj; izbranih je bilo pet stopenj ultrazvočnega časa: 30, 60, 90, 120 in 150 min; : 1, 30: 1 ml/g pet stopenj; ultrazvočna moč izbere pet stopenj 100, 125, 150, 175, 200 W; čas potopitve izbere pet stopenj 30, 60, 90, 120, 150 min; koncentracija etanola izbere pet stopenj 75 odstotkov, 80 odstotkov, 85 odstotkov, 90 odstotkov, 95 odstotkov pet stopenj, poskus z enim faktorjem. Pri filtriranju za enega od parametrov

, drugi dejavniki so: ultrazvočna temperatura 40 stopinj, ultrazvočni čas 30 min,

Razmerje med tekočino in materialom 10:1 ml/g, ultrazvočna moč 100 W, čas namakanja 30 min

in koncentracijo obarjanja alkohola 80 odstotkov.

1.2.4 Eksperiment optimizacije odzivne površine Po Box-Benhnkenovem principu eksperimentalne zasnove, z donosom polisaharida kavnega cveta kot odzivno spremenljivko, so bili izmed enega faktorja izbrani trije dejavniki, ki imajo največji vpliv na donos polisaharida kavnega cveta. rezultate testa, kot je prikazano v tabeli 1. Optimizacija ultrazvočne temperature z izkoristkom polisaharida kavnega cveta kot stopnje indeksa, ultrazvočnega časa in ultrazvočne moči.

1.2.5 Test antioksidativne sposobnosti

1.2.5.1 Poskusi čiščenja prostih radikalov DPPH Poskusi čiščenja prostih radikalov DPPH so bili izvedeni, kot je opisano v Ref. [31]. Vzemite 3,9 mL reakcijske raztopine 0.075 mmol/L DPPH in jo zmešajte z 100 μL raztopine polisaharidov različnih koncentracij. Reakcijo smo izvajali pri sobni temperaturi 30 minut v temi, vrednosti absorbance pa smo izmerili pri 515 nm. Z uporabo rutina kot pozitivne kontrole je bila stopnja lovljenja prostih radikalov DPPH izračunana kot: I odstotkov =[(A0–As)/A0]×100 (pri čemer je: As absorbanca raztopine vzorca; A0 je absorbanca raztopine brez vzorca), antioksidativna aktivnost pa je izražena kot 50-odstotna stopnja inhibicije (IC50).

1.2.5.2 ABTS plus poskus lovljenja prostih radikalov

ABTS plus poskusi odstranjevanja radikalov so bili izvedeni z uporabo metode, opisane v Ref. [32]. Vzemite 2 ml raztopine polisaharida in jo dodajte k 2 ml raztopine ABTS plus prostih radikalov, po enakomernem mešanju reagirajte pri sobni temperaturi 6 minut in izmerite UV absorpcijo pri 734 nm, rutin pa je pozitivna kontrola. Formula za izračun ABTS in sposobnosti lovljenja prostih radikalov je naslednja: I( odstotki )=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (kjer je As absorbanca raztopine vzorca; A0 je absorbanca raztopine brez vzorca) Standardna krivulja se določi z merjenjem Risba standardnih raztopin Troloxa z različnimi koncentracijami (I odstotkov =0.0247C −0,0046, R2=0.9937), ABTS anti-

Oksidativna aktivnost je izražena kot mmol Trolox/g.

1.2.5.3 Metoda FRAP

Metoda, opisana v ref. [33] je bil uporabljen za določanje antioksidativne kapacitete FRAP. Vzemite 5.0 mL TPTZ, 5.0 mL 20 mmol/L FeCl3 in 50 mL pufrske raztopine natrijevega acetata (300

mmol/L, pH 3,6) za pripravo delovne raztopine FRAP; 100 μL vzorca smo zmešali s 300 μL vode in 3,0 ml delovne raztopine FRAP, postavili v vodno kopel pri 37 stopinjah za 30 minut; absorbanca je bila izmerjena pri 595 nm. Pripravili smo standardno krivuljo s FeSO4 kot standardno snovjo (A=0.572C0.008, R2=0.9974) in uporabili rutin kot pozitivno kontrolo glede na standardno krivuljo

Izračunajte redukcijsko moč v mmol FeSO4/g polisaharida.

1.3 Obdelava podatkov

Vse poskuse smo ponovili trikrat in vzeli povprečno vrednost. Za načrtovanje in analizo poskusov odzivnih površin je bila uporabljena programska oprema DesignExpert 8.0.6.

2 Rezultati in analiza

2.1 Eksperimentalni rezultati z enim faktorjem

Rezultati eksperimenta z enim faktorjem so prikazani na sliki. Učinek ultrazvočne temperature na izkoristek polisaharida kavnega cveta: ultrazvočna temperatura je bila 40-80 stopinj, izkoristek polisaharida pa 1,0048 odstotka -1.7982 odstotkov. V območju 40-70 stopinj se je izkoristek polisaharida kavnega cveta postopoma povečeval s povišanjem ultrazvočne temperature, dosegel največjo vrednost pri 70 stopinjah in začel padati po 70 stopinjah. To je lahko posledica zmanjšanega izkoristka polisaharidov zaradi uničenja strukture polisaharidov kavnega cveta pod pogoji visoke temperature, o čemer je podobno poročala literatura [29,34–35]. Temperatura sonikacije je bila izbrana na 70 stopinj.

Učinek ultrazvočnega časa na izkoristek polisaharida kavnega cveta: ultrazvočni čas je bil 30-150 min, izkoristek polisaharida je bil 1,0369 odstotka -1.5853 odstotkov, izkoristek polisaharida se je povečal s povečanjem ultrazvočnega časa, in dosegel najvišjo vrednost pri 90 minutah, se je izkoristek začel zmanjševati s povečanjem časa ultrazvočne obdelave. To je zato, ker kratkotrajna ultrazvočna ekstrakcija ne vodi do popolnega raztapljanja polisaharidov, medtem ko bo dolgotrajna ultrazvočna ekstrakcija razgradila polisaharide in privedla do zmanjšanja donosa, o čemer poročajo tudi v literaturi [29,34–35]. Zato je bil izbran čas sonikacije 90 minut.

Učinek razmerja med tekočino in trdno snovjo na izkoristek polisaharida kavnega cveta: učinek razmerja med trdno in trdno snovjo na izkoristek polisaharida je majhen. Dobitek polisaharida se je povečeval s povečanjem razmerja med tekočino in trdno snovjo in je dosegel maksimum pri 25:1 ml/g. Po 25:1 ml/g se je izkoristek zmanjšal s povečanjem razmerja med tekočino in trdno snovjo. Manj topila bo povzročilo nezadostno raztapljanje polisaharida, kar bo povzročilo manjši izkoristek polisaharida; več topila bo raztopilo polisaharid in otežilo njegovo obarjanje, hkrati pa se bo izkoristek zmanjšal zaradi absorpcije ultrazvočnega sevanja s strani topila. 29,34−35] imajo tudi podobna poročila. Glede na to, da razmerje med tekočino in materialom malo vpliva na izkoristek, je bilo izbrano razmerje med tekočino in materialom 10:1 ml/g, da bi prihranili količino reagentov.

Učinek ultrazvočne moči na izkoristek polisaharida kavnega cveta: ultrazvočna moč je bila izbrana kot 100-200 W, izkoristek polisaharida pa je bil 1,1185 odstotka -1.8583 odstotka. Po W se je izkoristek zmanjšal s povečanjem ultrazvočne moči. Povečanje ultrazvočne moči lahko učinkovito uniči celice in tkiva, da raztopi polisaharide v topilu, zato je povečanje ultrazvočne moči koristno za obarjanje polisaharidov; vendar pa bo učinek razdrobljenosti in toplotni učinek, ki ga povzročijo večji ultrazvočni valovi, povečal tudi raztapljanje nečistoč v cvetovih kave. , bo toplotni učinek uničil polisaharidne komponente in povzročil zmanjšanje izkoristka polisaharida, o čemer poroča tudi literatura [36–37]. Zato je bila ultrazvočna moč izbrana na 175 W.

Učinek časa namakanja na izkoristek polisaharida kavnega cveta: učinek časa namakanja na izkoristek polisaharida je bil majhen, čas namakanja je bil 30-150 min, izkoristek polisaharida pa 1,1827 odstotka -1. 4609 odstotkov. V razponu 30-90 min se je izkoristek polisaharida povečeval s podaljševanjem časa namakanja in dosegel največjo vrednost pri 90 min. Po 90 minutah se je s podaljševanjem časa namakanja izkoristek rahlo zmanjšal in je bil skoraj enak. Podaljšanje časa namakanja lahko olajša obarjanje polisaharidov med ultrazvokom in zmanjša porabo energije. Toda predolgo namakanje ne more prinesti večjega izkoristka, predolgo namakanje pa bo povzročilo tudi sproščanje drugih komponent in vplivalo na izkoristek polisaharidov. To je podobno kot poroča [38]. Glede na to, da je vpliv časa namakanja majhen, smo zaradi prihranka časa izbrali čas namakanja 30 minut.

Vpliv koncentracije obarjanja alkohola na izkoristek polisaharida kavnega cveta: koncentracija obarjanja alkohola ima majhen vpliv na izkoristek polisaharida, koncentracija obarjanja alkohola je 75 odstotkov ~95 odstotkov, izkoristek polisaharida je 0.9703 odstotka ~1,2806 odstotka. Dobitek polisaharida se je povečeval s povečanjem koncentracije etanola in je dosegel maksimum pri 85 odstotkih. Po 85 odstotkih se je izkoristek zmanjšal s povečanjem koncentracije etanola. Ekstrakcija z vodo in obarjanje z alkoholom je uporaba polisaharida, netopnega v alkoholu, za njegovo obarjanje. Ko se količina dodanega etanola poveča, je polisaharid netopen v etanolu in se obori, izkoristek pa se poveča. Ko koncentracija obarjanja alkohola preseže 85 odstotkov, izkoristka polisaharida ni mogoče izboljšati, vendar so reagenti izgubljeni. To je podobno kot poroča [38]. Da bi poenostavili operacijo, ta članek sprejme metodo neposrednega dodajanja etanola za prilagoditev koncentracije alkohola za obarjanje. Hkrati pa lahko prihrani reagente in zmanjša količino odpadkov, ker se izkoristek 80-odstotnega in 85-odstotnega polisaharida ne razlikuje veliko. Zato je bila izbrana koncentracija obarjanja alkohola 80 odstotkov.

2.2 Rezultati preskusa odzivne površine

2.2.1 Rezultati preskusa odzivne površine Ultrazvočna temperatura, ultrazvočni čas in ultrazvočna moč imajo velik vpliv. Zato je na podlagi zgornjih poskusov z enim faktorjem metoda odzivne površine optimizirana za tri pogoje ultrazvočne temperature, ultrazvočnega časa in ultrazvočne moči. Rezultati so prikazani v tabeli 2.

Ob izkoristku polisaharida (Y) kot indeksu odziva je bil vzpostavljen regresijski model s tremi faktorji ultrazvočne temperature, ultrazvočnega časa in ultrazvočne moči ter pridobljena kvadratna regresijska enačba:

Y{{0}}.29−0.067A plus 0.{{10}}54B−0. 019C plus 0,34AB plus 0,083AC plus 0,011BC−0,40A2

−0.19B2−0.27C2

2.2.2 Preizkus pomembnosti variance

Rezultati testa so prikazani v tabeli 3.

Glede na rezultate analize variance v tabeli 3 je bil skupni model pomemben (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05 pomanjkanje preskusa ustreznega elementa ni pomembno, kar kaže, da neznani dejavniki malo vplivajo na rezultate preskusa, preostali element pa povzročajo predvsem naključne napake, kar kaže, da je izbira modela ustrezna in pravilna . Vpliv AB je bil pomemben (P<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].

2.2.3 Odzivne površine in konture

Diagram odzivne površine interakcije različnih dejavnikov na izkoristek polisaharida kavnega cveta je prikazan na sliki 2. Interakcija med ultrazvočno temperaturo in ultrazvočnim časom je pokazala, da je bila interakcija med obema pomembna; ko je ultrazvočna temperatura ostala nespremenjena, se je izkoristek polisaharidov kavnega cveta najprej povečal in nato zmanjšal s povečanjem ultrazvočnega časa; ko je ultrazvočni čas ostal nespremenjen, se je kava Izkoristek cvetnega polisaharida najprej povečala in nato zmanjšala s povišanjem ultrazvočne temperature. Iz interakcije med ultrazvočno temperaturo in ultrazvočno močjo je razvidno, da ko je ultrazvočna temperatura konstantna, se donos polisaharida kavnega cvetja najprej poveča in nato zmanjša s povečanjem ultrazvočne moči; ko ultrazvočna moč ostane nespremenjena, se z ultrazvočnim valom poveča izkoristek polisaharida kavnega cveta. Zvišanje temperature se najprej poveča in nato zniža. Iz interakcije med ultrazvočnim časom in ultrazvočno močjo je razvidno, da ko je ultrazvočni čas konstanten, se donos polisaharida kavnega cvetja najprej poveča in nato zmanjša s povečanjem ultrazvočne moči; ko je ultrazvočna moč konstantna, se donos polisaharida kavnega cvetja poveča s povečanjem ultrazvočne moči. Povečanje časa se najprej poveča in nato zmanjša.

Zato so rezultati optimizacije metode odzivne površine za tri pogoje ultrazvočnega časa, ultrazvočne temperature in ultrazvočne moči z uporabo izkoristka polisaharida kot standarda vrednotenja: ultrazvočna temperatura 69,56 stopinje, ultrazvočni čas 92,99 min in ultrazvočna moč 174,01 W, to predvideva se, da bo pod tem pogojem 2,290 odstotka. Glede na dejansko stanje je ultrazvočna temperatura 69,5 stopinj, ultrazvočni čas 93.00 min, ultrazvočna moč 175 W, čas potopitve 30 min, razmerje med tekočino in materialom 10: 1 ml/g in koncentracijo etanola 80 odstotkov smo izbrali za 4 vzporedne teste.

Povprečni donos je bil 2,292 odstotka ±0,061 odstotka. V bistvu je blizu teoretični vrednosti, dobljeni s testom, kar kaže, da obstaja dobro ujemanje med napovedano vrednostjo in dejansko vrednostjo, zato so optimizirani procesni parametri, pridobljeni z odzivno površino v tej študiji, točni in zanesljivi [43].

2.3 Eksperimentalni rezultati antioksidativne sposobnosti

DPPH test je učinkovit in občutljiv model ocenjevanja antioksidativne sposobnosti rastlin. Zmogljivost testiranega vzorca za lovljenje prostih radikalov je povezana z njegovo potencialno sposobnostjo doniranja protonov; Test ABTS se pogosto uporablja za oceno antioksidativne zmogljivosti rastlinskih vzorcev, ki lahko testira vzorce Antioksidantna aktivnost lipofilnih in hidrofilnih komponent v metodi FRAP; redukcijska sposobnost naravnih produktov je bila ocenjena z redukcijo Fe3 plus -TPTZ v Fe2 plus -TPTZ [44–45]. Rezultati antioksidativnih poskusov polisaharidov kavnih cvetov so prikazani v tabeli 4. Polisaharidi kavnih cvetov imajo določene antioksidativne aktivnosti proti prostim radikalom DPPH in ABTS plus prostim radikalom, vendar je njihova antioksidativna aktivnost manjša kot pri rutinu.

3 Zaključek

V tem poskusu je bila kot surovina uporabljena cvetlica drobnozrnate kave Yunnan inpolisaharidYunnanskega drobnozrnategakavacvet je bil ekstrahiran z ultrazvokom. Ugotovljeno je bilo, da ultrazvočni čas, ultrazvočna temperatura in ultrazvočna moč pomembno vplivajo na ekstrakcijo polisaharidov cvetov kave. Nato so bili ultrazvočni čas, ultrazvočna temperatura in ultrazvočna moč optimizirani glede na odzivno površino, optimalni procesni pogoji polisaharida kavnega cvetja pa so bili določeni na naslednji način: ultrazvočna temperatura 69,5 stopinj, ultrazvočni čas 93 min, ultrazvočna moč 175 W, razmerje med tekočino in materialom. 10:1 mL/g, čas namakanja je bil 30 minut, koncentracija etanola pa 80 odstotkov. Pod tem pogojem je bil izkoristek polisaharida 2,292 odstotka ±0,061 odstotka. Metoda lahko učinkovito izboljša donos kavnega cvetjapolisaharid, hkrati pa skrajša čas ekstrakcije in zmanjša količino uporabljenega etanola. Rezultati poskusov z antioksidanti so pokazali, da so polisaharidi cvetov kave pokazali šibko antioksidativno sposobnost. Ta študija bo zagotovila referenco za nadaljnje ločevanje in čiščenje kavnega cvetapolisaharidter raziskave o njenem delovanju in delovanju, prav tako pa bo zagotovila teoretične podlage in podporo nadaljnjemu razvoju in uporabi kave.

Podpora:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950