Učinek antidiabetikov na ledvice podgan

Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

R Mary Sujin et al

Povzetek

Optimizacija te študije jeproti-diabetikučinek vledvicaalbino podgan Wistar z uporabo Gymnema Sylvestre (Retz) R.Br. zeliščni prah. Histopatološke in biokemične preiskave so bile izvedene v organskem in krvnem serumuledvica. Različne koncentracije praška, obravnavane kot 5, 10, 15, 20/gms/25 dni. Učinek surovih zdravil pri podganah je zmanjšal telesno težo in obsegdiabetikije bil ocenjen vledvicaz merjenjem ravni izbranih krvnih parametrov beljakovin, glukoze, holesterola, inzulina in trigliceridov ter učinkom histopatologije. Surova zdravila so zmanjšala telesno in ledvično težo živali ter znatno zmanjšala raven insulina, beljakovin, trigliceridov, holesterola in glukoze. Podatki so bili analizirani z uporabo matematičnih izračunov, vrednosti so bile izražene kot pomembne.

Ključne besede:Anti-diabetikučinek, Gymnema Sylvestre, histopatološki in biokemijski test vLedvica.

Cistanche tubulosa preprečuje bolezni ledvic, kliknite tukaj za vzorec

Uvod

Zeliščarstvo je tradicionalna ali ljudska medicina, ki temelji na uporabi rastlin in rastlinskih izvlečkov. Zeliščna zdravila so na voljo na trgu v trgovinah z zdravo hrano brez recepta in se pogosto uporabljajo v Indiji, na Kitajskem, v ZDA in po vsem svetu. Glede na nedavno raziskavo večina ljudi, ki uporabljajo zdravila rastlinskega izvora, ne obvesti svojih zdravnikov o njihovem uživanju, kar lahko povzroči nenormalne rezultate testov in zmedo pri pravilni diagnozi. Interakcije med zdravili in zelišči lahko povzročijo nepričakovane koncentracije terapevtskih zdravil. Več zeliščnih izdelkov moti imunske teste, ki se uporabljajo za spremljanje koncentracij terapevtskih zdravil. Zeliščna zdravila lahko povzročijo tudi neželene učinke. Zato splošno prepričanje, da je vse naravno varno, ni pravilno.

Gymnema Sylvestre je velika lesna plezalka. Njegova glavna sestavina je gimnemična kislina, ki imaproti-diabetikin lastnosti hiperglikemije. Odpravlja okus po sladkorju in naj bi nevtraliziral presežek sladkorja v telesu pri diabetes mellitusu¹.

Celotna rastlina je želodec, stimulans, odvajalo in diuretik. Dober je pri kašlju, žolču in vnetih očeh. Če žvečimo liste rastline, zatremo čut za sladke in grenke snovi.

Germanska kislina je sestavljena iz molekul, katerih razporeditev atomov je podobna razporeditvi molekul glukoze. Te molekule napolnijo receptorske lokacije na brbončicah za obdobje ene do dveh ur in tako preprečijo, da bi brbončice aktivirale katere koli molekule sladkorja, prisotne v hrani. Podobno glukozi podobne molekule v gimnemični kislini napolnijo mesta receptorjev v absorpcijskih zunanjih plasteh črevesja in s tem preprečijo, da bi črevesje absorbiralo molekule sladkorja.

Nedvomno sta dve izmed najbolj spregledanih, ko gre za razstrupljanje, jetra in ledvice. Ko so jetra preobremenjena, poskušajo ledvice pobrati ohlapnost. Ledvice so dva organa v obliki fižola, vsaka približno tako velika kot prvi. Čeprav so ledvice po teži majhni organi, prejmejo ogromno (približno 20 odstotkov) krvi, ki jo črpa srce. Vsak dan ledvice predelajo približno 200 litrov krvi, da izločijo 2 litra odpadnih snovi in ​​odvečno vodo. Brez ledvic bi se odpadne snovi in ​​toksini kopičili do nevarnih ravni v krvi in ​​posledično poškodovali telo. Zaradi kopičenja toksinov ali zanemarjanja prehrane se lahko ti pomembni organi za filtriranje toksinov vnamejo, okužijo in razvijejo ledvične kamne ali pa popolnoma odpovejo.

Tako kot skoraj vsi organi v telesu so tudi ledvice izpostavljene številnim motnjam in boleznim. Okvara ledvic običajno poteka postopoma in brez simptomov in lahko se šele po letih bolezni ledvic delovanje ledvic opazno zmanjša. Pri bolezni ledvic lahko na splošno izgubimo do 75 odstotkov delovanja ledvic, preden postanejo učinki akutno očitni. Če je ne zdravite, lahko bolezen ledvic postane nepovratna in lahko resno ogrozi vaše zdravje. Ljudje s sladkorno boleznijo, visokim krvnim tlakom ali družinsko anamnezo bolezni ledvic morajo tudi aktivno preprečevati bolezni ledvic in ohranjati organe v optimalnem stanju.

Ledvična bolezen, povezana z aristolohično kislino (imenovana kitajska zeliščna nefropatija), lahko relativno hitro privede do končne odpovedi ledvic. Kitajska zeliščna nefropatija je bila prvič ugotovljena v Belgiji v devetdesetih letih prejšnjega stoletja. Ugotovljeno je bilo, da je približno 100 bolnikov z odpovedjo ledvic jemalo "shujševalni režim", ki je bil kasneje identificiran kot aristolohična kislina. Biopsije ledvic pri teh bolnikih so bile zelo podobne, saj so pokazale obsežne in hude brazgotine na ledvicah. Najmanj 70 od teh bolnikov je potrebovalo dializo ali presaditev ledvice. Dodatni primeri kitajske zeliščne nefropatije so bili pozneje ugotovljeni v Franciji, Združenem kraljestvu in Združenih državah. Zaradi tega je leta 2001 ameriška FDA izdala strogo opozorilo in prepoved uvoza prehranskih dopolnil, ki vsebujejo to spojino.

V tej študiji so učinki različnih koncentracij G. Sylvestre pri albino podganah Wistar prek histopatoloških in biokemičnih reakcij pri podganah.

Materiali in metode

Zbiranje in priprava surovih zdravil

Rastlina je bila zbrana in primerjana s herbarijem Holy Cross College v Nagercoilu, okrožje Kanyakumari, Tamilnadu-Indija. Vzorci so bili posušeni v senci in grobo zmleti.

Poskusne živali

Albino Wister podgane obeh spolov, težke 180-210 g, so bile v ločenih kletkah v standardnih okoljskih pogojih temperature 20 do 30 °C in vlažnosti s standardno hrano za podgane in vodo ad libitum. Eksperimentalni postopki so bili izvedeni v strogem skladu s predpisi institucionalnega odbora za etiko živali.

Protokol študije

Izvedena je bila pilotna študija za preučevanje razmerja med odmerkom in odzivom rastlinskega prahu Gymnema v odmerku 5, 10, 15, 20, 25 g z rižem in mlekom v obdobju 25 dni.

Protokol zdravljenja

Živali smo razdelili v 5 skupin po 5 živali in jih obravnavali po spodaj navedenem protokolu.

Kontrolna skupina (G1):

Skupina zdravljenja (G2): Skupina zdravljenja (G3): Skupina zdravljenja (G4): Skupina zdravljenja (G5):

Živali so 25 dni dobivale normalno prehrano z rižem in mlekom.

Živali so dobile 5 g praška z rižem in mlekom.

Živali so dobile 10 g praška z rižem in mlekom.

Živali so dobile 15 g praška z rižem in mlekom.

Živali so dobile 20 g praška z rižem in mlekom.

Zmanjšanje telesne teže pri podganah je potekalo čez noč po poskusnem obdobju. Evtanazirali so jih z anestezijo s hlapi kloroforma, kri pa so zbrali s krvavitvijo iz srčne arterije in takoj prenesli v epruveto, obdelano z EDTA. Kri smo nato centrifugirali pri 4000 obratih na minuto 10 minut, da smo odstranili rdeče krvne celice in pridobili plazmo. Ledvica je bila izrezana, stehtana in shranjena za histopatološke študije. Ledvica iz različnih skupin je bila stehtana in opažene so bile razlike v teži.

Histopatološke študije

Odseki želodca so bili konzervirani v 10-odstotnem formalinu. Obarvani so bili s hematoksilinom in eozinom, obarvane dele so opazovali pod mikroskopom, da bi ocenili obseg diabetičnega melitusa.

Biokemični testi

Ocena glukoze:Mešanica reagentov (fosfatni pufer pH 7,5:250 mmol/1, fenol 5 mmol/1, 4- aminoantipirin 0,5 mmol/1, glukoza oksidaza (GOD) večja ali enaka 10 KU/1 , peroksidazo (POD), večjo ali enako 1 KU/1) smo vzeli v tri epruvete po 1000 µl standarda (S), testa (T) in slepega (B). 10 µl seruma smo dodali (T). Standardno raztopino 10 µl/100 mg/dl smo dodali (S) in 10 µl destilirane vode (B). Vsebino smo dobro premešali in inkubirali

10 minut pri 37oC. Absorbanco (S) in (T) smo odčitali glede na reagent

(B) spektrofotometrično. Intenzivnost je bila izmerjena pri 505 nm.
Ocena beljakovin:Mešanica biuretnega reagenta (natrijev hidroksid 500 mmol/1, kalijev natrijev tartrat 35 mmol/1, kalijev jodid 30 mmol/1, bakrov sulfat 10 mmol/1) je bila vzeta v tri epruvete po 1000 µl standarda (S) in slepega testa (T). (B) in dodali 10 µl seruma (T). Standardno raztopino 10 µl/6 g/dl smo dodali standardu (S) in 10 µl destilirane vode (B). Vsebino smo dobro premešali in inkubirali 10 minut pri 37oC. Absorbanco (S) in (T) smo spektrofotometrično odčitali glede na reagent (B). Intenzivnost je bila izmerjena pri 546 nm.

Ocena holesterola:Mešanica reagentov (Goodov pufer pH 6,7:50 mmol/1, fenol 5 mmol/1, 4-aminoantipirin 0,3 mmol/1, holesterol esteraza (CHE) Večja ali enaka 200 U/1, Holesterol oksidaza (CHOD) Večja ali enaka 50 U/1, Peroksidaza (POD) Večja ali enaka 3 kU/1) so bile vzete v tri epruvete po 1000 µl standarda (S) in preskusne (T) slepe (B) in dodali smo 10 µl seruma (T). Standardno raztopino 10 µl/200 mg/dl smo dodali (S) in 10 µl destilirane vode (B). Vsebino smo dobro premešali in inkubirali 10 minut pri 37oC. Absorbanco (S) in (T) smo spektrofotometrično odčitali glede na reagent (B). Intenzivnost je bila izmerjena pri 505 nm.

Ocena trigliceridov:Mešanica reagentov Goodov pufer pH 7,2:50 mmol/1, 4-klorofenol 4 mmol/1, ATP 2 mmol/1, Mg2 plus 15 mmol/1, glicerokinaza (GK) Večji ali enak do {{20}}.4 kU/1, Peroksid (POD) Večji ali enak 2 kU/1, Lipoproteinska lipaza (LPL) Večji ali enak 2kU/1, 4- Aminoantipirin 0,5 mmol/1, glicerol-3-fosfat-oksidaza Večja ali enaka 0,5 kU/1)) smo vzeli v tri epruvete po 1000 µl standarda (S) in testa (T) slepega (B) in 10 µl dodanega seruma (T). Standardno raztopino 10 µl/200 mg/dl smo dodali (S) in 10 µl destilirane vode (B). Vsebino smo dobro premešali in inkubirali 10 minut pri 37oC. Absorbanco (S) in (T) smo spektrofotometrično odčitali glede na reagent (B). Intenzivnost je bila izmerjena pri 546 nm.

Ocena insulina:Kvantitativno merjenje insulina je bilo opravljeno s kompetitivnim encimsko vezanim imunskim testom v trdni fazi (ELISA). Insulin je bil ocenjen v laboratorijih Vivek, Nagercoil.

Statistična analiza

Vse vrednosti so bile izražene kot povprečje ± SD. Podatki so bili analizirani z uporabo matematičnih izračunov. Vrednosti so bile izražene kot pomembne.

Rezultati in razprava

Biokemični parametri

V tej raziskavi so podgane, ki so bile hranjene z G. Sylvestre do G2, pokazale zmanjšanje telesne teže s 178.0 ± 17,6 na 156 ± 12,2 gm. Podobno se je pri živalih, hranjenih z G3, G4 in G5, pokazalo pomembno zmanjšanje v primerjavi z začetnim dnem ob koncu 25. dne (tabela 1.).

Pri G2 je prišlo do rahlega povečanja (0.20 ± 0.05) v primerjavi z G1 (0,13 ± 0,02). Toda G4 in G5 sta pokazala znižanje ravni insulina v primerjavi z G1. G. Sylvestre je pomembno vplival na profil insulina v plazmi normalnih podganjih samcev albino pri skupinah z višjo koncentracijo G4 oziroma G5 (tabela 2.).

Raven glukoze je pokazala normalno vrednost 88,98 ± 4,6, 84,87 ± 4,3 in 83,70 ± 4,2 v G1, G2 oziroma G3. Vendar se je pri skupini z višjimi koncentracijami G4 in G5 vsebnost glukoze enakomerno zmanjševala z največjim zmanjšanjem pri G5. V skupinah z višjo koncentracijo G4 in G5 se je vsebnost glukoze enakomerno zmanjševala z največjim zmanjšanjem pri G5 (tabela 3.).

G2 in G3 nista dosegla statistično pomembnega zmanjšanja. Vendar sta G4 in G5 (7,94 ± 0,4 in 8,12 ± {{10}},1 mg/dl) pokazala rahlo povečanje v primerjavi z G1 (7,16 ± 0,3 gm/dl). G. Sylvestre ne vpliva pomembno na profil plazemskih beljakovin normalnih samcev albino podgan niti do višje koncentracije G5 (Tabela 4.).

Raven trigliceridov je pokazala normalno vrednost 51,47 ± 3,8, 44,75 ± 2,7 in 42,30 ± 3,7 gm/dl v G1, G2 in G3. Vendar se je pri višjih koncentracijskih skupinah G4 in G5 vrednost enakomerno zniževala z največjim zmanjšanjem pri G5 (tabela 5.).

Razlika v ravni holesterola 72.05 ± 4,0 in 49,40 ± 5,9 mg/dl je bila opažena pri podganah, hranjenih z Gymnemo, glede na G4 in G5 v primerjavi z vrednostjo G1 87,15 ± 3,6 mg/dl. Skupina z nizkimi odmerki G2 in G3 je bila podobna normalni (tabela 6.).

Histopatološke študije

Rezultati histopatoloških študij so prikazani na plošči 1. Odseki iz G1 so pokazali normalno histologijo ledvice podgan. Proksimalni zaviti tubuli, distalni zaviti tubuli in ledvična telesca z glomerulom in glomerularno kapsulo so zelo jasni in izraziti. Jasno je opazno ledvično telesce z visceralno plastjo, parietalno plastjo in kapsularnim prostorom. Živali, zdravljene s praškom do G2 in G3, niso bile veliko prizadete. Zdravljenje G (4) in (5) ledvic pri živalih, hranjenih s praškom, kaže nekrozo, vakuolacijo in motnje glomerularnih tubulov. Pri obeh visokih odmerkih (15 in 20 g/kg telesne teže) zeliščnega praška je prišlo do zmernih degenerativnih sprememb in nekroze epitelija ledvičnih tubulov in glomerulov. Pri obeh odmerkih G4 in G5 so opazili tudi vakuolizacijo; vendar tega niso opazili pri skupinah z nizkimi odmerki s telesno maso G2 in G3.

Pri živalih, hranjenih z majhnim odmerkom G. Sylvestre, so opazili pomembne spremembe v ravneh serumskega holesterola in trigliceridov, kar je lahko posledica normalne prehrane in normalnih podgan, kot so opazili. Pri višji koncentraciji G4 in G5 telesne teže je prišlo do zmanjšanja holesterola, kar je morda zato, ker so gimnemagenin in gimnemične kisline medsebojno delovale s steroidi, zlasti holesterolom in žolčnimi kislinami, pridobljenimi iz CA, v prebavnem traktu podgan. Tako je lahko znižanje holesterola posledica fekalnega izločanja holesterola, kar je lahko posledica prekinitve tvorbe micelov, ki vsebujejo holesterol in žolčne kisline v črevesju, in posledične motnje pri absorpciji holesterola. Znižanje ravni holesterola, trigliceridov in prostih maščobnih kislin v plazmi so opazili v dveh študijah bolnikov s sladkorno boleznijo, ki so poleg običajnih antidiabetičnih zdravil (npr. insulina, glibenklamida ali tolbutamida) prejemali dodatke zdravila Gymnema. te ravni so se postopoma povečevale od izhodišča pri bolnikih iz kontrolne skupine, ki niso jemali zdravil. Opozoriti je treba, da je bilo znižanje lipidov sekundarna končna točka v teh študijah, ki so bile zasnovane za prikaz antidiabetičnih učinkov zdravila Gymnema.

Tradicionalne izkušnje morda niso v veliko pomoč pri prepoznavanju škodljivih interakcij s konvencionalnimi zdravili^9,10. Umrljivost in vedenjske spremembe veljajo za osnovne parametre za oceno toksičnosti katerega koli zeliščnega izdelka. Listi G. Sylvestre so bili pogosto uporabljeni kot zdrava hrana, saj uporabniki pogosto pričakujejo zmanjšanje telesne teže in izboljšanje sladkorne bolezni zaradi njihove sposobnosti zatiranja sladkega okusa in zaviranja absorpcije glukoze8.

V tej študiji sta se povečanje telesne mase in vnos hrane pri podganah, ki so prejemale G. Sylvestre, zmanjšala v odvisnosti od odmerka. Zmanjšanje povečanja telesne teže je lahko posledica zmanjšanja vnosa hrane. Poleg tega je znano, da ta rastlinski prah zavira receptor okusa sladkega na jeziku, kar je lahko še en vzrok.

Od odmerka odvisne spremembe so opazili tudi pri semenih triplata. V tem opazovanju ni bila opažena pomembna smrtnost. Možen razlog bi lahko bil, da zdravilo Gymnema ne moti različnih življenjskih funkcij živali in zato ne povzroča resne toksičnosti, ki bi lahko povzročila smrt živali. Listi zvišujejo raven inzulina, glede na raziskave na zdravih prostovoljcih2, verjetno zaradi regeneracije -celic trebušne slinavke.³.

Strupene snovi lahko prizadenejo ledvice in oslabijo njihove fiziološke funkcije. Te učinke je mogoče zaznati in/ali količinsko opredeliti z navzkrižnim preverjanjem običajno pričakovanih funkcij ledvic pri izločanju dušikovih odpadnih produktov presnove brez praga, kot sta sečnina in kreatinin. Tudi z določanjem sposobnosti ledvic za filtriranje in reabsorpcijo snovi, ki jih telo potrebuje, kot so elektroliti, je mogoče zaznati toksičnost za ledvice7. Nekateri avtorji so dokazali, da ocena ravni sečnine in kreatinina ni dovolj občutljiva za odkrivanje nizke stopnje toksičnosti ali poškodbe ledvic. Drugi so opazili, da je absolutna teža ledvic relativno občutljiv indikator nefrotoksičnosti znanih nefrotoksičnih snovi. Nefrotoksičnost je bila zato opredeljena kot povečana teža ledvic (bodisi absolutna ali relativna) skupaj s pomembno spremembo vsaj enega serumskega parametra ⁶.

Histopatološke študije so bile izvedene na jetrih podgan. Fibrozo jeter je povzročil CCL4, obseg bolezni pa je bil ocenjen z merjenjem ravni HP in TBL z uporabo Trigonella foenumgraecum¹¹G. Sylvestre ni veliko vplival na zdravljenje živali z G2 in G3. Odseki ledvic pri živalih, hranjenih s praškom do G4 in G5, kažejo nekrozo, vakuolacijo in motnje glomerularnih tubulov. Pri obeh visokih odmerkih (15 in 20 g/kg telesne teže) zeliščnega praška je prišlo do zmernih degenerativnih sprememb in nekroze epitelija ledvičnih tubulov in glomerulov. Pri obeh odmerkih so opazili tudi vakuolizacijo; vendar tega niso opazili pri skupinah z nizkimi odmerki G2 in G3. V nekaterih glomerulih in ledvičnih tubulih podgan v skupini z velikimi odmerki so opazili nekrozo in celično infiltracijo.

Glomeruli, ker prejmejo eno četrtino minutnega volumna srca in se prekrvavijo pri najvišjem tlaku katere koli kapilarne postelje v telesu, so občutljivi na poškodbe s številnimi zdravili in drugimi strupenimi snovmi. Ti dejavniki lahko povzročijo poškodbe zaradi enega od dveh osnovnih mehanizmov: 1) neposredna strupena poškodba, povezana z odmerkom; 2) posredna, imunološko posredovana poškodba, v veliki meri odvisna od odmerka. Ledvica kontrolnih živali je pokazala normalno morfologijo ledvic. Ker si zdravilna zelišča običajno predpisujejo potrošniki sami, manjkajo priporočila za uporabo predpisanih zdravil, kot so odmerek, način in pogostnost jemanja, ki jih pregleduje in nadzoruje zdravnik, ki predpisuje zdravilo. Ti dejavniki povečajo tveganje za toksičnost zdravila Gymnema, saj potrošniki uporabljajo izvleček, dokler traja njihovo stanje, in celo v večjih odmerkih. Izvleček listov Gymnema Sylvestre: 52-tedenska študija toksičnosti prehrane pri podganah Wistar⁵.

V ledvicah so bile histopatološke spremembe akutne tubularne nekroze z razpršeno intersticijsko in glomerularno krvavitvijo. To nakazuje, da je prišlo do ireverzibilne celične poškodbe, ki je prizadela epitelijski parenhim in endotelne celice. Histologija ledvic zdravljenih podgan je pokazala značilnosti, skladne s poškodbo ledvičnega epitelija zaradi toksinov. Ugotovljeno je bilo, da številni zeliščni pripravki kažejo ledvično tubularno nekrozo, ki kaže obsežno intersticijsko fibrozo in hudo tubularno izgubo, ki je najbolj izrazita v zunanji skorji4 (slika 1.).

Zaključek

G. Sylvestre ne predstavlja resne nevarnosti za diabetike v koncentracijah do 10 g/kg telesne teže. Višje koncentracije 15 in 20 gm/kg telesne teže povzročajo histopatološke spremembe, resnost je zelo zmanjšana in odmerek do 10 gm/kg telesne mase ne vpliva na beljakovine, glukozo, inzulin, holesterol ali trigliceride, zato je priporočljivo, da G. Sylvestre se lahko uporablja pri različnih boleznih v omejenem odmerku po nasvetu zdravnika.

Reference

1. Shanmugasundaram KR, Panneerselvam C, Sumudram P in Shanmugasundaram ER, 1983. Encimske spremembe in izraba glukoze pri diabetičnih kuncih učinekGymnema Silvester, J. Etnofarmakol 2: 205-34.

2. Beckles GLA, American Diab AK, Mathur KK, Datta SK, Tandon in Dikshith TSS, 1998. Raziskovalni center za industrijsko toksikologijo,Sladkorna bolezen Skrb 21:1432-1438.

3. Mhasker KS in Caius JF, 1930. Študija indijskih zdravilnih rastlin. II.Gymnema SyvestreR.Br,,indijski. J. Med. Res. Spomini 16: 72-75.

4.Vanherweghem JL, Depierreux M, Tielemans C, Abramowicz D, Dratwa M, Jadoul M, Richard C, Vandervelde D, Verbeelen D in Vanhaelen-Fastre R, 1993. Hitro napredujoča intersticijska ledvična fibroza pri YounWomen,kitajski Zelišča Lanceta 341 : 387–391.

5. Ogawa Y, Sekita K, Umemura T, Saito M, Ono A, Kawasaki Y, Uchida O, Matsushima Y, Inoue T in Kanno J,2004. Gymnema Silvesterizvleček listov: 52-tedenska študija toksičnosti prehrane pri podganah Wistar,Šokuhin Eiseigaku Zasshi, 45(1): 8-18.

6. Srivasta S, Srivastava AK, Patnaik GK in Dhawan BN. 1996. Vpliv pikroliva na regeneracijo jeter pri podganah,Fitoterapija, 67: 252-256.

7. Barzaghi N, Creama F, Gatti G, Pifferi G in Perucca E, 1990. Farmakokinetične študije kompleksa silibin-fosfatidilholin pri zdravih ljudeh,EUR. J. Zdravilo Meta Pharmacokinet 15: 333-338.

8. Ueno G, 1997. UporabaGymnema silvesterizvlečki na živilih,Šokuhin do Kagaku 1 : 100-103.

9. De Smet PAGM, 1993.Uvod v farmakoepidemiologijo zelišč.J. Etnofarmakol 38: 197-208.

10. Atherton DJ. 1994, Za varnejšo uporabo tradicionalnih zdravil je potrebna večja ozaveščenost o toksičnosti.BMJ, 308: 673-674.

11. Santha Rani Thakur, Saraswathy GR, Maheswari E, Sunil Kumar N, Hazarathiah T, Sowmya K, Dwarakanadha Reddy P in Ramesh Kumar B, 2007. Zaviranje jetrne fibroze, ki jo povzroča CCl4Trigonella foenumgraecum L, Naravno Izdelek Izžarevanje 6(1): 11-17.