Potencial polifenolov peteršilja in njihova antioksidativna sposobnost za pomoč pri zdravljenju depresije in anksioznosti: subakutna študija in vivo

Za več informacij. stiktina.xiang@wecistanche.com

Povzetek: Depresija in anksioznost sta glavni težavi duševnega zdravja v vseh delih sveta. Te bolezni so povezane s številnimi dejavniki tveganja, vključno z oksidativnim stresom. Psihotropna zdravila kemične narave so pokazala številne stranske učinke, ki so povečali vpliv teh bolezni. V tej situaciji se zdi, da so naravni izdelki obetavna alternativa. Namen te študije je bil oceniti anksiolitične in antidepresivne učinke Petroselinum sativum.polifenoliin vivo, pa tudi koreliranoantioksidant lastnosti in vitro.Anksiolitikaktivnost izvlečka (50 in 100 mg/kg) smo ocenjevali s testom odprto polje in svetlo-temna komora, antidepresivno delovanje pa s testom prisilnega plavanja. Antioksidativno delovanje izvlečka smo ocenili s testom prostih radikalov 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) in testom FRAP (iron-reducing capacity). Fenolni izvleček je pokazal zelo močne anksiolitične in antidepresivne učinke, zlasti pri odmerku 100 mg/kg, pri čemer je zmanjšal depresivno vedenje pri miših (skrajšan čas nepremičnosti) in tudi anksiolitično vedenje (nagnjenost k odkrivanju v središču in osvetljenih območjih). )boljši celo od paroksetina in bromazepama (klasičnih zdravil), sočasno s temi rezultati je izvleček pokazal tudi pomembno antioksidativno sposobnost. Ti predhodni rezultati kažejo, da ima Petroselinum satioum anksiolitični in antidepresivni potencial za uporabo kot dopolnilo ali samostojno fitomedicino za zdravljenje depresije in anksioznosti.

Ključne besede: Petroselinum sativum; polifenol; anksiolitik; podoben antidepresivu; antioksidant; farmakologija; zeliščna zdravila; naravne izdelke

1. Uvod

Depresija in anksiozne motnje že dolgo veljata za problem duševnega zdravja in predstavljata veliko breme za vsako družbo, v kateri je stres vseprisoten. Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) napoveduje, da bo do leta 2030 depresija, kot potencialno smrtna bolezen, drugi vodilni vzrok invalidnosti po vsem svetu [1]. Po zadnjih ocenah WHO več kot 300 milijonov ljudi po vsem svetu trpi za depresijo, od tega jih ima več kot 260 milijonov tudi anksiozne motnje [2].

Diagnostični in statistični priročnik duševnih motenj (DSM-V) definira hudo depresivno motnjo kot ne le občasno žalost ali napad depresije, temveč depresivno razpoloženje ali izgubo zanimanja ali užitka vsaj dva zaporedna tedna, katerih epizode so pogosto ponavljajoči se [3]. WHO opredeljuje depresijo tudi kot "različne psihološke in biološke simptome, kot so splošen občutek žalosti, izguba užitka in zanimanja, občutek krivde, motnje spanja (nespečnost ali zaspanost) in apetita, občutek utrujenosti (psihomotorična zaostalost). ), in pomanjkanje koncentracije". V najresnejših primerih lahko depresija vodi celo v samomor [4].

Anksioznost, kot jo definira WHO, je "občutek nedoločene neposredne nevarnosti, ki ga spremlja slabo počutje, vznemirjenost, nemoč ali celo izničenje". Lahko ga opišemo tudi kot stanje vnaprejšnjega strahu, ki ga povzroči potencialna in negotova nevarnost, čeprav njegov vzrok ni nujno zavesten, v nasprotju s strahom, ki se pojavi ob resnični nevarnosti. Za ti dve čustvi pa so značilni podobni fiziološki (povečan krvni tlak, znojenje, tahikardija itd.) in vedenjski (povečana budnost in izogibanje) odzivi [5].

Depresijo in anksioznost običajno zdravimo s psihotropnimi zdravili, vključno z antidepresivi inanksiolitiki(pomirjevala), pogosto kemične narave, kot so paroksetin in benzodiazepini. Vendar pa ima uporaba teh zdravil določene omejitve in lahko povzročijo neželene stranske učinke. Bromazepam je predpisan za zdravljenje anksioznosti. Vendar ima njegovo uživanje številne negativne stranske učinke, vključno z zaspanostjo, sedacijo in izgubo spomina [6]. Težave s spanjem, izguba apetita, zaspanost in spolna disfunkcija so tudi tipični neželeni učinki paroksetina, antidepresiva iz družine zaviralcev ponovnega privzema serotonina (SSRI), ki se uporablja za obvladovanje velikih depresivnih motenj [7]. Zaradi te omejene učinkovitosti je raziskovanje novih, učinkovitejših in nestrupenih terapevtskih sredstev zelo cenjeno.

Zdravilne rastline so lahko ustrezen vir novih, varnih in učinkovitih terapevtikov, še posebej, ker je za mnoge znano, da imajo manj stranskih učinkov [8]. Več zdravilnih rastlin je bilo preizkušenih pri zgornjih motnjah in dali so zelo prijetne rezultate, ki so spodbudili nadaljnje študije za odkrivanje antidepresivom podobnih in anksiolitičnih lastnosti dodatnih rastlin [9].

Petroselinum satioum Hoffm., splošno znan kot "peteršilj" ("maadnous" v arabščini), je član družine Apiaceae. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm in Petroselinum crispum (Mill) Fuss. sta tudi sinonima za Petroselinum sativum Hoffm.[10. Peteršilj kot kulinarično zelišče, ki izvira iz sredozemske regije, je v sodobnem času postalo splošno razširjeno zelišče [11]. P. sativum ima vrsto koristnih lastnosti, vključno zantioksidant, analgetične, spazmolitične, antidiabetične, imunomodulacijske in gastrointestinalne učinke [12]. Te različne koristi lahko pripišemo glavnim sestavinam rastline, kot so polifenoli (apigenin, kvercetin, luteolin in kaempferol), vitamini, karotenoidi, kumarin in tanini [13]. Družina Apiaceae obsega številne rastline, znane po svojem antidepresivnem in anksiolitičnem delovanju, kot so Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] za koncentracijo med 50 in 200 mg/kg.

V tej študiji so potencialne antidepresivu podobne in anksiolitične aktivnosti peteršiljapolifenoliso prvič ocenili, skupaj s svojimantioksidativno delovanje, da bi ugotovili, ali obstaja korelacija.

2. Rezultati

2.1. Ocena antioksidativne aktivnosti

2.1.1. Preskus DPPH

Slika 1 prikazuje odstotek antioksidativne aktivnosti kot funkcijo različnih ravni PSPE in BHT. Dobljeni rezultati razkrivajo, da naš ekstrakt in BHT kažeta protiradikalno aktivnost, odvisno od koncentracije. To pomeni, da odstotek inhibicije radikala DPPH narašča s koncentracijo fenolnega ekstrakta P. sativum in BHT. BHIT je pokazal največjo aktivnost v primerjavi z našim ekstraktom. Za 0,5 ug/mL je BHT dosegel najvišji odstotek inhibicije 90 odstotkov, ki je ostal konstanten pri koncentraciji 1 ug/mL. Pri enaki koncentraciji je fenolni ekstrakt povzročil največjo inhibicijo 58 odstotkov

Sintetični antioksidant BHT je pokazal zelo močno antiradikalno delovanje z IC50 okoli 0.024 ug/mL, kar je višje od tistega, zabeleženega za fenolni izvleček P sativum （približno 0,184 ug/mL） .

2.1.2. Preizkus FRAP

Slika 2 prikazuje variacijo optične gostote (OD) kot funkcijo različnih koncentracij PSPE in BHT (pozitivna kontrola). Vidimo lahko, da so odstotki zmanjšanja sorazmerni s koncentracijo ekstrakta in BHT. Slednji je pokazal večji odstotek zmanjšanja v primerjavi z ekstraktom.

Da bi primerjali učinkovitost polifenolne frakcije P.sativoum(PSPE) z učinkovitostjo BHT, smo določili koncentracijo, ki je zmanjšala 50 odstotkov FRAP (IC50).

BHT (sintetični antioksidant BHT) je pokazal zelo močno antioksidativno delovanje z IC50 približno 0.09ug/mL, kar je višje od tistega, zabeleženega za fenolni izvleček P. sativum (približno 0,38 ug/mL). ）.

2.2. Vrednotenje testa prisilnega plavanja proti antidepresivi

Spremembe v času izpada v testu prisilnega plavanja v treh tednih poskusa so prikazane na sliki 3. Čas nepremičnosti med testom je bil znatno krajši pri miših, zdravljenih s PSPE (PSPE 50 mg/kg (34 s±3,286), PSPE 100 mg/kg (33,8 s ± 2,653)) v primerjavi s kontrolami (paroksetin (100,8 s ± 6,837), nosilec (176 s ± 6,550).

Ti rezultati kažejo, da je antidepresivni učinek fenolnega ekstrakta P. sativum večji od učinka paroksetina.

2.3. Ocena anksiolitičnega delovanja

2.3.1. Anksiozno vedenje na odprtem terenu

Slika 4 prikazuje spreminjanje časa, porabljenega v središču preskusa na odprtem polju med tremi tedni tretiranja z ekstraktom. Vidimo lahko, da so miši, zdravljene s PSPE (50 in 100 mg/kg), preživele več časa v osrednjem območju v primerjavi s kontrolnimi skupinami. To znatno povečanje ni sorazmerno le s trajanjem zdravljenja, temveč tudi s koncentracijo ekstrakta. Optimalna vrednost je bila dosežena s koncentracijo 100 mg/kg (37,4 s± 1,778, v primerjavi s 33,4 s±1,208 sat pri odmerku 50 mg/kg). To kaže naanksiolitikučinek te rastline.

Spremembe v številu ploščic, prečkanih med tritedenskim poskusom, so prikazane na sliki 5. Analiza je pokazala izjemno povečanje števila ploščic, ki so jih prečkale miši, zdravljene s PSPE (50 mg/kg (161,2±5,490), 100 mg/ kg (173 ± 10,104)) v primerjavi s skupinama, ki sta prejemali bromazepam 1 mg/kg (115,8 ± 1,393) in vehikel (147,4 ± 1,568). Ti rezultati kažejo na večji anksiolitični učinek FPPS celo kot učinek bromazepama pri 1 mg/kg.

2.3.2. Anksiozno vedenje v svetlo-temni sobi

Slika 6 prikazuje rezultate variacije časa, preživetega v osvetljeni komori med študijskim obdobjem. Rezultati kažejo progresivno povečevanje časa, preživetega v osvetljeni komori, skozi čas za miši, zdravljene s PSPE. To povečanje je še posebej opazno 21. dan. V tem testu so miši, zdravljene z bromazepamom in PSPE, preživele znatno več časa v osvetljenem prostoru (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50 mg/kg (199,6 s ± ± 6,838), PSPE 100 mg/kg (213,6s±9,331) v primerjavi s kontrolnimi mišmi (nosilec (75,8s±4,352)). To je bilo razloženo kot dokaz anksiolitičnega učinka polifenolnega ekstrakta P. sativum.

Slika 7 prikazuje spreminjanje števila prehodov med svetlimi in temnimi komorami med tem preskusom. V 21 dneh so ugotovili izjemno razliko med mišmi, zdravljenimi s PSPE (50 mg/kg (16±{{10}},548), 100 mg/kg. kg (12,4 ± 0,510)) in kontrolnih miši (nosilec (10 ± 0,837), bromazepam 1 mg/kg (12 ± 0,949). Ti rezultati so skladni z rezultati časa, preživetega v osvetljeni komori, saj sta ta dva parametra obratno sorazmerna s stopnjo tesnobe, ki so jo pokazale miši.

3. Razprava

V tej študiji smo dokazali, da fenolni izvleček P. satioum kaže antioksidativno aktivnost in vitro ter anksiolitično in antidepresivno aktivnost in vivo.

V nekaterih študijah je bilo ugotovljeno, da imata ferulinska kislina in cimetova kislina antidepresivne učinke [17,18], medtem ko sta kvercetin in hidroksitirozol pokazala odobren anksiolitični učinek [19,20]. Te spojine bi lahko bile v ozadju opazovanega učinka.

Učinkovitost antioksidanta se lahko kaže v različnih oblikah, kot je lovljenje prostih radikalov, razgradnja prostih radikalov in tudi kelacija kovinskih ionov [17]. To aktivnost je mogoče ovrednotiti s testi FRAP in DPPH, od katerih se slednji zaradi svoje hitrosti pogosto uporablja za presejanje molekul, prisotnih v rastlinskih izvlečkih [18]. Naši rezultati so pokazali antioksidativno delovanje fenolnega izvlečka peteršilja. Prejšnje delo Hinneburga et al [21] je pokazalo, da je vodni ekstrakt peteršilja pokazal šibko inhibitorno aktivnost radikala DPPH z IC50 reda 12.0±{{8} }.10 mg/mL (v primerjavi s polifenolnim ekstraktom v naši študiji, 0,184 ug/mL). Nasprotno pa je bil kelatni učinek tega izvlečka učinkovitejši v primerjavi z drugimi izvlečki, uporabljenimi v isti študiji.

Nedavne študije so odkrile tudi povezavo med motnjami razpoloženja in oksidativnim stresom [22,23] ter psihološkim stresom [24,25], s čimer so odprle nove poti za preprečevanje in/ali obvladovanje anksioznosti in depresije v zvezi s potencialno uporabo antioksidantov. Desrumaux et al. [26] so opazili, da je pomanjkanje vitamina E v mišjih možganih zvišalo raven ključnih znakov oksidativnega stresa in vedenja, ki povzroča tesnobo. Podobno so miši, ki so dobivale vitamin C, nedavno pokazale, da ima ta spojina antidepresivno vlogo na podlagi rezultatov testa obešanja repa [27]. Polifenoli, vključno s flavonoidi in fenolnimi kislinami, so znani po svojih močnih antioksidativnih učinkih [28, 29]. Uporaba teh sekundarnih fitokemičnih metabolitov kot način izogibanja in obvladovanja anksioznosti in depresije je lahko obetavna strategija [9]. Študija, ki so jo izvedli Akinci et al. [30] so dokazali, da je peteršilj uspešen pri zmanjševanju stresno povzročene poškodbe želodca, če ga jemljemo peroralno, tako da podpira antioksidativni obrambni sistem celic, kar se kaže v povečanju povprečne ravni glutationa v tkivih (53,31 ± 9,50) in aktivnosti superoksid dismutaze (30). 15,18±1,05) in katalaze (16,68 ±2,29).

Poskus na odprtem polju se uporablja za oceno čustvenega stanja živali. Živali, ki so bile ločene od domače kletke in postavljene v drugo okolje, pogosto izkazujejo stisko in tesnobo s spremembami vseh ali nekaterih parametrov, kot je zmanjšana aktivnost premikanja, raziskovanje in imobilizacija, a povečana nego vedenje [31]. Izvleček P.sativum v odmerku 100 mg/kg je povzročil zelo pomemben anksiolitični učinek, kar se je pokazalo v znatnem povečanju časa, preživetega v središču polja, in celotne ambulantne aktivnosti. To povečanje je bilo večje od tistega, opaženega pri miših, zdravljenih z bromazepamom v odmerku 1 mg/kg.

Eksperiment svetlo-temna soba je koristen tudi pri napovedovanju anksiolitičnega učinka zdravil. Da bi izmerili stopnjo anksioznosti pri miših med tem testom, sta upoštevana dva parametra: (1) nižji odstotek časa, ki ga je žival preživela v temni komori, je povezan z njeno stopnjo anksioznosti. Z drugimi besedami, ko je odstotek časa, preživetega v osvetljenem predelu, minimalen, se tesnoba šteje za visoko in (2) je število prehodov, tj. število prehodov med obema oddelkoma, obratno sorazmerno s stopnjo tesnobe. (manjše število prehodov pomeni visoko stopnjo anksioznosti)[32]. Ugotovitve te študije so pokazale, da je polifenolni ekstrakt P. sativum pri 100 mg/kg pokazal optimalen anksiolitični učinek na podlagi povečanega časa, ki ga je žival preživela v osvetljeni komori, in števila prehodov v primerjavi s kontrolami v študijskem obdobju.

Poskus prisilnega plavanja je bil razvit v sedemdesetih letih prejšnjega stoletja. Znan je tudi po imenu izumitelja kot Porsoltov test [33]. Naša ugotovitev kaže, da je bil čas nepremičnosti zdravljenih miši krajši kot pri kontrolnih miših, kar kaže na antidepresivni učinek fenolnega izvlečka P. sativum. Vendar je bilo to zmanjšanje časa nepremičnosti morda v prid povečanju časa plavanja ali časa plezanja. Ta razlika je zelo pomembna z nevrofarmakološkega vidika, saj teoretično med prisilnim plavanjem antidepresivi, ki povzročajo pretežno noradrenergični ali dopaminergični dvig, zmanjšajo nepokretnost s podaljšanjem časa stopnjevanja [34], medtem ko tisti, ki namesto tega aktivirajo 5HT, zmanjšajo nepokretnost s podaljšanjem časa plavanja. [35]. Kar zadeva delovanje centralnega živčevja, večina polifenolov neposredno vpliva na sisteme nevrotransmiterjev [36]. Študije, izvedene na peteršilju, kažejo prevlado flavonoidov 37]. Široka paleta flavonoidov, ki jih najdemo v konvencionalnih tradicionalnih medicinskih izvlečkih, naj bi imela sedativne/anksiolitične učinke z neposredno vezavo na receptorje GABA A [38].

Študija, ki so jo izvedli Priprem in sod. [39] kaže, da polifenol kvercetin izkazuje anksiolitično delovanje po tednu ponavljajočega se jemanja v odmerku 300 mg/kg, ki pa ni tako učinkovito kot diazepam, ki pokaže učinek eno uro po jemanju v nižjih odmerkih. Pereira idr. [40] so pokazali, da ima rožmarinska kislina anksiolitični učinek pri zelo nizkih odmerkih (2 do 4 mg/kg). Drug primer je apigenin, ki kaže selektivno in nizko afiniteto za benzodiazepinske receptorje, kar povzroča anksiolitično aktivnost skoraj brez stranskih učinkov [41]. Flavonoidi imajo tudi vlogo pri depresiji z zaviranjem monoaminooksidaze in posledično zvišanjem ravni 5-HT, DA in norepinefrina v določenih predelih možganov [42].

Ekscitatorne aminokisline, kot so aspartat, glutamat, homocistein in cistein, stimulirajo postsinaptične celice, medtem ko inhibitorne aminokisline, kot so alanin, glicin, GABA in tavrin, zavirajo postsinaptični razvoj celic 43]. Encim, imenovan aromatska L-aminokislinska dekarboksilaza, imenovana tudi DOPA dekarboksilaza, triptofan dekarboksilaza, 5-hidroksitriptofan dekarboksilaza ali AAAD, ki katalizira ustrezno dekarboksilacijo L-dope in 5-hidroksitriptofana v dopamin in {{ 7}} ima lahko tudi vlogo hidroksitriptamin. Peteršilj lahko povzroči prekomerno izražanje tega encima, kar prispeva k njegovemu antidepresivnemu učinku. Študija, izvedena na Centella Asiatica, rastlini iz iste družine Apiaceae, je pokazala, da je antidepresivni učinek skupnih triterpenov posledica izboljšanja delovanja hipotalamus-hipofizno-adrenokortikalne osi in povečanja vsebnosti monoaminskih nevrotransmiterjev. [44]. Te študije kažejo na prisotnost anksiolitičnega in antidepresivnega delovanja fenolnega ekstrakta P. sativum.

4. Materiali in metode

4.1. Rastlinski material

Petroselinum sativum Hoffm. nadzemni deli so bili zbrani med fazo pred cvetenjem (pomlad 2018) iz regije Tanounate v severnem Maroku (34 stopinj 32'9"N 4 stopinj 38'24"W). Razvrstitev, identifikacijo in botanično ime te rastline je preveril usposobljeni botanik Pr. Bari Amina. Vzorec rastline je deponiran v herbariju Fakultete za znanost Dhar El Mahrez Fez (vzorec vavčerja: 18TA5001).

4.2. Ekstrakcija

Ekstrakcija je bila izvedena, kot so opisali Slighoua et al. [11]. Na kratko, 10 g posušenih nadzemnih delov P. sativum finega prahu smo zmešali z metanolom (100 ml) in macerirali 3 ure pri temperaturi 50 stopinj. Nato smo filtrat koncentrirali z uporabo rotacijskega uparjalnika do suhega, da smo zagotovili popolno izhlapevanje topila. Nastali ekstrakt smo ponovno raztopili v destilirani vodi (200 mL) in izprali s tremi heksani in kloroformom (3-krat po 200 mL), da smo se znebili pigmentov in drugih nečistoč. Končno vodno fazo smo ekstrahirali z etil acetatom (200 mL trikrat). Organsko fazo (etil acetat) smo koncentrirali, da smo dobili polifenolni ekstrakt. Izkoristek ekstrakcije je 10,52 odstotka.

Prej smo objavili delo o istem izvlečku, ki je z analizo HPLC-DAD pokazalo, da je sestavljen iz naslednjih polifenolov: (1) ferulinska kislina, (2) cimetova kislina, (3) galna kislina, (4) kvercetin, (5) Miricetin, (6) Naringenin, (7) Hidroksi-tirozol [11].

4.3. Študije živali

V tej študiji je miši (švicarski albino) zagotovila Živalska hiša naravoslovne fakultete Dhar el Mahraz Fez. Preden so jih vključili v poskuse, so jih dali v skupine po šest v običajne kletke in jim omogočili dvotedensko obdobje prilagajanja s prostim dostopom do hrane in vode ter nadzorovano temperaturo 22 ± 2 stopinji in ciklom svetloba/tema 12 h/12 ​​h.

Poskusi so bili izvedeni v skladu z mednarodnimi standardi za zdravljenje in uporabo poskusnih živali [16] in notranjim odborom za etiko živali (#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Ocena antioksidativne aktivnosti

4.4.1.2, 2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) test

DPPH je ena najpogostejših kemičnih spojin, ki se uporabljajo za ocenjevanje antioksidativne aktivnosti fenolnih spojin |45. DPPH ima nesparjeni elektron na premostitvenem atomu dušika. Načelo tega testa je povzeto v zmožnosti ekstrakta, da reducira temno vijoličen prosti radikal DPPH v rumenkasto obarvano redukcijo, ki jo je mogoče izmeriti s spektrofotometrijo [28]. Pripravili smo niz koncentracij ekstrakta v metanolu, od katerih smo 100 μL vsakega dodali 750 μL metanolne raztopine DPPH (0,004 odstotka). Po inkubacijskem obdobju 30 minut pri 25 stopinjah smo izmerili absorbanco pri 517 nm. Za negativno kontrolo smo vzorec nadomestili z metanolom. Odstotek DPPH je bil določen z naslednjo enačbo:

(1)I=[(prazen vzorec)/prazen]×100

V odstotku antiradikalne aktivnosti je Sample absorbanca vzorca, Blank pa absorbanca negativne kontrole.

4.4.2. Preskus redukcijske moči železa (FRAP).

Redukcijska moč železa (Fe3 plus ) v proučevanem ekstraktu je bila določena po metodi, ki so jo opisali Mechchate et al. 【28】. Na kratko, 100 μL ekstrakta v različnih koncentracijah smo zmešali s 500μL raztopine s fosfatnim pufrom （PBS, 0,2 M, pH 6,6 ） in 500 μL 1-odstotne raztopine kalijevega fericianida K, Fe（CN）. Te smo inkubirali v vodni kopeli pri 50 stopinjah 20 minut. Nato smo reakcijski mešanici dodali 500 μL 10-odstotne vodne raztopine trikloroocetne kisline （TCA）, 100 μL 0,1-odstotne raztopine železovega klorida FeCl3 in 0,5 mL destilirane vode. Odčitavanje absorbance te mešanice je bilo vzeto pri 700 nm proti slepemu vzorcu, ki je vseboval vse reagente medija razen rastlinskega izvlečka. Rezultati so izraženi kot 50-odstotna efektivna koncentracija (EC50), ki predstavlja koncentracijo antioksidantov, potrebno za pridobitev absorbance 0,5. Povečanje absorbance ustreza povečanju redukcijske moči testiranega ekstrakta.

4.5. Antidepresivni test prisilnega plavanja (FST)

Porsoltov model ali test prisilnega plavanja je napovedni test aktivnosti antidepresivnega tipa. Miši so posamezno prisiljene plavati v valjasti posodi, napolnjeni do višine 12 cm z vodo. Test traja 6 minut, vendar se analizirajo samo zadnje 4 minute testa. Žival se šteje za negibno, ko lebdi v pokončnem položaju in naredi le nekaj gibov, da ohrani ravnotežje v vodi (čas nepremičnosti).

Za ta test so bile uporabljene skupno štiri serije po pet miši. Vse rastlinske izvlečke smo dajali z gavažo 21 dni, test pa smo izvedli 1 uro po dajanju izvlečkov 21 dni. Skupina A, negativna kontrola, je prejela fiziološko raztopino kot nosilec. Skupina B, pozitivna kontrolna skupina, je prejela paroksetin v odmerku 11 mg/kg. Skupini C in D sta prejeli PSPE v odmerku 50 oziroma 100 mg/kg.

Eno uro po dajanju rastlinskega ekstrakta smo čas nepremičnosti šteli 6 minut. Prvi dve minuti sta miški omogočili, da se je prilagodila stresu, nato pa je miška s časom postala utrujena in imobilizirana. Čas nepremičnosti smo šteli v sekundah in ga nato primerjali s časom nepremičnosti miši v skupini pozitivne kontrole (paroksetin) za referenco [33].

4.6. Anksiolitična aktivnost

4.6.1. Odprto polje

Test odprtega polja (OF) se uporablja za napovedovanje anksiolitične aktivnosti, saj živali kažejo visoko stopnjo izogibanja osrednjemu območju glede na periferijo. Uporablja se tudi kot test raziskovanja in gibanja. Območje je bilo sestavljeno iz štirih lesenih sten, visokih 40 cm, razporejenih v površino 50 × 50 cm, razdeljenih na 25 ploščic enake velikosti, označenih s črnimi črtami.

Za ta test so bile uporabljene skupno štiri serije po pet miši. Vse rastlinske izvlečke so dajali z gavažo 21 dni. Nato je bil test izveden 1 uro po dajanju rastlinskega izvlečka 1, 7, 14 dni in skupina A, negativna kontrola, je prejela fiziološko raztopino kot vehikel Skupina B, pozitivna kontrola, je prejela bromazepam v odmerku 1 mg/kg . Skupini C in D sta prejeli PSPE v odmerku 50 oziroma 100 mg/kg.

Po 60 minutah smo preizkus izvedli tako, da smo vsako miško postavili v osrednji kvadrat, da bi raziskali areno, da bi izmerili celotno ambulantno aktivnost miši (število skupnih ploščic, ki so jih miši prečkale, tj. število perifernih ploščic in število sredinskih ploščic, ki so jih miši prečkale z vsemi štirimi nogami), in čas, porabljen v središču odprtega polja [3146].

4.6.2. Test svetlo-temne sobe

Test svetlo-temne sobe se uporablja tudi za napovedovanje anksiolitične aktivnosti, saj omogoča enostavno oceno vedenja živali, povezanega z anksioznostjo, z analizo gibanja živali med dvema predelkoma različnih barv in osvetlitve. Bolj zaskrbljene živali preživijo manj časa v osvetljenem prostoru. Lesena svetlo-temna škatla z merami 44 × 21 × 21 cm je bila sestavljena iz dveh črno-belih predelkov, povezanih s prehodom (luknja 7 × 7 cm v sredini, ki ločuje oba prostora in omogoča dostop do enega ali drugega predelkov). Osvetljen kupe je osvetljevala svetilka.

Za ta test so bile uporabljene skupno štiri serije po pet miši. Vse rastlinske izvlečke so dajali z gavažo 21 dni. Test smo izvedli 1 uro po dajanju rastlinskega izvlečka 1., 7., 14. in 21. dan. Skupina A, negativna kontrola, je prejela fiziološko raztopino kot nosilec. Skupina B, pozitivna kontrola, je prejela bromazepam v odmerku 1 mg/kg. Skupini C in D sta prejeli PSPE v odmerku 50 oziroma 100 mg/kg.

Po 60 minutah smo izvedli petminutni test tako, da smo vsako miško postavili obrnjeno proti odprtini, ki povezuje temni predel [47]. Po vsakem testu smo škatlo očistili z alkoholom. Izmerjena parametra sta bila čas, porabljen v osvetljeni komori, in število prehodov komore [48].

5. Sklepi

Peteršilj, vsakodnevno uporabljeno zelišče v kulinariki po vsem svetu, predstavlja ogromne koristi za zdravje in s to študijo je bilo dokazano, da ima izjemno antidepresivno in anksiolitično delovanje, celo boljše od klasičnih zdravil, zlasti pri odmerku 100 mg/kg. V iskanju učinkovitega zdravila z manj ali skoraj brez stranskih učinkov bi lahko bila ta rastlina dobra alternativa. To delo spodbuja njegovo vsakodnevno uživanje in njegov razvoj v dobro uveljavljeno fitomedicino.

Za dokončanje tega dela so potrebne nadaljnje raziskave, vključno z izvedbo drugih vedenjskih testov z istim izvlečkom za potrditev njegove učinkovitosti. Tako je načrtovano biološko vodeno frakcioniranje fenolnega izvlečka P. satioum za identifikacijo ključne komponente, ki je odgovorna za opažene anksiolitične in antidepresivu podobne aktivnosti, ter za določitev njihovega natančnega mehanizma delovanja.

Reference
1. Friedrich, MJ Depresija je glavni vzrok invalidnosti po vsem svetu. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Razširjenost depresije v skupnosti iz 30 držav med letoma 1994 in 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Ameriško psihiatrično združenje. Diagnostični in statistični priročnik duševnih motenj (DSM-5®); Ameriško psihiatrično združenje: Washington, DC, ZDA, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Napovedovanje naravnega poteka depresije iz širokega spektra kliničnih, psiholoških in bioloških podatkov: pristop strojnega učenja. prevod Psihiatrija 2018, 8, 1–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Nevrobiološke povezave med stresom in anksioznostjo. Neurobiol. Stres 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepini: njihova uporaba bodisi kot esencialnih zdravil bodisi kot strupenih snovi. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF. Izpostavljenost hipobarični hipoksiji pri podganah različno spremeni antidepresivno učinkovitost selektivnih zaviralcev ponovnega privzema serotonina, fluoksetina, paroksetina, escitaloprama in sertralina. Pharmacol. Biochem. Obnašaj se. 2018, 170, 25–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andrij, A.; Andriy, D. Zdravilne rastline, ki se uporabljajo za zdravljenje akutnih težav s prebavnim sistemom v regiji Fez-Meknes v Maroku: Etnofarmakološka raziskava. Etnobotanika. Res. Appl. 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Subakutna ocena toksičnosti in antidepresivu podobnih učinkov polifenolov Origanum Majorana L. pri švicarskih albinih miših. Molecules 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: pregled. Med. Začimbe Veg. Afr. 2017, 527–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Ocena in vivo estrogenih in protivnetnih aktivnosti hidro-etanolnega ekstrakta in polifenolne frakcije peteršilja (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, GOSPA; Rahimi, R.; Farzaei, F. Peteršilj: Pregled etnofarmakologije, fitokemije in bioloških aktivnosti. J. Tradicija. brada. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafifim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS Fenolna kemična sestava ekstrakta Petroselinum Crispum in njen učinek na hemostazo. Nat. Prod. Komun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Anti-anksiozna aktivnost Coriandru m Sativum, ocenjena z uporabo različnih eksperimentalnih modelov anksioznosti. Indijski J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Šahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Vrednotenje antidepresivu podobnih učinkov vodnih in etanolnih izvlečkov sadja Pimpinella Anisum pri miših. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Vpogled v anksiolitične in antidepresivne lastnosti Carum carvi L. in njihovo povezavo z njegovo antioksidativno aktivnostjo. Life 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulinska kislina izboljša depresivno vedenje pri prenatalno stresnih potomcih podgan prek protivnetne aktivnosti in osi HPA. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Antidepresivni potencial cimetovih kislin: mehanizmi delovanja in perspektive pri razvoju zdravil. Molecules 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Šim, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Zaščitni učinki kvercetina na anksioznosti podobne simptome in nevrovnetje, ki ga povzroča lipopolisaharid pri podganah. Evid. Na osnovi dopolnila. Altern. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi´c Markovič, A.; Tori's, J.; Barbarič, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, Tyrosol in derivati ​​ter njihovi potencialni učinki na zdravje ljudi. Molecules 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Antioksidativne aktivnosti izvlečkov iz izbranih kulinaričnih zelišč in začimb. Food Chem. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Zmanjšana kakovost življenja pri motnjah razpoloženja je povezana s povečanim nevrooksidativnim stresom in bazalnimi ravnmi ščitnično stimulirajočega hormona ter uporabo antikonvulzivnih stabilizatorjev razpoloženja. J. Eval. Clin. Prakt. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Povečana nitrooksidativna stresna toksičnost kot glavna determinanta povišanega krvnega tlaka pri motnjah razpoloženja. J. Afekt. Disord. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Labod, SH; Ferguson, KK Povezava med prenatalnim psihološkim stresom in oksidativnim stresom med nosečnostjo. pediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Učinki psihološkega stresa med vadbo na označevalce oksidativnega stresa pri mladih zdravih, usposobljenih moških. Physiol. Obnašaj se. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Pomanjkanje fosfolipidnega prenosnega proteina (PLTP) zmanjša vsebnost vitamina E v možganih in poveča anksioznost pri miših. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [CrossRef]