Odkrivanje novih indikacij in potencialnih intervencijskih ciljev za bolezni podocitov

Ta študija je razdeljena na dva dela, klinično raziskavo in raziskavo na živalih. Klinični raziskovalni del je multicentrična študija, ki je analizirala pozitiven delež protiteles proti nefrinu pri bolnikih z boleznimi glomerulov pri odraslih (vključno z MCD, FSGS, MN, imunoglobulinsko A nefropatijo [IgAN], glomerulonefritisom in lupusom, povezanim z nevtrofilnimi citoplazmatskimi protitelesi [ANCA] nefritis [LN]), otroci z idiopatskim nefrotskim sindromom (INS) in kontrolni. Omeniti velja, da podatki za odrasle in pediatrične bolnike prihajajo predvsem iz Evrope (Nemčija, Italija, Francija).

Kliknite na Cistanche za ledvično bolezen

Raziskovalni del na živalih je vzpostaviti ustrezen mišji model, zlasti samce miši divjega tipa BALB/c, ki so bili subkutano cepljeni z rekombinantnim mišjim nefrinom in popolnim Freundovim adjuvansom. Miši kontrolne skupine so prejele popoln Freundov adjuvans, pomešan s fiziološko raztopino s fosfatnim pufrom.

Seveda je ta študija inovativno uporabila imunoprecipitacijo za odkrivanje anti-nefrina. Prejšnje preiskovalne metode, kot so Blot, ELISA itd., ne morejo natančno kvantificirati ali kvantificirati protiteles proti nefrinu, vendar je metoda imunoprecipitacije drugačna. Natančneje, status avtoprotiteles proti nefrinu je bil določen z imunoprecipitacijo z uporabo zunanje domene rekombinantnega humanega nefrina (aminokisline A36 do L1052). Proteine ​​smo čez noč inkubirali s človeškim serumom ali plazmo in nato dodali protein G. Imunoprecipitate smo zbrali, podvrgli elektroforezi, popivnali in analizirali na nefrin s protitelesom proti nefrinu (AF4269; R&D Systems). Vzorci so bili analizirani na slep način, diagnoza bolezni in klinični podatki pa so bili razkriti šele po določitvi statusa avtoprotiteles proti nefrinu. Za kvantitativno odčitavanje avtoprotiteles proti nefrinu je bil vzpostavljen hibridni test, ki je vključeval kvantifikacijo imunoprecipitacije in imunoprecipitiranega nefrina. Takšen test omogoča najbolj jasno in nedvoumno odkrivanje protiteles proti nefrinu.

1 Osnovne informacije

V to študijo je bilo vključenih skupno 656 udeležencev, vključno s 357 odraslimi z glomerularno boleznijo, 182 otrok z glomerularno boleznijo in 117 kontrolnimi osebami (67 odraslih in 50 otrok). Specifične bolezni bolnikov z glomerularnimi boleznimi so vključevale MCD, FSGS, MN, imunoglobulinsko A nefropatijo (IgAN), nefritis, povezan z nevtrofilnimi citoplazemskimi protitelesi (ANCA-GN), lupusni nefritis (LN) in idiopatski nefrotski sindrom.

2 Porazdelitev protiteles proti nefrinu pri odraslih bolnikih

Med odraslimi bolniki je bilo ugotovljeno, da je 46 (44 %) od 105 bolnikov z MCD in 7 (9 %) od 74 primarnih bolnikov s FSGS pozitivnih na avtoprotitelesa proti nefrinu, medtem ko skoraj noben bolnik (n manj kot ali enako 1) z drugimi glomerularne bolezni so bile pozitivne na avtoprotitelesa proti nefrinu. Če bolniki z MCD niso prejemali nobenega imunosupresivnega zdravljenja, je bila pozitivna stopnja avtoprotiteles proti nefrinu kar 69 % (24/35), kar je bilo višje kot pri bolnikih z MCD, ki so prejemali imunosupresivno zdravljenje (36/59).

3 Otroški bolniki

Pri otrocih z idiopatskim nefrotskim sindromom (INS) je bil skupni delež pozitivnih avtoprotiteles proti nefrinu 52 %. V podskupini, ki ni prejemala imunosupresivnega zdravljenja, je bil skupni delež pozitivnih avtoprotiteles proti nefrinu kar 90 %, medtem ko so bila pri zdravih otrocih avtoprotitelesa proti nefrinu skoraj negativna, le pri enem bolniku je bil pozitiven rezultat. Treba je omeniti, da imajo ti podatki velik klinični pomen, ker otroci redko opravijo biopsijo ledvic.

4 Razmerje med pozitivnim pregledom in kliničnimi značilnostmi

Ne glede na to, ali gre za odrasle ali otroke, imajo bolniki s pozitivnimi protitelesi proti nefrinu višje razmerje beljakovin in kreatinina v urinu (UPCR) ali razmerje albumina in kreatinina v urinu (UACR), medtem ko imajo bolniki z negativnimi protitelesi proti nefrinu običajno UACR ali UPCR<0.3.

Poleg tega, če se raven protiteles proti nefrinu spremeni po tem, ko bolnik prejme učinkovito imunosupresivno terapijo, se bo spremenila tudi bolnikova raven UACR. Na primer, poročilo o primeru bolnika je pokazalo, da so se bolnikove protitelesa proti nefrinu in ravni proteinurije po prejemu zdravljenja z glukokortikoidi in ciklosporinom A ponovno povečale, medtem ko so po prejemu rituksimaba ravni protiteles proti nefrinu in UACR še naprej upadale in so bile blizu { {3}}. Seveda ne gre za osamljen primer in veliko bolnikov ima podobne ugotovitve. Analiza podatkov je pokazala, da obstaja močna korelacija med vsemi izmerjenimi ravnmi avtoprotiteles proti nefrinu in razmerjem med albuminom in kreatininom v urinu (r=0,64).

Povzetek kliničnih študij

Na splošno so avtoprotitelesa proti nefrinu široko prisotna pri odraslih z MCD in otrocih z ISN in so učinkoviti biomarkerji za napovedovanje proteinurije pri bolnikih, titer avtoprotiteles proti nefrinu pa lahko usmerja klinično zdravljenje. Zato so avtoprotitelesa proti nefrinu nov klasifikacijski biomarker za bolezen podocitov in nov standard za patološko klasifikacijo, ki se lahko uporablja za spremljanje aktivnosti bolezni, napovedovanje prognoze in usmerjanje zdravljenja.

1 Rezultati biopsije ledvic in klinične značilnosti

Samci miši divjega tipa BALB/c so prejeli subkutano imunizacijo z rekombinantnim mišjim nefrinom in popolnim Freundovim adjuvansom (intervencijska skupina). Miši kontrolne skupine so prejele popoln Freundov adjuvans, pomešan s fiziološko raztopino s fosfatnim pufrom. Miši intervencijske skupine so po 3 tednih hitro razvile nefrotski sindrom.

Ledvične biopsije obeh skupin miši so pokazale, da čeprav ni bilo pomembnih razlik med obema skupinama pri preiskavi barvanja s PAS, je elektronska mikroskopija pokazala razširjeno izbris izrastkov podocitnih stopal in nobenih usedlin z elektronsko gostoto pri miših intervencijske skupine, medtem ko ni bilo podoben pojav v kontrolni skupini. Natančneje, označevanje mišjega IgG z imunskim zlatom pri miših intervencijske skupine je pokazalo, da je bilo specifično lokalizirano na razrezani diafragmi med območji izbrisa procesov stopal podocitov.

Poleg tega so miši intervencijske skupine pokazale prerazporeditev nefrina iz membrane v citoplazmo, s pozitivnostjo mišjega IgG v finem pikčastem vzorcu, delno kolokalizirano z nefrinom in brez infiltracije imunskih celic, zmanjšanega števila podocitov ali odlaganja komplementa.

2 Molekularni mehanizem

Da bi pojasnili, ali imajo avtoprotitelesa proti nefrinu neposreden učinek na signalizacijo nefrina in poti navzdol, so raziskovalci izvedli proteomske in fosfoproteomske analize na glomerulih, izoliranih iz kontrolnih miši. Rezultati so pokazali povečano fosforilacijo Nphs1, tirozinskega ostanka, ki ustreza Y1176 človeškega nefrina.

Znano je, da je to mesto fosforilacije vključeno v signalizacijo nefrina, kar vodi do sestavljanja aktina, reorganizacije citoskeleta in endocitoze nefrina. Proteomika je pokazala, da so se v glomerulih miši intervencijske skupine ravni adapterskih proteinov, kot sta ShcA (Shc1) in klatrin (Cltc), ki sodelujejo pri endocitnem transportu nefrina, povečale, medtem ko je bil protein, povezan z jedrno režo diafragme, znatno znižan, kar je pomemben vzrok lezij podocitov. To pomeni, da so avtoprotitelesa proti nefrinu povzročila nefrotski sindrom, fosforilacijo nefrina in preureditev celic na proteomski ravni, kar je povzročilo ultrastrukturne spremembe, značilne za MCD.

Kako zdravilo Cistanche zdravi ledvično bolezen?

Cistancheje tradicionalno kitajsko zeliščno zdravilo, ki se že stoletja uporablja za zdravljenje različnih zdravstvenih stanj, vključno zledvicabolezen. Pridobiva se iz posušenih stebelCistanchedeserticola, rastlina, ki izvira iz puščav Kitajske in Mongolije. Glavne aktivne sestavine cistanche sofeniletanoidglikozidi, ehinakozid, inakteozid, za katere ugotovili, da blagodejno vplivajo naledvicazdravje.

Ledvična bolezen, znana tudi kot ledvična bolezen, se nanaša na stanje, pri katerem ledvice ne delujejo pravilno. To lahko povzroči kopičenje odpadnih produktov in toksinov v telesu, kar povzroči različne simptome in zaplete. Cistanche lahko pomaga pri zdravljenju bolezni ledvic prek več mehanizmov.

Prvič, ugotovljeno je bilo, da ima cistanche diuretične lastnosti, kar pomeni, da lahko poveča proizvodnjo urina in pomaga pri odstranjevanju odpadnih snovi iz telesa. To lahko pomaga zmanjšati obremenitev ledvic in prepreči kopičenje toksinov. S spodbujanjem diureze lahko cistanche pomaga tudi pri zniževanju visokega krvnega tlaka, ki je pogost zaplet bolezni ledvic.

Poleg tega se je pokazalo, da ima cistanche antioksidativne učinke. Oksidativni stres, ki ga povzroča neravnovesje med nastajanjem prostih radikalov in antioksidativno obrambo telesa, ima ključno vlogo pri napredovanju bolezni ledvic. pomaga nevtralizirati proste radikale in zmanjšati oksidativni stres ter tako ščiti ledvice pred poškodbami. Feniletanoidni glikozidi, ki jih najdemo v cistanči, so bili še posebej učinkoviti pri lovljenju prostih radikalov in zaviranju peroksidacije lipidov.

Poleg tega je bilo ugotovljeno, da ima cistanche protivnetne učinke. Vnetje je še en ključni dejavnik pri razvoju in napredovanju bolezni ledvic. Protivnetne lastnosti Cistanche pomagajo zmanjšati nastajanje protivnetnih citokinov in zavirajo aktivacijo obveznih poti za vnetje ter tako ublažijo vnetje v ledvicah.

Poleg tega se je pokazalo, da ima cistanche imunomodulatorne učinke. Pri ledvični bolezni je lahko imunski sistem moten, kar povzroči prekomerno vnetje in poškodbo tkiva. Cistanche pomaga uravnavati imunski odziv z moduliranjem proizvodnje in aktivnosti imunskih celic, kot so celice T in makrofagi. Ta imunska regulacija pomaga zmanjšati vnetje in preprečiti nadaljnje poškodbe ledvic.

Poleg tega je bilo ugotovljeno, da cistanche izboljšuje delovanje ledvic s spodbujanjem regeneracije ledvičnih cevk s celicami. Epitelijske celice ledvičnih tubulov igrajo ključno vlogo pri filtraciji in reabsorpciji odpadnih produktov in elektrolitov. Pri bolezni ledvic se te celice lahko poškodujejo, kar povzroči okvarjeno delovanje ledvic. Sposobnost Cistanche, da spodbuja regeneracijo teh celic, pomaga obnoviti pravilno delovanje ledvic in izboljša splošno zdravje ledvic.

Poleg teh neposrednih učinkov na ledvice je bilo ugotovljeno, da ima cistanche blagodejne učinke na druge organe in sisteme v telesu. Ta celovit pristop k zdravju je še posebej pomemben pri boleznih ledvic, saj stanje pogosto prizadene več organov in sistemov. dokazano je, da ima che varovalne učinke na jetra, srce in krvne žile, ki jih pogosto prizadenejo bolezni ledvic. S spodbujanjem zdravja teh organov cistanche pomaga izboljšati splošno delovanje ledvic in preprečiti nadaljnje zaplete.

Skratka, cistanča je tradicionalno kitajsko zeliščno zdravilo, ki se že stoletja uporablja za zdravljenje bolezni ledvic. Njegove učinkovine delujejo diuretično, antioksidativno, protivnetno, imunomodulatorno in regenerativno, kar pomaga izboljšati delovanje ledvic in ščiti ledvice pred nadaljnjimi poškodbami. , cistanche blagodejno vpliva na druge organe in sisteme, zaradi česar je holističen pristop k zdravljenju bolezni ledvic.