Ocenjevanje razmerja med visoko občutljivim C-reaktivnim proteinom in delovanjem ledvic z uporabo Mendelove randomizacije v japonski študiji J-MICC v skupnosti

POVZETEK

Ozadje: Vnetje naj bi bilo adejavnik tveganja za bolezni ledvic. Ne glede na to, ali je vnetni status vzrok ali posledicakronična ledvična bolezenostaja sporen. Želeli smo raziskati vzročno zvezo medvisoko občutljiv C-reaktivni protein(hs-CRP) inocenjena hitrost glomerulne filtracije(eGFR) z uporabo pristopov Mendelske randomizacije (MR).

Metode:V tej študiji je bilo analiziranih skupno 10.521 udeležencev japonske večinstitucionalne kohortne študije. Za oceno učinka genetsko določenega hs-CRP na delovanje ledvic smo uporabili pristope MR z dvema vzorcema (uteženo inverzno varianco (IVW), uteženo mediano (WM) in MR-Eggerjevo metodo). Izbrali smo štiri in tri polimorfizme enega nukleotida (SNP), povezane s hs-CRP, kot dve instrumentalni spremenljivki (IV): IVCRP in IVAsian, ki temeljita na SNP-jih, predhodno identificiranih v evropski in azijski populaciji. IVCRP in IVAsian sta pojasnila 3,4 % oziroma 3,9 % variacije hs-CRP.Rezultati:Z uporabo IVCRP genetsko določen hs-CRP ni bil pomembno povezan zeGFRpri metodah IVW in WM (ocena na 1 enoto povečanja ln(hs-CRP), 0.000; 95-odstotni interval zaupanja [CI], −0.{{ 7}}19 do 0.020 in −0.003; 95 % IZ, −{{23 }}.019 do 0.014). Za IVAsian smo našli podobne rezultate z uporabo metod IVW in WM (ocena, 0.005; 95-odstotni IZ, −0.{{44} }20 do 0,010 oziroma –0,004; 95 % IZ, –0,020 do 0,012). Metoda MR-Egger tudi ni pokazala nobenih vzročnih povezav med hs-CRP in eGFR (IVCRP: -0,008; 95 % IZ, -0,058 do 0,042; IVAsian: 0,001; 95 % IZ, -0,036 do 0,036).

Sklepi:Naše analize MR dveh vzorcev z različnimi IV niso podprle vzročnega učinka hs-CRP na eGFR.

Ključne besede: hs-CRP; eGFR; Mendelska randomizacijska študija;genetske epidemiologije; vnetje

KLIKNITE TUKAJ ZA NARAVNI ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE S 25 % EHINAKOZIDA IN 9 % AKTEOZIDA ZA DELOVANJE LEDVIC

Podporna storitev Wecistanche-največjega izvoznika cistanche na Kitajskem:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Nakupujte za več podrobnosti o specifikacijah:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

UVOD

Sistemsko vnetje velja za enega oddejavniki tveganja za pogoste kronične bolezni, vključno zsladkorna bolezen,1 hipertenzija,2 bolezni srca in ožilja,3 inkronična ledvična bolezen(CKD).4 Na splošno,C-reaktivni protein(CRP) je bil uporabljen kot biomarker sistemskega vnetja v kliničnih in osnovnih raziskavah. Čeprav so prejšnje longitudinalne študije preučevale povezavo med ravnmi CRP in kronično ledvično boleznijo pri različnih populacijah, ostajajo dokazi o vzročnosti te povezave sporni.5–7 Nekateri raziskovalci pa so dokazali učinek bioloških funkcij, usmerjenih v CRP, na delovanje ledvic.8, 9 En raziskovalec je objavil tudi metaanalizo, ki nakazuje, da bi dodatki vitamina D lahko znižali ravni CRP v obtoku.10 Te študije skupaj kažejo, da lahko posegi na CRP pomagajo izboljšati delovanje ledvic.

V zadnjih letih jeMendelska randomizacija(MR) pristop je pritegnil veliko pozornosti v genetski epidemiologiji. Največja prednost te metode je raziskati vzročno razmerje med izpostavljenostjo (X) in izidom (Y) iz nabora opazovalnih podatkov z uporabo genetskih variant kot instrumentalnih spremenljivk (G: IV).11 Razvoj MR analize se je zgodil zaporedno por prepoznavanje polimorfizmov enega nukleotida(SNP) v asociacijskih študijah celotnega genoma (GWAS). Kot pri drugih zdravstvenih rezultatih je prejšnji GWAS identificiral SNP, povezane z ravnmi CRP, vključno z genom CRP v kromosomu 1.12,13 Zanimivo je, da je znano, da na serumske ravni CRP vplivajo genetski polimorfizmi,14 kar kaže, da lahko SNP, povezani z ravnmi CRP, odražajo dolgotrajna izpostavljenost višji=nižji ravni CRP. Zato so SNP-ji, povezani z ravnmi CRP v serumu, primerni za intravenske injekcije za raziskovanje vzročnih povezav med CRP in več patofiziološkimi stanji ter uporabljeni v prejšnjih študijah MR pri odraslih v evropskih državah.15–17

V azijskih državah so v zadnjih nekaj desetletjih obsežne kohortne študije zbirale človeške genome in izvajale genotipizacijo. Več raziskovalcev je izvedlo GWAS in odkrilo nove lokuse, povezane z ravnmi CRP v azijskih populacijah. 18–20 Te študije omogočajo raziskovalcem, da izvajajo študije MR z uporabo SNP-jev, povezanih s CRP, v azijskih populacijah, kar se zdi pomembno v smislu etničnih razlik. Zato smo raziskali, ali so genetsko določene ravni hs-CRP z uporabo dveh različnih IV, ki temeljijo na SNP-jih, identificiranih v evropski in azijski populaciji, vzročno povezane zdelovanje ledvicpri japonski populaciji, ki uporablja pristope MR.

METODE

Študijski predmeti

The study subjects were participants of the Japan Multi-institutional Collaborative Cohort (J-MICC) Study which was conducted in 14 study areas throughout Japan. The purpose of the J-MICC study was to find out the risk factors of cancer and other diseases by examining the relationship between genetic variants, lifestyle habits, blood components, and disease. The eligibility for the J-MICC Study was adults aged 35–69 years living in each study area. The details of the J-MICC Study have been described previously elsewhere and the latest information is available on its website (http:==www.jmicc.com).21,22 The selection process of participants is shown in Figure 1. From the genotyped 14,539 subjects, 26 samples with inconsistent sex information between the questionnaire and an estimate from genotype were excluded. The identity-by-descent method implemented in the PLINK 1.9 software (https:==www.cog-genomics.org=plink2) identified 388 relative pairs (pi-hat >0.1875) and one sample of each pair was excluded. Principal component analysis with a 1,000 Genomes reference panel (phase 3) (http:==www. international genome.org= category=phase-3=) detected 34 subjects whose estimated ancestries were outliers from the Japanese population. The 34 samples were excluded. Among all the remaining 14,091 samples, five subjects withdrew their consent to participate, leaving 14,086 subjects for the final analyses. Of these, the values of serum hs-CRP were available only at three study sites. Therefore, we decided to use a two-sample MR study design, rather than a single sample MR for a smaller dataset. We divided the participants into two groups; 1) 2,503 participants (available for hs-CRP) and 2) 12,501 participants (non-overlapping participants), which are by a basic principle of two-sample MR (nonoverlapping populations with the same ethnicity, similar sex, and age distribution).23 After excluding participants who had an extremely high value for hs-CRP (hs-CRP >3.0 mg=dL, n = 828) and eGFR (eGFR >120 mL=min=1,73 m2, n=3,647) in nižje od meje kvantifikacije za hs-CRP (n=8), skupaj 10.521 Japoncev (1.667 za genetsko povezavo s hs-CRP [imenovano kot nabor podatkov CRP] in 8.854 za genetsko povezavo z eGFR [imenovano kot nabor podatkov o eGFR]) je bilo analiziranih v MR z dvema vzorcema te študije. Pisno informirano soglasje je bilo pridobljeno od vseh udeležencev te študije. Študija J-MICC je bila izvedena v skladu z Etičnimi smernicami za raziskave človeškega genoma in genetskega zaporedja. Postopek te študije je odobril Odbor za etično presojo Medicinske fakultete Univerze Nagoya (939-14), Center za raka Aichi in vsi raziskovalni inštituti. Analize smo izvedli z naborom podatkov različice 20190728.

Merjenje hs-CRP in eGFR

Vzorci seruma so bili zbrani pri vseh udeležencih. Izmerili smo hs-CRP z nefelometrijo, izboljšano z lateksom. Serumski kreatinin smo izmerili z encimsko metodo. Nekateri inštituti so merili kreatinin v serumu z metodo Jaffe in ga nato pretvorili v ekvivalentno vrednost encimske metode. eGFR je bil izračunan z uporabo japonske enačbe, ki jo je predlagalo Japonsko združenje za nefrologijo: eGFR (mL= min=1,73 m2 )=194 × serumski kreatinin (mg=dL) −1.{{10}}94 × starost −0,287 (× 0,739 za ženske).24

Izbor instrumentalnih spremenljivk

Seznam kandidatnih SNP za IV je prikazan v tabeli 1. Najprej smo izbrali štiri SNP (rs3093077, rs1205, rs1130864 in rs1800947) znotraj gena CRP, ki je bil uporabljen kot IV v prejšnjih študijah MR.15 V tej študiji so ti SNP so bili izbrani kot minimalna podskupina za pridobitev raznolikosti na genu CRP v evropskih populacijah in imenovani IVCRP. Nato smo menili, da je treba izbrati SNP in razviti izvirne IV v azijski populaciji, ker je bil IVCRP razvit na podlagi SNP, identificiranih pri ljudeh evropskega porekla. Zato smo iskali besedo 'CRP' v katalogu GWAS (https:==www.ebi.ac.uk= gwas=) ​​in se zožili na študije v skladu z naslednja merila: 1) študija, izvedena v azijski populaciji, in 2) študija tako s fazo odkritja kot s fazo replikacije. Po spletnem izboru smo na koncu izbrali 13 SNP. Za 151233628 zaradi nizke kakovosti imputiranja (MAF<0.05 and r2 < 0.3), this SNP was not included in the original J-MICC dataset. Of the remaining 12 SNPs, 6 SNPs (rs12133641, rs9375813, rs2097677, rs79802086, rs2393791, and rs1169284) were excluded because these SNPs were not significantly associated with hs-CRP in our dataset (P > 0.0042 = 0.05=12). Next, rs814295 (GCKR) and rs429358 (APOE) were likely to have pleiotropic effects on kidney function. rs3093059 was excluded due to the high linkage disequilibrium (LD) with rs3093068 in the CRP dataset (r2 > 0.9). Finally, three SNPs (rs30933068, rs7553007, and rs7310409) were included in our analysis and were called as IVAsian (Table 2).

Statistična analiza

To confirm the cross-sectional association between hs-CRP and eGFR, multiple linear regression analysis was performed with adjustments for sex, age, and study sites. We performed two-sample MR approaches after dividing the participants into two datasets (CRP and eGFR datasets) as described above. Methods for two-sample MR were different from the one-sample MR method, which was described in previous methodological papers.25–27 The inversevariance weighted method (IVW) is a conventional approach to estimating a causal effect on a study outcome from different studies in meta-analysis.25 In the setting of MR analysis, the IVW method can provide a combined estimate weighted using the inverse variances of the causal effect of per-allele. However, this method can be biased when a genetic variant violates the assumptions of MR (eg, pleiotropic effect).27 Therefore, we also performed two other methods (the weighted median (WM) and the MR-Egger method) which can provide consistent estimates even under the weaker assumption.25 The MR-Egger analysis is also useful to detect either both directional pleiotropy or violation of the Instrument Strength Independent of Direct Effect (InSIDE) assumption. Additionally, the F-statistic was calculated for each IV from linear regression analyses to test whether IVs are strongly associated with exposure (referred to as relevance assumption).28 We performed linear regression analyses using the lm function in R and included all SNPs used in each IV in models. An arbitrary threshold of F-statistic >10 je bil uporabljen, da bi se izognili uporabi šibkih genetskih instrumentov v tej študiji.29 Vse statistične analize so bile izvedene z uporabo programske opreme R različice 3.5.0 (R Foundation for Statistical Computing, Dunaj, Avstrija). Zlasti je bil uporabljen R paket "Mendelske randomizacije" za analize MR z dvema vzorcema.30