Kontakt: emily.li@wecistanche.com

Učinek Cistanche Desertica Polysaccharides na učenje in spomin funkcije in ultrastrukturo cerebralnih nevronov pri eksperimentalnih staranje miši

SUN Yun et al

ABSTRAKTNI CILJZa opazovanje učinkovCistanchedeserticapolisaharidi(CDP) nafunkcije učenja in pomnilnikain cerebralne ultrastrukture pri eksperimentalnih staranje miši. Metode: CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)64 zaporednih dni dajali intragastrično 50 ali 100 mg/kg na dan za poskusno staranje miši, ki so jih inducirale D-galaktoze, sofunkcije učenja in pomnilnikaY-mazejev test; organele možganskega tkivo in možgansko ultrastrukturo so opazili s prenosnim elektronskim mikroskopom, fizično moč pa je bila določena s plavalnim preskusom. Rezultati: CDP bi lahko očitno izboljšalfunkcije učenja in pomnilnika(FV0. 01) in podaljšajte čas plavanje (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolisaharidi)lahko izboljšajo motnje fiziološke funkcije in ublažijo cerebralne morfološke spremembe pri poskusnih staranju miši.

KLJUČNE BESEDEStaranjefunkcije učenja in pomnilnika,Cistanche desertica polisaharidi, ultrastruktura, D-galaktoza

Cistanchedesertica, zdravilo rastlinskega izvora, ki se aplavira kot "ginseng iz puščave", ima poseben učinek pri krepitvi kosti in mozga ter podaljšanju življenjske dobe, njegov učinek proti staranju pa so potrdile sodobne farmakološke študije"). Proces naravnega staranja se začne z učenjem in razgradnjo spomina, ki mu sledijo degenerativne spremembe v bioloških in morfoloških strukturah. V tem članku je bil model miške, ki ga je povzro il D-galaktoza, uporabljen za opazovanje učinkaCistanchedeserticapolisaharidi(CDP) nafunkcije učenja in pomnilnikain fizično moč, kot tudi ultra strukturo možganskih tkiv. Rezultati so bili opisani na naslednji način.

Cistanche ima veliko funkcij. Kliknite tukaj, če želite vedeti več

METODE

Žival

Miši ICR, stare 2 meseca, iz jasnega stekla, pol moške in pol ženske, ki tehtajo 20 – 22g, so bile kupljene v eksperimentalnem centru za živali univerze Yangzhou (Certification no. 98002). Deset miši je bilo v vsaki komori, vse živali pa so imele prost dostop do hrane in vode.

Reagenti

D-galaktoza, kupljena v Farmacevtski tovarni Šanghaj št.(Cistanchedeserticapolisaharidi)ga je zagotovil Nanjing Institute of Wild Plant z destilirano vodo, da bi jo spojili na 2,5 g/ L in 5. 0 g/L. Step-down komplet in Y-maze aparati so bili izdelki podjetja Shanghai Haodun Medical Apparatus Company.

Staranje Model podvajanje in eksperimentalno oblikovanje1,3,

Miši ICR so bili naključno razdeljeni v 4 skupine: kontrolno skupino (normalne miši), skupino modelov staranja; visokega odmerka CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)skupine, in nizek odmerek CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)skupine, 55 miši v vsaki skupini. Za kontrolno skupino 10 ml - kg-1. d_1 normalna raztopina je bila injiciran subkutano vsaki miški. Kar zadeva druge skupine, je bilo 50 mg. kg-1 - d_1 D-galaktoze 42 dni hipodermično injicirana v vsako žival, da bi podvojila model staranja. Od začetka podvajanja je bila 20 ml - kg-1 - d-1 normalna raztopina intragastrično dana vsaki živali iz skupine modelov staranja in 50 mg • kg-1 • d_1and 100 mg - kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)intragastrično dajali vsaki miški v majhnih odmerkih CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)skupini (skupina zdravljenja I) in CDP z visokim odmerkom(Cistanchedeserticapolisaharidi)64 dni.

Šest ur po zadnjem zdravilu so iz vsake skupine vzeli 30 miši, da bifunkcije učenja in pomnilnikaY-labirint, 15 za vsak preskus. Plavalni test za oceno telesne tolerance miši je bil izveden 2 uri po zadnjem zdravilu s 15 mišmi iz vsake skupine. Poleg tega je bilo na koncu poskusa za histomorfološki pregled ubitih 10 miši iz kontrolne skupine, skupine modelov in skupine za zdravljenje H.

Preskus koraka navzdol (4)

Miši so bili dani v odzivno komoro, da bi se prilagodili okolju 3 min, nato pa so usposabljanje začeli s priključitvijo električne energije na komoro. Miška je bila varna, ko je bila na ploščadi, ko pa je skočila na dno komore (napaka), bi 36 V električna stimulacija prisilila miško, da skoči nazaj na platformo. Usposabljanje je bilo opravljeno 5 min, zabeleženo je bilo kopičenje števila napak v 5 minutah. Formalni test je bil izveden 24 ur kasneje, da bi testirali zmogljivost miške o iskanju varnega območja za beg pred električno stimulacijo. Miška je bila dana na platformo, in latentni čas pred prvo napako (čas bivanja na platformi) in akumulativno število časa za izdelavo napak v 5 min je bilo zabeleženo.

Y-labirint test

Y-labirint je labirintna škatla s tremi komorami, razporejenim radialno z dno iz bakrenih palic in odpiranjem med seboj. Svetilka je nastavljena na vrhu in električni vir je povezan z dno vsake komore. Svetilka bo prižgana ob prekinitvi električnega tokokroga, nato pa je komora varno območje za žival. Con- trarily, ko je električno vezje energizirano, temnjena komora postane električno stimulacijsko območje, ki bo povzročilo električne poškodbe na živali. Miška je bila najprej položena v Y-labirint 2 min, da bi se prilagodila okolju, nato pa je bilo vezje (36 –40 V) v komori, v kateri je miška ostala, priključeno, da bi miško prisilili, da pobegne v varno območje. Usposabljanje se je ponovilo 15-krat, da se utrdi svetlobno odvisen spomin varnega območja v miški. Nato je bilo zabeleženo število pravilnih in napačnih časov 10 preskusov za oceno pravilne stopnje.

Plavajoča preizkušnja(1)

Miška je bila položena v posodo, ki je bila visoka 28 cm, in napolnjena z vodo, pri temperaturi 15 °C, plavala pa je v vodi, dokler se ni izčrpala in utopila. Čas od dajanja v vodo do potopa se je štel kot čas plavanja, s katerim so ocenjevali fizično toleranco miške.

Priprava vzorca histomorfološkega vrednotenja (3)

Deset miši, odvzetih iz kontrolne skupine, skupine modelov staranja in skupine zdravljenja II, so obglavljene in izvlečen je bil korteks levega cerebruma vsake miške, ki je bil podvojen s 4 % glutaralne in 1% osmiške kisline, dehidrirano gradientno z acetonom, ki ga je vdelal Epon 812, obarvanega s Pb-U madeningom. Glavne organele so opazili pod prenosnim elektronskim mikroskopom (TEM, Hitachi H-300, Japonska).

Statistična analiza

Podatki so bili izraženi kot x +s. Statistične primerjave rezultatov so bile opravljene s parnim t-testom.

REZULTATI

Učinki CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)o funkcijah učenja in pomnilnika

Test koraka navzdol je pokazal, dafunkcije učenja in pomnilnikastaranje miši se je v primerjavi s tistimi iz kontrolne skupine bistveno zmanjšalo, kar se kaže kot skrajšani čas zakasnjenosti, in povečani časi kopičenja napak. Čas zakasnjenosti se je podaljšal in akumulativni časi za napake so se zmanjšali v skupinah I in U zdravljenja; v primerjavi s skupino modelov staranja. Rezultati so pokazali, da je cdp(Cistanchedeserticapolisaharidi)bi lahko očitno izboljšalafunkcije učenja in pomnilnika. Glej preglednico 1.

Rezultati Y-labirint testa so bili podobni kot pri testu korak-down, ki je pokazal, da se je stopnja pravilnega varnostnega pomnilnika zmanjšala pri staranju miši. Pomembna razlika je obstajala, ko so primerjali skupine zdravljenja I in H s skupino modelov, kar kaže na hitrost pravilnega varnostnega pomnilnika,(Cistanchedeserticapolisaharidi)zdravljenje.

Učinek CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)o fizični strpnosti

Plavanje pri staranih miših se je v primerjavi s časom v kontrolni skupini bistveno skrajšalo. Izkazalo se je, da je samo visok odmerek CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)lahko bistveno podaljšajo čas plavanja, tako imajo funkcijo proti utrujenosti. Glej preglednico 2.

Učinek CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)na Organelles v cerebralne nevrone

Pod elektronskim mikroskopom je bilo opaženih 10 nevronov vsakega vzorca, izmerjeno pa je bilo tudi število organelle(4). Rezultati so pokazali, da se je raven lipofuscina in lizosoma povečala v nevronih, število mitohondrije in golgi kompleksa se je zmanjšalo v skupini modelov staranja. Ta merila so bila po velikem odmerku CDP ponovno vzpostavljena do določene stopnje.(Cistanchedeserticapolisaharidi)zdravljenje. Glej preglednico 3.

Učinek CDP(Cistanchedeserticapolisaharidi)na Možgansko tkivo Ultra-struktura

Izkazalo se je, da se mitohondrijski crista razčleni in redko porazdeli z vakuolarno degeneracijo. Število NissP telesa je bilo zmanjšano, in degranulacijo pojavil v nekaj grobih površin endoplazmičnih retikulum, glikogen granule dobil zmanjša, sploščena saccule Golgikompleks rahlo razširjen, s številom sinapse zmanjšano, in število sinaptičnega vesicle v presinaptična komponenta zmanjša. Glej sl. 1.

Slika 1 Mitohondrija je nabreknjena in njena sinapsa je izginila v nevronih. Skupine modelov staranja 10.000

Degenerativne spremembe so se nekoliko ublažile po(Cistanchedeserticapolisaharidi)zdravljenje z očitno povečanimi jedmi, NissPs teles in procesov, in zmanjša lipofuscin. Glej sl. 2 in 3.

Slika 2 Nissl~ov trupla nevronov so se ponovno izobličla in nekaj lipofuscina je še vedno mogoče videti. Skupina zdravljenja II, X 10.000

Sl. 3 Jedrska pora je povečana in jedrsko poro je mogoče videti pri nevronih, citoplazma je bogata. Skupina za zdravljenje K, X 10.000

RAZPRAVO

Mehanizem E> galaktoze pri indukcijo staranja temelji na teoriji staranja prostih radikalov. Zaradi tega lahko D-galaktoza poveča vsebnost prostih radikalov v organizmih in z oksidacijo poškoduje organelo. Mitohondrija kot "energetska tovarna" celic, lahko proizvaja veliko prostih radikalov v dihalnem procesu, in lahko bi ga zlahka napadli ti prosti radikali. Mitohondrije v starem organizmu zlahka poškodujejo prosti radikali, škode ni bilo mogoče popraviti zaradi pomanjkanja zmogljivosti popravila. ), in bi se vse bolj oteževala do končne smrti. Lipofuscin je pomemben znak staranja, njegova proizvodnja je tesno povezana s prostimi radikalnimi poškodbami, zato se pogosto uporablja kot merilo pri ocenjevanju ravni staranja.

Rezultati te študije so pokazali, da je cdp(Cistanchedeserticapolisaharidi)pri visokih odmerkih lahko poveča fizično toleranco pri staranju miši in izboljša njihovofunkcije učenja in pomnilnika, in ublažiti stopnjo škode cerebralne ultra-strukture. Vsi ti rezultati so v naključju z našimi prejšnjimi raziskavami (1,2) in kažejo, da(Cistanchedeserticapolisaharidi)lahko podaljša življenjsko dobo, njegov učinek proti staranju je lahko povezan z njegovo anti-oksidacijsko sposobnostjo in učinki prostega radikala scavenging(2) za stabilizacijo membranskega sistema in ohranitev stabilnega znotrajčeličnega okolja.

Iz: "Učinek Cistanche Desertica Polysaccharides na funkcije učenja in spomina in ultrastrukturo cerebralnih nevronov v eksperimentalnih staranje miši" sun Yun et al

---CJIM2001;7(4) =288--292

SKLICEVANJA

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Raziskave o£ XinjiangCistanchedeserticaoksidacijo, ki jo povzročijo prosti radikali. Kitajska J Kitajski material Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, et al. Opazovanje XinjiangaCistanche deserticana hepatocit in možgansko skorjo staranja miši s prenosom elektronski mikroskop. Tradicionalna kitajska raziskava drog 1997;8(1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Študija modela staranja pri miših. J China Pharmaceutical University 1991;22(2):101.

4. LI YK. Eksperimentalna metodologija kitajskega zelišča v farmakologiji. Shanghai: Science and Technology Publishing House 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Oksidacijska škoda mitohondrialne DNK in staranje s prostim radikalom. Progr Biochem in Biophys 1995;22(5): 430.