Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 98. bolnišnica kitajske ljudske osvobodilne vojske, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Ortopedska bolnišnica tradicionalne kitajske medicine Fuyang, mesto Hangzhou, provinca Zhejiang, Hangzhou 311400, Zhejiang, Kitajska

Povzetek

Cilj: opazovati učinekCistanchevodni izvlečeko zdravljenjuosteoporotičnizlomov pri podganah in raziskati njihov mehanizem. Metode: Podganje samice SD stopnje SPF so bile naključno razdeljene v kontrolno skupino, modelno skupino in tretirano skupino ter modelirane v skladu s sorodnimi metodami. 24 ur po modeliranju zloma sta kontrolni skupini in modelni skupini dali običajno fiziološko sondo, zdravljeni skupini pa so daliCistanchevodni ekstrakt enkrat na dan. Po 2 tednih in 6 tednih intervencije je bila zbrana kri iz trebušne aorte za odkrivanje interlevkinov. ravni TP (IL-1 B) in transformirajočega rastnega faktorja-B l (TGF-8 1), hkrati odvzemite vzorce zlomov, po fiksaciji izvedite mikroCT skeniranje, izmerite R0 Volumski delež kostnega kalusa I (BV/TV) in drugi povezani parametri Po dekalcinaciji, dehidraciji in vdelavi je bil narejen v voščene bloke za uporabo. Rezultati: 6 tednov po vzpostavitvi modela osteoporoze je bila mineralna kostna gostota podgan v modelni skupini in zdravljeni skupini nižja kot v kontrolni skupini (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistanchelahko pospeši celjenjeosteoporotičnizlomov, njegov mehanizem pa je lahko povezan z njegovim zaviranjemosteoporotičnizlomi. Po podganjem serumu IL-1 B in spodbujajo izločanje TGF-8 1, kar lahko izboljša osteoporozo in pospeši celjenje zlomov.

Ključne besede: osteoporotični zlom, Cistanche, celjenje zloma, podgana

Osteoporoza je bolezen, pri kateri se zmanjša kostna gostota, poruši se fina struktura kostnega tkiva in poveča krhkost kosti. Bolniki lahko povzročijo zlome pod rahlo zunanjo silo v vsakdanjem življenju. Je pogosta klinična bolezen in pogosto pojavljajoča se bolezen. Poleg tega gre za to vrsto zlomov večinoma pri starejših bolnikih, ki so pogosto povezani z drugimi boleznimi, večina zlomov pa je zdrobljenih, s slabo stabilnostjo, včasih pride do počasnega ali nezaraščenega celjenja zlomov, obstaja pa visoka stopnja invalidnosti in smrtnosti. Trenutno se zdravi predvsem s kirurškim posegom, ročno obnovo in zdravljenjem proti osteoporozi. Primanjkuje zdravil za tarčno zdravljenje bolnikov zosteoporotičnizlomi. Tradicionalna kitajska medicina ima dolgo zgodovino zdravljenja osteoporoze in ima pozitiven učinek. Številna tradicionalna kitajska zdravila dokazano izboljšujejo kosti. Revščina lahko pospeši tudi celjenje zlomov. Rongrong se običajno uporablja kot reprezentativno zdravilo za hranjenje ledvičnega janga in ima učinek hranjenja jeter in ledvic. Tradicionalna kitajska medicina verjame, da ledvica upravlja s kostjo, in tudi zdravljenje zlomov je neločljivo povezano z ledvico in esenco. Sodobna farmakologija je ugotovila, da ima mesni pepel tudi določen estrogenski učinek. Ta študija namerava uporabiti merjenje kostne gostote, mikro-CT in serumski interlevkin-13 (IL-10), opazovanje ravni transformirajočega rastnega faktorja-P KTGF-P 1) in vodni izvleček mesne paste kile na celjenjeosteoporotičnizlomi pri podganah

Cistanche

1Materiali in metode

1.1 Poskusne živali in oprema za reagente: 52 SPF podganjih samic SD, ki tehtajo 210~250g, je vzrejenih v Centru za poskuse na živalih Univerze tradicionalne kitajske medicine Zhejiang. Kompleksni jod, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., številka serije 20160720; Penicillin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., številka serije F3117217; komplet IL-18 (številka serije: 20160715), komplet TGF-8 1 (številka serije: 20160722); Dvoenergijski rentgenski skener kostne gostote, 0STE0C0RE2; Mikro-CT, Skyscan1176O

1.2 EkstrakcijaCistanchevodni izvleček: zemljo namočimocistanche(Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutical Factory) 10-krat ultračista voda za 0,5 ure, prevretek v ponvi za 1,5 ure, ponovite ekstrakcijo 2-krat in mešano medicinsko tekočino rotacijski parnik Koncentrirajte do koncentracije 1,5 g /ml in shranite v hladilniku pri 4 stopinjah za kasnejšo uporabo.

1.3 Priprava modeliranja: Točke so naslednje.

1.3. 1 Model osteoporoze: Podgane so bile prilagojeno vzrejene 1 teden pred modeliranjem in naključno razdeljene v kontrolno skupino, modelno skupino in skupino za zdravljenje, s 16 podganami, 18 podganami in 18 podganami, vsaka skupina pa je temeljila na časovni točki 2 tedna in 6 tednov. Vsak je bil razdeljen v dve skupini. Tako skupina za zdravljenje kot modelna skupina sta bili anestezirani z 1-odstotnim natrijevim pentobarbitalom (0,4 ml/100 g), koža je bila anestezirana, razkužena, pokrita in koža razrezana. Podgani so bili odstranjeni obojestranski jajčniki. Kontrolna skupina je imela samo rez. Ne

Odstranitev jajčnikov

1.3. 2 Model zloma: 6 tednov po pripravi modela osteoporoze bo pripravljen model zloma. Ko so podgane v vsaki skupini anestezirane, se izmeri mineralna gostota kosti srednje stegnenice. , Rez, naredimo model transverzalnega zloma srednje stegnenice, fiksiramo z 1mm Kirschnerjevo žico, steriliziramo in zašijemo kožo reza.

1.4 Intervencija z zdravili: po modeliranju je bila izvedena rentgenska detekcija stegnenice, podgane, ki niso uspele pripraviti modela, so bile izločene in po modeliranju je bilo intramuskularno injiciranih 80 000 enot penicilina, da se prepreči okužba. 24 ur po operaciji je terapevtska skupina dobila vodni izvleček paste iz mesne kile (koncentracija 1,5 g/ml, lg/kg, enkrat na dan). Kontrolni skupini in modelni skupini sta dali enak volumen fiziološke raztopine.

1.5 Zbiranje vzorcev: Vzorci podgan so bili zbrani 2 in 6 tednov po posegu. Po 1-odstotni anesteziji z natrijevim pentobarbitalom smo 5-10ml krvi zbrali iz trebušne aorte za pripravo seruma in shranili v -20B hladilniku. rezervni. Nato so podgane žrtvovali in zbrali vzorce zlomov stegnenice ter jih za 72 ur dali v 10-odstotni nevtralni formaldehid.

1.6 Indikatorji testiranja: Točke so naslednje.

1.6. 1 Mineralna gostota kosti: Vse podgane po modelu osteoporoze so bile anestezirane pred modelom zloma, nato pa je bila izmerjena mineralna gostota kosti srednje stegnenice. Tri skupine podgan so prejele vzorce po 2 in 6 tednih intervencije, vzorce pa so fiksirali 72 ur in nato ponovno izmerili kostno gostoto.

1.6. 2 Mikro-CT: Mikro-CT skeniranje se izvede po tem, ko je vzorec fiksiran 72 ur, z 200 slikama nad in pod koncem zloma kot regijo zanimanja (R01), kot skeniranja 360 stopinj, trenutni 555uA, napetost 42kV, filter Al 0,2mm, ločljivost 8,73um, po opravljeni rekonstrukciji tridimenzionalne slike in analizi kalusa. Parametri zaznavanja so naslednji: volumski delež kosti BV/TV, kostni faktor trabekularnega modela (Tb. Pf); indeks strukturnega modela (SMI) itd."

1.6.3 Določanje serumskega IL-1P in TGF-P1: Odmrznite podganji serum iz hladilnika pri -20 stopinjah in izvedite detekcijo korak za korakom v skladu z IL-13 in navodila za komplet TGF" 1.

1.7 Statistične metode: za obdelavo uporabite programsko opremo za statistično analizo SPSS.19. Eksperimentalni podatki so izraženi kot povprečje ± standardni odklon (G±s) in mineralna gostota kosti treh skupin podgan. Parametri mikro-CT JL-1 P JGF- P 1 ravni so povprečene z enosmerno analizo variance in uporabljene so parne primerjave med skupinami Inšpekcija, raven inšpekcije je P<0.>

2 rezultata

2.1 Kostna gostota treh skupin: glejte tabelo 1.

Tabela 1: rezultati mineralne gostote kosti v srednji stegnenici vsake skupine podgan (x±s, g/cm²)

Opomba: V primerjavi s skupino modelov, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Mikro-CT dvodimenzionalni prečni prerez: sagitalni dvodimenzionalni prečni prerez izbere slike vzdolžne osi stegnenice na vsaki časovni točki v vsaki skupini (glejte sliko 1), vodoravni dvodimenzionalni prečni prerez odsek izbere 100. sliko pod linijo zloma za primerjavo (slika 2) ), iz slike je razvidno, da se je kalus vsake skupine sčasoma postopoma povečeval, vendar je bil 6 tednov po zlomu plastičen do različne stopnje; istočasno je razvidno, da je bil kalus v kontrolni skupini velik, skorja kalusa pa je bila debela in je po 6 tednih polzela čez linijo zloma, medtem ko je bil kalus v modelni skupini v kalusu manj kosti pri 2 tednih, korteks kalusa pa je bil ohlapen po 6 tednih. Čeprav volumen kalusa v zdravljeni skupini po 2 tednih ni bil velik, je bila kostna masa v kalusa večja kot v modelni skupini. Kalus je bil bolje oblikovan po 6 tednih. In linija zloma ni očitna.

Kontrolna skupina Modelna skupina Zdravstvena skupina

Slika 1 Sagitalni prerez srednje stegnenice vsake skupine

Slika 2 Vodoravni prerez srednje stegnenice vsake skupine

2.3 Mikro-CT tridimenzionalna rekonstrukcija: tridimenzionalna rekonstrukcija kalusa na zlomljenem koncu stegnenice je prikazana na sliki 3. Iz slike 3 je razvidno, da je kalus nastal vzdolž pokostnice na obeh koncih zloma. linija 2 tedna po zlomu v vsaki skupini so bili zlomni prameni v vsaki skupini še vedno čisti, zlasti v modelni skupini in zdravljeni skupini, medtem ko je bil kalus v kontrolni skupini debel in debel, večinoma s ploščami 6 tednov po zlomu . Prevladovale so trabekularne kosti in linija zloma je izginila, medtem ko so bile v modelni skupini ohlapne kosti in linija zloma je bila mehka, vendar je imela zdravljena skupina več kalusne kosti, pravilno in debelo trabekularno kost, linija zloma pa ni bila očitna.

Slika 3 Tridimenzionalna rekonstrukcija kalusa R0I na zlomljenem koncu

2.4 Parametri mikro-CT: Uporabite programsko opremo za analizo kalusa na zlomljenem koncu. Za povezane parametre glejte tabelo 2.

Tabela 2 Primerjava parametrov mikro-CT vsake skupine (x±s)

Kontrolna skupina Modelna skupina Zdravstvena skupina

Opomba: V primerjavi s skupino modelov, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Raven serumskega IL-1 P .TGF-P 1: glejte tabelo 3.

Tabela 3 Primerjava ravni IL-1 P JGF-0 1 v vsaki skupini G±s, n=8)

Opomba: V primerjavi s skupino modelov, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

V zadnjih letih je bilo v klinični praksi dokazano, da tradicionalna kitajska zdravila Yinyangdian, Drynaria fortune in njune spojine (tablete Qing's, tablete Liuwei Dihuang itd.) znatno izboljšajo osteoporozo. Ta vrsta kitajske medicine in spojin se večinoma uporablja za hranjenje jeter in ledvic. To je skladno z načelom hranjenja ledvice in obnavljanja mišic v srednji in pozni fazi zloma. "Deset dni. Mesnata pasta za okončine je bila prvič objavljena v "Shen Nong's Materia Medica". Po naravi je topla, ima funkcije hranjenja ledvic in krepitve janga, dopolnjevanja esence in kostnega mozga, nege krvi in ​​vlaženja suhosti ter prijetne barve in podaljševanje življenja.

V tej študiji je bila mineralna gostota kosti v zdravljeni skupini višja kot v modelni skupini po 2 in 6 tednih posega (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporotičniceljenje zloma. Neposredno odraža kostno vsebino kalusa. To kaže, da lahko Rouganrong vpliva na spodbujanje osteogeneze. Analiza je lahko učinkovita pri pasti iz mesne kile. Sestavine imajo učinek pospešene regulacije BMP2, BMP2 pa je eden od članov družine TGF-8. In ta rezultat potrjujejo tudi drugi parametri mikro-CT skeniranja (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp in SMI odražata biomehanske lastnosti kalusa in vrednosti v zdravljeni skupini so znatno boljše od modelne skupine, kar dodatno nakazuje, da ima Roudongrong učinek izboljšanja izgube kosti, spodbujanja osteogeneze in pospeševanja celjenja zlomov.

Kar zadeva serumske ravni IL-1B in JGF-P 1, je bilo po 2 tednih in 6 tednih intervencije ugotovljeno, da je bila raven IL-1P v zdravljeni skupini nižja kot v drugih dveh skupine pri 2 tednih in pri 6 tednih. Čeprav je bila raven IL-1 B v zdravljeni skupini višja kot v kontrolni skupini, še vedno znatno nižja kot v modelni skupini (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchelahkoizboljšanje izgube kostispodbujajo osteogenezo in pospešujejo celjenje zlomov. Lahko zmanjša raven IL-13 vosteoporotičnizlomijo podgane in zavirajo zlom. Dosežena je aktivnost kostnih celic; poleg tega je lahko povezano tudi z dejstvom, daCistanchelahko poveča raven TGF-B 1 pri zlomljenih podganah, spodbuja osteogeno diferenciacijo ter zorenje in oblikovanje kalusa.

Če povzamemo, na podlagi analize mineralne gostote kosti, parametrov mikroCT skeniranja in serumskih ravni IL-1 P, TGF"1 je bilo ugotovljeno, da je vodni izvlečekCistanchelahkoizboljšanje izgube kostiinpospešujejo celjenje osteoporotičnih zlomov. Mehanizem je morda povezan s tem. Lahko zavira izločanje serumskega ILT 8 in spodbuja izločanje TGF-B 1 pri podganah poosteoporotičnizlomov, s čimer se izboljša osteoporoza in pospeši celjenje zlomov.

4 Reference

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang et al. Smernice za diagnozo in zdravljenje osteoporoze pri starejših na Kitajskem (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang et al. Terapevtski učinek in mehanizem alkoholnega izvlečka mesne kile na ovariektomiranih podganah z osteoporozo [J]. Journal of Jilin University (medicinska izdaja), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. Izvleček srčike iz Dalbergie sissoo spodbuja celjenje zlomov in njegovo uporabo pri osteoporotičnih podganah, povzročenih z ovariektomijo [J]. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM, et al. Ocena napredovanja celjenja zlomov pri miših z mikroračunalniško tomografijo [j]. Kost, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian et al. Strokovno soglasje o stopenjski diagnozi in zdravljenju primarne osteoporoze s tradicionalno kitajsko medicino v provinci Zhejiang (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Napredek raziskav pri preprečevanju in zdravljenju osteoporoze s samostojnimi in sestavljenimi kitajskimi zdravili [J]. China Medical Guide, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng et al. Učinek družinskega pireja iz puščavskega mesa na izražanje beljakovin BMP-2 pri hitro starajočih se osteoporotičnih miših [J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116