Hemodializa poveča oksidativni stres prek radikalov s središčem ogljika kljub izboljšani biokompatibilnosti

Aktivacija levkocitov in posledičnooksidativni streski jih povzročabiokompatibilnih materialovmedučinek hemodializeprognozo bolnikov. Kljub večkratnemu napredku vdializatorji za hemodializo, thenapoved hemodializebolniki z zapleti, globoko povezanimi zoksidativni stres, kot naprimersladkorna bolezen melitus ostaja slab. Tako smo ponovno ovrednotili učinkehemodializaveč reaktivnih kisikovih vrst z uporabo metod, ki temeljijo na elektronski spinski resonanci, za nadaljnje izboljšavebiokompatibilnostvhemodializa. Vključili smo 31 bolnikov v stabilnem stanju na hemodializi z uporabo polisulfonskih dializatorjev z visokim pretokom. Učinke hemodialize na reaktivne kisikove vrste so ovrednotili z dvema metodama: MULTiS, ki ocenjuje aktivnosti odstranjevanja seruma z več hidrofilnimi reaktivnimi kisikovimi vrstami, in i-STrap, ki zaznava lipofilne radikale v ogljikovem središču. Podobno kot v prejšnjih študijah smo ugotovili, da se je aktivnost odstranjevanja hidroksilnih radikalov v serumu po hemodializi znatno izboljšala. Za razliko od prejšnjih študij smo odkrili, da se je lovilna aktivnost proti alkoksilnim radikalom po tem znatno zmanjšalahemodializa. Poleg tega so bolniki s sladkorno boleznijo po hemodializi pokazali zmanjšanje aktivnosti odstranjevanja seruma proti alkil peroksilnim radikalom in povečanje lipofilnih radikalov ogljikovih centrov. Ti rezultati kažejo, da so kljub obsežnim izboljšavam dializatorskih membran oblikereaktivne kisikove spojineki se lahko izločijo med dializo, so omejene, več reaktivnih kisikovih vrst pa med hemodializo ostane na povišanih ravneh.

Ključne besede:hemodializa, biokompatibilnost, elektronska spinska resonanca radikala alkil peroksila, MULTiS, i-STrap

KLIKNITE TUKAJ ZA NARAVNI ORGANSKI IZVLEČEK CISTANCHE S 25 % EHINAKOZIDA IN 9 % AKTEOZIDA ZA DELOVANJE LEDVIC

Podporna storitev Wecistanche-največjega izvoznika cistanche na Kitajskem:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Trgovina za več podrobnosti o specifikacijah:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Kronična ledvična bolezen(CKD), je znano, da je povezana zvisok oksidativni stres. (-4)Kopičenje uremičnega toksinas prooksidativnimi lastnostmi, ki vodijo domikrovnetjeki jih povzročazvišanje protivnetnih citokinovsje ključna značilnostPatofiziologija CKD. (s-, hemodializa (HD), razširjeno nadomestno ledvično zdravljenje, deluje kot dvorezen meč za zmanjšanje oksidativnega stresa pri bolnikih s kronično ledvično boleznijo. Aktivacija polimorfonuklearnih levkocitov zaradi stika z membrano ali drugimi umetnimi površinami v vezjih HD. , je glavni vzrok oksidativnega stresa, ki ga povzroča HD.s-) Nasprotno pa lahko odstranitev prooksidativnih uremičnih toksinov, zlasti hidrofilnih spojin z nizko molekulsko maso, kot so spojine trimetilamin-noksid ali gvanidino, izboljša antioksidativno naravo HD, vodi do dolgoročnega izboljšanja stopnje preživetja in kakovosti življenja pribolniki s kronično ledvično boleznijo. (2,13) ​​Poleg tega korekcija acidoze povzroči ponovno aktivacijo antioksidativnih encimov in zmanjšanje volumske preobremenitve, kar vodi do preprečevanja kardio. vaskularni zapleti so antioksidativni mehanizmi. (4 Tako. je potrebno za materiale HD, da čim bolj zmanjšajo aktivacijo levkocitov in povečajo antioksidativne učinke. Za premagovanje te težave so razvili antioksidativne in biokompatibilne materiale HD, ki jih ponazarja dializator, prevlečen z vitaminom E. (si7) Kljub številnim napredkom pri dializatorjih HD, napoved bolnikov s HD ostaja nezadovoljiva, zlasti tistih z diabetesom mellitusom (DM), boleznijo, ki spodbuja visoko oksidativno stanje.(8) Ti pomisleki so delno zato, ker so podrobnosti zelo raznolike in zapletene in vivoreakcije, povezane z oksidativnim stresomniso bili dovolj analizirani. Zato je bila ta študija namenjena razjasnitvi učinka HD na dinamiko reaktivnih kisikovih zvrsti (ROS), kot predhodne dogodke reakcij oksidativnega stresa, ki temelji na konceptu, da je treba vsako ciljno mesto oksidativnih in antioksidativnih reakcij v telesu biokemično opisati v določenem času in prostoru. Ena od razlag za to je apomanjkanje podrobne analizezgornje strani reakcij, povezanih z oksidativnim stresom, ki spodbujajo te celične reakcije. Identifikacija ROS, ki delujejo kot stimulatorji oksidativnih stresnih reakcij ali interakcij med ROS za ustvarjanje oksidativnih stimulatorjev, je težavna zaradi visokih reakcijskih stopenj in kompleksnih reakcijskih verig. Ker ROS niso enotne in imajo posamezne ROS specifične značilnosti med reakcijami in vivo, je potrebna analiza več ROS. (9-2n Za izboljšanje biokompatibilnosti na podlagi uporabe antioksidativnih in biokompatibilnih materialov je treba razumeti spremembe v dinamiki ROS, ki jih povzroča HD.

Da bi raziskali dinamiko ROS med HD, smo uporabili dve na novo razviti metodi, ki temeljita na elektronski spinski resonanci (ESR). večkratni hidrofilni test za odstranjevanje prostih radikalov (MULTIS) in test za odkrivanje lipofilnih radikalov na polni krvi (i-STrap) Čeprav raziskave lovilne aktivnosti ROS z ESR niso obsežne, ostaja edina razpoložljiva metoda za identifikacijo vrste in preučevanje dinamike ROS. Metoda združuje pretočni sistem tipa tekočinske kromatografije visoke ločljivosti s sistemom ESR in uporablja 5-(2,2-dimetil-1.3-propoksiciklofosforil)-5- metil-1-pirolinoksid (CYPMPO) kot vrtilno past. MULTIS zagotavlja večjo občutljivost in stabilnost za merjenje odstranjevanja ROS kot običajni testi ESR.22-24) Eden od naših soavtorjev je že poročal o aktivnostih odstranjevanja ROS, izmerjenih z MULTIS, pri bolnikih s kronično ledvično boleznijo 5. stopnje. Vendar pa niso ovrednotili učinka HD.e2) Poleg tega je metoda i-STrap metoda, ki temelji na ESR in zazna ROS v polni krvi z uporabo 2-difenilfosfinoil-2-metil-3,{ {20}}dihidro-2H-pirol N-oksidDPhPMPO) kot svojo spinsko past in meri ESR po organski ekstrakciji, kar odraža lipofilne ROS.2s.26 V tej študiji smo ugotovili, da so bile ravni več ROS poveča in ga HD ne odpravi, kar kaže, da radikalne verižne reakcije po HD še vedno niso ustrezno nadzorovane. To lahko vpliva naprognozo bolnikov s kronično ledvično boleznijo.

Materiali in metode

Preiskovanci in privolitev po seznanitvi. Vsi postopki, izvedeni na ljudeh, so bili izvedeni po pridobitvi pisnega soglasja posameznika. Uporabljeni protokol je odobril odbor tehnološke univerze Tsukuba (št. dovoljenja 201809). To je opazovalna študija; zato so pri bolnikih izvajali posege. V študijo je bilo vključenih skupno 31 stabilnih bolnikov s HD. Za vsakega bolnika smo pridobili in zabeležili klinične in demografske podatke. Vsi bolniki so bili zdravljeni z dializatorji s polisulfonsko membrano visokega pretoka (Toray Medical Co., Ltd., Tokio, Japonska) z različnimi površinami membrane, prilagojenimi telesni konstituciji vsakega posameznika. Bolniki so bili razdeljeni v dve skupini glede na vzrok njihove končne ledvične odpovedi: skupina brez sladkorne bolezni (skupina brez sladkorne bolezni, n=17) in skupina s sladkorno boleznijo, n=14).

Zbirka vzorcev. Vzorci krvi so bili odvzeti na začetku in koncu dializnega zdravljenja iz vzorčenja na arterijski strani HD kroga. Za meritve MULTIS so bili serumi ločeni in shranjeni v zamrzovalniku pri {{0}} stopinjah (dokler ni bila izvedena meritev, za meritve i-STrap so bili vzorci polne krvi zbrani v epruvete, prevlečene s heparinom, ki so bile dovoljene stati eno uro pred meritvami.Meritve večkratne aktivnosti lovljenja prostih radikalov v serumu.Hidrofilne aktivnosti lovljenja ROS so bile izmerjene z metodo MULTIS z uporabo predhodno opisanih protokolov z manjšimi modifikacijami.2227) Aktivnosti lovljenja proti petim ROS, in sicer hidroksilnemu radikalu(OH) , superoksid (0,"), alkoksilni radikal (RO"), alkil peroksilni radikal (ROO") in singletni kisik ('0,), so bili izmerjeni. X-pasovni ESR spektrometer ( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Tokio, Japonska), ki uporablja modulacijo polja 100 kHz in operacijsko programsko opremo WN-RAD (Radical Research Inc.). Uporabljena sta bila reagenta za prestrezanje ESR CYPMPO za " OH, O, RO' in ROO' ter 4-hidroksi-2,2,6,6-tetrametilpiperidin (TEMP) za 'O. Tipične nastavitve spektrometra so bile naslednje: širina modulacije polja.0,1 mT; mikrovalovna moč, 10 mW; širina in hitrost skeniranja polja+7.5 mT/2 min; in časovna konstanta 0,1 s. Vsak ROS je bil ustvarjen z osvetljevanjem in situ z UV/vidno svetlobo iz osvetljevalnikaRUVF-203SR UV osvetljevalca, Radical Research Inc.), opremljenega z 200 W srednjetlačno živosrebrno/ksenonsko obločno žarnico in kvarčni svetlobni vodnik, povezan z resonatorsko votlino. Viri svetlobe, časi osvetlitve, prekurzorji in fotosenzibilizatorji, uporabljeni za proizvodnjo ROS, so povzeti v tabeli 1. Aktivnosti čiščenja ROS so bile izračunane v skladu s prej opisano metodo22) in pretvorjene v enoto, ki je enaka znanim čistim čistilcem: glutation (GSH) za OH in 'O, superoksid dismutaza (SOD) za O, 6-hidroksi-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilna kislina (Trolox) za RO' in -lipoična kislina za ROO'MULTIS. Meritve za vsak ROS so bile izvedene v treh izvodih.

Merjenje lipofilnih

Aktivnost odstranjevanja Ros v polni krvi z uporabo i-Strap. Aktivnost lipofilnega ločevanja RO je bila izmerjena z meritvijo i-STrap ESR ki (Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Japonska) na podlagi proizvajalčevega protokola in prejšnjega poročila.2s Ta metoda temelji na konkurenčni reakciji med antioksidanti v polni krvi in ​​DPhPMPO s terc-butil hidroperoksidom (BuOOHradical. Vzorce polne krvi smo inkubirali z DPhPMPO(1{{10}} mM) in testnim BuOOH (10 mM) 30 minut pri sobni temperaturi. Po inkubaciji centrifuga adukti v organski fazi so bili ekstrahirani z raztopinami kloroforma in metanola; Meritve ESR so bile izvedene z uporabo teh organskih vzorcev. Merilni pogoji so bili enaki kot pri meritvi MULTIS, razen širine in hitrosti skeniranja polja, nastavljeni na +5 .0 mT/2 min. Za merjenje i-STrap ni bilo specifičnih antioksidantov; zato je bila čistilna aktivnost izražena kot vrednost an10/-1, kjer "0" označuje intenzivnost signala brez vzorca in "' označuje signal intenzivnosti z vzorcem (28)Reagenti. CYPMPO je bil pridobljen pri RR INC. (Japonska); riboflavin, 2,2'-azobis (2-amidinopropan) dihidroklorid (AAPH), tekst-BuOOH, dimetil sulfoksid (DMSO) in bengalska vrtnica so bili kupljeni pri Sigma-Aldrich Japan (Tokio, Japonska) in TEMP je bil kupljen iz Tokyo Chemical Industry (Tokio, Japonska). Vodikov peroksid in pufre smo pridobili pri WakoChemical Co. (Osaka, Japonska). Statistična analiza. "Statistična analiza je bila izvedena z uporabo Prism 6 za računalniško programsko opremo Mac OS X (GraphPad SoftwareInc., La Jolla, CA). Podatki so bili testirani z uporabo Studentovega parni test t. Podatki so bili izraženi kot srednje vrednosti s 95-odstotnim intervalom zaupanja (95-odstotni IZ.