Nevroprotektivne koristi vadbe in MitoQ na spominsko funkcijo, mitohondrijsko dinamiko, oksidativni stres in nevrovnetje pri starajočih se podganah, povzročenih z D-galaktozo, 3. del
Sep 02, 2024
3.4. Vpliv vadbe na tekalni stezi in MitoQ na izražanje vnetnih proteinov in antioksidativnih encimov v hipokampusu starajočih se podgan, ki jih povzroča D-Gal
Potrjeno je bilo, da TE in MitoQ vplivata na vnetne proteine (COX-2, TNF-) in antioksidativne encime (SOD-2, katalaza) v hipokampusu starajočih se podgan (slika 4).
Ker ljudje več pozornosti posvečamo zdravju in dolgoživosti, so antioksidativni encimi postali pomembno hranilo v naši vsakodnevni prehrani. Lahko nam pomaga upreti se poškodbam telesa škodljivih prostih radikalov in s tem ščiti naše fizično zdravje. Vendar pa so antioksidativni encimi poleg zaščitnega delovanja na telo tesno povezani tudi z našim spominom.
Študije so pokazale, da učinki prostih radikalov ne morejo vplivati le na fizično zdravje, ampak lahko vplivajo tudi na naše možgane. Prosti radikali lahko poškodujejo naše živčne celice in neposredno vplivajo na naš spomin in druge kognitivne sposobnosti. Vendar imajo lahko antioksidativni encimi ključno vlogo pri upiranju poškodbam prostih radikalov in s tem ohranjajo naše možgane zdrave.
Poleg tega antioksidativni encimi pomagajo spodbujati molekularno stabilnost, preprečujejo vnetja in zmanjšujejo smrt nevronskih celic. Vsi ti učinki pomagajo ohranjati zdravje naših možganov in lahko pomagajo izboljšati naš spomin.
Nekatere študije so tudi pokazale, da lahko naše telo, če nima dovolj antioksidativnih encimov, povzroči kognitivni upad, izgubo spomina in druge nevrološke bolezni. Zato uživanje živil, bogatih z antioksidativnimi encimi, kot so zelenjava, sadje, oreščki in ribe, pomaga varovati zdravje naših možganov in krepi naš spomin, zaradi česar smo bolj zdravi in bolj energični.
Skratka, antioksidativni encimi so zelo pomembni za spodbujanje našega telesnega zdravja in zdravja možganov. Z uživanjem zadostne količine zelenjave, sadja, oreščkov in rib, ki so bogati z antioksidativnimi encimi, lahko zaščitimo svoje telo in možgane, okrepimo spomin ter postanemo bolj zdravi in energični. Vidimo lahko, da moramo izboljšati svoj spomin, in Cistanche lahko bistveno izboljša spomin, ker ima antioksidativne, protivnetne učinke in učinke proti staranju, kar lahko pomaga zmanjšati oksidacijo in vnetje v možganih ter tako ščiti zdravje živčnega sistema. Poleg tega lahko Cistanche spodbuja tudi rast in popravilo živčnih celic ter tako izboljša povezljivost in delovanje nevronskih mrež. Ti učinki lahko pomagajo izboljšati spomin, sposobnost učenja in hitrost razmišljanja ter lahko tudi preprečijo pojav kognitivnih motenj in nevrodegenerativnih bolezni.
Kliknite spoznajte načine za izboljšanje delovanja možganov
Stopnje izražanja vnetnih proteinov so se znatno razlikovale med zdravljenimi skupinami (COX{{0}}, F4, 34=148.171, p < {{10}}.0 01; TNF-, F4, 34=33.645, p < 0,001). Ravni izražanja antioksidativnih encimov so se prav tako pomembno razlikovale med zdravljenimi skupinami (SOD-2,F4,34=477.940, p <0,001; katalaza, F4,34=75.447, p <0,001).
Rezultati post hoctesta so pokazali, da je prišlo do dramatične spremembe v izražanju COX-2, TNF-, SOD-2 in katalaze med skupinama Y-CON in D-CON.
Vendar pa sta sama TE in MitoQ zmanjšala ekspresijo COX-2 in TNF-proteina, reguliranega z D-gal, kombinacija TE in MitoQ pa je dodatno ublažila oba vnetna citokina v primerjavi s samim MitoQ.
Ti rezultati kažejo, da dajanje D-gal povzroči nevroinflamacijo, medtem ko imata TE in MitoQ protivnetne učinke v hipokampusu. Poleg tega sta samo TE in MitoQ povečala z D-gal povzročeno zmanjšanje SOD-2 in ekspresijo proteina katalaze.
SOD-2 se je v skupini, ki je prejemala D-COMBI, dodatno povečala v primerjavi z zdravljenjem samo z MitoQ in samo TE. Ti rezultati kažejo, da dajanje D-gal inducira tudi ROS v hipokampusu, medtem ko zdravljenje s TE in MitoQ obnovi oksidativni stres, ki ga povzroča starost.
Slika 4. Vpliv vadbe na tekalni stezi in MitoQ na izražanje vnetnih proteinov in antioksidativnih encimov v hipokampusu podgan, ki jih povzroča D-gal. (A) Reprezentativni Western bloti vnetnih proteinov (COX-2, TNF-) in antioksidativnih encimov (SOD-2, katalaza). (B–E) Denzitometrična analiza Western blot trakov, normaliziranih na -aktin.
Podatki, prikazani v Western blotu, so povprečja iz sedmih podganjih možganov. -Aktin je bil testiran kot notranja kontrola. Bonferronipost hoc test je bil uporabljen po ANOVA. Vrednosti so srednje vrednosti ± SEM. a Označuje statistično razliko od skupine Y-CON.
b Označuje statistično razliko od skupine D-CON. c Označuje statistično razliko od skupine D-TE. d Označuje statistično razliko od skupine D-MI (p < 0,05).
3.5. Vpliv vadbe na tekalni stezi in MitoQ na učenje in spomin pri starajočih podganah, ki jih povzroča D-Gal
Za določitev funkcionalnih izboljšav pri zdravljenju s TE in MitoQ v hipokampusu staranja, ki ga povzroča D-galin, smo izvedli Morrisov vodni labirint in teste pasivnega izogibanja za oceno učenja in spomina (slika 5).
Preizkus pasivnega izogibanja je pokazal pomembne razlike med zdravljenimi skupinami (retencijski čas zakasnitve, F4, 59=69.131, p < 0.001; slika 5A). Post hoc test je pokazal, da so v skupini D-CON opazili znatno zmanjšanje časa zadrževanja v primerjavi s skupino Y-CON. Vendar je prišlo do znatnega povečanja časa zakasnitve zadrževanja v D-TE, ne pa tudi v skupini DMI v primerjavi s skupino D-CON.
Poleg rezultatov Morrisovega testa vodnega labirinta (slika 5B, C) so se časi zakasnitve pobega in razdalje pobega znatno razlikovali med zdravljenimi skupinami (čas zakasnitve pobega, F4, 59=31.565, p < 0). 001; razdalja pobega,59=10,833, p < 0,001).
Post hoc test je pokazal, da je prišlo do znatnega povečanja zakasnitvenih časov in razdalj v D-CON v primerjavi s skupino Y-CON. Čas eskalatence se je znatno povečal v skupinah D-TE in D-COMBI v primerjavi s skupino D-CON.
Vendar pa razdalja pobega ni bila pomembna v vseh intervencijskih skupinah v primerjavi s skupino D-CON. Ti rezultati kažejo, da samo TE obnovi okvaro učenja in spomina, ki jo povzroči D-gal.
4. Razprava
S starostjo povezan kognitivni upad je tesno povezan s staranjem možganov. Zakasnitev staranja možganov ima ogromno vrednost, čeprav je neizogiben del procesa staranja.
V tej študiji smo raziskovali preventivne učinke TE in MitoQ na kognitivne motnje, povezane s staranjem možganov. Ugotovljeno je bilo, da D-gal delno poslabša mitohondrijsko dinamiko s povečanjem in zmanjšanjem mitohondrijske fisije oziroma fuzije v hipokampusu. Poleg tega je D-gal povečal vnetje in izražanje NOX, kar je povzročilo zmanjšano od hipokampusa odvisno kognitivno funkcijo, povezano z učenjem in spominom.
Vendar je TE učinkovito obnovil ta patološka stanja in preprečil kognitivni upad. Samo zdravljenje z MitoQ je izboljšalo učinke staranja na vnetje in antioksidativne encime, ni pa povzročilo pomembnih sprememb v mitohondrijski dinamiki ali kognitivni funkciji.
Ne glede na sinergistične ali aditivne učinke meril izidov, povezanih s staranjem možganov, naši rezultati kažejo, da imata TE ali MitoQ potencialno vlogo kot nefarmakološko zdravljenje za preprečevanje ali upočasnitev kognitivnega upada s staranjem.
Neuravnotežena mitohondrijska dinamika je tesno povezana z različnimi boleznimi, povezanimi s staranjem, in je zelo pomembna za preživetje celic [36, 37]. V tej študiji je skupina D-CON, zdravljena z D-gal za induciranje staranja, pokazala povečano izražanje proteinov Drp1 in Fis1, povezanih z mitohondrijsko fisijo, in zmanjšano izražanje proteinov Mfn1, Mfn2 in Opa1, povezanih z mitohondrijsko fuzijo.
Ti rezultati kažejo, da je prekomerna cepitev mitohondrijev povzročila delno zmanjšanje delovanja mitohondrijev. Po drugi strani pa je TE zmanjšal izražanje proteinov, povezanih z mitohondrijsko fisijo, in povečal izražanje proteinov, povezanih z mitohondrijsko fuzijo, kar je pomagalo vzdrževati mitohondrijsko homeostazo.
Kot rezultat MitoQ sta le fuzijski protein Mfn1 in fisijski protein Fis1 pokazala podobne trende kot TE, vendar se izražanje drugih proteinov (Mfn2, Opa1 in Drp1) ni razlikovalo od tistega v skupini D-CON.
Prejšnje študije z uporabo sistemov celičnih kultur so pokazale, da je MitoQ izboljšal dinamično ravnovesje mitohondrijske dinamike, porušeno zaradi oksidativnega stresa [38], kot tudi mitohondrijsko fisijo v farmakološkem modelu Parkinsonove bolezni, kar je povzročilo fragmentacijo mitohondrijev [39], kar ni v skladu z našimi ugotovitvami iz eksperimenta in vivo zaradi metodološkega razlike med poskusom in vitro in in vivo.
Zato so nadaljnje študije z uporabo našega živalskega modela upravičene glede uporabe MitoQ in mitohondrijske dinamike, vključno z upoštevanjem odmerka in trajanja zdravljenja.
Analiza NOX je pokazala, da je skupina D-CON pokazala povečano ekspresijo p47 phox, gp91phox in p22 phox v hipokampusu v primerjavi s skupino Y-CON.
Nadalje je IHC analiza pokazala povečano p22 phox imunoreaktivnost v možganski skorji in hipokampalni regiji CA3. Ti rezultati so skladni s prejšnjo študijo, ki je poročala, da je D-gal povečal izražanje NOX v modelu staranja, ki ga povzroča D-gal [40].
Po drugi strani pa je TE zmanjšal izražanje podenot NOX2 p47 phox, gp91 phox in p22phox. Z drugimi besedami, TE je učinkovito zaviral izražanje NOX, kar lahko povzroči ROS.
Ta ugotovitev se ujema s študijo, v kateri je telesna vadba zmanjšala aktivnost NOX in obnovila skeletno mišično maso pri podganah s srčnim popuščanjem [41], in študijo, v kateri je TE znižal ekspresijo NOX v aorti modela debelosti, povzročenega z dieto z visoko vsebnostjo maščob [42].
Predvsem MitoQ, ki je vplival na mitohondrijsko dinamiko, je močno pozitivno vplival na aktivnost NOX. Samo zdravljenje z MitoQ je zmanjšalo aktivnost NOX, podobno kot TE. Ni presenetljivo, da so bili enaki rezultati opaženi tudi pri kombiniranem zdravljenju s TE in MitoQ.
Ustrezna študija je poročala o zaščitnem učinku MitoQ proti oksidativnemu stresu na mtDNA prek aktivacije signalizacije Nrf2/ARE, ki je odločilen dejavnik pri zaščiti celic pred oksidativnim stresom [43].
Zato naše ugotovitve kažejo, da lahko vadba in MitoQ izboljšata oksidativni stres, ki ga povzroči staranje, prek signalnih poti, povezanih z NOX [44, 45]. Da bi raziskali učinke staranja, ki ga povzroči D-gal, na nevrovnetje, smo analizirali tudi vzorce izražanja za astrocite specifične marker GFAP, proinflamatorna faktorja COX-2 in TNF- ter antioksidantna encima SOD-2 in katalazo v možganski skorji in hipokampalnem DG.
Opazili smo morfološke spremembe z obarvanjem z anti-GFAP; celična telesa in dendriti so bili širši in močneje obarvani v skupini D-CON v primerjavi s skupino Y-CON.
To nakazuje, da je staranje tesno povezano z gliozo, pri kateri aktivacija astrocitov v možganski skorji in hipokampalnem DG vodi do povečanega nevrovnetja.
TE in MitoQ sta zmanjšala izražanje GFAP in s tem zmanjšala nevrovnetje. Ti rezultati so skladni z ugotovitvijo, da je D-gal povečal ekspresijo GFAP v možganskem tkivu [46], da je aktivnost astrocitov povzročila prirojene in adaptivne imunske odzive [47] in da so astrociti v poškodovanem možganskem tkivu pokazali povišano ekspresijo GFAP [48].
Ta študija je potrdila ugotovitve prejšnjih študij, da je staranje tesno povezano z nevrovnetjem. Vendar smo tudi ugotovili, da sta TE in MitoQ učinkovito ublažila to nevrovnetje.
Natančneje, zdravljenje z MitoQ je pokazalo jasnejši učinek v možganski skorji kot v hipokampalnem DG. Provnetni faktorji COX-2in TNF- so pokazali povečano izražanje po zdravljenju z D-gal, vendar sta TE in MitoQ to učinkovito ublažila.
Mehanizmi, na katerih temeljijo protivnetni učinki vadbe, niso pojasnjeni. Vendar pa ob upoštevanju hipoteze, da gre za zmanjšanje maščobe [49], bo povečanje ravni telesne dejavnosti aktivno uporabilo energijo, shranjeno v adipocitih, in posledično zmanjšanje telesne maščobne mase bi lahko bilo povezano z zmanjšanimi proinflamatornimi dejavniki, ki jih izločajo adipociti.
Poleg tega je kombinirano zdravljenje s TE in MitoQ povečalo izražanje antioksidativnih encimov SOD-2 in katalaze. To se ujema z drugimi študijami, ki poročajo o povečanih ravneh antioksidativnih encimov pri starajočih se živalih po vadbi [50] ali zdravljenju z MitoQ [51].
Tako ugotovitve naše študije kažejo, da sta vadba in MitoQ pomagala zmanjšati vnetje in spodbudila antioksidativno delovanje v možganskem tkivu.
Uporabili smo dobro raziskane Morrisove vodne labirinte in teste pasivnega izogibanja, da bi raziskali, ali lahko TE in MitoQ zavirata pogosto opaženo kognitivno upadanje pri staranju, vključno z učenjem in spominom.
Skupina D-CON je potrebovala bistveno več časa (čas zakasnitve pobega) in je potovala dlje (razdalja pobega) kot skupina Y-CON, da je našla platformo za pobeg v testu vodnega labirinta. To dokazuje, da je D-gal inducirana sposobnost zmanjšala sposobnost učenja in spomina pri poskusnih živalih. Po drugi strani pa je TE zmanjšal čas zakasnitve pobega, kar dokazuje, da TE učinkovito obnavlja prostorsko učenje in spomin.
Nekoliko se je povečala tudi razdalja pobega, vendar je bilo ocenjeno, da je to posledica povečane hitrosti gibanja živali po TE. Podobno je pri nalogi pasivnega izogibanja skupina D-CON potrebovala manj časa za vstop v temno zadnjo komoro iz svetle sprednje komore (čas zakasnitve zadrževanja) v primerjavi s skupino Y-CON, kar kaže na oslabljen spomin.
Rezultati testov vodnega labirinta in pasivnega izogibanja kažejo, da lahko TE učinkovito zavira kognitivni upad, vključno z učenjem in spominom, do katerega lahko pride med staranjem. Prejšnja študija je poročala, da je 5-mesečno dajanje zdravila MitoQ izboljšalo poslabšanje zadrževanja prostorskega spomina pri transgenskem modelu Alzheimerjeve bolezni [52].
Za razliko od tega dolgotrajnega vnosa so naši rezultati pokazali, da sorazmerno krajše obdobje zdravljenja z MitoQ ni izboljšalo obstoječega s starostjo povzročenega kognitivnega upada. Glede na to, da ima zdravljenje z MitoQ pozitivne učinke na vnetje, NOX in antioksidante v naši študiji, daljše obdobje MitoQ morda potrebna za preprečevanje kognitivne disfunkcije, povezane s staranjem.
Hipokampus na splošno velja za najpomembnejšo možgansko regijo za učenje in spomin [53]. Glede na to, da živali s poškodbo hipokampusa kažejo zmanjšano učenje in spomin [54], je mogoče učinke TE na izboljšanje kognitivnih sposobnosti in spomina razumeti v smislu povečane nevroplastičnosti in nevrogeneze ter zmanjšanega oksidativnega stresa in vnetja.
Kljub zmanjšanju oksidativnega stresa in vnetja MitoQ ni pokazal jasnega učinka na učenje in spomin. Ti rezultati so skladni s prejšnjo študijo s starimi mišmi (starimi 19 mesecev), v kateri je vadba, ne pa prehrana, ki vsebuje antioksidante, izboljšala spominsko funkcijo [6].
Domnevamo, da je možna razlaga, zakaj MitoQ ni izboljšal s starostjo povzročene kognitivne disfunkcije, ta, da za razliko od TE MitoQ ne izboljša delovanja krvnega obtoka (kot je povečanje oskrbe s kisikom in hranili ter odstranjevanje odpadnih produktov in CO2 s krčenjem mišic) in še posebej nima vpliva na presnovo energije v možganih (kot je zvišanje ravni nevrotransmiterjev ali nevrotrofičnih dejavnikov, kot je živčni rastni faktor ali možganski nevrotrofični faktor) [55–57].
Vendar to ostaja le hipoteza, ker ti dejavniki v tej študiji niso bili preučeni. Kljub temu naši rezultati kažejo, da MitoQ ni vplival na nevroplastičnost in nevrogenezo, potrebno za izboljšanje dejanske kognitivne funkcije.
5. Sklepi
V tej študiji smo potrdili, da je staranje, povzročeno z D-gal, povezano s kognitivnimi motnjami, ki vplivajo na učenje in spomin zaradi neravnovesja med mitohondrijsko fuzijo in fisijo, povečanega vnetja, zmanjšane ravni antioksidantnih encimov in aktivacije NOX. Vendar pa je TE izboljšal te patološke učinke in preprečil kognitivni upad, povezan s staranjem možganov.
Zdravljenje z MitoQ je pokazalo pozitivne učinke na vnetje, antioksidativne encime in izražanje NOX, vendar ni izboljšalo mitohondrijske dinamike ali kognitivnih sposobnosti. V nasprotju z našo hipotezo pa kombinacija TE in MitoQ ni povzročila nobenih sinergijskih ali aditivnih učinkov na merila izida, ki smo jih raziskovali v tej študiji.
Vendar naše ugotovitve kažejo, da lahko zdravljenje z antioksidanti, usmerjenimi v mitohondrije, kot je MitoQ, povzroči nekatere pozitivne učinke. Zlasti telesna dejavnost, kot je TE, učinkoviteje preprečuje staranje kognitivnih motenj, vključno z učenjem in spominom. Zato predlagamo, da je treba poudariti pomen redne telesne dejavnosti kot učinkovitega nefarmakološkega zdravljenja za izboljšanje in preprečevanje kognitivnega upada pri starejših odraslih.
Avtorski prispevki: Konceptualizacija, J.-HJ, J.-YC in E.-BK; Metodologija, J.-HK; Projektna administracija, J.-YC; Nadzor, E.-BK; Validacija, J.-HK in JSY; Pisni izvirni osnutek, J.-HJ in J.-HK; Pisanje-recenzija in urejanje, JSY, J.-YC in E.-BK. Vsi avtorji so prebrali objavljeno različico rokopisa in se z njo strinjali.
Financiranje: to raziskavo je financirala raziskovalna štipendija univerze Daejeon (številka štipendije, 20180160).
Izjava institucionalnega nadzornega odbora: Študijo je odobril Odbor za institucionalno oskrbo in uporabo živali Korejske nacionalne športne univerze (koda protokola KNSU-IACUC-2018-05).
Izjava o razpoložljivosti podatkov: Podatki, predstavljeni v tej študiji, so na voljo na zahtevo ustreznega avtorja.
Zahvala: zahvaljujemo se Dong-Won Kimu za pomoč pri eksperimentu Western blotting in ravnanju z živalmi.
Nasprotje interesov: Avtorji izjavljajo, da ni navzkrižja interesov. Financerji niso imeli nobene vloge pri načrtovanju študije; pri zbiranju, analizah ali interpretaciji podatkov; pri pisanju rokopisa ali pri odločitvi o objavi rezultatov.
Reference
1. Keller, JN. Starostna nevropatologija, kognitivni upad in Alzheimerjeva bolezen. Staranje Res. Rev. 2006, 5, 1–13. [CrossRef]
2. Rowe, JW; Kahn, RL Uspešno staranje. Gerontolog 1997, 37, 433–440. [CrossRef] [PubMed]
3. Van Praag, H.; Lucero, MJ; Yeo, GW; Stecker, K.; Heivand, N.; Zhao, C.; Yip, E.; Afanador, M.; Schroeter, H.; Hammerstone, J.; et al. Flavanol (-)epikatehin rastlinskega izvora krepi angiogenezo in ohranjanje prostorskega spomina pri miših. J. Neurosci. 2007, 27, 5869–5878. [CrossRef] [PubMed]
4. Yook, JS; Rakwal, R.; Shibata, J.; Takahashi, K.; Koizumi, H.; Šima, T.; Ikemoto, MJ; Oharomari, LK; McEwen, BS; Soja, H. Leptin v hipokampusu posreduje koristi blage vadbe z antioksidantom na nevrogenezo in spomin. Proc. Natl. Akad. Sci.USA 2019, 116, 10988–10993. [CrossRef] [PubMed]
5. Bhattacharya, TK; Pence, BD; Ossyra, JM; Gibbons, TE; Perez, S.; McCusker, RH; Kelley, KW; Johnson, RW; Woods, JA; Rhodes, JS. Vadba, vendar ne (-)-epigalokatehin-3-galat ali -alanin, izboljša telesno pripravljenost, plastičnost možganov in vedenjsko učinkovitost pri miših. Physiol. Obnašaj se. 2015, 145, 29–37. [CrossRef] [PubMed]
6. Gibbons, TE; Pence, BD; Petr, G.; Ossyra, JM; Mach, HC; Bhattacharya, TK; Perez, S.; Martin, SA; McCusker, RH; Kelley, KW; et al. Prostovoljni tek kolesa, vendar ne prehrana, ki vsebuje (-)-epigalokatehin-3-galat in -alanin, izboljša učenje, spomin in hipokampalno nevrogenezo pri starih miših. Obnašaj se. Brain Res. 2014, 272, 131–140. [CrossRef] [PubMed]
7. Nam, SM; Seo, M.; Seo, JS; Rhim, H.; Nahm, SS; Cho, IH; Chang, BJ; Kim, HJ; Choi, SH; Nah, SY Askorbinska kislina blaži z D-galaktozo povzročeno staranje možganov s povečanjem hipokampalne nevrogeneze in izboljšanjem spominske funkcije. Hranila 2019, 11, 176. [CrossRef] [PubMed]
8. Archer, SL Mitohondrijska dinamika – mitohondrijska fisija in fuzija pri človeških boleznih. N. angl. J. Med. 2013, 369, 2236–2251.[CrossRef]
9. Hall, AR; Burke, N.; Dongworth, RK; Hausenloy, DJ Mitohondrijska fuzija in cepitveni proteini: Nove terapevtske tarče za boj proti srčno-žilnim boleznim. Br. J. Pharmacol. 2014, 171, 1890–1906. [CrossRef]
10. Žan, M.; Brooks, C.; Liu, F.; Sonce, L.; Dong, Z. Mitohondrijska dinamika: Regulacijski mehanizmi in nastajajoča vloga v ledvični patofiziologiji. Kidney Int. 2013, 83, 568–581. [CrossRef]
11. Held, NM; Houtkooper, RH Poti nadzora kakovosti mitohondrijev kot determinante presnovnega zdravja. Bioeseji 2015, 37, 867–876. [CrossRef] [PubMed]
12. López-Otín, C.; Blasco, MA; Partridge, L.; Serrano, M.; Kroemer, G. Znaki staranja. Celica 2013, 153, 1194–1217. [CrossRef][PubMed]
For more information:1950477648nn@gmail.com
