Izvleček cvetnih listov vrtnice (Rosa Gallica) beli kožo in deluje proti gubam

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Young-Ran Song,1,* Won-Chul Lim,1,* Ahram Han,1 Myung-hee Lee,1 Eun Ju Shin,1Kwang-Min Lee,1,2 Tae-Gyu Nam,1 in Tae-Gyu Lim1, 3

POVZETEK

Skušali smo raziskati učinek izvlečkov izCvetni listi Rosa gallica(RPE) vklopljenbeljenje kožeinproti gubamdejavnost. Aktivnost tirozinaze je bila oslabljena z zdravljenjem z RPE, sočasno z zmanjšanjem kopičenja melanina pri človeškem melanomu B16F10. Obdelava kože obraza prostovoljcev v kliničnem preskušanju s formulacijo, ki vsebuje RPE, je znatno povečala svetlost kože (vrednost L*). Ugotovljeno je bilo, da je osnovni odgovorni mehanizem povezan z aktivacijo protein kinaze, aktivirane z mitogenom (MAPK). poleg tegaRPErazstavljenoproti gubamaktivnost tvorbe človeških dermalnih fibroblastov z zaviranjem ravni matrične metaloproteinaze (MMP)-1. Študija in vivo je RPE zaviral tudi sončno ultravijolično stimulirano raven MMP-1 z regulacijo c-Jun. Naše ugotovitve na splošno kažejo, da RPE povzročabeljenje kožein aktivnost proti nastajanju gub z uravnavanjem znotrajceličnega signaliziranja, kar podpira njegovo uporabnost kot sestavine za beljenje kože in kozmetičnih izdelkov proti gubam.

KLJUČNE BESEDE: melanin, MMP-1, Rosa gallica, beljenje kože, nastanek gub

Izvleček Cistanche: beljenje kože

UVOD

Čeprav ima staranje kože genetsko določeno izhodiščno stopnjo, je zapleten in večfaktorski proces, ki ga lahko pospešijo različni okoljski dejavniki.1 Normalno staranje kože je naravni kronološki proces skozi čas, ki ga poslabša eksogeno staranje, ki ga sprožijo zunanji stresi zaradi sončne svetlobe, onesnaževal ozračja in ekstremne temperature.2 Od tega je izpostavljenost sončnemu ultravijoličnemu sevanju (SUV) (zlasti ultravijoličnemu B [UVB]) glavni vzrok za fotostaranje kože, ki ga označujeta hiperpigmentacija (prekomerna proizvodnja melanina) innastanek gub.3 SUV sevanje spodbuja nastajanje reaktivnih kisikovih zvrsti (ROS)/reaktivnih dušikovih zvrsti in poškodbe DNK, kar vodi do različnih procesov, povezanih s staranjem, v kožnih celicah, kot so vnetje, preoblikovanje zunajceličnega matriksa (ECM), celična smrt in hiperpigmentacija.4Melanin (črna ali rjava pigmentacija) ščiti kožo pred poškodbami, ki jih povzročajo UV-žarki.5 Vendar pa lahko neregulirana ali čezmerna proizvodnja melanina v koži povzroči motnje hiperpigmentacije, vključno s kloazmo, pegami in senilnimi lentigini.6 Arbutin in kojična kislina, ki sta bila razvita za zdravljenje teh bolezni, je znano, da predstavljajo tveganje za raka na črevesju oziroma raka na jetrih.7 Zaradi tega je bilo zanimanje za uporabo naravnih materialov, ki so odlični pri zaviranju proizvodnje melanina brez resnih stranskih učinkov. Melanogenezo stimulira tirozinaza, ki ima ključno vlogo v začetni stopnji določanja hitrosti biosintetske poti melanina, ta encim pa stabilizirata in aktivirata TRP-1 in TRP 2.8 Transkripcijo teh melanogenih proteinov modulira transkripcijski faktor, povezan z mikroftalmijo (MITF). Izpostavljenost UV-žarkom aktivira promotor MITF in inducira izražanje gena tirozinaze, kar povzroči kopičenje melanina v melanocitih. Poleg tega mitogen-aktivirane proteinske kinaze (MAPK), ki jih sestavljajo ekstracelularna signalno regulirana kinaza (ERK), c-Jun-N-terminalna kinaza (JNK) in p38, vodijo do transkripcijske kontrole melanogeneze.8 Zlasti ERK in JNK Znano je, da negativno uravnavajo izražanje MITF,9 medtem ko p38 MAPK inducira proteasomsko razgradnjo melanogenih encimov. Fosforilirani p38 MAPK pa aktivira izražanje MITF in melanogenih encimov.10

Proteini ECM, kot so kolagen, elastin in proteoglikani, so prisotni v dermalnem matriksu, kar daje koži moč in prožnost.11 Med procesom staranja kože pride do sprememb dermalnega matriksa, vključno s spremembami deležev kolagena, kar na koncu povzroči nastanek gub. Poleg tega UV-obsevanje sproži tudi razgradnjo kolagenaze, med katero nastali oksidativni stres olajša izražanje proteolitske matrične metaloproteinaze (MMP), ki zmanjša sintezo kolagena in pospeši razgradnjo kolagena.2 Oksidativni stres spodbuja različne biološke poti, povezane s fotostaranjem, ter citoplazemske kinaze in MAPK.4 MAPK simulirajo aktivatorski protein 1 (AP-1; c-Fos/c-Jun), transkripcijski faktor, ki dodatno uravnava raven MMP.12 Ti proteini so predvsem odgovorni za razgradnjo kolagena.7 Od MMP je MMP{10}} znan kot pomemben encim, ki sodeluje pri razgradnji ECM z razgradnjo kolagena tipa I, ki je ključna komponenta v dermisu.3 Tako zaviranje MMP-1 velja za izvedljivo strategijo za terapijo proti staranju kože.

Vrsta Rosa (R.) je vključena v družino Rosaceae in rod Rosa je ena najbolj razširjenih rastlin. To so pomembne komercialne rastline, ki se uporabljajo za vrtnarjenje, okrasje in parfume. Kot užitne rože se cvetni listi pogosto uporabljajo tudi kot sestavine funkcionalnih živil zaradi svoje barve, močnega okusa in visoke hranilne vrednosti.13 Medtem so vrtnice uporabljali kot zeliščna zdravila za zdravljenje dismenoreje, driske in nefritisa, izboljšanje krvnega obtoka, obvladovanje bolečin in hemostazo.13,14 Opažene fiziološke lastnosti je mogoče pripisati velikemu številu fitokemikalij, vključno s fenolnimi spojinami, flavonoidi in antocianini.15 Nekatere študije so dejansko pokazale biološke funkcionalnosti, ki vsebujejo močno antioksidacijo, protimikrobno, protivnetno in protialergijsko delovanje. .15–17 Pred kratkim smo poročali, da etanolekstrakt cvetnih listov vrtnice izzove protivnetni potencial za kožo.18 Poleg tega so bili raziskani optimalni pogoji ekstrakcije cvetnih listov vrtnic, ki imajo učinek proti staranju kože, za uporabo v industriji.19 Vendar kljub njihovi široka dostopnost, potencialne lastnosti proti staranju izvlečkov cvetnih listov vrtnic (RPE) forsk incare ostajajo slabo razumljeni. V tej študiji smo ocenili možne uporabeRPEv negi kože in njihovi molekularni mehanizmi odgovorni.

korist cistanche: proti staranju

MATERIALI IN METODE

Reagenti

Cvetni listi vrtnic so bili kupljeni v Turčiji prek GN Bio (Gyeonggi-do, Koreja). Raztopina MTS (CellTiter 96 Aqueous OneSolution Cell Proliferation Assay) je bila kupljena pri Promegi (Madison, WI, ZDA). Poliklonska anti-tirozinaza, anti-b-aktin, anti-ERK, anti-MKK4 in anti-JNK so bili kupljeni pri Santa Cruz Biotechnology (CA, ZDA). Monoklonski anti-fosfo-MEK (Ser217/221), anti-MEK, pri Tehnologija CellSignaling (Danvers, MA, ZDA). Monoklonalni anti-MMP-1 in kolagen proti tipu I sta bila pridobljena pri R&D Systems (Minneapolis, MN, ZDA) oziroma Ab cam (Cambridge, Združeno kraljestvo). Alfa melanocite stimulirajoči hormon (a-MSH), gobja tirozinaza in l-3,4-dihidroksifenilalanin (l-DOPA) so bili pridobljeni pri Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, ZDA).

Priprava RPE

Cvetni listi vrtnic (10 g) so bili posušeni na zraku, zmleti in zmešani s 1000 ml 70-odstotnega (v/v) etanola ter ekstrahirani pri 70 C 3-krat z uporabo soxhletovega ekstraktorja. Produkt smo nato filtrirali skozi filtrirni papir št. 2 (Whatman, Maidstone, Združeno kraljestvo). Topilo smo kontinuirano vakuumsko koncentrirali in ostanek liofilizirali z uporabo zamrzovalnega sušilnika.

In vitro test aktivnosti gobove tirozinaze

Encimski test smo izvedli z merjenjem tvorbe DOPAkroma, kot je opisano prej.20 Na kratko, 40 lLofRPEvzorec (12,5, 25, 50 in 100 LG/mL) smo razredčili na 20 l PBS pufra. Po dodatku 20 l gobove tirozinaze (0,02 mg/mL) smo inkubacijo izvajali 30 minut. Substrat l-DOPA smo dodali mešanici, ki je vsebovala encim, in nato inkubirali 15 minut. Produkt dopa kroma smo nato izmerili pri 475 nm. Arbutin in vitamin C sta bila uporabljena kot pozitivna kontrola.

Izvleček cistanke zmanjša aktivnost tirozinaze

Kultura celic

Celice mišjega melanoma B16F10 in primarni človeški dermalfibroblasti (HDF) so bili pridobljeni iz Korean Cell LineBank (Seul, Koreja) oziroma ScienCell Research Laboratories (Carlsbad, CA, ZDA). Obe celici sta bili vzdrževani v Dulbeccovem modificiranem mediju Eagle (DMEM) (GIBCO Invitrogen, Auckland, Nova Zelandija), dopolnjenem z 10 odstotki (v/v) fetalnega govejega seruma (FBS) in 1 odstotkom streptomicina-penicilina (GIBCO Invitrogen) pri 37 °C in 5 % CO2 inkubator.

Test viabilnosti celic

Test MTS je bil uporabljen za merjenje z RPE povzročene proliferacije celic človeškega melanoma B16F10. Na kratko, celice so bile zasejane in gojene z DMEM, ki je vseboval 10 odstotkov FBS in 1 odstotek antibiotikov v 96-ploščah z jamicami. Celice smo nato 12 ur izstradali s serumom in jim dodaliRPEvzorcev (50–1000 LG/mL) 24 ur. Nato smo 10-odstotno raztopino MTS, vključno s fenazin metosulfatom, obdelali s celicami 1 uro. Stopnja živih celic je bila izmerjena pri 490 nm.

Test proizvodnje melanina

Nastajanje melanina v celicah človeškega melanoma B16F10 je bilo ocenjeno, kot je bilo navedeno prej.20 Na kratko, celice (8 · 103 celic/jamico) smo gojili v ploščah s šestimi jamicami v 2 ml DMEM. Naslednji dan smo celice predhodno obdelali z RPE (100 in 200 lg/mL) 1 uro, preden smo dodali a-MSH 100 nM in nato nadalje inkubirali 72 ur. Ekstracelularni melanin je bil raziskan pri 495 nm.

Western blot analiza

Vzorce beljakovin iz celic B16F10, HDF in človeškega kožnega tkiva smo lizirali s pufrom RIPA [20 mM Tris-HCl (pH 7,5) 150 mM NaCl, 1 mM Na2EDTA 1 mM EGTA 1 odstotek NP-40 1 odstotek natrijevega deoksiholata 2,5 mM natrija pirofosfat 1 mM b glicerofosfat 1 mM Na3VO4 1 lg/ml leveptina] in kvantificirano s Pierce BCA Protein Assay Kit. Proteini so bili ločeni z 10-odstotnimi akrilamidnimi geli natrijevega dodecil sulfata glede na molekulsko maso in nato preneseni na nitrocelulozne membrane. Membrane so bile 1 uro blokirane z raztopino albumina iz govejega seruma in 12 ur inkubirane z navedenim primarnim protitelesom pri 4 °C. Po 1-urni reakciji s sekundarnim protitelesom, konjugiranim s hrenovo peroksidazo, smo intenzivnost izražanja proteina vizualizirali z uporabo kemiluminiscenčnega čitalnika (UVITEC Cambridge).

Predmeti in zdravljenja

SposobnostRPEza izboljšanje obrazabeljenje kože was assessed in a double-blind clinical trial in 10 women (>20leti). Osnovno formulacijo smo pripravili z uporabo prečiščene vode, poliakrilne kisline, 1,2-heksandiola in natrijevega hidroksida. RPE smo dodali v koncentraciji 0,05 odstotka (v/v). V 6-tedenskem obdobju dodajanja so preiskovanci na eno stran obraza nanesli formulo RPE, drugo stran obraza pa so tretirali enkrat na dan samo z osnovno formulacijo kot kontrolo. V poskusnem obdobju je bila prostovoljkam prepovedana uporaba drugih kozmetičnih izdelkov.

Ocena stanja kože

Stanje kože je bilo ovrednoteno v skladu s standardnim operativnim protokolom Korejskega inštituta za dermatološke znanosti (Seul, Koreja) in opravljeno pri 22 C – 2 Cand 50 % – 5 % vlažnosti. Po 30-minutnem umivanju obraza je bilo stanje kože vsakega subjekta raziskano s pomočjo Skin ColorCatch (Delfin Technologies, Kuopio, Finska) in zbrani so bili komentarji. Rezultati so bili določeni z vrednostjo L* (svetlost) in izmerjeni tik pred testom ter 3 in 6 tednov kasneje.

SUV obsevanje

Obsevanje SUV je bilo izvedeno s kombinacijo ultravijoličnih A (UVA) in UVB žarnic (Q-Lab Corporation, Cleveland, OH, ZDA); njihove luči oddajajo pri 340 nm, kar posnema optimalno sončno svetlobo, oddano med 365 in 295 nm. Razmerje med UVA in UVB, ki jih proizvaja ta svetilka, je bilo 94,5 odstotka oziroma 5,5 odstotka. HDF in tkivo, ekvivalentno človeški koži, v mediju brez seruma smo stimulirali z obsevanjem SUV pri 23 oziroma 46 kJ/m2 z uporabo UVB žarnice.

Priprava vzorcev človeške kože

Odrezke trebušne kože so pridobili pri kavkaški pacientki (Biopredic International, Saint Gregoire, Francija). Na kratko, vzorci tkiva so bili zbrani iz trebuha po plastični operaciji v skladu s francoskim zakonom L.1245-2 CSP. Ta študija je sledila vsem načelom iz Helsinške deklaracije. Kožno tkivo je bilo 10 dni inkubirano v 10-odstotnem FBS ustreznem mediju, ki ga je zagotovil Biopredic International, pri 37 °C pod 5-odstotnim CO2, pri čemer so bili mediji zamenjani vsaka 2 dni. V obdobju teka je bilo tkivo izpostavljeno tudi z anRPEvzorec 1 uro pred SUV obsevanjem 46 kJ/m2 dvakrat na dan. Ob koncu zdravljenja smo tkivo uporabili za imunohistokemijsko (IHC) analizo ali imunoblot analizo.

IHC opazovanje

Analizo IHC je izvedla pogodbena raziskovalna agencija ABION (Seul, Koreja). Kožno tkivo je bilo namočeno v 10 odstotku formaldehida, dehidrirano z gradientom koncentracije etanola in vdelano v parafinski vosek. Endogeno peroksidazo odseka smo 15 minut inaktivirali z 0,3 % H2O2 in nato eno uro inkubirali s protitelesom proti MMP-1 (R&D Systems, Inc., ZDA, Kanada). Po petkratnem pranju je odseke inkubiramo s sekundarnimi protitelesi 20 minut. Odseke smo obarvali z detekcijskim reagentom DAB (3,30-diaminobenzidin) (K3468; DAKO, Glostrup, Danska) ter opazovali in fotografirali s svetlobnim mikroskopom (BX40; Olympus, Tokio, Japonska).

Statistična analiza

Vsi poskusi so bili izvedeni vsaj trikrat in podatki so bili izraženi kot povprečje – standardni odklon. Statistična značilnost je bila ovrednotena s Studentovim t-testom v programu SPSS (Chicago, IL, ZDA) in pomembne razlike so bile izražene kot P <>

cistanche tubulosa

REZULTATI

RPE zavira proizvodnjo melanina z inhibicijo tirozinaze

Tirozinaza je edini encim, ki omejuje hitrost melanogeneze in je prisoten v človeških kožnih celicah.8 V melanocitih nastaja DOPA iz tirozina s tirozinazo, ki se nadalje oksidira v dopakinon na poti sinteze melanina.7 V tej študiji je bil za določitev uporabljen test gobove tirozinaze antimelanogeno delovanjeRPE. Kot je prikazano na sliki 1A, je RPE izzval pomemben od odmerka odvisen zaviralni učinek na aktivnost tirozinaze in zaviralni učinek pri 50–100 lM RPE je bil večji od učinka arbutina in vitamina C. Ti rezultati so bili dodatno potrjeni z vrednotenjem učinka RPE na izločanje melanina in izražanje tirozinaze v celicah melanoma B16F10, obdelanih z a-MSH. Keratinociti izločajo a-MSH za zaščito kože pred čezmerno izpostavljenostjo UV-žarkom, ki povzroči aktivacijo melanocitov za proizvodnjo melanina.5 Potrjeno je bilo, da je zdravljenje z a-MSH povzročilo izražanje tirozinaze in proizvodnjo melanina v melanocitih (sl. 1B, C). Vendar pa je bila ekspresija tirozinaze v celicah B16H10, induciranih z a-MSH, odvisno od odmerka zavrta z zdravljenjem z RPE (slika 1B), skladno s prej opisanimi rezultati. Poleg tega je RPE (100 in 200 LG/mL) znatno zmanjšal vsebnost melanina, ki je bila povečana v melanocitih, stimuliranih z a-MSH (slika 1C). Poleg tega smo potrdili, da ekstrakt ni induciral celične citotoksičnosti pri koncentracijah £1000 LG/mL v celicah B16F10 (slika 1D).

RPE zniža izražanje MITF z induciranjem aktivacije MAPK v celicah melanoma B16F10

Različne signalne poti lahko posredujejo pri tvorbi pigmenta melanina. Melanogenezo nadzirajo MAPK, ki so razvrščeni v tri podtipe, ki jih sestavljajo ERK, JNK in p38 ter zgornji aktivatorji MEK, MKK4 ali MKK3/6, s transkripcijskim uravnavanjem ekspresije MITF in tirozinaze.21 Fosforilacija p38 MAPK uravnava melanogenezo s spodbujanjem proteasomska razgradnja melanogenih encimov.6 Znano je, da ERK zniža izražanje MITF in melanogenezo s fosforilacijo več kot 160 proteinov.10 Poleg tega je JNK vključena v proliferacijo in apoptozo rakavih celic ter nadzoruje tudi melanogenezo z znižanjem izražanja MITF.

Za pojasnitev mehanizma, odgovornega za biološko aktivnostRPEsmo raziskali učinek RPE na signalno pot MAPK z Western blot analizo. Kot je prikazano na sliki 2, je bilo prikazano tudi, da zdravljenje z RPE fosforilira MEK-ERK, MKK4/7-JNK in MKK3/6- p38 MAPK poti v celicah B16F10. Poleg tega je bila fosforilacija MAPKKs-MAPKs znatno okrepljena z naraščajočimi koncentracijami RPE. Poleg tega smo opazili, da je RPE zmanjšal izražanje MITF. Ti rezultati kažejo, da RPE zavira izražanje MITF in tirozinaze z aktiviranjem signalnih poti MAPK.

RPE izzove učinek beljenja kože na človeški koži

V tej študiji je učinekRPEna svetlost človeške kože je bilo nadalje potrjeno v dvojno slepem kliničnem preskušanju. Vsak subjekt je prejel aplikacijo dveh različnih formulacij, eno s 0.05 odstotki (v/v) RPE in eno brez RPEon vsako polovico obraza enkrat na dan 6 tednov. Svetlost kože, ocenjena z vrednostjo L*, je bila ocenjena z uporabo SkinColorCatch (Delfin Technologies). Kot je prikazano na sliki 3, se je svetlost kože ob zdravljenju z 0,05-odstotno (v/v) formulacijo, ki vsebuje RPE, znatno povečala v primerjavi s kontrolami. 3-tedensko zdravljenje z RPE je povzročilo znatno povečanje vrednosti L*, učinek pa se je z nadaljevanjem zdravljenja še povečal.

RPE preprečuje razgradnjo kolagena z inhibicijo MAPK-MMP-1 v HDF-jih

UV-obsevanje povzroči oksidativni stres in tako sproži razgradnjo kolagena z indukcijo aktivacije MMP.2 MMP-1 je pomemben dejavnik v procesu fotostaranja, ker specifično cepi kolagen tipa I.3 Izražanje MMP-1 posreduje MAPK, kot so ERK, p38 MAPK in JNK, ki nato povečajo aktivacijo transkripcijskega faktorja AP-1.22 Kot podenota AP-1 se c-Jun inducira tudi kot odziv na aktivacijo MAPK, ki jo stimulira UV-sevanje .23 Skušali smo raziskati, ali jezmanjševanje gubUčinek RPE je bil določen s stopnjo zatiranja MMP-1 in MMP-1-posredovane transdukcije signalov navzgor v HDF-jih, obsevanih s SUV. Ocenjena je bila tudi stopnja izražanja kolagena tipa I, ki odraža količino kolagena, sintetiziranega v celicah. Kot je prikazano na sliki 4A, B, je obsevanje SUV povzročilo zmanjšano izražanje kolagena tipa I in povečano izražanje MMP-1 v HDF. Vendar se je izražanje ravni kolagena tipa I, zmanjšano z obsevanjem SUV, dramatično povrnilo z zdravljenjem z RPE, ki je tudi znatno oslabilo povečane ravni izražanja MMP-1, ki jih povzroča obsevanje SUV. Poleg tega so preučili učinek RPE na s SUV inducirano fosforilacijo AP-1 in MAPK, da bi razjasnili signalne poti, vključene v SUV posredovano izražanje MMP-1. Rezultati so pokazali, da povečana fosforilacija c-Jun pri HDF-jih, ki jih povzroča SUV, je bil izrazito zatrt zRPEna način, ki je odvisen od odmerka (slika 4C). Poleg tega je RPE zaviral fosforilacijo MEK ERK, MKK4/7-JNK in MKK3/6-p38, ki jo povzroča SUV (sl. 4D–F). Ti rezultati kažejo, da RPE lajša razgradnjo kolagena, ki jo povzroča SUV, tako da zavira izražanje MMP-1 z znižanjem signalnih poti AP-1 in MAPK v HDF.

RPE zmanjša izražanje MMP-1, ki ga povzroči SUV, tako da zniža signalizacijo AP-1 in MAPKK-MAPK v tkivu človeške kože

Za nadaljnjo potrditev lastnosti RPE proti fotostaranju in vivo smo 1 uro predhodno obdelali vzorce tkiva človeške kože, čemur je sledilo 46 kJ/m2 obsevanja SUV. Kot je prikazano na sliki 5A, se je izražanje MMP-1 izrazito povečalo z izpostavljenostjo SUV, medtem koRPEzdravljenje je zavrlo ravni izražanja MMP-1, ki jih povzroči SUV. Poleg tega je analiza barvanja IHC razkrila zaščitni učinek RPE na debelino povrhnjice z izpostavljenostjo SUV, tako da je pokazala raven izražanja MMP-1 v kožnem tkivu. Izražanje MMP-1 v modelu človeške kože, zdravljenega s SUV, je bilo opazno povečano, medtem ko je zdravljenje z RPE zmanjšalo izražanje MMP-1, ki ga povzroča SUV (slika 5B). AP-1 stimulira izražanje MMP-1,24 MAPK pa so glavni posredniki izražanja MMP-1, povzročenega z UV žarki, z uravnavanjem transaktivacije AP-1.25 Kot je prikazano na sliki 5C, RPE je zaviral s SUV inducirano fosforilacijo c-Jun v človeškem kožnem tkivu, kar kaže na znižanje regulacije transkripcijske aktivacije AP-1 z RPE. Poleg tega je RPE zaviral fosforilacijo MEK-ERK, MKK4/7-JNK in MKK3/6-p38, ki jo povzroča SUV (slika 6). Ti rezultati skupaj kažejo, da RPE zavira proizvodnjo kolagena, ki jo povzroča SUV. v dermalnih celicah in kožnem tkivu.

izvleček cistanche tubulosa

DISKUSIJA

Številne sorte okrasnih vrtnic, ki obstajajo danes, se že dolgo uporabljajo v prehrambene in medicinske namene. Dejansko so v rastlini vrtnice prisotne različne zanimive bioaktivne spojine, vključno s fenolnimi spojinami.26 Prej smo poročali o protikožni vnetni aktivnostiRPEz uporabo mišjih epidermalnih celic, v katerih je RPE zmanjšal SUV-inducirano ekspresijo COX-2 z zaviranjem signalne poti MAPK.

Tesna povezava med vnetjem in procesom staranja je dobro uveljavljena28 in skušali smo raziskati ta odnos v kontekstubeljenje kožeinproti gubamformacijske dejavnosti. Kot je prikazano na sliki 1, je RPE odvisno od odmerka zaviral aktivnost tirozinaze in vitro in njeno izražanje v celicah B16F10. Poleg tega je bil končni rezultat pigmentacije kože, proizvodnja melanina, zavrt z zdravljenjem z RPE v celicah B16F10. RPE je prav tako induciral fosforilacijo MAPK in njegovega predhodnega aktivatorja MAPKK, čemur je sledilo zmanjšanje izražanja MITF (slika 2). Znano je, da so MAPK ključni signalni dejavniki, ki uravnavajo melanogenezo v melanocitih.21 Poti ERK in JNK sta vključeni v številne korake signalne transdukcije in sodelujeta tudi pri regulaciji MITF, kar zaporedno vodi do inhibicije tirozinaze in melanogeneze.9 Medtem pa aktivacija p38 MAPK vodi do inhibicije sinteze melanina z indukcijo razgradnje proteina tirozinaze. 6 Ti rezultati skupaj kažejo, da RPE zavira melanogenezo v celicah melanoma B16F10 z inhibicijo transkripcije MITF in tirozinaze, učinek RPE pa se pojavi v povezavi z aktivacijo signalnih poti MAPKK-MAPK.

Za potrditev, ali jebeljenje kožein so aktivnosti RPE proti nastajanju gub veljavne za človeško kožo, smo prostovoljce zdravili z RPE 6 tednov, da bi ocenili aktivnost beljenja kože. Ocenjevali smo tudi ex vivo človeško kožno tkivo 10 dni, da bi oceniliproti gubamformacijski učinki. Zdravljenje s formulacijo, ki vsebuje RPE, je bistveno povečalo vrednosti L*, merske enote za belino kože (slika 3). Poleg tega je večina prostovoljcev odgovorila, da se je stanje njihove kože, vključno z belino, izboljšalo s formulacijo, ki vsebujeRPE, na podlagi anketnega vprašalnika (podatki niso prikazani).

SUV sevanje velja za primarni dejavnik v procesih, povezanih s staranjem kože.4 V tej študiji RPE ni le obnovil sinteze prokolagena, ampak je tudi zadušil izražanje MMP-1, ki ga povzroči SUV, v HDF (slika 4). Poleg tega je analiza barvanja IHC pokazala, da lahko RPE oslabi ekspresijo MMP1, ki jo povzroča SUV, v kožnem tkivu (slika 5B). Poleg tega smo raziskali, ali RPE vpliva na transkripcijske faktorje, kot sta MAPK in AP-1. Ugotovili smo, da so bile ravni beljakovin povišane v HDF, obsevanem s SUV, in kožnem tkivu, medtem koRPEznatno zaviralo pot MAPKK-MAPK in aktivacijo-1AP. Po izpostavljenosti SUV lahko nastali ROS deluje kot aktivator za več molekularnih poti, vključno s potjo MAPK, ki aktivira transkripcijo AP-1 in jedrskega faktorja kapaB.29 Te poti prispevajo k izražanju številnih genov, vključno z MMP, kar vodi do pomanjkanja kolagena in 12 V prejšnji študiji smo tudi dokazali, da RPE vsebuje visoke koncentracije antioksidantov, kot so antocianini, polifenoli in flavonoidi, s čimer zagotavlja določeno stopnjo protivnetne zmogljivosti proti izpostavljenosti SUV. 27 Zato je zaščitni učinek RPE na poškodbe kože zaradi sevanja SUV prikazano v tej študiji, je mogoče pripisati njegovi antioksidativni sposobnosti.

Na koncu smo ugotovili, daRPEkaže na beljenje kože inproti gubamučinke, hkrati pa zavira aktivnost tirozinaze in tvorbo melanina v melanocitih. Antimelanogene lastnosti RPE se lahko izzovejo z aktivacijo signalne poti MAPKK-MAPK. Poleg tega RPE ne samo spodbuja sintezo prokolagena, ampak tudi zavira ekspresijo MMP, ki jo povzroči izpostavljenost SUV v kožnih fibroblastih in tkivih, tako da zavira pot MAPKK-MAPK in aktivacijo AP-1. Poleg tega pri prostovoljcih niso odkrili nobenih negativnih učinkov, povezanih s stabilnostjo formulacije. Naše ugotovitve kažejo, da je lahko RPE učinkovit biomaterial za zaščito kože z aplikacijami pri kliničnem in/ali kozmetičnem zdravljenju kožne pigmentacije in gub.

dodatki cistanche