Cepiva proti klopom in prikriti proti izpostavljenim antigenom

Povzetek:

Razvoj cepiva proti klopom je v veliki meri odvisen od identifikacije ustreznih antigenov, ki bi morali imeti v idealnem primeru različne lastnosti. To bi morale biti ključne molekule v biologiji klopov, kodirane z enim samim genom, izražene v vseh življenjskih obdobjih in tkivih klopov, sposobne inducirati celice B in T za spodbujanje imunološkega odziva brez alergenih, hemolitičnih in toksičnih učinkov; in ne sme biti homologna gostitelju sesalcu. Razprava o tej temi in uporabnosti "izpostavljenih" in "skritih" antigenov je bila učinkovito raziskana v publikaciji Nuttall et al. (2006). Ta komentar namerava razpravljati o pomembnosti takšne študije na področju imunološkega nadzora klopov.

Cepivo proti klopom je učinkovito sredstvo za preprečevanje bolezni, ki jih prenašajo klopi. Lahko povzroči, da telo razvije imunost proti klopom, da zaščiti ljudi pred boleznimi, ki jih prenašajo klopi. Cepiva proti klopom so tesno povezana z imunostjo. S cepljenjem proti klopom lahko okrepimo človeško imunost in učinkovito preprečimo pojav bolezni, ki jih prenašajo klopi.

Cepivo proti klopom je preventivno cepivo, katerega glavna sestavina je virus akari. Po cepljenju proti klopom bo človeško telo razvilo določeno mero imunosti in ustvarilo zaščitno pregrado za zaščito človeškega telesa pred okužbo z boleznimi, ki jih prenašajo klopi. Cepiva proti klopom lahko učinkovito preprečijo pojav bolezni, ki jih prenašajo klopi, kot so infuzijska mrzlica, gorska mrzlica in mrzlica lassa, ter imajo pozitiven zaščitni učinek na zdravje ljudi.

Poleg cepljenja proti klopom je pomemben dejavnik pri preprečevanju bolezni, ki jih prenašajo klopi, tudi imunost telesa. Močnejša ko je imunost telesa, učinkoviteje se upira boleznim, ki jih prenašajo klopi. Zato moramo v vsakdanjem življenju posvetiti pozornost gibanju, ohranjanju zdravja in krepitvi imunosti. Na primer, več telesne vadbe, vzdrževanje dobrih navad pri delu in počitku, zdrava prehrana in uživanje bolj hranljive hrane, kot sta sadje in zelenjava, lahko učinkovito izboljšajo našo imunost.

Če povzamem, cepiva proti klopom so tesno povezana z imunostjo. S cepljenjem proti klopom lahko okrepimo človeško imunost in učinkovito preprečimo pojav bolezni, ki jih prenašajo klopi. Obenem moramo biti pozorni tudi na vsakodnevne navade ohranjanja zdravja in krepitve imunosti, da zaščitimo svoje telo pred boleznimi, ki jih prenašajo klopi. S tega vidika moramo izboljšati našo imuniteto. Cistanche lahko bistveno izboljša našo imunost, saj ima cistanche tudi protivirusne in protirakave učinke, ki lahko okrepijo sposobnost imunskega sistema za boj in izboljšajo odpornost telesa.

Kliknite zdravstvene koristi cistanche

Ključne besede:

Kontrola klopov; cepivo; "izpostavljen" antigen; "prikritega" antigena.

1. Uvod

Klopi so ektoparaziti, ki lahko dvojno prizadenejo svoje gostitelje, saj njihovo hematofagno vedenje neposredno vpliva na gostitelja, zato so ti ektoparaziti zaradi sposobnosti vektorjev različnih patogenov velika grožnja zdravju živali in javnosti. Živalska industrija pozna klope in bolezni, ki se prenašajo s klopi, kot so anaplazmoza, erlihioza, babezioza in teilerioza, saj vsako leto poročajo o znatnih gospodarskih izgubah, ki jih povzročajo umrljivost in obolevnost živali, zdravljenje bolezni in zatiranje klopov. Trenutno glavni nadzor nad klopi in boleznimi, ki jih prenašajo klopi (TTBD), so kemični izdelki, ki se neposredno nanašajo na živali. Ti izdelki onesnažujejo zemljo in izdelke živalskega izvora ter prispevajo k odpornosti klopov.

Zamisel o uporabi imunosti gostitelja in cepljenja za boj proti klopom ni nova. Uporaba naravno pridobljene imunosti in homogenatov žlez slinavk (znanih kot "izpostavljeni" antigeni) kot virov inducirane zaščite [1–3] je bil prvi korak v prizadevanju, da bi cepiva postala alternativna metoda zatiranja klopov. Od objave pionirskih študij Williama Tragerja leta 1939 [3] ter Allena in Humphreysa leta 1979 [4] je bilo izvedenih veliko projektov za ustvarjanje cepiv proti klopom. Pri uresničevanju tega cilja so sledili različnim potem, vendar je resničnost taka, da je po izdaji cepiv na osnovi Bm86-v devetdesetih letih prejšnjega stoletja le nekaj kandidatov doseglo predprodajno stopnjo [5]. Komercializacija teh cepiv je znanstvenike spodbudila k iskanju drugih antigenov, ki bi lahko reproducirali ali celo presegli učinke znamenite "črevesne beljakovine neznane funkcije" govejega klopa Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

To odkritje je usmerilo pozornost raziskovalne skupnosti na zamisel, da bi lahko "skriti" antigen uporabili za izzivanje močnega imunskega odziva in od tod vprašanje, ali tako "izpostavljeni" kot "prikriti" antigeni predstavljajo potrebne zahteve, ki jih je treba vključiti. v potencialnem cepivu proti klopom. V zadnjih letih se je o uporabnosti vključevanja ene ali druge vrste antigenov v cepiva proti klopom razpravljalo v različnih publikacijah, pri čemer se strinjajo, da so "prikriti" antigeni opredeljeni kot običajno skriti pred imunskim strojem gostitelja in, "izpostavljeni" antigeni so opredeljeni kot izločeni v klopovi slini med pritrditvijo in hranjenjem, kar izzove imunološki odziv. Gostitelji, imunizirani z "izpostavljenimi" antigeni, so okrepljeni s trajnim stikom s klopi, medtem ko cepljenje s "prikritimi" antigeni zahteva naknadna cepljenja, da se zagotovi stalna zaščita [6]. Po poskusih, ki sta jih izvedla Allen in Humphreys [4], v katerih so bili morski prašički in govedo imunizirani z antigeni iz črevesja in drugih notranjih organov, delno hranjenih z Dermacentor andersoni, so druga poročila pokazala, da bi lahko naravno živalsko imunost proti infestaciji s klopi okrepili z uporabo homogenatov klopov iz sledijo celi klopi ali posebni organi [7–9].

Leta 1988 sta Willadsen in Kemp označila "prikriti" antigen kot ključno prednost v primerjavi z "izpostavljenimi" antigeni: malo verjetnost, da bi klopi razvili imunsko utajo [10]. Kmalu zatem so o tej trditvi nadalje razpravljali in jo podprli z eksperimentalnimi testi, ki so vključevali antigen Bm86 [11,12]. Od takrat je bilo obravnavanih in testiranih več "skritih" in "izpostavljenih" (izločenih) antigenov, ki so pokazali močne in šibke lastnosti pri nadzoru infestacije s klopi. Poleg že omenjene prednosti naravnega spodbujanja, doseženega z uporabo "izpostavljenih" antigenov, imajo cepiva, formulirana s temi antigeni, druge pomembne lastnosti: spodbujajo naravno pridobljeno odpornost na hranjenje s klopi in ciljajo na različne molekule in/ali različne stopnje v primerjavi s cepivi, formuliranimi s "prikritimi" antigeni [13]. Iz številnih poskusov, ki so bili izvedeni za preizkušanje možnih kandidatov za cepivo, se je pojavila nova ideja, ki je vključevala uporabo antigenov, ki predstavljajo značilnosti tako "izpostavljenih" kot "prikritih" vrst, ki so jih poimenovali cepiva z dvojnim delovanjem.

Z uporabo domnevnega klopnega cementnega proteina (64P) iz Rhipicephalus appendiculatus kot antigena so dokazali indukcijo vnetnega odziva na mestu hranjenja in hkratno povečanje titra protiteles [14,15]. Ko so raziskave napredovale, so drugi "izpostavljeni" in "prikriti" antigeni pokazali potencial kot kandidati za cepivo, nekateri pa so bili združeni za izboljšanje učinkovitosti cepiva proti različnim vrstam klopov in proti patogenom, ki jih prenašajo klopi, kot je Anaplasma sp. in Babesia sp. [16]. Publikacija Nuttall et al. iz leta 2006, ki je zbirala ustrezne informacije o raziskavah, ki so se osredotočale na razvoj cepiv proti klopom na osnovi obeh vrst antigenov, je razpravljala o optimalnih zahtevah za cepivo in novih formulacijah ter obravnavala potrebo po razumevanju odnosov med gostiteljem in parazitom za prepoznavanje primerni kandidati za razvoj cepiva, zaradi česar je ta rokopis "klasičen dokument" za raziskovalce, ki delajo na področju imunološkega nadzora TTBD.

2. Odkritje

Pot za zmanjšanje TTBD, podprta z integriranimi ukrepi, katerih sestavni del so rekombinantna cepiva, še naprej predstavlja glavno omejitev: identifikacijo zaščitnih antigenov. Pregled Nuttala et al. (2006) zbira eksperimentalno podporo za uporabo tako "skritih" kot "izpostavljenih" antigenov pri razvoju cepiv proti klopom, pri čemer poudarja nove možnosti, kot so cepiva z dvojnim delovanjem in cepiva proti prenosu (namenjena blokiranju razvoja parazitov znotraj klopa, kar zmanjšuje kužnost klopov in omejuje prenos). Predstavljena je definicija "izpostavljenih" in "prikritih" antigenov ter karakterizacija njihovega "načina delovanja" v zvezi z imunskim odzivom gostitelja.

Če "izpostavljeni" antigeni naravno izzovejo imunski odziv gostitelja z delovanjem dendritičnih celic, ki predelajo in predstavijo te antigene limfocitom T, s čimer sprožijo celično ali protitelesno posredovani imunski odziv, "prikrite" odzive, ki niso naravno predstavljeni imunski mehanizem gostitelja, lahko povzroči močno humoralno imunost, ki proizvaja protitelesa, ki lahko dosežejo in poškodujejo svoje tarče, kar bi škodovalo preživetju klopov [6,13]. Glavna težava s tako imenovanimi "izpostavljenimi" antigeni je, da žleze slinavke med hranjenjem izločajo kopico bioaktivnih molekul, da premagajo gostiteljeve hemostatske, vnetne in imunske mehanizme [17], zaradi česar je malo verjetno, da bi en sam klopni antigen induciral učinkovit imunski odziv. Po drugi strani pa imajo "prikriti" antigeni koristi od elementa presenečenja na način, da parazit ni "pripravljen" na blokado teh skritih proteinov, vendar pa je lahko potrebno ponavljajoče se priprave gostiteljevih imunskih mehanizmov.

V klasičnem prispevku je naveden tudi seznam testov, ki so uporabljali dve vrsti antigenov, ki so bili objavljeni pred letom 2006. Podan je primer prej omenjenega antigena Bm86, temu primeru pa so priloženi drugi "prikriti" antigeni dodani, kot je Vitellin, ki je bil testiran proti R. microplus pri govedu. Druge "prikrite" antigene so proučevali v različnih okoljih, na primer HLS1, HLS2 in P27/30, testirane proti Haemaphysalis longicornis, Voraxin proti Amblyomma hebraeum in 4D8 proti Ixodes scapularis.

Vzporedno so bili "izpostavljeni" antigeni, kot so kalretikulin, protein, ki veže imunoglobulin, protein, ki veže histamin, P29, HL 34, RIM36 in 64TRP, testirani proti različnim vrstam klopov, Amblyomma americanum, D. variabilis in R. microplus, R appendiculatus in H. longicornis [6]. Na splošno so bili rezultati obeshrabrujoči in nobeden ni dosegel komercialne razvojne stopnje, čeprav so bili nekateri od njih testirani na govedu, kar velja za 64TRP, ki je bil testiran proti R. appendiculatus.

Takrat je bil poseben poudarek namenjen rekombinantnim različicam kandidatov za cepivo 64P, ki niso kazale le humoralnega, ampak tudi zakasnjenega odziva. V tem primeru so bili po imunizaciji prizadeti pritrditev klopa, prehranjevanje in celovitost srednjega črevesa, kar je povzročilo smrt klopa. Druga prednost tega antigena je dejstvo, da je bil zgrajen z več kot enim ohranjenim epitopom, kar povečuje njegove možnosti za učinkovitost. Na podlagi koncepta in ugotovitev v zvezi z "izpostavljenimi" in "skritimi" antigeni ter cepivi z dvojnim delovanjem in zaviranjem prenosa je bila obravnavana metoda, ki ni usmerjena le na nadzor vektorjev, temveč tudi na zaviranje ali zmanjšanje prenosa patogenov. V zvezi s tem je bil testiran tudi R. appendiculatus 64TRP z uporabo I. ricinus, okuženega z virusom klopnega encefalitisa (TBEV) na mišjem modelu, kar je pokazalo obetavne rezultate.

V tej študiji cepljenje z rekombinantnim proteinom ni samo oslabilo hranjenja klopov in motilo črevesje klopov, temveč je tudi zaščitilo miši pred smrtonosno okužbo s TBEV. Avtorji so predlagali, da je nadzor nad okužbami verjetno posledica interakcij na ravni Langerhansovih celic, ki igrajo vlogo pri prenosu TBEV, ki ga prenašajo klopi, in jih modulirajo komponente v slini klopov [18]. Glede na napredek v tehnikah molekularne biologije v tistem času (genomika, transkriptomika in proteomika, povezana z, na primer, utišanjem genov, posredovanim z interferenco RNA), je bilo pričakovano, da bodo takšne tehnologije ključne za gradnjo znanja o kompleksnih interakcijah med klopi, paraziti , in gosti končno olajšanje/pomoč pri predlogu novih cepiv proti TTBD. Predstavljen je bil pristop sistemske biologije, ki poudarja prednosti preučevanja omrežij, ki podpirajo celične funkcije [16].

3. Vpliv

Šestnajst let po objavi ostaja pregled z naslovom "Izpostavljeni in prikriti antigeni kot tarče cepiv za nadzor nad klopi in boleznimi, ki jih prenašajo klopi", avtorji Nuttall et al., mejnik. To ni zato, ker predstavlja prelomno odkritje, temveč zato, ker je zanesljiva zbirka dokazov, ki podpirajo različne raziskovalne poti, ki se izvajajo pri iskanju učinkovitih cepiv proti klopom in patogenom, ki jih prenašajo klopi. Od takrat je bilo v poskusih cepljenja proti različnim vrstam klopov testiranih vsaj 68 različnih "izpostavljenih" in/ali "skritih" antigenov, da bi dosegli zmanjšanje okužbe s klopi (tabela 1) [19–59]. Uspela je tudi privlačna zamisel o cepivih, ki blokirajo prenos, in nekatere študije so vključevale hipotezo, da bi poslabšanje antigena, ki je tarčen na klopa, lahko vplivalo tudi na življenjski cikel patogena, ki se pojavlja v njegovem vektorju (tabela 1).

Vpletenost žlez slinavk v temeljni proces hranjenja s krvjo in prenosa patogenov je postala tarča raziskav. Poleg tega je dostop gostiteljskih protiteles do beljakovin srednjega črevesa še naprej spodbujal zanimanje za to tkivo, vendar drugi antigeni, odkriti v jajčnikih ali jajčecih, kot je CDK10/od ciklina odvisna kinaza iz I. persulcatus [41] in encim, ki razgrajuje vitelin [23] in rumenjakov prokatepsin iz bakterije R. microplus [19] sta bila prav tako testirana v preskušanjih cepljenja. Če pa je obstajal začetni pomislek glede razvrščanja antigenov glede na izpostavljenost gostiteljevemu imunskemu sistemu, so se raziskovalci nekje na poti začeli osredotočati na funkcijo in vlogo biologije klopov in ne na takšno razvrstitev.

V zadnjih letih, kar lahko imenujemo velika revolucija v pristopih omike, je omogočilo primerjavo genomov, transkriptomov, proteomov in v zadnjem času metabolomov različnih vrst klopov, tkiv, stopenj, okužb in statusov hranjenja med drugim, kar s tehnologijo interference RNA so z bolj akademskega vidika razširili znanje o biologiji parazitov, ustvarili ogromne količine informacij o interakcijah med klopi, gostitelji in patogeni, v bolj uporabnem pogledu pa so natančno določili ustrezne molekule, vključene v temeljne biološke procese pri klopih, ki jih je mogoče pregledani kot zaščitni antigeni [60].

Katalogi genov in proteinov, za katere je bilo ugotovljeno, da so različno zastopani kot odziv na določeno stanje, so javno dostopni v repozitorijih in jih je mogoče pregledati kot kandidate za cepivo proti klopom, pri čemer je njihov izbor določen z merili raziskovalcev. Čeprav se vedno bolj krepi zavedanje o nujnosti ustvarjanja modelov za analizo obstoječih podatkov, žal ti viri, ki jih lahko dojemamo kot prvi korak na poti k odkrivanju primernih ciljev, pogosto premalo raziskani. Reverzna vakcinologija, ki jo je uvedel Rino Rappuoli [61], je bila uporabljena tudi pri razvoju cepiva proti klopom z razvojem bioinformacijskih cevovodov, namenjenih prepoznavanju primernih tarč [54,62,63].

Postopoma je postalo tudi jasno, da je treba analizirati in izkoristiti prednosti različnih antigenov, epitopov, formulacij cepiv in imunoloških odzivov gostitelja, da bi dosegli učinkovito zaščito. Pri kombiniranju antigenov z dokazano učinkovitostjo in aktiviranjem različnih imunoloških mehanizmov pričakujemo sinergistični učinek na zaščito. Cepivo, sestavljeno iz treh klopnih rekombinantnih proteinov, ki je samo zagotavljalo delno zaščito pred R. microplus pri zaprtem govedu, je bilo testirano v terenskih razmerah. Imunizacija s cisteinsko endopeptidazo, ki razgrajuje vitelin (VTDCE), prokatepsinom rumenjaka Boophilus (BYC) iz R. microplus in glutation S-transferazo iz H. longicornis (GST-Hl), je povzročila povečano raven zaščite pred infestacijami z R. microplus pri primerjava z enim antigenom [64].
Obetavni antigen Subolesin (SUB) je bil kombiniran z njegovim ortologom Akirinom, kar je povzročilo visoko učinkovitost cepiva pri kuncih proti I. ricinus in D. reticulatus [65], nedavno pa je bila objavljena študija, ki je pokazala možnost kombiniranja SUB z Bm{{ 1}} [66]. Ta strategija je vodila tudi do kombinacije SUB z antigeni patogenov, da bi dosegli cepivo z dvojnim učinkom. Cepljenje s SUB/Anaplasma marginale Major Surface Protein 1a je povzročilo znatno zmanjšanje okužb s klopi pri govedu in ovcah, pa tudi 30-odstotno zmanjšanje Babesia bigemina [67]. Poleg tega se je izkazalo, da je himera Q38 Subolesin/Akirin, ki vsebuje ohranjene zaščitne epitope, kandidatni antigen za nadzor infestacij z več vrstami klopov [68]. Peptid ribosomskega proteina P{{10}} je še en antigen, ki se trenutno obravnava za razvoj cepiva. Kljub temu, da je del ohranjenega proteina, se uporabljeno peptidno zaporedje razlikuje od ortologov gostiteljev vretenčarjev in je med klopi zelo ohranjeno. Peptidi so majhni in zato šibko imunogeni, zato potrebujejo nosilne molekule kot adjuvans, dodajo kemično stabilnost in povečajo imunski odziv. Hemocianin ključavnice iz Megathura crenulata (KLH) je bil uporabljen skupaj s P0 in rezultati so pokazali visoko zaščito pred okužbo s klopi [37,69,70] pri različnih rodovih klopov. Zato se raziskuje zamisel, da bi bilo mogoče posamezne učinkovitosti Bm86 in P0 izboljšati s konjugacijo obeh antigenov [69–71] [37,69,70].

Velik izziv odkrivanja antigena, primernega za razvoj in komercializacijo cepiva proti klopom, ostaja še danes. Vendar pa je bil dosežen izjemen napredek pri identifikaciji in validaciji kandidatov in antigeni, ki kažejo obetavne rezultate (zlasti pri govedu, zaradi pomena TTBD v živalski proizvodnji), so podprli registracijo patentov. Na primer, sam ali skupaj z Bm86 je zaščitni antigen SUB antigen, v katerega polagamo velike upe (patent US20050123554A1 in WO2014154847A1). Različne študije so pokazale pozitivne učinke proti različnim členonožcem ektoparazitom in patogenom, kot poročajo za Plasmodium sp., ki ga prenašajo komarji. [72] in za A. marginale, ki ga prenašajo klopi [38]. Leta 2009 so rezultati glede imunizacije goveda s feritinom 2 proti I. ricinus podprli zahtevo za patent (US8168763B2). Pred kratkim je bilo ugotovljeno, da ima cepljenje z membrano povezanim proteinom, akvaporinom, visoko učinkovitost, ko so ga raziskali v preskušanjih cepiva proti peresniku [39], kar je leta 2017 omogočilo registracijo patenta US20180085443A1.

Zanimivo je omeniti, da je slednje antigene mogoče razvrstiti kot "prikrite", kar podpira koncept, da antigeni, ki se izločajo v slini ("izpostavljeni"), niso le del imunološkega ravnovesja, ki se pojavi med klopom in gostiteljem, ampak tudi, da so ti "skriti" "molekule stimulirajo močan pozitiven imunski odziv, posredovan s celicami T in B celicami. Ne glede na to, ali je antigen "skrit" ali "izpostavljen", je identifikacija učinkovitega antigena le prvi korak v razvoju cepiva. Delo, ki sledi njegovemu priznanju kot primernega antigena za razvoj cepiva, najprej vključuje oceno imunogenosti, kombinacije z adjuvansi in formulacijami cepiva, izbiro sistema dostave, čemur sledi validacija cepiva v nadzorovanih pogojih in na terenu. Če vsi prejšnji koraki prinesejo zadovoljive rezultate, potem je treba izpolniti obsežno proizvodnjo in komercializacijo.

Imunološka zaščita velja za najbolj trajnostno metodo zatiranja klopov in bolezni, ki jih prenašajo klopi, saj se z njo izognemo pomanjkljivostim akaricidov, namreč pojavu odpornosti klopov ter kontaminaciji živali in okolja. Cepljenje z "izpostavljenimi" in "prikritimi" antigeni klopov izkorišča bodisi naravno pridobljen ali umetno induciran humoralni imunski odziv, vendar je potrebnih več študij za razumevanje specifičnih imunoloških odzivov, ki so odvisni od širokega nabora dejavnikov, kot so vrsta in/ali pasma gostitelja, starost gostitelja, imunska sposobnost ali predhodna izpostavljenost klopom. Za večplastni imunski odziv gostitelja je zaradi raznolikosti klopov in posebnosti življenjskega cikla razvoj cepiva proti klopom zapleten izziv [73,74], a čeprav je pot pred nami dolga, je članek Nuttall et al., objavljen leta 2006, nujno branje ob vstopu v svet raziskovanja klopov.

Avtorski prispevki:

Konceptualizacija SA in AD; pisanje—priprava izvirnega osnutka, SA in AD; pisanje—pregledovanje in urejanje, SA in AD; vizualizacija, SA in AD Vsi avtorji so prebrali in se strinjajo z objavljeno različico rokopisa.

Financiranje:

Ta raziskava ni prejela zunanjega financiranja.

Izjava institucionalnega revizijskega odbora:

Se ne uporablja.

Izjava o informirani privolitvi:

Se ne uporablja.

Izjava o razpoložljivosti podatkov:

Se ne uporablja.

Zahvala:

Avtorji bi se radi zahvalili FCT za financiranje Centra za raziskave in razvoj, globalno zdravje in tropsko medicino (GHTM—UID/04413/2020).

Nasprotja interesov:

Avtorji izjavljajo, da ni navzkrižja interesov.

Reference

1. Randolph, SE Regulacija populacije pri klopih: Vloga pridobljene odpornosti pri naravnih in nenaravnih gostiteljih. Parazitologija 1979, 79, 141–156. [CrossRef]

2. Brown, SJ Imunologija pridobljene odpornosti na klope. Parazitol. Danes 1985, 1, 166–171. [CrossRef] [PubMed]

3. Trager, W. Pridobljena imunost na klope. J. Parazitol. 1939, 25, 57. [CrossRef]

4. Allen, JR; Humphreys, SJ Imunizacija morskih prašičkov in goveda proti klopom. Narava 1979, 280, 491–493. [CrossRef] [PubMed]

5. de la Fuente, J.; Almazán, C.; Canales, M.; Pérez de la Lastra, JM; Kočan, KM; Willadsen, P. Desetletni pregled učinkovitosti komercialnih cepiv za nadzor okužb s klopi pri govedu. Anim. Health Res. Rev. 2007, 8, 23–28. [CrossRef] [PubMed]

6. Nuttall, PA; Trimnell, AR; Kazimirova, M.; Labuda, M. Izpostavljeni in skriti antigeni kot tarče cepiva za nadzor klopov in bolezni, ki jih prenašajo klopi. Imunol proti parazitom. 2006, 28, 155–163. [CrossRef] [PubMed]

7. Johnston, LAY; Kemp, DH; Pearson, RD Imunizacija goveda proti Boophilus microplus z uporabo izvlečkov, pridobljenih iz odraslih samic klopov: Učinki inducirane imunosti na populacije klopov. Int. J. Parazitol. 1986, 16, 27–34. [CrossRef]

8. Kemp, DH; Agbede, RIS; Johnston, LAY; Gough, JM Imunizacija goveda proti Boophilus microplus z uporabo izvlečkov, pridobljenih iz odraslih samic klopov: hranjenje in preživetje parazita na cepljenem govedu. Int. J. Parazitol. 1986, 16, 115–120. [CrossRef]

9. Opdebeeck, JP; Wong, JY; Jackson, LA; Dobson, C. Cepiva za zaščito goveda Hereford proti govejemu klopu, Boophilus microplus. Imunologija 1988, 63, 363–367.

10. Willadsen, P.; Kemp, DH Cepljenje s "prikritimi" antigeni za nadzor klopov. Parazitol. Danes 1988, 4, 196–198. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com