Dendritične celice tipa 1 (DC) pri boleznih ledvic

za več informacij:ali.ma@wecistanche.com

Konvencionalne dendritične celice tipa 1 (cDC1) pri boleznih ledvic pri človeku: klinično-patološke korelacije

Titi Chen, Qi Cao in drugi.

POVZETEK

Ozadje: Dendritične celice tipa 1(cDC1) je podmnožica običajnih DC, katerih najbolj priznana funkcija je navzkrižna predstavitev celicam CD8 in T. To študijo smo izvedli, da bi raziskali število in lokacijoDendritične celice tipa 1(cDC1s) pri različnih ljudehbolezni ledvickot tudi njihovo korelacijo s klinično-patološkimi značilnostmi in celicami CD8 T.

Metode: Analizirali smo 135ledvicavzorci biopsije.Bolezni ledvicvključeno: akutna tubularna nekroza (ATN), akutni intersticijski nefritis (AIN), proliferativni glomerulonefritis (GN) (nefropatija IgA, lupusni nefritis, slaboimunski GN, bolezen proti GBM), neproliferativni GN (bolezen minimalnih sprememb, membranska nefropatija) ) in diabetične nefropatije. Za kvantifikacijo cDC1 je bilo uporabljeno indirektno imunofluorescenčno barvanje (Dendritične celice tipa 1), CD1ct DC in CD8 plus T celice.

Rezultati:Dendritične celice tipa 1(cDC1) so bili v normalnih redkih primerih prisotniledvice. Njihovo število se je znatno povečalo pri ATN in proliferativnem GN, sorazmerno veliko več kot CD1ct DC. cDC1s (Dendritične celice tipa 1)večinoma najdemo v intersticiju, razen pri lupusnem nefritisu, pauci-imunem GN in bolezni proti GBM, kjer so bili izraziti v glomerulih in periglomerularnih regijah. Število cDC1 (Dendritične celice tipa 1)korelira z resnostjo bolezni pri ATN, številom polmesecev pri pauci-imunem GN, intersticijsko fibrozo pri nefropatiji lgA in lupusnem nefritisu ter prognozo pri nefropatiji IgA. Tudi število celic CD8 plus T se je v teh pogojih in cDC1 znatno povečalo (Dendritične celice tipa 1)število v korelaciji s številom CD8 in Tcelic pri lupusnem nefritisu in pauci-imunem GN, pri čemer so mnogi med njimi tesno lokalizirani. Sklepi: cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število v korelaciji z različnimi klinično-patološkimi značilnostmi in prognozo, ki odraža možno vlogo pri teh stanjih. Njihova povezava s celicami CD8 plus T nakazuje kombiniran mehanizem v skladu z rezultati na živalskih modelih.

UVOD

Dendritične celice(DC) so osrednji orkestratorji učinkovite imunosti. Te celice so heterogene in jih je mogoče razdeliti v različne podskupine glede na njihov fenotip in funkcijo. Dendritične celice lahko na splošno kategoriziramo v plazmocitoidne DC (Dendritične celice)(pDC) in običajnih DC (Dendritične celice)(cDC).cDC je sestavljen iz dveh glavnih podmnožic: cDC1 (Dendritične celice tipa 1)(CD141* DC (Dendritične celice) pri ljudeh in CD103t ali CD8ot DC pri glodalcih) in cDC2(CD1c DC pri ljudeh in CD1 lbt DC pri glodalcih) (1).cDC1 (Dendritične celice tipa 1)so bili najprej odkriti pri miših in nato pri ljudeh, zanje pa je značilna njihova vrhunska sposobnost fagocitoze nekrotičnih celic prek receptorja Clec9A, povezanega z molekularnim vzorcem, povezanega s poškodbami (DAMP) in navzkrižne predstavitve celicam CD8 plus T. V nasprotju s tem so cDC2 učinkoviti aktivatorji T-celic CD4*, vendar slabši pri aktivaciji T-celic CD8t (2).

DC-ji (Dendritične celice)so proučevali pri ljudehbolezni ledvicin njihovo število je bilo povečano pri glomerulonefritisu (GN) (3, 4). Po odkritju cDCl so številne študije na živalih pokazale, da igra ključno vlogo pribolezni ledvic, na primer pri adriamicinski nefropatiji in polmesečastem GN, prek interakcije s celicami T (5-8). Vendar takšnih študij pri ljudeh nibolezni ledvic, pri čemer je samo ena študija pokazala povečano število cDC (KonvencionalenDendritične celice)v GN (9). To študijo smo izvedli, da bi zagotovili analizo ključnih podskupin cDC, cDC1 (Dendritične celice tipa 1), in cDC2, v širokem spektru ljudibolezni ledvicvključno z neglomerularnimi boleznimi [akutna tubularna nekroza (ATN), akutni intersticijski nefritis (AIN)], proliferativnim GN (nefropatija IgA, lupusni nefritis, pauci-imunski GN, bolezen proti GBM), neproliferativnim GN (bolezen minimalnih sprememb ( MCD), membranska nefropatija) in diabetična nefropatija. Ugotovili smo, da je cDC pomembno povezan s patološkimi značilnostmi, vključno z resnostjo ATN, tvorbo polmeseca pri pauci-imunem GN in intersticijsko fibrozo pri imunsko posredovanem GN. Poleg tega je skladno z njihovo specializirano sposobnostjo aktiviranja CD8 in celic T pri živalih modelov smo v teh vzorcih pokazali tudi njihovo korelacijo s celicami T CD8t. Te ugotovitve so spodbuda za raziskovanje novih terapevtskih ciljev, ki manipulirajo s temi celicami za zdravljenjeledvicabolezni.

Kliknite za steblo Cistanche za bolezen ledvic

MATERIAL IN METODE

Pacienti in vzorci tkiv

Študija je bila izvedena v skladu z načeli Helsinške deklaracije in jo je odobril Odbor za etiko humanih raziskav lokalnega zdravstvenega okrožja Western Sydney. Pridobljeno je bilo informirano soglasje bolnika. Analizirali smo 176 zamrznjenih diagnostičnihledvicabiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 let) med 18. junijem 2016 in 30* junijem 2017 v bolnišnici Westmead, Sydney, Avstralija.Ledvicatkiva so bila na hitro zamrznjena v OCTcompound (Tissue-Tek Sakura, ZDA) in shranjena pri -80 stopinjah. Enainštirideset (41) vzorcev je imelo slabo kakovost tkiva in so bili izključeni iz študije. Osnovni podatki o bolnikih, vključno s starostjo, spolom, ocenjeno hitrostjo glomerulne filtracije (eGFR) in stopnjo proteinurije, so bili zbrani v časuledvicabiopsija.eGFR smo izračunali s formulo CKD-EPI. Diagnozo je postavil ledvični patolog na podlagi svetlobe, imunofluorescence (IF) in elektronske mikroskopije ter klinične anamneze.

Analizirane so bile različne bolezni, vključno z neglomerulnimi boleznimi (ATN, AIN), proliferativnim GN (nefropatija IgA, lupusni nefritis, slaboimunski GN, bolezen proti GBM), neproliferativnim GN (MCD, membranska nefropatija) in diabetično nefropatija. Za ATN smo vključili samo neseptične primere, saj ima septični ATN drugačno patofiziologijo. ATN je bil nadalje kategoriziran v blago do zmerno bolezen (opredeljeno kot<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 odstotkov kortikalnih tubulov, ki kažejo poškodbo). Nefropatija IgA je bila razvrščena glede na rezultat Oxford MEST (M mezangialna hipercelularnost, E endokapilarna hipercelularnost, S segmentna glomeruloskleroza, T tubularna atrofija/intersticijska fibroza). Analizirali smo tudi korelacijo med cDC1 (Dendritične celice tipa 1) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Lupusni nefritis je bil nadalje razvrščen v 2 skupini glede na stopnjo intersticijske fibroze (<25%,>=25 odstotkov kortikalne intersticijske prizadetosti). Pauci-imunski GN je bil razvrščen v 2 skupini glede na odstotek glomerulov s polmeseci (<40%,>=40 odstotkov ).

Kot običajnoledvicakontrole smo uporabili 5 normalnih ledvičnih kortiklov iz vzorcev nefrektomije in 2 darovalcaledviceni primeren za presaditev. Za tumorske nefrektomije so bili vzorci odvzeti s pola, ki je nasproti tumorja, in vsaj 5 cm od roba tumorja. Ta tkiva so imela normalen makroskopski videz. Mikroskopsko nič od tegaledvicavzorci so imeli znake pomembnega glomerularnega ali tubulointersticijskega vnetja ali poškodbe. Kot pozitivno kontrolo za testiranje protiteles smo uporabili normalno tkivo vranice odraslega darovalca.

Imunofluorescenčno barvanje

Sekcije kriostata so bile odrezane na 5 μm in postavljene na steklena stekelca Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific, ZDA). Diapozitivi so bili shranjeni pri -80 stopinjah. Odseke tkiva smo fiksirali s 100-odstotnim metanolom pri -20 stopinjah 10 minut in nato posušili na zraku. Indirektno imunofluorescenčno obarvanje je bilo izvedeno z uporabo naslednje metode: rezine tkiva so bile sprane v DPBS (Lonza, ZDA) in blokirane z 2-odstotnim govejim serumskim albuminom (Sigma-Aldrich, ZDA) 15 minut; nato so jih obarvali s primarnim protitelesom pri 4 stopinjah čez noč, čemur so sledila sekundarna protitelesa 40 minut pri sobni temperaturi. Tabela 1 je seznam uporabljenih primarnih in sekundarnih protiteles ter njihovih razredčin. Jedra so bila obarvana z DAPI (1: 250, 000, ThermoFisher, ZDA), preden so bili vzorci nameščeni na pokrovna stekelca s fluorescenčnim pritrdilnim medijem (Dako, ZDA). Preverili in izključili smo nespecifično obarvanje in navzkrižno reaktivnost med različnimi primarnimi in sekundarnimi protitelesi.

TABELA 1|Primarna in sekundarna protitelesa, uporabljena v študiji

cDCl so identificirali z barvanjem za marker Clec9A. Pri ljudeh je izražanje Clec9A močno omejeno na cDCl v krvi in ​​tkivih (10, 11). Za potrditev tega vledvicesmo izvedli dvojno barvanje Clec9A in HLA-DRB1 ter Clec9A in CD1lc v izbranih normalnih in obolelih stanjih. Večina, če ne celoten Clec9A se je prekrival s HLA-DRB1 (dodatna slika 1) in CD1lc (dodatna slika 2).

SLIKA 1|Normalna ledvica cDC1 (Dendritične celice tipa 1), cDC2 in CD8 plus T celice.

DC-ji (Dendritične celice)so bili v normalnem stanju redko prisotniledvicein številke cDC2 so bile približno 7-krat večje od števila cDC1 (Dendritične celice tipa 1). (Palica=100 mm).

REZULTATI

Pacientove osnovne značilnosti.Izhodiščne značilnosti bolnikov v kontrolni skupini in kohorti bolezni so povzete v preglednici 2. V študijo je bilo vključenih skupno 135 bolnikov. Širok razponledvicabolezniso bili analizirani, vključno z neglomerularnimi boleznimi [ATN (22), AIN (10)], proliferativno GN[gA nefropatijo (44), lupusnim nefritisom (12), pauciimunskim GN (12), boleznijo proti GBM (4)] , neproliferativni GN [MCD (5), membranska nefropatija (5)] in diabetična nefropatija (21). V skupini z lupusnim nefritisom je bilo več žensk in njihova starost je bila običajno nižja v primerjavi z drugimiledvicabolezni, kar je skladno z literaturo (12). Bolniki s šibkim imunskim GN in boleznijo proti GBM so imeli najnižji eGFR. Raven proteinurije je bila najvišja pri MCD in membranski nefropatiji.

TABELA 2|Osnovne značilnosti.

Število in lokacija DC-jev (Dendritične celice)v nadzoru in bolezni.cDCl so bili v normalnih redkih primerih prisotniledvice(slika 1) in številke cDC2 so bile približno 7-krat večje od števila cDC1 (Dendritične celice tipa 1).Število cDC1 (Dendritične celice tipa 1)znatno povečalo pri ATN in proliferativnem GN (slika 2A), medtem ko je njihovo število ostalo nespremenjeno v primerjavi s kontrolo pri AIN, membranski nefropatiji, MCD in diabetični nefropatiji (dodatna slika 3). Tudi število cDC2 se je znatno povečalo pri ATN in proliferativnem GN (slika 2B). Prišlo je do zmanjšanja cDC2 (Dendritične celice tipa 2)/cDC1 (Dendritične celice tipa 1)razmerje, ki kaže cDCl (Dendritične celice tipa 1)povečal sorazmerno več kot cDC2 (slika 2C).

SLIKA 2|Število cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in cDC2, razmerje cDC2/cDC1 in CD8 plus celica T pri kontrolnih in izbranih boleznih.

P-vrednost se izračuna za vsako bolezen v primerjavi s kontrolo. Oba cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in cDC2 sta se znatno povečala pri ATN, IgA, lupusnem nefritisu, pauci-imunem GN in bolezni proti GBM (A, B)

s cDC1 (Dendritične celice tipa 1)povečal sorazmerno več kot cDC2 pri ATN, lupusnem nefritisu, pauci-imunem GN in bolezni proti GBM (C).

CD8 plus celice T so bile znatno povečane pri ATN, IgA, lupusnem nefritisu, pauci-imunem GN in bolezni proti GBM (D).

Večina cDCl je bila lociranih v intersticiju, razen pri lupusnem nefritisu, pauciimunem GN in bolezni proti GBM, kjer so jih našli tudi v periglomerularnih in intraglomerularnih regijah (slika 3A). Poleg tega smo ugotovili tudi pomembno število celic CD8t T v periglomerularnih in intraglomerularnih regijah (slika 3A) in veliko jih je lokaliziranih skupaj s cDCl (slika 3B). Po drugi strani pa so cDC2 redko našli v intraglomerularnih regijah in minimalna ko-lokalizacija s CD8 plus T celicami.

SLIKA 3|(A) cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in CD8 plus celice T v intraglomerularnih regijah. (B) ko-lokalizacija cDC1 s CD8 plus T celicami. (Palica=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Povezava med cDC1 (Dendritične celice tipa 1)S klinično-patološkimi značilnostmi in celicami CD8 plus T Analizirali smo korelacijo med cDCl (Dendritične celice tipa 1)in klinično-patološke značilnosti ter celice CD8 plus T. Bilo je 22 primerov ATN (blage oblike bolezni n=12, hude bolezni n=10). Hujša bolezen je bila povezana z večjim številom cDC1 (Dendritične celice tipa 1)(p=0.032), vendar ne cDC2(slika 4A).cDC1 (Dendritične celice tipa 1)povečalo sorazmerno več kot cDC2 (razmerje cDC2/cDC1 2,5, p=0.019). Število celic CD8 plus T se je prav tako znatno povečalo pri ATN(p=0.005) (tabela 3, slika 2D). Število cDC1 (Dendritične celice tipa 1)ni v korelaciji s številom celic T CD8* pri ATN.

TABELA 3|CD8 plus število celic T in korelacijski koeficient med cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in število celic CD8 plus T v kontrolnih in obolelih ledvicah.

Analiziranih je bilo štiriinštirideset primerov IgA nefropatije. Z uporabo ocene MEST po Oxfordovi klasifikaciji (M mezangialna hipercelularnost, E endokapilarna hipercelularnost, S segmentna glomeruloskleroza, T tubularna atrofija/intersticijska fibroza) je večje število cDC1 (Dendritične celice tipa 1)je bil povezan z višjo oceno T (p=0.008), ne pa z rezultati MES (slika 4B). Bilo je 7 primerov s polmeseci in število cCD1 ni bilo povezano s številom polmesecev. ŠteviloledvicaCD8* celic T je bilo bistveno več pri nefropatiji IgA kot pri kontroli (str<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Dendritične celice tipa 1) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>20-odstotno zmanjšanje eGFR. Razdelitev bolnikov v 2 skupini glede na cDCl (Dendritične celice tipa 1) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), višji cDC1 (Dendritične celice tipa 1)številčna skupina je bila povezana s slabšimi rezultati (slika 4E).

SLIKA 4|Korelacija med cDC1 (Dendritične celice tipa 1), cDC2 in CD8 ter število celic T in resnost bolezni (A–D).

Kaplan-Meierjeva krivulja preživetja nefropatije IgA (E). Rezultat T 0 se nanaša na odstotek površine, ki kaže tubularno atrofijo/intersticijsko fibrozo <=25>

Ocena T 1 se nanaša na odstotek površine, ki kaže tubularno atrofijo/intersticijsko fibrozo 26 - 50 odstotkov, ocena T 2 se nanaša na odstotek površine, ki kaže tubularno atrofijo/intersticijsko fibrozo > 50 odstotkov.

Preživetje je bilo opredeljeno kot > 20-odstotno zmanjšanje eGFR na dan ali pred 31. decembrom 2019. NS, nepomembno.

Bilo je 12 primerov lupusnega nefritisa. Tako kot pri nefropatiji IgA je bilo višje število cDCl povezano s hujšo fibrozo (p=0.020) (slika 4C). Poleg tega se je znatno povečalo tudi število celic CD8 in celic T (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Dendritične celice tipa 1)in celice T CD8t so bile najdene v periglomerularnih in intraglomerularnih celicah, kar kaže, da lahko igrajo vlogo pri tem stanju. Drugič, pri imunsko posredovani bolezni, povezani z intersticijsko fibrozo (nefropatija IgA in lupusni nefritis), smo ugotovili, da cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število koreliralo z resnostjo fibroze in prognozo pri IgA nefropatiji, medtem ko pri neimunsko posredovani fibrotični bolezni (diabetična nefropatija) take korelacije niso našli. Tretjič, obstajala je močna korelacija med številom cDCl in tvorbo polmeseca pri pauci-imunem GN, cDCl pa je bil prisoten v velikem številu v periglomerularnih in intraglomerularnih regijah, kar kaže na njihovo možno vlogo pri tvorbi polmeseca. Četrtič, število cDC1 je bilo v korelaciji s številom celic CD8 plus T pri lupusnem nefritisu in pauci-imunem GN, s številnimi cDCl, ki so lokalizirani s celicami CD8 plus T, kar kaže na njihovo možno interakcijo. To je v skladu z našimi ugotovitvami na živalskih modelihledvicabolezenki kažejo mišje homologe cDC1 (Dendritične celice tipa 1)celice prednostno aktivirajo T celice CD8t. Te ugotovitve skupaj kažejo, da ima cDCl pomembno vlogo v številnihledvicaboleznivključno z ATN, intersticijsko fibrozo pri imunsko pogojeni bolezni in tvorbo polmeseca ter da lahko potencialno delujejo z aktivacijo celic CD8t T.

cDC1 (Dendritične celice tipa 1)Število v korelaciji z resnostjo bolezni pri ATN. Pri neseptičnem ATN smo prvič pokazali pomembno povečano število DC (Dendritične celice), zlasti cDCl v primerjavi s cDC2. Pomembno je, da cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število v korelaciji z resnostjo bolezni. Poleg tega se je povečalo tudi število celic CD8 plus T. ATN je običajno posledica ishemično-reperfuzijske poškodbe (IRI), nefrotoksinov ali sepse. Tradicionalno IRI in toksini povzročajo sterilno vnetje, prevladujočo vlogo pa je veljalo za prirojeno imunost, kjer so DC in T-celice manj pomembni. Vse več dokazov iz študij na živalih pa je pokazalo, da so celice cDCl in CD8 plus T pomembne akterje. Prejšnje študije živalskega IRI in nefrotoksičnosti cisplatina so pokazale, da se skupno število celic DC in T poveča (13-17). Naše prejšnje študije so pokazale, da se je pri adriamicinski nefropatiji število cDCl znatno povečalo (5). Pri IRI kaže podmnožica aktiviranih dendritičnih celic povečano zmogljivost navzkrižne prisotnosti antigena v celicah T CD8t (18). Pri adriamicinski nefropatiji smo ugotovili tudi, da so cDCls izzvali odziv celic CD8 plus T, kar je povzročilo poškodbo (5). Pomanjkanje korelacije med cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in celica CD8* T v človeškem ATN v nasprotju z ugotovitvami na živalskih modelih lahko odražata različne neimunološke poti poškodb pri človeškem ATN v primerjavi z IRI v modelih miši, kjer igrajo cDCl pomembno vlogo prek celic CD8* T. Poleg tega je bilo pri glodavcih dokazano, da se cDCl rekrutira v tkivo s kemoatraktantom XCLl, ki ga proizvajajo naravne celice ubijalke (19). Zato bi bilo morda vredno to podrobneje preučitiledvicabolezen.

cDC1 (Dendritične celice tipa 1)Število v korelaciji z imunsko posredovano intersticijsko fibrozo. Druga pomembna ugotovitev v tej študiji je, da je število cDCl povezano z resnostjo intersticijske fibroze, povezane z imunsko posredovano boleznijo (IgA nefropatija in lupusni nefritis), vendar ne pri neimunsko posredovani fibrotični bolezni (diabetična nefropatija), je pokazala prejšnja študija. povečano število cDCl in cDC2 pri intersticijski fibrozi (9). Prvič smo pokazali, da to velja samo za imunsko posredovano bolezen in cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število se je povečalo sorazmerno bolj kot cDC2. Poleg tega smo pokazali tudi cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število je bilo v korelaciji z prognozo, število celic T CD8* pa se je prav tako znatno povečalo pri nefropatiji IgA. To podpirajo študije na živalih, ki kažejo DC (Dendritične celice)neposredno prispevajo k fibrozi. Na primer, amfiregulin, pridobljen iz DC, je spodbujal fibrozo (20). Možno je tudi, da so cDCl prispevali k fibrozi prek celic CD8 plus T, za katere je znano, da prispevajo k fibrozi v drugih organih (21-23). Ker je intersticijska fibroza povezana z napredovanjem kroničneledvicabolezen, ni presenetljivo, da smo našli cDC1 (Dendritične celice tipa 1)je dober prognostični marker pri IgA nefropatiji. Druge študije so pokazale, da so celice T CD8t povezane z napovedjo nefropatije IgA (24), ki je lahko posledica navzkrižne predstavitve s cDCl. Pri lupusnem nefritisu smo dokazali korelacijo med cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število in intersticijska fibroza ter število CD8t T celic. Tudi prejšnje študije so pokazale povečanjeledvicacDC1 (Dendritične celice tipa 1)pri lupusnem nefritisu (25), zlasti pri lupusnem nefritisu razreda III in VI, z ustreznim zmanjšanjem njihovega števila v obtoku (26). Te ugotovitve smo razširili tako, da smo pokazali, da so povezane tudi s kroničnimi spremembami. Dobro ugotovljeno je, da ima intersticijsko vnetje, ki ga sestavljajo celice T, celice B, dendritične celice in makrofagi, prevladujočo vlogo pri napredovanju lupusnega nefritisa (27). cDCl lahko prispeva k napredovanju lupusnega nefritisa pri različnih načinov. Prvič, aktivacija interferona igra ključno vlogo pri patogenezi lupusnega nefritisa (28-30) in cDCl so pomemben proizvajalec IFN-入. (31) Drugič, cDC1 (Dendritične celice tipa 1)lahko prispeva k napredovanju lupusnega nefritisa skozi celice CD8t T (32-37) in naša ugotovitev korelacije med cDCl in CD8 plus T dodatno podpira njuno možno interakcijo. Vloga celic CD8 plus T pri lupusnem nefritisu je bila že dokazana. Celice CD8 plus T nadzorujejo avtoreaktivno imunost s sproščanjem citotoksičnih molekul. Ugotovljeno je bilo, da imajo celice CD8 plus T pri lupusnem nefritisu oslabljeno citotoksično delovanje, kar lahko sproži avtoimunost (38). Poleg tega lahko te celice tvorijo tudi avtoantigene lupusa (39). Obstaja veliko dokazov, da celice T CD8* v obehledvica(32,33) in urina (34-36) korelirajo z aktivnostjo bolezni in histološko poškodbo pri lupusnem nefritisu. Poleg tega se je izkazalo, da izčrpanost T-celic CD8* napoveduje ugodno prognozo (37).

cDC1 (Dendritične celice tipa 1)Število v korelaciji s številom polmesecev v Pauci-Immune GN. Pri pauci-imunem GN smo našli cDCl, agregirane v periglomerularnih in intraglomerularnih regijah, njihovo število pa je bilo v korelaciji s številom polmesecev in CD8 plus T celic. Prejšnje študije so pokazale, da DC (Dendritične celice)redko prisotne znotraj glomerula (3,4,9) ali le v zelo majhnem številu (40). Po drugi strani pa so bile celice T vidne v intersticiju, periglomerularnih in intraglomerulnih regijah ({{6} }). Ugotovili smo, da so celice T cDCls in CD8* vidne v periglomerularnih in intraglomerularnih regijah, pri čemer jih je veliko so-lokaliziranih. Poleg tega cDC1 (Dendritične celice tipa 1)število v korelaciji s številom celic v obliki polmeseca in CD8 plus celic T. Vse te ugotovitve kažejo na vlogo cDCl pri oblikovanju polmeseca prek interakcije s CD8* T celicami. Patogena vloga CD8t T celic pri pauci-imunem GN in tvorbi polmeseca je bila že dokazana na živalskih modelih (45, 46). V skladu z našimi ugotovitvami pri ljudeh, v živalskem polmesecu GN, cDC1 (Dendritične celice tipa 1)in CD8* T celice so bile najdene predvsem v periglomerularni regiji (47,48). Pokazalo se je, da Bowmanova kapsula zagotavlja zaščiteno imunološko nišo s preprečevanjem dostopa DC in citotoksičnih celic CD8 plus T do Bowmanovega prostora in s tem do podocitov (45, 47). Ko pa je bila Bowmanova kapsula prebita, so te vnetne celice dobile dostop in uničile podocite, kar je povzročilo hitro napredujoč GN (47).

Ena od omejitev te študije je, da tehnika obarvanja IF omogoča uporabo le omejenega števila markerjev. Koristno bi bilo razširiti naše ugotovitve z uporabo tehnologije, kot je pretočna citometrija, ki lahko združuje več markerjev za nadaljnjo analizo fenotipa teh DC. (Dendritične celice)in njihove ustrezne profile citokinov in kemokinov. Vendar bodo informacije o lokaciji izgubljene. Druge tehnike, kot sta multipleksna imunohistokemija in Nanostring, se lahko upoštevajo tudi v prihodnjih študijah za nadaljnji pregled teh celic vledvicabolezen. Poleg tega lahko pri barvanju cDC2 z uporabo CD1c, HLA-DRB1 in CD1lc obstaja majhen odstotek celic B, ki izražajo tudi te markerje, kar ni bilo izključeno.

SKLEPI

Čeprav cDC1 (Dendritične celice tipa 1)obsega manjšo podmnožico DC-jev (Dendritične celice)v homeostatskih pogojih ta študija dokazuje pomembno povezavo med to celično populacijo in klinično-patološkimi značilnostmi pri ljudehledvicabolezen. To odraža njihov verjeten pomen pri boleznih, kot so ATN, tvorba polmeseca pri proliferativnem GN in intersticijska fibroza pri imunsko posredovanem GN. Poleg tega lahko njihova so-lokalizacija in korelacija s celicami T CD8t zagotovita razlago njihovega mehanizma delovanja, kar potrjuje podatke iz živalskih modelov. Te ugotovitve so spodbuda za raziskovanje novih terapevtskih ciljev, ki manipulirajo s temi celicami za zdravljenjeledvicabolezni, kot smo storili v študijah na živalih (6), in raziskati njihovo uporabo kot prognostičnega markerja. Za preučitev vloge cDC1 so potrebne nadaljnje študije pri ljudeh in živalih (Dendritične celice tipa 1), njihov mehanizem delovanja in kako jih najbolje terapevtsko usmeriti.

REFERENCE

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Tkivno specifična raznolikost in funkcije običajnih dendritičnih celic. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Linija dendritičnih celic: Ontogeneza in funkcija dendritičnih celic in njihovih podskupin v stanju dinamičnega ravnovesja in vnetju. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/letni imunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. Kompartmentno specifično izražanje markerjev dendritičnih celic pri človeškem glomerulonefritisu.LedvicaInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. Kvantifikacija podskupin dendritičnih celic v človeškem ledvičnem tkivu v normalnih in patoloških pogojih.LedvicaInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW, et al. Cd103 plus dendritične celice izzovejo odzive celic Cd8 plus T za pospešitevLedvicaPoškodbapri adriamicinski nefropatiji. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q, et al. Zaviranje Flt3 ublažikroničnoLedvicaBolezenz zaviranjem CD103 in aktivacije T-celic, ki jo posredujejo dendritične celice. Nephrol Dial Transplant (2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C, et al Cd103 plusLedvicaDendritične celice ščitijo pred polmesečastim GN z ohranjanjem Il{0}}proizvodnje regulativnih T-celic. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Ledvične dendritične celice: dolga in ovinkasta pot. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Povečano tubulointersticijsko pridobivanje podmnožic človeških CD141(hi)CLEC9A(plus) in CD1c(plus) mieloidnih dendritičnih celic pri ledvični fibrozi in BLedvicaB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, et al. Nenadzorovana visokodimenzionalna analiza poravna dendritične celice po tkivih in vrstah. Imuniteta (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, et al. Enocelična RNA-seq razkriva nove vrste dendritičnih celic, monocitov in matičnih celic človeške krvi. Science(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Posodobitev lupusnega nefritisa. Clin Jaz sem Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Opomba:zgoraj ni popoln seznam referenc