Ocenjevanje razmerja med visoko občutljivim C-reaktivnim proteinom in delovanjem ledvic z uporabo Mendelove randomizacije v japonski študiji J-MICC v skupnosti

Za več informacij:emily.li@wecistanche.com

Ryosuke Fujii, Asahi Hishida, Takeshi Nishiyama, Masahiro Nakatochi, Keitaro Matsuo, Hidemi Ito, Yuichiro Nishida, Chisato Shimanoe, Yasuyuki Nakamura, Tanvir Chowdhury Turin, Sadao Suzuki4, Miki Watanabe4, Rie Ibusuki, Toshiro Takezaki, Haruo Nakamura, Yohko Za J -Študijska skupina MICC plus

1 Oddelki za patofiziološke laboratorijske znanosti, Medicinska fakulteta Univerze Nagoya, Nagoya, Japonska

2 Oddelek za preventivne medicinske vede, Fakulteta za medicinske vede Fujita Health University, Aichi, Japonska

3 Oddelek za preventivno medicino, Medicinska fakulteta Univerze Nagoya, Nagoya, Japonska

4 Oddelek za javno zdravje, Podiplomska šola medicinskih znanosti Nagoya City University, Nagoya, Japonska

5 Enota za informatiko javnega zdravja, Oddelek za integrirane zdravstvene vede, Medicinska fakulteta Univerze Nagoya, Nagoya, Japonska

6 Oddelek za epidemiologijo in preprečevanje raka, Center za raka Aichi, Nagoya, Japonska

7 Oddelek za epidemiologijo raka, Medicinska fakulteta Univerze Nagoya, Nagoya, Japonska

8 Oddelek za informacije in nadzor raka, Aichi Cancer Center, Nagoya, Japonska

9 Oddelek za preventivno medicino, Medicinska fakulteta, Univerza Saga, Saga, Japonska

10 Oddelek za zdravstvene vede, Medicinska univerza Shiga, Otsu, Japonska

11 Oddelek za družinsko medicino, Cumming School of Medicine, Univerza v Calgaryju, AB, Kanada

12 Oddelek za mednarodno otoško in skupnostno medicino, Visoka šola za medicinske in zobozdravstvene znanosti Univerze Kagošima, Kagošima, Japonska

13 Center za preprečevanje raka, Chiba Cancer Center Research Institute, Chiba, Japonska

14 Oddelek za geriatrično medicino, Visoka šola za medicinske znanosti, Univerza Kyushu, Fukuoka, Japonska

15 Laboratorij za javno zdravje, Šola za prehrano in prehranske vede, Univerza Shizuoka, Shizuoka, Japonska

16 Oddelek za epidemiologijo za zdravje in medicino skupnosti, Medicinska univerza prefekture Kjoto, Kjoto, Japonska

17 Oddelek za preventivno medicino, Inštitut za zdravstvene bioznanosti, Podiplomska šola Univerze v Tokušimi, Tokušima, Japonska

18RIKEN Center za integrativne medicinske znanosti, Yokohama, Japonska

POVZETEK

Ozadje: Vnetjenaj bi bil dejavnik tveganja zaledvicabolezen. Vendar ostaja sporno, ali je vnetni status bodisi vzrok ali rezultat kronične ledvične bolezni. Naš cilj je bil raziskati vzročno razmerje med visoko občutljivim C-reaktivnim proteinom (hs-CRP) in ocenjeno hitrostjo glomerularne filtracije (eGFR) z uporabo pristopov Mendelske randomizacije (MR).

Metode:V tej študiji je bilo analiziranih skupno 10.521 udeležencev japonske večinstitucionalne kohortne študije. Za oceno učinka genetsko določenega hs-CRP na delovanje ledvic smo uporabili pristope MR z dvema vzorcema (uteženo inverzno varianco (IVW), uteženo mediano (WM) in MR-Eggerjevo metodo). Izbrali smo štiri in tri enojne nukleotidne polimorfizme (SNP), povezane s hs-CRP, kot dve instrumentalni spremenljivki (IV): IVCRP in azijski, na podlagi SNP-jev, predhodno identificiranih v evropski in azijski populaciji. IVCRP in Asian sta pojasnila 3,4 odstotka oziroma 3,9 odstotka variacije hs-CRP.

Rezultati:Z uporabo IVCRP genetsko določen hs-CRP ni bil pomembno povezan z eGFR v metodah IVW in WM (ocena na 1 enoto povečanja ln(hs-CRP), 0.000; 95 odstotkov interval zaupanja [CI], −0.019 do {{10}}.020 in −{{2{{{22 }}}}.003; 95-odstotni IZ, −0.019 do 0.014, v tem zaporedju) . Pri Azijcih smo našli podobne rezultate z uporabo metod IVW in WM (ocena, {{40}}.005; 95-odstotni IZ, –0,020 do 0,010 in –0,004; 95-odstotni IZ , od −0,020 do 0,012). Metoda MR-Egger tudi ni pokazala nobenih vzročnih povezav med hs-CRP in eGFR (IVCRP: -0,008; 95-odstotni IZ, -0,058 do 0,042; Azijec: 0,001; 95-odstotni IZ, -0,036 do 0,036).

Sklepi:Naše analize MR z dvema vzorcema z različnimi IV niso podprle vzročnega učinka hs-CRP na eGFR.

Ključne besede:hs-CRP; eGFR; Mendelska randomizacijska študija; genetska epidemiologija;vnetje

Cistanche lahko izboljša delovanje ledvic

UVOD

Sistemsko vnetje velja za enega od dejavnikov tveganja za pogoste kronične bolezni, vključno s sladkorno boleznijo,1 hipertenzijo,2 srčno-žilnimi boleznimi3 in kronično ledvično boleznijo (CKD).4 Na splošno se C-reaktivni protein (CRP) uporablja kot biomarker sistemskega vnetja v kliničnih in osnovnih raziskavah. Čeprav so prejšnje longitudinalne študije preučevale povezavo med ravnmi CRP in kronično ledvično boleznijo pri različnih populacijah, dokazi o vzročnosti te povezave ostajajo sporni.5–7 Nekateri raziskovalci pa so dokazali učinek bioloških funkcij, usmerjenih v CRP, naledvicafunkcijo.8,9 En raziskovalec je objavil tudi metaanalizo, ki nakazuje, da bi dodatki vitamina D lahko znižali ravni CRP v obtoku.10 Te študije skupaj kažejo, da lahko posegi na CRP pomagajo izboljšatiledvičnafunkcijo.

V zadnjih nekaj letih je pristop Mendelove randomizacije (MR) pritegnil veliko pozornosti v genetski epidemiologiji. Največja prednost te metode je raziskati vzročno razmerje med izpostavljenostjo (X) in izidom (Y) iz nabora opazovalnih podatkov z uporabo genetskih variant kot instrumentalnih spremenljivk (G: IV).11 Razvoj MR analize je sledil po identifikaciji polimorfizmi enega nukleotida (SNP) v asociacijskih študijah celotnega genoma (GWAS). Tako kot pri drugih zdravstvenih rezultatih je prejšnji GWAS identificiral SNP, povezane z ravnmi CRP, vključno z genom CRP v kromosomu 1.12,13 Zanimivo je, da je znano, da na serumske ravni CRP vplivajo genetski polimorfizmi,14 kar kaže, da lahko SNP, povezani z ravnmi CRP, odražajo dolgotrajna izpostavljenost višji=nižji ravni CRP. Zato so SNP-ji, povezani s serumskimi ravnmi CRP, primerni za intravenske injekcije za raziskovanje vzročne zveze med CRP in več patofiziološkimi stanji ter uporabljeni v prejšnjih študijah MR pri odraslih v evropskih državah.15–17

V azijskih državah so v zadnjih nekaj desetletjih obsežne kohortne študije zbirale človeške genome in izvajale genotipizacijo. Več raziskovalcev je izvedlo GWAS in odkrilo nove lokuse, povezane z ravnmi CRP v azijskih populacijah. 18–20 Te študije omogočajo raziskovalcem, da izvajajo študije MR z uporabo SNP-jev, povezanih s CRP, v azijskih populacijah, kar se zdi pomembno v smislu etničnih razlik. Zato smo raziskali, ali so genetsko določene ravni hs-CRP z uporabo dveh različnih IV, ki temeljijo na SNP-jih, ugotovljenih v evropski in azijski populaciji, vzročno povezane zledvicafunkcijopri japonski populaciji, ki uporablja pristope MR.

METODE

Merjenje hs-CRP in eGFR

Vzorci seruma so bili zbrani pri vseh udeležencih. Izmerili smo hs-CRP z nefelometrijo, izboljšano z lateksom. Serumski kreatinin je bil v osnovi izmerjen z encimsko metodo. Nekateri inštituti so merili serumski kreatinin z Jaffffejevo metodo in ga nato pretvorili v ekvivalentno vrednost encimske metode. eGFR je bil izračunan z uporabo japonske enačbe, ki jo je predlagalo Japonsko združenje za nefrologijo: eGFR (mL= min=1,73 m2 )=194 × serumski kreatinin (mg=dL) −1.{{10}}94 × starost −0,287 (× 0,739 za ženske).24

Izbor instrumentalnih spremenljivk

Seznam kandidatnih SNP za IV je prikazan v tabeli 1. Najprej smo izbrali štiri SNP (rs3093077, rs1205, rs1130864 in rs1800947) znotraj gena CRP, ki je bil uporabljen kot IV v prejšnjih študijah MR.15 Ti SNP so bili izbrani kot najmanjša podskupina za pridobitev raznolikosti pri genu CRP v evropskih populacijah in v tej študiji imenovana IVCRP. Nato smo menili, da je treba izbrati SNP in razviti izvirne IV v azijski populaciji, ker je bil IVCRP razvit na podlagi SNP, identificiranih pri ljudeh evropskega porekla. Zato smo iskali besedo 'CRP' v katalogu GWAS in jo zožili na študije po naslednjih merilih: 1) študija, izvedena v azijski populaciji, in 2) študija s fazo odkritja in replikacije. Po spletnem izboru smo na koncu izbrali 13 SNP. Za 151233628 zaradi nizke kakovosti imputiranja (MAF<0.05 and="" r2="" <="" 0.3),="" this="" snp="" was="" not="" included="" in="" the="" original="" j-micc="" dataset.="" of="" remaining="" 12="" snps,="" 6="" snps="" (rs12133641,="" rs9375813,="" rs2097677,="" rs79802086,="" rs2393791,="" and="" rs1169284)="" were="" excluded="" because="" these="" snps="" were="" not="" signifificantly="" associated="" with="" hs-crp="" in="" our="" dataset="" (p="" >="" 0.0042="0.05=12)." next,="" rs814295="" (gckr)="" and="" rs429358="" (apoe)="" were="" likely="" to="" have="" pleiotropic="" effects="" on="">ledvicafunkcijo. rs3093059 je bil izključen zaradi velikega neravnovesja povezave (LD) z rs3093068 v nizu podatkov CRP (r2 > 0,9). Končno so bili v našo analizo vključeni trije SNP (rs30933068, rs7553007 in rs7310409) in so bili imenovani azijski (tabela 2)

REZULTATI

Tabela 1 prikazuje osnovne značilnosti naborov podatkov CRP in eGFR. Povprečna starost udeležencev se med naborom podatkov CRP (55,5; standardna deviacija [SD], 9,6) in naborom podatkov eGFR (55,1; SD, 9,2) ni pomembno razlikovala, skoraj polovica subjekti so bile ženske v obeh nizih podatkov (CRP: 64,7 odstotka in eGFR: 53,4 odstotka). Mediana in interkvartilni razpon [IQR] ravni hs-CRP in eGFR je bil 0.04 mg=dL (IQR, 0.02–0.08) in 77,2 ml =min=1,73 m2 (IQR, 68,7–86,7).

Povezave med instrumentalnimi spremenljivkami in izhodiščnim hs-CRP

Two SNPs (rs3093077 and rs1205) in IVCRP were signifificantly associated with ln(hs-CRP), but not for the other two SNPs (rs1130864 and rs1800947) (Table 2). All three SNPs in IVAsian were associated with ln(hs-CRP). Combining these SNPs, both IVCRP and IV Asian had an F-statistic >10 (14,8 oziroma 22,5), kar je pokazalo, da dva IV izpolnjujeta merilo za predpostavko o pomembnosti. Štirje SNP v IVCRP in trije SNP v IVAsian so pojasnili 3,4 odstotka oziroma 3,9 odstotka variacije v hs-CRP.

Konvencionalna analiza povezave med hs-CRP in eGFR

Pred analizo MR smo izvedli konvencionalno statistično analizo za presečno povezavo med hs-CRP in eGFR. Med 1.598 udeleženci, ki so imeli na voljo tako hs-CRP kot eGFR, je bil ln(hs-CRP) močno povezan z ln(eGFR) (=−0.{{10 }}15; 95-odstotni interval zaupanja [CI], od –0,024 do –0,007; P=3.26 × 10–4 ), po prilagoditvi za spol, starost in študijska mesta. Diagram razpršitve za povezavo med ln(hs-CRP) in ln(eGFR) je prikazan na sliki 2.

MR analiza dveh vzorcev

Z uporabo IVCRP genetsko določen hs-CRP ni bil značilno povezan z eGFR v metodi IVW (ocena na 1 enoto povečanja ln(hs-CRP)=0.000; 95-odstotni IZ, −{ {6}}.019 do 0.020; P {{10}}.97) (Slika 1, črni bloki ). V skladu z rezultatom pri metodi IVW pri metodi WM ni bila najdena nobena vzročna povezava (ocena povečanja ln(hs-CRP) na 1 enoto=−0.0{{ 39}}3; 95-odstotni IZ, −0.019 do 0,014, P=0,77) in metoda MR-Egger (ocena na 1 enoto povečanja ln(hs) -CRP)=−0,008; 95-odstotni IZ, −0,058 do 0,042; P=0,75). Prestrezanje, ocenjeno z metodo MR-Egger, je bilo verjetno nič (ocena, 0,003; 95-odstotni IZ, -0,011 do 0,016; P=0,71). Graf razpršenosti z uporabo IVCRP je prikazan na sliki 3A.

Ocenjeno vzročno razmerje z uporabo genetskih instrumentov, o katerih so poročali pri azijskih populacijah (IV azijski), ni bilo pomembno, kar je bilo skladno z rezultatom z uporabo IVCRP (slika 1, rdeči bloki). Ocene ln(eGFR) na 1 enoto povečanja genetsko določenega ln(hs-CRP) pri IVW in metodi WM so bile −0.005 (95-odstotni IZ, −0.020 do 0.010; P {{10}}.54 ) oziroma −0.004 (95-odstotni IZ, od −0,020 do 0,012; P=0,61). Rezultat v MR-Eggerju je bil usmerjeno neskladen z dvema drugima metodama, vendar še vedno nepomemben (ocena, 0,001; 95-odstotni IZ, -0,036 do 0,036; P=0,99). Prestrezanje v metodi MR-Egger je bilo enako nič (ocena, -0,001; 95-odstotni IZ, -0,010 do 0,008; P=0,77). Graf razpršenosti z uporabo IVAsian je prikazan na sliki 3B.

DISKUSIJA

Ocenili smo vzročnost med genetsko določenim vnetjem in delovanjem ledvic z uporabo pristopov MR pri japonski populaciji. V tej študiji smo uporabili štiri in tri SNP kot različne genetske instrumente (IVCRP in IV Asian). Nobena od obeh instrumentalnih spremenljivk za hs-CRP ni bila povezana z ravnmi eGFR v analizi z dvema vzorcema MR. Ti rezultati niso pokazali pomembne vzročne povezave med hsCRP in eGFR v tej populaciji.

Ugotovili smo, da IVCRP ni bil pomembno povezan z eGFR, kar kaže na odsotnost vzročne povezave med genetsko določenimivnetjein delovanje ledvic. V tej študiji smo kot instrumentalne spremenljivke uporabili štiri SNP (rs3093077, rs1205, rs1130864 in rs1800947) znotraj gena CRP. Prejšnja študija je poročala, da so bili ti štirje SNP-ji izbrani kot nabor označevalnih SNP-jev v genu CRP.17 Ena od prejšnjih študij MR pri belcih je poročala, da genetsko določen CRP ni bil pomembno povezan z eGFR na osnovi kreatinina (=0 0,004; 95-odstotni IZ, –0,01 do 0,02). Zanimivo je, da je ta prejšnja študija uporabila isti nabor SNP (IVCRP) kot v tej študiji, velikost učinka IV na eGFR pa je bila podobna tisti, opaženi v tej študiji. Zato je ta nepomembna povezava med genetsko določenimi ravnmi CRP in eGFR verjetno dosledna pri različnih etničnih skupinah.

SNP-ji v IVCRP so bili prvotno izbrani med posamezniki evropskega porekla. Poleg tega je dobro znano, da je bila raven CRP v azijski populaciji nižja kot pri belcih.31 Zato smo poskušali razviti IV, specifično za azijske ljudi, in izbrali tri SNP-je, povezane s CRP (rs3093068, rs7553007 in rs7310409), v prejšnjem GWAS pri azijskih populacijah.18–20 Vendar pa ni bilo najdenih nobenih dokazov, da bi bila IV azijska povezana z eGFR v študijski populaciji.

IV requires the following three key assumptions: 1) relevance assumption (IV is associated with exposure), 2) exclusion restriction assumption (IV affects the outcome only through the exposure), and 3) exchangeability assumption (the effect of outcome is not confounded). Regarding relevance assumption, in this study, we restricted to only three SNPs in the robust selection process, thereby F-statistics of IV Asian was relatively small (F-statistic = 22.5). Although this value barely satisfies the assumption of IV (F-statistic >10), so bili rezultati verjetno empirično preverljivi za predpostavko o pomembnosti. Glede na to, da smo sprejeli najvišje pomembno povezane SNP kot IV CRP, ki ni bil povezan z delovanjem ledvic, so lahko prispevki genetsko določenega CRP na tveganje za ledvično bolezen relativno omejeni v primerjavi z več dejavniki tveganja te kompleksne bolezni.32 ,33

Druga ključna predpostavka za analizo MR je predpostavka o omejitvi izključitve.34 Ta metodološki pregled je zagotovil več scenarijev, ki kršijo to predpostavko (npr. neustrezna definicija fenotipa in časovno spremenljiva izpostavljenost). Za scenarije neustrezne definicije fenotipa in merilne napake smo kot spremenljivko izpostavljenosti uporabili ravni hs-CRP. To je jasna definicija izpostavljenosti in lahko vodi do manjše napake pri merjenju v primerjavi s fenotipizacijo na podlagi vprašalnika. Za scenarij prisotnosti LD smo skrbno izključili enega od SNP v LD, kar se zdi, da je ustrezno rešilo težavo. Scenariji časovno spremenljive izpostavljenosti in obratne vzročnosti so tesno povezani in so običajno zaskrbljujoči za retrospektivno študijo primera in kontrole, kjer se podatki o izpostavljenosti zbirajo po diagnozi izidov. Kot zgoraj, smo ustrezno obravnavali te težave ali pa naša analiza nima bistvenih možnosti za izpolnitev teh scenarijev. Poleg teh scenarijev lahko horizontalna pleiotropija krši predpostavko omejitve izključitve. IV Asian je bil sestavljen iz SNP-jev ne le v genu CRP, ampak v HNF1A. Čeprav so prejšnje študije pokazale, da ima lahko SNP v HNF1A druge pleiotropije,35–37 analize občutljivosti (metode MR-Egger in WM) v tej študiji kažejo, da ocena IVW ni bila pristranska zaradi povprečnega horizontalnega pleiotropnega učinka (znanega kot usmerjena pleiotropija).

Glavna prednost te študije je, da smo IV uporabili posebej za azijske populacije. Glede na to, da je raven CRP drugačna v vsaki populaciji, bi lahko konstrukcija IV Asian zagotovila smiseln pristop k vzročnemu sklepanju v azijski populaciji. Ta študija ima tudi omejitve, o katerih je treba razpravljati. Najprej smo v tej študiji ustvarili IVAsian, vendar smo povezavo raziskali le pri japonski populaciji. Zato ostaja nejasno, ali je ta rezultat skladen med azijskimi skupinami. Potrebne so nadaljnje študije za preučitev te povezave pri drugih azijskih populacijah. Drugič, število SNP, uporabljenih v IV, je bilo majhno. Oba IV sta izpolnjevala predpostavko o pomembnosti IV v MR, vendar sta bila relativno šibka. Glede na razmeroma nizko varianco ravni CRP v krvi in ​​obstoj številnih drugih determinant CRP v človeškem okolju, kot so bakterijske okužbe ali druge vnetne bolezni, ki ne izhajajo iz podedovanih ravni CRP, je lahko prispevek genetsko določenih ravni CRP v krvi omejen pri razvoju človeške ledvične bolezni. Potencialno, večje kot je število SNP v IV, večja je pojasnjena varianca izpostavljenosti. Nasprotno, s povečanjem SNP v IV se bodo povečali tudi pleiotropni učinki. V nedavnem članku je raziskovalec predlagal, da ni potrebe po izključitvi SNP-jev s pleiotropnimi učinki.37,38 V tej študiji pa smo dali prednost izbiri SNP-jev znotraj gena CRP pred pojasnjevalno stopnjo (tj. številom SNP-jev v IV ). V prihodnjih študijah bo bolj pomembna izbira IV. Tretjič, velikost vzorca študije je bila relativno velika v azijskih populacijah, vendar lahko ta velikost vzorca povzroči omejeno moč za MR z dvema vzorcema (eMateriali 1). Zato je treba rezultat potrditi v večjem naboru podatkov. Poleg tega je težko sklepati, da ni vzročne zveze med hs-CRP in eGFR, ker je bil ocenjeni koeficient v običajni analizi vključen v intervale zaupanja metod MR.

Za zaključek so te analize MR raziskale vzročno zvezo med hs-CRP in delovanjem ledvic. Naši analizi dveh vzorcev MR z dvema različnima IV nista podprli vzročnega učinka hs-CRP na eGFR pri tej populaciji.

ZAHVALA

Avtorji bi se radi zahvalili Kyota Ashikawa, Tomomi Aoi in drugim članom Laboratorija za razvoj genotipizacije, Center za genomsko medicino, RIKEN, za pomoč pri genotipizaciji. Avtorji so hvaležni Yoko Mitsuda in Keiko Shibata na Oddelku za preventivno medicino Medicinske fakultete Univerze v Nagoji za njuno tehnično pomoč, hvaležni pa so tudi dr. Hideu Tanaki v Kishiwada City Public Health Center in dr. Department of Healthcare Administration, Nagoya University Graduate School of Medicine za skrb za študijo J-MICC kot nekdanji glavni raziskovalec.

Člani odbora tega konzorcija (študijska skupina J-MICC): Kenji Wakai,3 Kenji Takeuchi,3 Asahi Hishida,3 Takashi Tamura,3 Keitaro Matsuo,6,7 Keitaro Tanaka,9 Katsuyuki Miura,10 Yoshikuni Kita,10 Sadao Suzuki, 4 Toshiro Takezaki,12 Hiroki Nagase,13 Haruo Mikami,13 Hiroaki Ikezaki,14 Kiyonori Kuriki,15 Ritei Uehara,16 Kokichi Arisawa,17 in Hiroto Narimatsu19 (povezave na seznamu avtorjev, razen 19Cancer Prevention and Cancer Control Division, Kanagawa Cancer Center, Raziskovalni inštitut, 1-1-2 Nakaonaga, Asahi-Ku, Jokohama 241-0815 Japonska)

Financiranje: To študijo so podprli Grants-in-Aid za znanstvene raziskave za prednostna področja raka [številka donacije: 17015018] in inovativna področja [številka donacije: 221S0001] in donacije JSPS KAKENHI [številke donacij: 16H06277, 15H02524, 19K21461, in 19K10659] z japonskega ministrstva za izobraževanje, kulturo, šport, znanost in tehnologijo. Ta študija je bila delno podprta s financiranjem projekta BioBank Japan s strani Japonske agencije za medicinske raziskave in razvoj od aprila 2015 ter Ministrstva za izobraževanje, kulturo, šport, znanost in tehnologijo od aprila 2003 do marca 2015.

Prispevki avtorjev (imena morajo biti navedena kot začetnice): Odgovornosti avtorjev so bile naslednje - KW je nadzoroval to sodelovalno kohortno študijo; RF, AH, TN, KM, H. Ito, Y. Nishida, CS, Yasuyuki Nakamura, TC, SS, MW, RI, T. Takezaki, HM, Yohko Nakamura, H. Ikezaki, MM, KK, NK, DM, KA, SK, MT, T. Tamura, YK, TK, YM, MK, KT, KW in študijska skupina J-MICC je izvedla raziskavo na vsakem študijskem mestu; RF organizirani podatki iz vsake študije; AH in MN organizirani podatki za genetsko analizo; RF konceptualizirani in analizirani podatki; RF je napisal izvirni osnutek; AH, TN, KM, TC in KW so rokopis kritično pregledali zaradi pomembne intelektualne vsebine; RF je imel glavno odgovornost za končno vsebino in vsi avtorji so prebrali in odobrili končni rokopis.

Nasprotja interesov:Dr. Nakatochi poroča o donacijah družbe Boehringer Ingelheim zunaj predloženega dela.

REFERENCE

1. Dehghan A, Kardys I, de Maat MP, et al. Genetske variacije, ustvarjalne ravni beljakovin in pojavnost sladkorne bolezni. Sladkorna bolezen. 2007; 56: 872–878.

2. Sesso HD, Buring JE, Rifai N, Blake GJ, Gaziano JM, Ridker PM. C-reaktivni protein in tveganje za razvoj hipertenzije. JAMA. 2003; 290: 2945–2951.

3. Ridker PM, Cushman M, Stampfer MJ, Tracy RP, Hennekens CH. Vnetje, aspirin in tveganje za bolezni srca in ožilja pri na videz zdravih moških. N Engl J Med. 1997; 336: 973–979.

4. Mihai S, Codrici E, Popescu ID, et al. Mehanizmi, povezani z vnetjem pri napovedovanju, napredovanju in izidu kronične ledvične bolezni. J Immunol Res. 2018;2018:2180373.

5. Kubo S, Kitamura A, Imano H, et al. Serumski albumin in visokoobčutljivi C-reaktivni protein sta neodvisna dejavnika tveganja za kronično ledvično bolezen pri Japoncih srednjih let: študija tveganja krvnega obtoka v skupnostih. J Aterosklerski tromb. 2016; 23: 1089–1098.

6. Fox ER, Benjamin EJ, Sarpong DF, et al. Odnos C-reaktivnega proteina do kronične ledvične bolezni pri Afroameričanih: Jacksonova študija srca. BMC Nefrol. 2010; 11: 1.

7. Lee JE, Choi SY, Huh W, Kim YG, Kim DJ, Oh HY. Metabolični sindrom, C-reaktivni protein in kronična ledvična bolezen pri odraslih brez sladkorne bolezni in brez hipertenzije. Am J Hipertenzija. 2007; 20: 1189–1194.

8. Ross R. Ateroskleroza-vnetna bolezen. N Engl J Med. 1999;340:115–126.

9. Zhang L, Shen ZY, Wang K, et al. C-reaktivni protein poslabša epitelijsko-mezenhimski prehod prek Wnt= -katenina in signalizacije ERK pri diabetični nefropatiji, ki jo povzroča streptozocin. FASEB J. 2019; 33: 6551–6563.

10. Chen N, Wan Z, Han SF, Li BY, Zhang ZL, Qin LQ. Učinek dodatka vitamina D na raven krožečega visoko občutljivega C-reaktivnega proteina: meta-analiza randomiziranih kontroliranih preskušanj. Hranila. 2014; 6: 2206–2216.

11. Smith GD, Ebrahim S. 'Mendelska randomizacija: ali lahko genetska epidemiologija prispeva k razumevanju okoljskih determinant bolezni?' Int J Epidemiol. 2003; 32: 1–22.

12. Dehghan A, Dupuis J, Barbalic M, et al. Meta-analysis of genome-wide association studies in >80 000 oseb identificira več lokusov za ravni C-reaktivnega proteina. Naklada. 2011; 123: 731–738.

13. Ridker PM, Pare G, Parker A, et al. Lokusi, povezani s potmi presnovnega sindroma, vključno z LEPR, HNF1A, IL6R in GCKR, so povezani s C-reaktivnim proteinom v plazmi: zdravstvena študija ženskega genoma. Am J Hum Genet. 2008; 82: 1185–1192.

14. Retterstol L, Eikvar L, Berg K. Dvojna študija C-reaktivnega proteina v primerjavi z drugimi dejavniki tveganja za koronarno srčno bolezen. ateroskleroza. 2003; 169: 279–282.

15. Prins BP, Abbasi A, Wong A, et al. Preiskovanje vzročne povezave C-reaktivnega proteina z 32 kompleksnimi somatskimi in psihiatričnimi izidi: obsežna medkonzorcijska Mendelova randomizacijska študija. PLoS Med. 2016;13:e1001976.

16. Hartwig FP, Borges MC, Horta BL, Bowden J, Davey Smith G. Vnetni biomarkerji in tveganje za shizofrenijo: 2-vzorčna Mendelova randomizacijska študija. Psihiatrija JAMA. 2017; 74: 1226–1233.

17. CRP CHD Genetics Collaboration. Skupna združena analiza podatkov o genskih različicah C-reaktivnega proteina in koronarni bolezni: presoja vzročnosti z Mendelsko randomizacijo. Eur J Epidemiol. 2008; 23: 531–540. 18. Kanai M, Akiyama M, Takahashi A, et al. Genetska analiza kvantitativnih lastnosti japonske populacije povezuje vrste celic s kompleksnimi človeškimi boleznimi. Nat Genet. 2018; 50: 390–400.

19. Okada Y, Takahashi A, Ohmiya H, et al. Študija povezav celotnega genoma za ravni C-reaktivnega proteina je odkrila pleiotropne povezave v lokusu IL6. Hum Mol Genet. 2011; 20: 1224–1231.

20. Vinayagamoorthy N, Hu HJ, Yim SH, et al. Nove različice, vključno s polimorfizmi ARG1, povezanimi z ravnmi C-reaktivnega proteina, identificiranimi z genomsko povezavo in analizo poti. PLoS One. 2014; 9: e95866.

21. Hamajima N; Študijska skupina J-MICC. Japonska večinstitucionalna kohortna študija (študija J-MICC) za odkrivanje interakcij med genom in okoljem pri raku. Azijski Pac J Rak Prev. 2007; 8: 317–323.

22. Takeuchi K, Naito M, Kawai S, et al. Profil študije japonske večinstitucionalne kohortne kohorte (J-MICC). J Epidemiol. 2020. doi:10.2188=jea.JE20200147. 23. Pierce BL, Burgess S. Učinkovita zasnova za Mendelove randomizacijske študije: ocenjevalci podvzorcev in 2-vzorcev instrumentalnih spremenljivk. Am J Epidemiol. 2013; 178: 1177–1184.

24. Matsuo S, Imai E, Horio M, et al. Revidirane enačbe za ocenjeno GFR iz serumskega kreatinina na Japonskem. Am J Kidney Dis. 2009; 53: 982–992.

25. Burgess S, Butterworth A, Thompson SG. Mendelska randomizacijska analiza z več genetskimi različicami z uporabo povzetih podatkov. Genet Epidemiol. 2013; 37: 658–665.

26. Bowden J, Davey Smith G, Haycock PC, Burgess S. Konsistentna ocena pri Mendelski randomizaciji z nekaterimi neveljavnimi instrumenti z uporabo utežene mediane ocenjevalke. Genet Epidemiol. 2016; 40: 304–314.

27. Bowden J, Davey Smith G, Burgess S. Mendelska randomizacija z neveljavnimi instrumenti: ocena učinka in odkrivanje pristranskosti z Eggerjevo regresijo. Int J Epidemiol. 2015; 44: 512–525.

28. Hemani G, Bowden J, Davey Smith G. Ocenjevanje potencialne vloge pleiotropije v Mendelovih študijah randomizacije. Hum Mol Genet. 2018; 27: R195–R208.

29. Staiger D, Stock J. Regresija instrumentalnih spremenljivk s šibkimi instrumenti. Econometrica. 1997; 65: 557–586. 30. Yavorska OO, Burgess S. Mendelska randomizacija: paket R za izvajanje analiz Mendelove randomizacije z uporabo povzetih podatkov. Int J Epidemiol. 2017; 46: 1734–1739.

31. Kelley-Hedgepeth A, Lloyd-Jones DM, Colvin A, et al. Etnične razlike v koncentracijah C-reaktivnega proteina. Clin Chem. 2008; 54: 1027–1037.

32. Cheng L, Zhuang H, Yang S, Jiang H, Wang S, Zhang J. Razkrivanje vzročnega učinka C-reaktivnega proteina na tveganje za diabetes mellitus tipa 2: Mendelska randomizacijska študija. Sprednji Genet. 2018; 9: 657.

33. C Reactive Protein Coronary Heart Disease Genetics Collaboration (CCGC), Wensley F, Gao P, et al. Povezava med reaktivnim proteinom C in koronarno srčno boleznijo: mendelska randomizacijska analiza na podlagi podatkov posameznih udeležencev. BMJ. 2011;342:d548. 34. VanderWeele TJ, Tchetgen Tchetgen EJ, Cornelis M, Kraft P. Metodološki izzivi pri Mendelski randomizaciji. Epidemiologija. 2014; 25: 427–435.

35. Imamura M, Takahashi A, Yamauchi T, et al. Študije povezav celotnega genoma pri japonski populaciji identificirajo sedem novih lokusov za sladkorno bolezen tipa 2. Nat Commun. 2016; 7: 10531.

36. Bochud M, Marquant F, Marques-Vidal PM, et al. Povezava med C-reaktivnim proteinom in debelostjo pri ženskah. J Clin Endocrinol Metab. 2009; 94: 3969–3977.

37. Wakil SM, Muiya NP, Tahir AI, et al. Nov lokus dovzetnosti za miokardni infarkt, hipertenzijo, diabetes mellitus tipa 2 in dislipidemijo na kromosomu 12q24. Dis markerji. 2014;2014: 291419.

38. Davies NM, Holmes MV, Davey Smith G. Branje Mendelovih randomizacijskih študij: vodnik, glosar in kontrolni seznam za klinike. BMJ. 2018;362:k601