2. del Preventivni učinki feniletanolnih glikozidov iz Cistanche Tubulosa na jetrno fibrozo pri podganah, povzročeno z albuminom govejega seruma
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com
Ekspresija NF-κB p65 in kolagena I po posegu z zdravili v celicah HSC-T6 Da bi opisali signale jetrne fibroze, smo s testom RT-PCR določili dva ključna regulatorna gena v jetrih. Podatki so pokazali, da so imele celice tHSC-T6 iz kontrolne skupine nižje ravni NF-κB in mRNA kolagena tipa I. Nasprotno pa je TGF- 1 induciral celice HSC-T6, da izrazito povečajo mRNA NF-κB (P < 0.01)="" in="" col-i="" (p="">< 0,01),="" z="" ravnmi,="" višjimi="" od="" tistih="" v="" kontrolni="" skupini.="" v="" prisotnosti="" različnih="" koncentracij="" cphg="">feniletanoidni glikozid iz cistanhe), rezultati NF-κB p65 [P NF-κB=0.001 za 100 ug/ml, P NF-κB=0.002 za 75 ug/ml, P NF-κB {{ 11}}.007 za 50 ug/ml in P NF-κB=0.012 za 25 ug/ml] in Col-I [P Col-I=0.006, P Col -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019 oziroma] so pokazale zmanjšano izražanje teh mRNA (slika 7).
Western blot analiza ravni kolagena I po posegu z zdravili v celice HSC-T6 Slika 8 prikazuje ravni izražanja proteina kolagena I v celicah HSC-T6 različnih poskusnih skupin. Raven izražanja proteina kolagena I se je znatno zmanjšala v različnih skupinah odmerkov CPhG(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml in 25 ug/ml) v primerjavi s skupino TGF- 1
Diskusija
CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)je feniletanoidni glikozid, izoliran in prečiščen iz korenike Cistanche, ki se uporablja kot tradicionalno kitajsko zeliščno zdravilo. V zadnjih letih se je pokazalo, da imajo CPhG močno sposobnost preprečevanja poškodb jeter [20]. Zato smo želeli raziskati, ali imajo CPhG zaviralne učinke na fibrozo hepatitisa z jetrno fibrozo, ki jo povzroča BSA, pri podganah. BJRG se na Kitajskem običajno uporablja kot terapevtsko zdravilo za jetrno fibrozo. Narejen je iz želvjega oklepa. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis itd. imajo učinke obnavljanja Qi in krvi, lajšanja utrujenosti, mehčanja vozlov. Poleg tega prejšnje študije kažejo, da ima očitno funkcijo blokiranja zgodnje fibroze jeter, zaviranja proliferacije celic, ki shranjujejo maščobo, in zmanjšanja sinteze kolagena [21]. Zato je bil BJRG v tej študiji uporabljen kot pozitivno zdravilo.
Patološke spremembe jetrne fibroze pri podganah, ki jih povzročajo injekcije BSA, so podobne tistim pri človeški portalni cirozi [22]. CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)odvisno od odmerka zmanjšal stopnjo jetrne fibroze in zaviral transformacijo HSC v celice, podobne miofibroblastom, zmanjšal povišane vrednosti serumskih ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 in jetrnega indeksa ter izrazito zatrl izražanje kolagena I, kolagena III in TGF- 1 v jetrnem tkivu. Stopnje jetrne fibroze so povezane s serumskimi ravnmi HA, LN in IV-C, ki lahko kot markerji igrajo vlogo pri odkrivanju stopnje jetrne fibroze [23]. Poročali so, da je HA glavni vir zunajceličnega matriksa. IV-C kot bistveni element bazalne membrane se bo v zgodnjih fazah ciroze jeter obilno sintetiziral in močno odložil. Serumske ravni LN in IV-C so indeksi hitrosti menjave bazalne membrane in kažejo stopnjo fibroze v portalnem območju in sinusoidnih kapilarah [24]. PC III je označevalec pri diagnozi jetrne fibroze in zgodnje ciroze, vendar njegova občutljivost in specifičnost nista visoki in v mnogih referencah ni pomembne razlike med različnimi stopnjami fibroze [24, 25].
Ta študija je dala podoben rezultat. Poleg tega H&E in Massonova trikromno obarvana opazovanja odsekov kažejo normalna jetrna tkiva z izrazitimi jetrnimi lobuli in jetrnimi sinusoidi. Struktura jetrnega tkiva v modelni skupini je bila neurejena, jetrno tkivo in jetrni sinusoid pa sta bila nadomeščena z veliko količino vezivnega tkiva. Vendar so opazili znatno izboljšanje v zdravljenih skupinah v primerjavi z modelno skupino. Pomembno je, da ima izražanje kolagena tipa I in kolagena tipa III bistveno vlogo pri razvoju jetrne fibroze, katere blokiranje lahko prepreči in zdravi jetrno fibrozo. Zato bi lahko nastajanje in odlaganje kolagena tipa I in kolagena tipa III v jetrnem tkivu služilo kot pomembna determinanta učinkovitosti proti jetrni fibrozi. TGF- 1 je tudi pomemben profibrogeni citokin pri poškodbi jeter in je biološko aktiven z več farmakološkimi učinki [26]. Za vzdrževanje homeostaze tkiva je potrebno ravnovesje med temi dejanji. Nenormalno izražanje TGF- 1 je vključeno v patogenezo bolezni jeter [27, 28]. Znano je, da je TGF- 1 ključni citokin, ki sodeluje pri zgodnjih fazah fibroze jeter.
Oksidativni stres sproži TGF- 1, zaradi česar slednji stimulira proizvodnjo in odlaganje ECM [29]. Zato je ena od učinkovitih strategij za proizvodnjo zdravila proti jetrni fibrozi identificirati sredstva proti TGF- 1. Imunohistokemijska analiza je pokazala, da izražanje kolagena tipa I, kolagena tipa III in TGF- 1 lahko zazna patološki proces jetrne fibroze. Izražanje kolagena tipa I, kolagena tipa III in TGF- 1 v zdravljenih skupinah je zmanjšano, kar je bilo bistveno nižje pri visokih odmerkih CPhG(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)posebej v terapevtski skupini, in predlagal, da je CPhGs učinkovit zaviralec kolagena tipa I, kolagena tipa III in TGF- 1. Verjetno lahko CPhG izboljšajo aktivnost kolagenaze, ohranjajo dinamično ravnovesje sinteze in razgradnje ECM, s čimer zadržijo in preprečijo nastanek fibroze jeter. CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)ne samo, da bi lahko izboljšalo jetrno fibrozo, ki jo povzroči BSA, pri podganah, ampak bi lahko bilo povezano tudi z zaviranjem aktivacije HSC in vitro. Aktivacija HSC naj bi predstavljala ključni korak fibrogeneze. V tej študiji so rezultati pokazali, da je dajanje CPhGs od 25 do 100 ug/ml izjemno oslabilo zmanjšano ekspresijo NF-κB p65, mRNA kolagena I in ekspresijo proteina kolagena I v HSC. NF-κB ima pomembno vlogo pri moduliranju imunskega odziva na okužbo ali dražljaje [30]. Kopičenje NF-κB v jetrnih celicah lahko povzroči rekrutiranje vnetnih citokinov/mediatorjev, kar povzroči razvoj fibroze [31, 32]. Poleg tega je kolagen tudi občutljiv indeks, ki odraža stopnjo fibroze in predstavlja približno 50 odstotkov vseh beljakovin v fibroznih jetrih [33].
Posledično smo domnevali, da je molekularni mehanizem proti hepatofibrozi povezan s CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)-posredovana inaktivacija ekspresije NF-κB, pri kateri korist prispeva k sinergističnim vlogam zmanjšanja imunotoksičnosti in vnetnega stresa v jetrnem tkivu, prizadetem s BSA, kar dodatno popravlja dismetabolizem za izboljšanje delovanja jeter.
Sklepi
Na koncu naše študije kažejo, da CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanhe)bistveno zmanjšajo obseg jetrne fibroze, ki jo povzroča BSA pri podganah. Njegov mehanizem je lahko vsaj delno posledica inhibitornega učinka CPhG na sestavo ECM in stimulacije razgradnje ECM in/ali neposredne inhibicije sinteze kolagena tipa I, kolagena tipa III in izražanja TGF{ {0}}. Zato smo pričakovali, da se CPhG lahko uporabljajo v izdelkih za zdravstveno nego ali v kliničnih zdravilih za preprečevanje fibroze človeških jeter. Za določitev učinkovitosti CPhG kot močnega zdravila proti jetrni fibrozi so potrebne prihodnje študije.
Okrajšave
CPhGs:Feniletanolni glikozidi iz cistanche; BSA: goveji serumski albumin; HSC-T6: jetrne zvezdaste celice; Hyp: hidroksiprolin; BJRG: tablete spojine Biejiarangan; TGF- 1: transformacijski rastni faktor 1; ALT: alanin aminotransferaza; AST: aspartat aminotransferaza; HA: hialuronska kislina; LN: Laminin; PC III: prokolagen tipa III; IV-C: kolagen tipa IV; NF-κB: jedrski faktor kapa-lahke verige-ojačevalec aktiviranih celic B; RT-PCR: verižna reakcija reverzne transkriptaze-polimeraze; SDS-PAGE: elektroforeza natrijevega dodecil sulfata in poliakrilamidnega gela.
Konkurenčni interesi Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov. Prispevki avtorjev TL, JZ, SPY, LM, MT in SLZ so zasnovali in oblikovali poskuse. SPY, TL in JZ so analizirali podatke. SPY in JZ sta napisala rokopis. TL, LM in JZ so pregledali rokopis. Vsi avtorji so prebrali in odobrili končni rokopis. Zahvala To raziskavo je podprla Nacionalna naravoslovna fundacija Kitajske (81260624). Avtorji bi se radi iskreno zahvalili profesorju Tao Liuju za njegove predlagane izboljšave za pisanje tega prispevka. Podrobnosti o avtorju 1 Oddelek za toksikologijo, Šola za javno zdravje, Medicinska univerza Xinjiang, št. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011 Xinjiang Uyghur Autonomous
Regija, Kitajska. 2 Ključni laboratorij za ujgursko medicino, Inštitut Materia Medica v Xinjiangu, Urumqi 830004, Kitajska. 3 No. 140 Xinhua South Road, okrožje Tianshan, Urumqi 830000 Ujgurska avtonomna regija Xinjiang, Kitajska. Prejeto: 6. avgusta 2015 Sprejeto: 24. novembra 2015
Reference
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Trenutno stanje novih antifibrotičnih terapij pri bolnikih s kronično boleznijo jeter. The Adv Gastroenterol. 2011; 4 (6): 391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Jetrne zvezdaste celice in fibroza jeter. Compr Physiol. 2013; 3 (4): 1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Patogeneza jetrne fibroze. Annu Rev Pathol. 2011; 6: 425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Pregledni članek: reverzibilnost ciroze. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Kitajska akademija znanosti. 23. izd. Kitajska: Uredniški odbor Flore of China; 2013. str. 1–16.
Komisija za kitajsko farmakopejo sanitarnega ministrstva Ljudske republike Kitajske. Kitajska farmakopeja, 1. del. Kitajska: Založba kemijske industrije; 2010. str. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Napredek raziskav feniletanoidnih glikozidov iz Cistanche tubulosa. Central South Pharm. 2012; 10: 692–5.
Li J, Huang D, He L. Učinek Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) o reproduktivni toksičnosti pri miših, povzročeni z glikozidom Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE in zaviralci agregacije trombocitov iz Tamarix Hojnacki Bunge (gostiteljska rastlina Herba Cistanches), ki raste v Xinjiangu. Pharmacogn mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Izboljšanje kolitisa, ki ga povzroča natrijev dekstran sulfat, pri miših z ekstraktom Cistanche tubulosa, obogatenim z ehinakozidom. Phytother Res. 2014; 28 (1): 110–9.
